smsl 双木三林/s.m.s.l m6 异步多功能hifi音频解码耳放一体机怎么样

双木三林比矩声好。1、双木三林数字功放机这个牌子音效比矩声好。2、在这个价位前提下，双木三林比矩声优惠。

更新或升级的原因。双木三林的dp5作为一款入门级的数播，解码芯片采用了满血版八通道的es9038pro，在进行操作系统或软件更新、升级时，会导致启动慢的问题。

可以。双木三林解码器可以设置音量输出是否可调，或者最大锁定，锁定音量输出不可调即可固定开机音量，且官方还设计了遥控器默认带锁的防误触功能，需要按C键才可操作。

不一样。双木三林su-9n不错，整体声音的表现方面，给发烧友们带来惊艳感受，不是几百块的解码器可以做到的。解码播放器声音效果非常的好，声场开阔，现场感很强，如声临其境。乐器定位准确，人声也优秀。

中国。smsl是中国品牌。双木三林smsl佛山双木三林科技有限公司（原为深圳市双木三林电子有限公司），自2009年成立以来，一直专注于发烧音频解码器、耳机放大器、功率放大器等专业音频产品的研发与生产。佛山双木三林科技有限公司作为专注的Hi-Fi公司，从创立开始已经为国内以及世界许多的知名Hi-Fi音频公司作OEM代工生产，因此实际上双木三林生产的音频产品早已遍及世界各地。而“双木三林”这个名称，缘于“木”字本义，人说十年树木百年树人，事业起初独木乘舟，沉浮几番后根植于陆，多款音频产品使“双木三林”产品集结成林。

原因有低音功放音量过大、均衡器高中音衰减过大、调音台低频增益过大、低音喇叭有故障造成假性低音重。1.首先打开电脑,鼠标右键单击电脑右下角“音量”图标,然后点击选择“声音”按钮。2.然后在新的界面里点击选择“播放”按钮。3.之后在新的界面里鼠标左键双击选择“扬声器”按钮。4.然后在新的界面里点击选择“增强”按钮。

S.M.S.L如今的“市场定位”为“低端价实惠，中端也能‘撑市面"，真·高端暂无”~其出品的型号里有不少是“值那价”的！PS：个人觉得 xDuoo 是其在“低价市场”的对手！也值得考虑一下！

三林的数字功放声音不怎么样，之前我拿来配优雅的，现在取消三林了！

这两款里面我只接触过双木三林dp5，只能说一分钱一分货吧，首先在质感上dp5就有点一言难尽，塑料感太重……本来我是冲着支持hibylink来的，没想到这个机子的hibylink是个半残，居然不支持从NAS读取音乐，只能读取本地音乐……设置好DLNA，Dp5也总是连接不到，数播的DLNA基本功能都不完善！配备的遥控器也很难用，且dp5的屏幕本来就这么点，稍微坐远一点就看不到了……属实鸡肋啊。于是乎第二天就退货了。Silent Angel M1尚未接触过，如果绿檀紫檀上有试听活动我会果断先申请试听，申请成功后我会做进一步的M1试听感受，在此就不多赘述免得引起踩一捧一的嫌疑了。

2寸小喇叭要什么低音............ 功放最大输出参数 也是最大电压供电的时候，音量也许不够大，声音频率也许太高或太低。注意，喇叭的阻抗不是恒定的， 没准高频能到30-40欧，低频没准只有5欧， 不是什么时候都是标称8欧的。

就是一垃圾货，东西音质差不说，还特么不耐用，不到一个月就坏了

　　三林的数字功放声音不怎么样，之前我拿来配优雅的，现在取消三林了！

hifi功放,还是很不错的,都是桌面产品.

数字功放的基本电路是早已存在的D类放大器（国内称丁类放大器）。以前，由于价格和技术上的原因，这种放大电路只是在实验室或高价位的测试仪器中应用。这几年的技术发展使数字功放的元件集成到一两块芯片中，价格也在不断下降。

