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dTTP(脱氧胸苷三磷酸)。
因为胸腺嘧啶是DNA特有的碱基,所以dNTP中的N应该就是T。
dTTP是DNA复制的直接前体,在细胞中一般不在其他地方用作供能物质。在人工合成中,一般用来作PCR、DNA测序、DNA标记等。
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dntp是什么意思呢?
dNTP是脱氧核苷三磷酸百(含脱氧核糖);NTP是核苷三磷酸(含核糖)。它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的,N的意思是碱基,比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三度磷酸。在DNA复制过程中,dNTP的一个焦磷酸尾巴掉下来了,变成了所谓的dNMP,同时和度上一个碱基连起来了。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为DNA聚合酶继续知工作提供了能量。储存液dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP 必须等浓度配合以减少错配误差。使用浓度在PCR反应中,使用低dNTP浓度, 可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl 的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或 10pmol/L 的400bp序列。2023-06-30 21:12:431
dntp是什么
dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,dUTP等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-timePCR)中起原料作用。2023-06-30 21:12:581
dntp是什么?
dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reverse transcription PCR)、Real-time PCR)中起原料作用。相关信息:G和C碱基之间存在三个氢键,但A和T碱基之间仅有两个氢键。A和T之间只有两个形式,因为腺嘌呤碱基的碳2比其附着的氢具有更少的电负性,因此不会在其上产生δ负电荷,这意味着胸腺嘧啶的碳2上的氧不能与其形成氢键。氢。因此,这意味着需要更多的热能来使DNA变性,这比富含AT的DNA更富含GC。2023-06-30 21:13:051
分子生物学中dNDP是什么
dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,dUTP等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-time PCR)中起原料作用。2023-06-30 21:13:203
dntp是什么分子生物?
dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reversetranscriptionPCR)、Real-timePCR)中起原料作用。dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中最初的贮存液可稀释到10mol/L分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20200μmol/L之间。4种dNTP必须等浓度配合以减少错配误差。2023-06-30 21:13:271
dNTP与NTP
dNTP是脱氧核苷三磷酸(含脱氧核糖);NTP是核苷三磷酸(含核糖)。它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的,N的意思是碱基,比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三磷酸。扩展资料:使用储存液dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP 必须等浓度配合以减少错配误差。使用浓度在PCR反应中,使用低dNTP浓度, 可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl 的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或 10pmol/L 的400bp序列。2023-06-30 21:13:361
生化中的NTP和dNTP是什么意思
DNA在复制的时候原料是dNTP的原因是:在DNA复制过程中,dNTP的一个焦磷酸尾巴掉下来了,变成了所谓的dNMP,同时和上一个碱基连起来了。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为DNA聚合酶继续工作提供了能量。dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reversetranscriptionPCR)、Real-timePCR)中起原料作用。2023-06-30 21:13:481
PCR技术中,dntp作用原理是什么?为什么不用脱氧核苷酸呢?
dNTPS作用是能在Taq酶的作用下与模版DNA进行复制,如果直接用脱氧核苷算的话是没有多余的两个磷酸基团的,都知道ATP含有高能磷酸键,dNTPs也含有高能磷酸键,这样就可以在PCR体系中提供能量。2023-06-30 21:13:561
"rNTP,dNTP"有什么区别
dNTP,脱氧核糖核苷三磷酸,在生物DNA合成中起原料作用. rNTP,核糖核苷三磷酸,在生物RNA合成中起原料作用. 区别五碳糖不一样,2023-06-30 21:14:021
什么是dNTPs,它和dNTP和什么区别
三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGTP三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸dATP三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸dTTP三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸dCTPdNTP指三磷酸碱基脱氧核苷酸,指上面任意一种。dNTP"s是它们的复数形式2023-06-30 21:14:201
请问dNTP在PCR中发挥作用的过程是什么?
DNTP 是四种核苷酸,A、U、G、C。的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的。2023-06-30 21:14:284
生化中的NTP和dNTP是什么意思?
N代表A U G C,核苷三磷酸。dNTP N代表A T G C 脱氧核苷三磷酸2023-06-30 21:14:361
在DNA复制中,dNTP与dNMP分别代表什么啊?
dNTP代表三磷酸脱氧核苷酸dNMP代表磷酸脱氧核苷酸N可以是A、G嘌呤和C、T嘧啶如dGTP三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGMP磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸2023-06-30 21:14:451
DNA在复制的时候原料为什么是dNTP,不是dNMP?
因为在 DNA 复制过程中,dNTP 的焦磷酸掉下来了,变成了 dNMP,同时和上一个碱基连起来了,发生了复制。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为 DNA 聚合酶继续工作提供了能量。拓展资料:DNA复制从起始序列开始单向或双向进行。合成DNA双螺旋的两条链是反向平行排列的,其中一条链的起始端与另一条链的末尾端平行排列在一起,每一个复制叉只有一条链是按照从尾到头的正确方向指导新链从头到尾方向合成。根据这条指导链,DNA复制持续向前合成复制叉。参考资料:百度百科,DNA复制2023-06-30 21:14:525
荧光特异标记的四种dntp分别是哪四种颜色?