年原厂保养 - 免费试机 - 大量其他配件、解码器、喇叭、播放器可作配合试机

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我也是近期才知道，近期有点小热门的这款THX小尾巴居然在国内是由雷蛇代为管理，而且电商平台的详情中，它的型号前缀也带了“雷蛇”二字——不过我没把雷蛇写在标题里，怕大家觉得我居然开始恰起外设厂的饭了。但如果你对THX有所耳闻过，应该知道，THX既是一个标准制定者、又是一个具体的品牌，当初我在购买自己的人工耳测试套装时就考虑过DROP THX AAA ONE 789这款非常经典的耳放。THX现在的母公司是Razer（雷蛇），但是THX依旧是独立运营的一个品牌。所以大家会看到国内代理THX Onyx的其实是Razer（雷蛇），但从产品和技术开发来说，这是一个非常纯血的THX自家产品。雷蛇的诸多产品在音频和画面技术方面均有THX的硬件技术支持，而THX的这个Onyx则是由THX独立制作。目前，行业内有很多HIFI品牌也均加入了和THX合作的行列，包括但不限于飞傲、双木三林等。关于THX的更多介绍，度娘随随便便就可以搜索到，感兴趣的可以自行查阅一下~简单开个箱标杆点一：出色的颜值与易用性近一年时间差不多是小尾巴产品井喷的时期，市面上小尾巴、大尾巴层出不穷，我不能否认其中的不少产品有着能够达到发烧友需求的高素质，但在易用性方面总或多或少有些问题，比如容易接触不良、体积太大、重量太大、线材偏硬等问题，Onyx是一体式的设计，体积小、分量轻，和手机连接以后不会在手机底部带来明显的额外重量，橡胶外皮包括可以轻松折叠成任意形状。当然，对部分烧友来说，Onyx最大的不足当然还是没有平衡口，虽然我可以很负责任地告诉你们这货的单端口的素质可以完虐不少同类型产品的平衡口，但现在平衡插头是一个主流趋势，如果你种草了这款Onyx，可以考虑下ddhifi家的转接头，可能是目前市面上迷你转接头的最优解了。额不对...这段我是在写开箱来着？那继续。这个卡片的内容一目了然，支持MQA。主要配件就是一个USB-A转接头了......开箱完毕！颜值什么的你们自己看图吧。标杆点二：无懈可击的硬件指标先丢一张图给大家，关于DAC、耳放什么的我就不解读了，唯芯论用户麻烦直接右上角。这里的“音质”指标指的应该是失真，而官方标注的最大输出功率是180mW，阻抗负载条件为22欧，在小尾巴里算是非常高的了，不过我下文中的实测参数会基于THD+N＜0.1%来测量，而非1%。118dB的动态范围可以说是相当优秀的指标，但至于官方为什么没有标注信噪比，其实未来我会单独开一个帖子讲一下，在声学标准里，并没有“信噪比”这个概念，真正衡量信号纯净度的指标就是“动态范围”，而这个“动态范围”和发烧友们在听感上形容响度差异的“动态范围”是两码事。说人话总结一下的话，Onyx的所谓“信噪比”=“动态范围”=118dB。关于SNR（信噪比）、DR（动态范围）测量的介绍，这里给大家放一篇L7Audio Lab狼教授的延伸阅读：狼教授针对Onyx的详细硬件测试：（狼教授的硬件测试比我的更加全面和严谨、更能体现一个产品的硬件实力全貌，但对普通用户来说有一定的阅读门槛）下文内容为我自购测试仪所测出的实际带负载指标测试设备：AD2522DR和SNR的测量基于A记权，前端设备为节奏V1，测试文件为AP官方的192Khz 1K 文件这里我搭载32欧负载阻抗，THD+N＜0.1%的最大输出电平，最高可达到2.067Vrms，简单换算一下可以得出134mW的最大输出功率（Vrms的平方除以负载数）。在最大输出功率下达到了118dB+的动态范围。设置到100mw的输出值，也仍接近117dB。最大功率时的失真，简直丧心病狂......串扰、也就是所谓的“声道分离度”指标，这里的换算稍微复杂一些，左声道除以右声道的值开log以后乘以20，得出串扰值为76.7dB。不难看出，THX对于Onyx的指标数据标注是相对严谨的，而且耳闻过THX耳放的人也知道，他们的耳放一向是以大功率、低失真闻名，实测带负载指标测下来，确实名不虚传。看过我文章的应该知道我对蓝蜻蜓的喜爱吧，而蓝蜻蜓好听归好听，它的实测指标是有些拉胯的，下面列表中我详细标注了16和32欧负载下的硬件输出参数，大家可以对比一下，对蓝蜻蜓简直是公开处刑。当然了，还是要强调一下，Onyx的指标好看，但在我看来只是“锦上添花”的一部分，毕竟这个行业里仍有类似乐彼这样的在硬件指标方面极为变态的厂家存在。上图是W2的平衡口带负载指标，但毕竟是有平衡口的机器，推力、信噪比、串扰等指标有着先天优势，小尾巴之王不是盖的。千元内也有Hidizs S9这样的产品，在音质优秀的同时，输出的指标也非常漂亮，699价格你能买到的硬件实力与声音水准最顶尖的产品。标杆点三：中正、杂食度高的音色与出色的适配性Onyx在听感层面我认为和蓝蜻蜓是互有胜负的，从音色的参考性来说，我认为Onyx的参考性远高于蓝蜻蜓、也略胜W2的单端口，蓝蜻蜓主要输在了空间感、分离度，W2主要输在了声音稍显硬朗、不如Onyx这么宽松细腻，但和W2平衡口就没有什么可比性了，毕竟抛开素质比听感是耍流氓，只从素质的角度来说，Onyx和W2平衡口在驱动一些高阶耳塞时候的声音表现会有明显差距。Onyx的声音底子相比蓝蜻蜓来说，更接近一个入门级、甚至中端播放器的表现，尤其是声音的骨架在足够富有密度、肌肉感的同时也不失应有的韧劲和宽松感，声场表现相当优秀，优秀到你可以忽略它没有平衡口的那种。在驱动搭配了Eletech的苏格拉底的ST1000时，Onyx把横向的声场那种脱塞感和动圈耳塞独有的边缘的混响感表现的极为充分，也塑造出了舒展的头部空间与纵深，而且保留了ST1000的润泽度，并不会有明显数码声的感觉，而且对于低频的打击感与肉感保留的非常足（苏格拉底这条线会吃一些ST1000的低频下潜，而搭配在Onyx上时，这个“吃”的程度明显有所减轻）。而和Onyx不同的是，蓝蜻蜓通过更好的中低频厚度与声音的绵密感保留了ST1000的低频质感，二者的侧重点会有所不同——Onyx的声音会比蓝蜻蜓更加“规矩”，比如透明度、结像、空间感的塑造，它在听感和素质的“权衡”方面在我心目中是无限接近与55开的水准，而蓝蜻蜓我认为大概有7分功力用在了听感上，依然是拿ST1000来举例的话，我更喜欢用蓝蜻蜓驱动下的ST1000去听流行摇滚、港台老歌，而用Onyx的话，我可以打开我的歌单去随机播放任何类型的曲目，而且它在大动态方面的表现是可以媲美不少中端播放器的，不论你是流行党还是器乐党，Onyx的杂食风格都可以相对胜任。这款Onyx完全没有辜负THX的头衔，外形设计、做工质感、硬件指标、声音素质、音色适配性方面，都是我认为目前行业里第一梯队的水准，1599的售价，如果你预算充足、对平衡口没有硬性需求的话，它在音色的杂食度上是比蓝蜻蜓和W2更适合盲狙的选择。我很少在文章里表达一个产品适合“盲狙”的观点，但Onyx这款小尾巴，是我认为一个可以安心推荐的型号、而且如果早一年推出，我会毫不犹豫地把它列在我去年那篇小尾巴大杂烩的“标杆”列表里。打开值得买，享最佳阅读体验影音播放影音地带使用评测把耳朵叫醒RAZER/雷蛇 全部评论（5）值友1213383373请问你的AD2522哪里买的？软件兼容AP原来的吗？02-23 15:160 李凌佳琦 (作者)： 奥普新复刻的，和原版1比1的硬件，软件完全通用值友1213383373： 请问哪里买呢？想试试国产的如何。。。。怎么发不了私信给你，低烧的小于哥为什么我的v1就没法接w2这种小尾巴?2021-07-090 值友1213383373@值友1213383373 。。。。02-24 18:360 查看全部5条评论 文中商品Razer雷蛇 THX Onyx放大器解码耳放声卡hifi手机音效功率Type-C THX放大器实时价格9小时前已更新1044.05元天猫精选 影音播放优惠领券京东 国际音频优惠券满1499减2000人已经领取免费领取京东 HiFi音频优惠券满2999减4000人已经领取免费领取 影音播放促销活动好价汇总：双十二影音设备好价全汇总！索尼 WH-1000XM5 1999元，OPPO Enco Air2 123元，继续买买买！什么值得买12-120100%双12影音播放好价剁手抢！OPPO Enco Air2 半入耳式真无线蓝牙耳机仅103元，SONY 索尼 WH-1000XM5 头戴式降噪蓝牙耳机1999元，支持12期免息～京东12-1000 最新影音播放优惠SOUNDPEATS 泥炭 Air3 Deluxe HS 无线蓝牙耳机商品好评率96%229元包邮京东14:3900抖音超值购：小度 X10 带屏智能音箱124天新低影音播放热度Top8649元 包邮（限名额补贴E卡）抖音电商12:05777%小度 T8 带屏智能音箱 灰色比上次发布低15%值友专享799元包邮（限名额补贴E卡）抖音电商12:042100%15日0点：MONSTER 魔声 XKT01 半透明蓝牙耳机价格低于双11影音播放热度Top259元包邮（需用券）天猫精选10:36450% 猜你喜欢必入的上班族/学生党高性价比生产力工具——讯飞智能录音笔H1 Pro深度测评长鸣说2171.9K【硬核动手】36元复活Apple AirPods - 自行更换苹果AirPods电池记录纯洁的小邪恶120937收了同城一位女主播的麦后，才知道网络世界都是骗人的……金豆儿爹186496录音、转记、翻译！科大讯飞智能录音笔SR502如何助力学习与工作？GT_7353174 相关好价炳捷（BENJIE)X5-4G全面触摸屏2.5英寸/ MP3/MP4/播放器/电子书/学生小型随身听/英汉词典翻译118元京东12-07 20:2800Haiman/Kardon 哈曼卡顿（Harman\/Kardon） 音乐卫星七代桌面音箱电脑音响ONYX 7 ONYX 7夜空黑1819元包邮（需用券）京东12-01 17:0600SOAIY 索爱 S39 蓝牙音响台灯手机无线充电床头灯音箱2022新款智能感应家用小型高音质低音炮卧室睡眠氛围音乐小夜灯168元天猫精选12-11 17:1800丹唛仕 Danms) 8812/8815户外K歌音响带显示屏三分频大功率广场舞音箱移动KTV一体机3280元京东12-09 22:1500SOAIY 索爱 插卡音箱便携小音响老人收音音乐MP3随身听播放器广播57元唯品会12-09 21:1500 相关商品Razer雷蛇北海巨妖V3 X头戴式耳机7.1声道电竞游戏RGB灯光USB耳麦299元起0雷蛇 Razer 噬魂鲨专业版PS5 无线游戏耳麦 头戴式耳机暂无报价0RAZER 雷蛇 旋风黑鲨V2X头戴式游戏穿越火线耳机麦369元起0RAZER 雷蛇 北海巨妖V3 X进化版 头戴式有线耳机 黑色512.05元起0社区首页 电脑数码 影音播放 文章详情

似乎你个人需求，一般而言对大部分都是需要的，让振膜进行磨合，提早达到最佳音质阶段。煲机不需要接耳放，但是如果你的耳放也是新的话，耳放也需要煲的，让内部的电器元件、尤其是电容等进入最佳工作状态。煲耳机用你正常听音音量的1/3~1/5来煲，每次不超过3小时为佳。音乐最好选择几十首不同类型的流行音乐连着播放，这样高中低频都齐全了，千万不要用发烧音乐煲，发烧音乐都集中在某一频段，不适合煲机。专业一点的煲机可以下载煲机软件来煲，用分红噪声、白噪声等波段来煲效果更好一点。

双木三林dp5缺点如下。1、数据处理能力有限，只支持8位数据处理，不支持32位数据处理。2、具有较低的存储容量，存储容量只有1KB。3、功耗较高，最大工作电流达到520毫安。4、无可编程的I/O口，不能实现外部设备的控制。5、不支持定时器等功能。

　　乐之邦莫邪2010只是比板载声卡好那么一点。 比此款声卡好的多了去了。 创新 华硕 德国坦克 乐之邦 节奏坦克 声擎

家里的许多电器如视、空调都需要遥控器，遥控器用的时间长了，有些按键就不是太好用了，有人会拿到电器维修部去修理，也有人干脆再去买个新的，其实大可不必，有一个简单的方法，自己就能修好。按键失灵是按键上原有的导电涂层磨损造成的，准备一把小号的螺丝刀，一节5B或6B的素描铅笔，自己动动手就行用小螺丝刀把遥控器背面的螺丝去掉，打开后盖，在按键反面的各个接触点上，用铅笔涂一遍，然后再安装好即可。

低端耳放推力够但三频控制力不足~不适合推 AKG K550 MKII

数字功放的基本电路是早已存在的D类放大器（国内称丁类放大器）。以前，由于价格和技术上的原因，这种放大电路只是在实验室或高价位的测试仪器中应用。这几年的技术发展使数字功放的元件集成到一两块芯片中，价格也在不断下降。理论证明，D类放大器的效率可达到100%。然而，迄今还没有找到理想的开关元件，难免会产生一部分功率损耗，如果使用的器件不良，损耗就会更大些。但是不管怎样，它的放大效率还是达到90%以上。

以前大家都认为solo耳放是公认最好，不过最近有款纯笛的耳放打破了这个说法。你还是用纯笛hd650专用版耳放，它是专门为搭配hd650这款耳机推出的耳放，所以最大限度地发挥了hd650，另外价格也是非常吸引人，只要980元

　　乐之邦在国内市场名声还是不错的，尤其是在音频解码方面很出色，N20这个箱子我没听过，不过在这个价位也算是款性价比不错的微型音响了，惠威S2W我听过音色不错，但是高音火候稍欠，听听流行乐还可以，综合考虑的话，我觉得还是入N20的好！

想的话其实都可以.....250欧煲开了直推也还可以.....一方面看预算，一方面看使用需求了，看是需要一体机，还是需要usb解码，还是需要耳放发烧无谓新老，音乐不分贵贱，欢迎访问拜亚动力爱好者之家——Beyerdynamic吧： http://tieba.baidu.com/f?kw=beyerdynamic

价格，连接。1、价格方面。双木三林su9每款358元，su9n每款450元。2、连接方面。双木三林su9仅支持手机连接，而su9n支持电脑usb连接和手机连接。

双木三林q5接汽车24伏电应该是可以的，没什么问题的。

数字功放的基本电路是早已存在的D类放大器（国内称丁类放大器）。以前，由于价格和技术上的原因，这种放大电路只是在实验室或高价位的测试仪器中应用。这几年的技术发展使数字功放的元件集成到一两块芯片中，价格也在不断下降。

高阻高敏的，hd600,650，白牙家的一堆。akg的、真男人家的不行

数字功放的基本电路是早已存在的D类放大器（国内称丁类放大器）。以前，由于价格和技术上的原因，这种放大电路只是在实验室或高价位的测试仪器中应用。这几年的技术发展使数字功放的元件集成到一两块芯片中，价格也在不断下降。

有声音源就会响，就是大小点

乐之邦莫邪2010只是比板载声卡好那么一点。 比此款声卡好的多了去了。 创新 华硕 德国坦克 乐之邦 节奏坦克 声擎

碧玉是和田玉的一个品种，但鉴定证书上写和田玉（碧玉）并不代表是和田产的碧玉。因为俄罗斯碧玉和加拿大碧玉同样鉴定为和田玉（碧玉）。另外碧玉是和田玉里比较热闹的品种，近年来涨势非常快。

这个好像是毛阿敏唱的历史的天空，是三国演义片尾曲吧，歌词应该是长江有意化作泪

对外汉语教师文化休克不是先蜜月而是先休克原因是，取决于文化适应者自身的文化适应能力，如语言能力、对异文化的期望值、对本国文化的认同感、本身对异文化的接纳、理解能力等。“文化休克”，即指一个人处于一种社会性隔离，而产生焦虑、抑郁的心理状态，通常“文化休克”会经历四个阶段：蜜月期(honeymoon)、挫折期(cultureshock)、调整期(adjustment)、适应期(adaptment)。

协商不成，以欺诈到法院起诉，主张解除合同。中华人民共和国合同法第五十四条　下列合同，当事人一方有权请求人民法院或者仲裁机构变更或者撤销：　　（一）因重大误解订立的；　　（二）在订立合同时显失公平的。　　一方以欺诈、胁迫的手段或者乘人之危，使对方在违背真实意思的情况下订立的合同，受损害方有权请求人民法院或者仲裁机构变更或者撤销。　　当事人请求变更的，人民法院或者仲裁机构不得撤销。

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大概是酶的种类不一样吧。寡核苷酸引物的延伸应该在最适温度下进行,对于Taq酶来说最适温度一般为72-78度。但过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。我们用的也是72度，酶是黄石公园Mushroom Spring的嗜热水生菌（T.aguaticus）的taq。程序是94度4.5分预变性，94度30秒denature，55度1分aneal，72度1分extension（循环）72度5分结束。---------------------------------------------随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入，PCR已成为一门相当成熟的常规技术，而热聚合酶（即Taq酶）的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上有多种Taq酶，能够满足多方面的实验需要。那么，如何选择最合适的Taq酶？根据用户经常考虑的指标，如特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度、能否进行复杂模板扩增以及优化条件难易等等，我们在这儿将主要的Taq酶归归类，其性质、用途也就一目了然了。高特异性Taq酶高度特异性地扩增所需的片段是PCR最基本的要求，影响PCR特异性的因素很多，包括模板、引物性质及质量、反应条件的控制等等，而高特异性Taq酶的出现大大减少了摸条件这一繁琐的实验过程，也为PCR产物快速有效的纯化（PCR产物直接纯化）打下了基础。这类酶最典型的代表是热启动Taq酶。大家都知道，在PCR第一个循环变性之前，有一个升温的过程，引物和模板会有一些非特异性配对，如果这时Taq酶发挥活性，就很容易产生非特异性扩增，由于循环初期模板量非常少，产生的非特异性条带经过后面的指数扩增，就会严重干扰目的片段的扩增，甚至导致特异性条带不能扩出。而热启动Taq酶是必需经过高温才能激活的酶，因此在初始循环的变性之前它没有活性，不会产生非特异性扩增，这就大大提高了PCR扩增的特异性。第一代热启动Taq酶往往直接在Taq酶上做一些修饰，比如用抗体抑制，蜡封等，如Clontech、Stratagen、Gibcol-LTI的一些产品，由于抗体、蜡等异物的掺入，对实验造成一定的影响，也给试验者带来一些不便。新一代的热启动Taq酶是通过内部改造的重组酶，真正实现便利的热启动，代表产品如QIAGEN公司的HotStar系列，无需别的辅助抑制物，也不用担心抑制不稳定，使用起来方便、高效。此外，由于几乎所有的Taq酶产品都带有相应的反应缓冲液，缓冲液的品质也对保证Taq酶特异性扩增起着不可忽视的作用，一般的缓冲液中调节H键作用的盐只有KCl，QIAGEN公司的缓冲体系通过KCl、(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节也提高了酶作用的特异性。此外，热启动的Taq酶也是实现一步法RT-PCR的基础。如QIAGEN公司的OneStep RT-PCR试剂盒，在RT反应较低温度下，Taq酶没有活性，逆转录酶发挥活性；RT反应结束，高温灭活逆转录酶的同时，激活Taq酶，进行PCR反应。另一家公司Epicentre有一种MasterAmpTM Tth DNA聚合酶，本身就具有逆转录酶活性，也可用作RT-PCR。高保真Taq酶下游应用为基因筛选、测序、突变检测，分子诊断等等的用户，往往对PCR保真性要求很高，保真性的一个通用标准是错配率，错配率越低保真性越好。普通Taq酶的错配率在2-5X10-5碱基/循环数，而高保真Taq酶错配率可达10-6数量级，大大降低了出错的可能。其原理主要是因为高保真Taq酶具有3"到5"核酸外切酶（Proofreading）的活性，扩增途中如果产生了错配的碱基，它可以将其切掉，从而保证了扩增的准确性。需要提醒用户的是由于此酶具有核酸外切酶功能，往往扩增效率低一些，有的还容易降解引物，且产物一般不宜用TA或UA克隆法克隆。目前市面上主要有两类产品，一类是混合型的高保真酶，将带有Proofreading活性的酶与普通Taq酶（用于提高扩增效率）混合起来，错配率在8-9 X10-6碱基/循环数。Clontech、LTI等公司都有此类产品。如果要求更高的保真度，就要选择单一型的高保真酶，如Stratagene的Pfu，NEB公司的Vent DNA 聚合酶，错配率5.7 X10-5碱基/循环数；QIAGEN公司新推出的ProofStart DNA聚合酶，兼特异性与保真性于一体，其聚合酶及Proofreading活性都为热启动，可避免引物降解，错配率达2-4×10-6碱基/循环数，加上优化的反应体系，可在室温下配置反应液，可进行复杂模板（高GC含量、二级结构）及长片段的扩增，的确是这类酶中的佼佼者。高耐热性Taq酶对于有些模板变性温度较高，需要时间较长的用户，可能要求高耐热性Taq酶，这里介绍NEB公司的Vent和Deep Vent DNA聚合酶系列，两者都是从海底火山口分离出来后克隆的，是普通Taq酶耐热性的三倍以上，前者在95°C半衰期近7小时，100°C近2小时；后者更甚，分别为23小时和8小时。超长片段扩增Taq酶对于作基因组图谱、测序及分子遗传学研究的用户，可能会用到超长片段的扩增，Clontech公司的Advantage Genomic系列混有Tth DNA聚合酶，Proofreading酶和热启动抗体，对复杂模板可扩增10kb片段，简单模板可达40kb。关于复杂模板的扩增对于模板结构复杂，如GC含量高（>60%），有二级结构等，普通的Taq酶可能难以延伸下去，加入DMSO等助熔剂可帮助扩增顺利进行，但DMSO有毒，而且用量需要优化。QIAGEN公司的任何一种Taq酶都附有特制的Q-溶液，操作方便、安全，对复杂模板的扩增特别有效。关于条件的优化现下很多著名的生物试剂公司都提供优化的缓冲液，如QIAGEN公司的缓冲体系，对温度和Mg2+的耐受性很强，随试剂盒有推荐的操作手册，大大减少了反应条件的优化，如果结合好的引物设计软件和高质量的模板引物，一次成功率极高。但任何东西都不是万能的，如果碰到比较特殊的情况，还需要仔细分析，优化调整。以上就Taq酶的一些基本分类分别进行了介绍，具体选购时要根据实验需要择其重点，再参照其他参数，才能选到最合适的Taq酶。我们会及时将最新的技术和产品推荐给大家，希望能帮助大家更快更好的达到实验目的。

　　 试述文化休克的预防方法。 　　 答： （1）认知方面：通过专门的学习和系统的训练提高跨文化沟通交流能力，并了解文化休克的特征、产生原因及具体症状，可以使人们对这一现象有理论上的认识。也可进行自我训练。进人新环境之前，通过各种途径充分了解、熟悉新环境中的各种文化模式，如所在地的风俗习惯、地理环境和人文知识等，预防文化冲突时突然产生强烈的文化休克，并以开放的心态接受新的文化和结交新环境里的人们。 　　（2）感情方面：进入新环境之后，理解新的文化模式。在两种不同的文化发生冲突时。如果人们理解新环境中文化现象的主体，就会较快接受这一文化模式，打开社交圈子，踊跃参加一些有益的社会活动，以开阔视野，学习如何处理人际关系。 　　（3）沟通方面：个体需要学习、培养跨文化沟通交流能力，做到得体性和有效性的统一，以提高文化适应能力，例如得体的谈吐、合适的举止等。从语言交际和非语言沟通两方面看，得体性意味着一个人说话做事要尊重交际对方，不伤害对方的自尊心；而有效性是指一个人说话做事能影响交际对方，能达到行为源的预期目的。得体性是交际的最起码要求，而有效性是交际的最佳境界。得体性主要是就内容而言。有效性不仅牵涉内容（说什么话做什么事），而且还包括方式与手段（该怎么说怎么做）。 　　 　　自学考试改革后，一年就剩两次考试了，我要抓住机会，争取早日毕业。 　　感谢校《英语（二）》的老师，英语对于我来说很难，但报课之后，跟着老师讲课的进度来学习，感觉就是不一样，自己似乎都能听懂，很感谢你们这个平台。

我听过让我印象最深的一部电视剧片头曲或者片尾曲有《千年等一回》、《当》和《凉凉》。《千年等一回》是电视剧《新白娘子传奇》的片头曲。我看过这部电视剧至少十遍了。这并不夸张，我小时候这部剧是暑假必看的电视剧之一。前奏曲一想到就莫名其妙地激动起来，现在提起来还仿佛能听到这首歌的旋律跟歌词。赵雅芝那时真漂亮，虽然已经四十多岁，但她真的非常漂亮，当时叶童也很好看。《当》这首歌不仅是《还珠格格》的片头曲，也是那个年代KTV同学聚会的必点歌曲，有那么点轰轰烈烈的感觉。这首歌也让动力火车红遍了大街小巷，每当前奏一想起来，瞬间能放下手中的事情，或者停下脚步，去听它的旋律，尽管已经听了很多很多遍。就算是现在，再听到这首歌也会不自觉的唱出来，尽管跟以前比起来，多了一份对青春的思念。对于《凉凉》这首歌，我相信就算没听过它的人肯定也知道这个词，《凉凉》是《花千骨》的主题曲，开头的笛声仿佛把人拉近了剧中凄美的爱情中，而且歌词非常贴近剧中的人物关系，把男女主角中间发生的爱恨情仇表现的很到位，而且这首歌是张碧晨演唱的，她的音色为这首歌加了不少分。一部电视剧拥有一首好的片头曲或片尾曲是非常重要的，能让人在听到这首歌的同时就能想到这部电视剧，我说的这三首是让我印象最深的电视剧片头曲或片尾曲。

可以拒绝，给当事人造成损失的，可以是向责任者直接提出损失赔偿请求，也可以是向管理机关、仲裁机关、司法机关提出损失赔偿请求。《中华人民共和国消费者权益保护法》第十条 消费者享有公平交易的权利。消费者在购买商品或者接受服务时，有权获得质量保障、价格合理、计量正确等公平交易条件，有权拒绝经营者的强制交易行为。

在美国总体上的就业，研究生是不如本科生的。所以中国那套法则在美国并不适用;在美国，本科毕业后基本上大部分的学生选择了就业。而且美国的文化也并不像中国一样，对学历有着盲目的崇拜，更多注重的是个人能力，只要你能表现出你的价值，那么你就可以被录用。而硕士或博士就业不如本科的最重要一点是，大部分的工作并不需要技术含量那么高的人员去从事，仅仅有本科的知识就足以胜任。另一方面，美国的教育体制在某种程度上决定了“研究生不如本科生好就业”这一现象。整体来说，美国的教育体制与我们有着很大的差别。在中国大部分的学校里，硕士生是通往博士道路的必经之路，可以说，是阶梯性的，无法跨越的。而在美国，一个本科生是可以直接去读博士。纵观华人在北美的历史，最终能够立足的人，都是依托于自身的技术优势，并且从事一些美国人并不乐于从事的职业。简单点说，第一，立足于自身的技术;第二，为美国人所不为。所以中国人容易在美就业的专业都是技术含量高的专业，比如说理工科;或者数理含量比较高的其它专业。可是我们知道，专业的选择并不是由我们自己想怎么选就怎么选的，有很多的因素制约着我们的选择，其中最大的三块：本科所学课程;相关背景(研究背景、社会活动、实习等);兴趣爱好。这三个因素直接导致我们很难在专业的选择上有突破性的改变。在美国提供给学生的带薪实习的机会分为两种：CPT(Curricular Practical Training)和OPT(Optional Practical Training)。我们不能简单的把CPT看作是打工，它的本质是算学分的课程，并且有很多CPT会付工资;OPT则是毕业后的带薪实习。然而CPT给学生带来的价值很多时候并不是工资那么简单，很多同学通过CPT的机会最终拿到这个公司的OPT。而OPT是拿到工作签证(H1B)最重要的一步。总体来说，毕业生可以直接申请H1B，也可以申请OPT，这两者之间没有明确的先后顺序。但是H1B每年都有相应的配额，一般来说每年大概在65000左右的名额，而申请者很多时候会达到18～20万。所以毫不夸张的说，取得H1B很多时候是靠“抽签”的，而并不是靠优秀程度。因为并不是所有的公司都有资质帮助你申请H1B，这个很好理解，就好像说在北京有的公司能帮助你解决户口问题，有的公司不能。在这种情况下，OPT的价值就体现出来了，它能为毕业生拿到H1B提供多一层的机会。OPT对学生的价值不言而喻，不仅仅是取得H1B的重要通道，还是在美积累工作经验的少有途径。OPT一般来说期限是12个月，也就是说，如果在这期间内，没有办法拿到H1B至少你还积累了一年的工作经验。

广东东软学院是二本大学。广东东软学院（NeusoftInstitute,Guangdong），简称广东东软或东软学院，是经教育部批准设立的省级示范性软件学院、国家技能型紧缺人才培养基地、广东省企业信息化培训基地、广东省“依法治校”示范校、全国职业院校魅力校园。由东软集团联合亿达集团共同投资举办的一所以工学为主，兼办管理学、人文学等学科专业的全日制普通本科高等院校，是广东省首批2014年5月经教育部批准升格本科并更名为广东东软学院。截至2018年6月，学院校园占地630余亩，校舍总建筑面积24万平方米，200多间多媒体教室均安装有空调。拥有标准室内体育馆、足球场、羽毛球场、网球场、乒乓球室、篮球场和400米标准跑道的田径运动场。新落成的图书馆大楼建筑面积2万平方米，气势恢宏，设施精良，纸质图书约70万册，电子图书31万册。截至2018年6月，学院教师团队中，享受国务院政府特殊津贴2人、国家二级教授2人、教育部“新世纪优秀人才支持计划”1人、省级优秀教育工作者2人、省级优秀教师6人;佛山市创新领军人才2人;校级学科带头人7人;校级专业带头人/负责人18人;校级千百十培养对象13人;校级创新团队5个。学院拥有高级职称专任教师83名，其中正教授21名。博士31名，硕士264名，外籍教师19名。

文化休克是指当一个人处于一个与其原先文化背景截然不同的文化环境时，因受到文化冲击而产生的不适应或不适感。针对文化休克，一个人可以采取以下措施：1. 了解和学习目标文化。包括搞清楚目标文化的社会规范、价值观念、信仰习俗等，这有助于减少文化差异所带来的冲击和不适；2. 接受目标文化并尝试融入目标文化。主动学习并遵守目标文化的规则和道德标准，积极参与目标文化的活动和交往，这有助于建立在目标文化中的自尊心和自信心；3. 寻求资源和支持。可以通过寻求与本土人士的交流、就业辅导、心理咨询等方式来帮助缓解文化休克；4. 看待文化休克的积极意义。文化冲击让人们能够反思和比较自身的文化，从而更好地认识和理解自己，并能够获得更多的人生经验和成长机会。因此，应对文化休克不仅可以帮助个人适应新环境，还可以增强跨文化交流的能力和意识，有益于推动文化理解、沟通和合作。

联科生物地处素有“天堂”之称的浙江省杭州市，迄今已在上海、北京、广州、南京、苏州和厦门设立了6个常驻办事机构，为全国各地的用户提供最方便和快捷的服务。联科生物已与多家国际著名的生产商签订了独家或区域代理协议，为中国的专家和学者提供种类齐全的高品质产品。主要产品包括：美国Invitrogen公司的细胞生物学和流式细胞术产品、美国eBioscience公司的流式细胞术产品, 美国Peprotech公司的重组细胞因子、奥地利Bender Medsystems公司的细胞因子ELISA公司检测试剂盒、美国CTL公司的ELISPOT分析仪、瑞典Mabtech公司的ELISPOT检测试剂盒、美国Enzo公司 (旗下品牌：Alexis Biochemicals, Biomol, Apotech) 的荧光素和各种检测试剂盒、美国Millipore公司的耗材和细胞生物学产品 (旗下品牌：Chemicon, Upstate, Linco)以及德国Qiagen公司的分子生物学试剂盒等。值得一提的是，联科生物最近与德国美天旎公司(Miltenyi Biotec)达成合作协议，从2009年9月1日起在中国十个省内独家经销美天旎公司的免疫磁珠分选产品和gentleMACSTM全自动组织处理仪，为分选富集干祖细胞、T细胞和B细胞亚群、DC细胞和各种肿瘤细胞提供全球最佳的产品。同时，我们公司时刻跟踪最新科技，密切关注国外的科研动态和新兴公司的发展，力争为中国用户引进更多、更好、更新的技术和产品。

林花多媚，春鸟意多哀。 春风复多情，吹我罗裳开。 朝登凉台上，夕宿兰池里。 乘月采芙蓉，夜夜得莲子。 渊冰厚三尺，素雪复千里。 我心如松柏，君情复何似。 歌词选自汉朝乐府，更用吴音唱出，旋律也很优美。烘托出欢乐、热烈的气氛，却又婉转如意，清雅之至。此时孙夫人虽未露面，然而其温丽可人之处已一展风姿矣。至于“松柏”“渊冰”之句似乎又预示着两人以后的生离死别和孙夫人绝望中的自尽。

Darker其实就是袁志邦培养的徒弟-执法者（因为他自己被炸伤了），袁志邦其实没有死，也就是现在的拾荒者-黄少平。做了袁志邦的替身。18年前的爆炸案是他一手策划的。他主要是为了给白菲菲报仇。他为什么会面目全非？是因为；孟云被他设计控制住。

公交线路：12路 → 地铁1号线 → 地铁2号线，全程约35.8公里1、从荥阳市步行约5.0公里,到达中原西路乔楼站2、乘坐12路,经过26站, 到达中原路大学路西站3、步行约390米,到达医学院站4、乘坐地铁1号线,经过4站, 到达紫荆山站5、步行约250米,换乘地铁2号线6、乘坐地铁2号线,经过2站, 到达关虎屯站7、步行约460米,到达可诺丹婷美颜美体（...

水稻原生质体分离与转化方法（储成才 课题组 2014-01-20）【概述】原生质体是一种非常好的瞬时表达系统，现在已被广泛应用于植物生理生化和分子机制的研究，包括细胞信号转导过程，离子转运，细胞壁合成，蛋白质分泌以及细胞程序化死亡等生物学过程。现在已有的基于原生质体的实验技术包括亚细胞定位，基因瞬时表达分析，启动子活性分析，离子吸收实验以及蛋白质相互作用验证（如BiFC和蛋白质免疫共沉淀）等。本文主要阐述如何利用原生质体进行亚细胞定位，包括原生质体的制备与转化，定位载体的选择，共定位蛋白参照的介绍，荧光蛋白的性质和波长选择等问题。一、实验的前期准备：1. 水稻材料：将露白的水稻种子(中花11或者日本晴均可)整齐的播种在营养土（最好混有蛭石，营养土与蛭石的比例为1:1）中，放在温室生长14-21天。或者放在96孔PCR板上，萌发两天后，换成1×木村营养液培养7-10天。注意如果采用水培苗必须每天更换营养液，否则水培苗纤维化程度较高，叶鞘部分不够肥厚，且不容易被酶液消化。制备一次原生质体需要50-60棵水稻幼苗，可供转化质粒5-8个。2. 质粒制备：转化原生质体对质粒的质量要求比较高，需要使用试剂盒大量提取。通常大量提取一次需要100 mL菌液，使用Qiagen中量提取试剂盒可获得100-150 μg的高纯度无内毒素的质粒。质粒提取完毕后需要定量，通常将质粒稀释到 2 μg/μL，一次原生质体转化需要5-10μg质粒。二、试剂和耗材：1. 耗材：耗材准备如下表所示。50 mL 蓝口瓶 1 否 用于配制酶液250 mL 三角瓶 2 是 用于盛放酶液和过滤原生质体A4打印纸 4-10 否 暂时盛放刀片切下的叶鞘薄片玻璃板 1 否 避免刀片划伤实验台50 mL Nalgen圆底有机玻璃管 2 是 用于离心收集原生质体2 mL离心管 6-10 是 用于原生质体转化双面刀片 8 否 用于切水稻茎和叶鞘0.22 μm滤膜 2-3 否 用于过滤酶液细胞培养板 1 否 用于培养转化的原生质体2. 试剂准备：(1) Enzyme solution0.6 M D-Mannitol (M=182.17) 2.74 g 5.47 g 10.93 g10 mM MES (M=195.24, pH=5.7) 0.0487 g 0.0975 g 0.195 g1.5% Cellulase R-10（w/v, Yakult）0.375 g 0.75 g 1.5 g0.75% Macerozyme（w/v, Yakult）0.1875 g 0.375 g 0.75 gD-Mannitol 和MES 在常温储存，Cellulase R-10和Macerozyme R-10在4度冰箱储存。用1M KOH 调pH 至5.7，然后65℃水浴10min ，过0.22μM 滤膜除菌至无菌三角瓶中（注意pH 值一定要准确，否则将极大的影响原生质体的制备效率。Cellulase R-10可以用Cellulase RS 代替，但是Cellulase RS 的最适pH 大约为6.0左右）。待酶液冷却至室温后，加入如下试剂： 0.1% BSA0.025 g 0.05 g 0.1 g 3.4 mM CaCl 2 (M=110.99) 0.0095 g 0.019 g 0.038 g 50 mM β-ME (14.3 M) 8.75 μL 17.5 μL 35 μL50 μg/ml Carbenicillin1.25 mg2.5 mg5 mg(CaCl 2可配制1M CaCl 2，然后加入85 μL/ 25 mL ，Carbenicillin 配制50 mg/ mL 的母液)。 (2) W5 Solution 154 mM NaCl (M=58.44) 0.9 g 1.8 g 3.6 g 125 mM CaCl 2 (M=110.99) 1.39 g 2.78 5.56g 5 mM KCl (M=74.55)0.037 g 0.074 g 0.148 g 2 mM MES (M=195.24, pH=5.7)0.039 g0.078 g0.156 g用1M KOH 调pH 至5.7 , 121℃灭菌20 min 。 (3) MMg Solution 0.6 M D-Mannitol (M=182.17) 10.93 g 15 mM MgCl 2 (M=95.22) 0.143 g 4 mM MES (M=195.24, pH=5.7)0.078 g用1M KOH 调pH 至5.7 , 121℃灭菌20 min 。 (4) 40% PEG Solution 0.6 M D-Mannitol 0.546 g10.93 g 100 mM CaCl 20.5 mL (1M CaCl 2) 1.11g 40% (v/v) PEG 4000 (Fluka, Sigma-Aldrich )2 g (体积约等于1.75 mL)40 gTips ：由于PEG 吸水后体积会膨胀，所以必须在定容前给PEG 留出一部分体积。配制该溶液时先溶解D-Mannitol 和CaCl 2后，再加入PEG ，65℃水浴加热10min 至完全溶解后，再定容到最终体积。三、实验步骤1. 原生质体制备：(1) 预先配制0.6 M D-Mannitol 溶液100 mL 。(2) 将培养的水稻苗从茎基部截断后，用刀片切成0.5 mm 薄片，每次4-5颗苗/1个刀片(茎部比较好，叶片的细胞比较小，去除衰老的叶鞘)。将切好的水稻细条迅速转移入0.6 M D-Mannitol 溶液中，在常温下60-80 rpm 培养30 min 。(3) 用神奇滤布（Miracloth）过滤后，再药匙将滤布上的水稻薄片转移入含有酶液的250 mL 三角瓶中（三角瓶需用锡箔纸包住，避免见光）。放入28℃摇床，在黑暗条件下60-80 rpm酶解4-5 h。Tips：以上步骤为节省时间，也可以直接将切好的水稻薄片转移入酶液中进行酶解。如果不经过0.6 M Mannitol质壁分离预处理的，则需抽真空半小时（15 mmHg）。(4) 取10 μL在光学显微镜下观察原生体的完整性，健康的原生质体为边缘清晰的圆形游离态。(5) 加入与酶液等体积的W5 Solution，用力摇晃15 s，充分释放原生质体。(6) 用W5 Solution润洗灭菌过的网筛(35 μm, 100目), 将酶解的原生质体通过网筛，过滤到新的250 mL三角瓶中。再用少量W5 Solution冲洗网筛，充分洗脱网筛上的原生质体，并将其全部转入250 mL三角瓶中。(7) 将三角瓶中的原生质体分装到两个50 mL透明离心管中，水平转子450 g（大约1500 rpm）离心3 min（注意调整升降速为3），小心去除上清。(8) 加入15 mL W5 Solution重悬原生质体，并于450 g 离心3 min。小心去除上清后，重悬原生质体于1 mL MMg Solution中，使细胞的终浓度为1-5×106 cell/mL。2. 原生质体转化：(1) 在2 mL离心管中加入5-10 μg 质粒，再加入100 μL制备好的原生质体，并轻柔地吸打混匀。(2) 加入110 μL 40% PEG，并迅速轻柔混匀，勿使原生质体成团。(3) 置于28 ℃水浴15 min，加入1.8 mL W5 Solution重悬，并终止反应。(4) 将2 mL离心管套在10 mL离心管中，水平转子450 g离心3 min。(5) 用移液器小心吸除上清后，重悬原生质体于750 μL W5 Solution中。(6) 转移原生质体到12孔细胞培养板里，用封口膜包好后，于28℃避光培养12-16h。Tips：原生质体的转化体系一定要按比例放大，否则PEG浓度的改变会导致转化效率的降低。用于Co-localization和BiFC等共转化实验需要的质粒要更多更纯。四、亚细胞定位以及BiFC的载体信息1. 用于亚细胞定位的载体有：pCAMBIA2300-35S-EGFP(N)：EGFP融合于目的蛋白N端。可用来做瞬时表达和稳定表达。pCAMBIA2300-35S-EGFP(C)：EGFP 融合于目的蛋白C端。可用来做瞬时表达和稳定表达。(这两个载体可用于稳定转化水稻、拟南芥和烟草，注意农杆菌分别对应AGL1和GV3101。) pUC-35S-EGFP(Modified): eGFP融合于目的蛋白N端。仅可用来瞬时表达。pSAT6-EYFP-C1(35S,CD3-1103)：eGYP融合于目的蛋白N端。仅可用来瞬时表达。pSAT6-EYFP-N1(35S,CD3-1104)：eGYP融合于目的蛋白C端。仅可用来瞬时表达。2. 用于BiFC的载体有（双分子荧光互补的载体是成对的）：pSPYNE173和pSPYCE（M）：分离的EYFP融合于目的蛋白的C端，用于瞬时表达。pSCYNE和pSCYCE：分离的CFP融合于目的蛋白的C端，用于瞬时表达。pVYNE和pVYCE：分离的Venus融合于目的蛋白的C端，用于瞬时表达和稳定表达。pVYNE(R)和pVYCE(R)：分离的Venus融合于目的蛋白的N端，用于瞬时表达和稳定表达。Tips：在转化原生质体时，应当尽量采用 ~4.5 kb的质粒。越小的质粒转化效率越高，蛋白荧光越强。五、共定位蛋白参照我们实验室现有的共定位蛋白参照如下：Endoplasmic reticulum ER-RFP（RFP-HDEL） Unknown Golgi Golgi-RFP（SialT-RFP） UnknownTonoplast Alpha-TIP-RFPGamma-TIP-RFPDelta-TIP-RFP At1g73190 At2g36830 At3g16240Chloroplast RbcS-EGFP Os12g0291100 Nuclear OsbZIP52-mRFP Os06g0662200此外，还有一些共定位蛋白参照可以参考：Chloroplast OsRbcS Os12g0292400 Chloroplast OsRbcA Os11g0707000 Mitochondrion OsRpl6-2 Os08g0484301 Mitochondrion OsAtpC Os07g0513000 Nuclear OsSRT1 Os04g0271000 Golgi Golgi-mCherry（Man49-mCherry）UnknownGolgi OsNST1 Os02g0614100 Endoplasmic reticulum DEP2 Os07g0616000六、荧光蛋白的基本特性目前，常用的一些荧光蛋白的基本性质总结如下：Aequorea FP derivatives (水母来源的荧光蛋白)Cyan (CFP) 433/452 475/505 Monomer/weakdimerCerulean 433 475 Monomer/weakdimer Enhanced green (eGFP) 488 506 Monomer/weakdimer Enhanced yellow (eYFP) 514 527 Monomer/weak dimerVenus 515 528 Monomer/weakdimer Citrine 516 529 Monomer/weakdimer Anthozoa FP derivatives (珊瑚来源的荧光蛋白)mOrange 548 562 MonomerRed (RFP) 555 584 M