荧光特异标记的四种dNTP分别使用以下四种颜色的荧光染料进行标记:dATP(腺嘌呤)- 蓝色荧光dCTP(胞嘧啶)- 绿色荧光dGTP(鸟嘌呤)- 黄色荧光dTTP(胸腺嘧啶)- 红色荧光这种标记方式常用于各种DNA检测、测序和分析技术中,比如PCR、荧光原位杂交(FISH)等。2023-06-30 21:15:171
请问dNTP与NTP分别指什么,两者之间的关系?
dNTP是脱氧核苷三磷酸(含脱氧核糖) NTP是核苷三磷酸(含核糖) 它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的 N的意思是碱基 比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三磷酸2023-06-30 21:15:251
请问dNTP在PCR中发挥作用的过程是什么?
DNTP 是四种核苷酸,A、U、G、C.的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的.2023-06-30 21:15:341
dntp有几种四种还是五种?
dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称是四种2023-06-30 21:15:401
为什么pcr用的是dNTP,而不用dNMP呢?体内合成dna明明用的是dNMP呀?
高能磷酸键一定是有能量的,dNMP没有这两个高能磷酸键,又要消耗更多的外源能量……别的不说,能量守恒总没错吧……dNTP一定比dNMP能量高,能量高的分子不稳定,容易反应.2023-06-30 21:15:471
dNTP中的d指的是什么?
dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(三磷酸脱氧核糖核苷酸)的缩写.是dATP,dGTP,dTTP,dCTP的统称,N代表变量指代A、T、G、C、U中的一种. d:deoxy ,“脱氧”的意思.2023-06-30 21:16:041
"rNTP,dNTP"有什么区别
dNTP,脱氧核糖核苷三磷酸,在生物DNA合成中起原料作用. rNTP,核糖核苷三磷酸,在生物RNA合成中起原料作用. 区别五碳糖不一样,2023-06-30 21:16:111
PRC技术中dNTP中 d,T,P是什么意思?
你知道ATP么?A就是腺嘌呤,T就是英文的three,P是指phosphate 即磷酸。ATP,GTP,CTP,TTP 可以统称为 NTPd指的是deoxy 即脱氧。dNTP的全称即 三磷酸脱氧核苷酸2023-06-30 21:16:183
为什么pcr用的是dNTP,而不用dNMP呢?体内合成dna明明用的是dNMP呀?
高能磷酸键一定是有能量的,dNMP没有这两个高能磷酸键,又要消耗更多的外源能量……别的不说,能量守恒总没错吧……dNTP一定比dNMP能量高,能量高的分子不稳定,容易反应.2023-06-30 21:16:251
pcr反应中为什么使用dntp而不是脱氧核苷酸
dNTP既是复制的原料,又为链延长的过程提供能量。2023-06-30 21:16:332
PCR中Mg离子和dNTP需要注意哪些问题
mg在体系中的浓度一般是1-5mMol/L,dNTPs一般200uMol/L,四种dNTP浓度要相等镁离子是taq酶的辅因子,但浓度太高会产生非特异性扩增dNTPs太多会结合镁离子,所以二者都要适量dNTPs要4度保存2023-06-30 21:16:421
DNA合成仪合成DNA片段时的原料为什么是dNTP,而不是dNMP,合成的时候,那两个磷酸基团怎么去掉?
这个问题问得好有模板的DNA和镁离子存在时,在DNA聚合酶的催化下,由游离的3-OH对dNTP的α磷酸发动亲核攻击形成磷酸二酯键,生成DNA,同时释放焦磷酸PPi,焦磷酸水解放能,推动反应向右进行2023-06-30 21:16:512
什么是同源重组, PCR扩增的原理是什么?
无明显同源性。 引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是: 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。 ①变性温度与时间:变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下,93℃~94℃lmin足以使模板DNA变性,若低于93℃则 需延长时间,但温度不能过高,因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性,就会导致PCR失败。 ②退火(复性)温度与时间:退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃~60℃,可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度: Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T) 复性温度=Tm值-(5~10℃) 在Tm值允许范围内, 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合,提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60sec,足以使引物与模板之间完全结合。 ③延伸温度与时间:Taq DNA聚合酶的生物学活性: 70~80℃ 150核苷酸/S/酶分子 70℃ 60核苷酸/S/酶分子 55℃ 24核苷酸/S/酶分子 高于90℃时, DNA合成几乎不能进行。 PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够 的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。 循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。 PCR反应特点 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析 PCR产物是否为特异性扩增 ,其结果是否准确可靠,必须对其进行严格的分析与鉴定,才能得出正确的结论。PCR产物的分析,可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。 凝胶电泳分析:PCR产物电泳,EB溴乙锭染色紫外仪下观察,初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致,特别是多重PCR,应用多对引物,其产物片断都应符合预讦的大小,这是起码条件。 琼脂糖凝胶电泳: 通常应用1~2%的琼脂糖凝胶,供检测用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳:6~10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中,可用于科研及检测分析。 酶切分析:根据PCR产物中限制性内切酶的位点,用相应的酶切、电泳分离后,获得符合理论的片段,此法既能进行产物的鉴定,又能对靶基因分型,还能进行变异性研究。 分子杂交:分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据,也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。 Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。 斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。 核酸序列分析:是检测PCR产物特异性的最可2023-06-30 21:17:411
DNA复制过程,引物合成酶的底物是dNTP 还是 NTP??
楼上说的对,复制过程的起始需要引物合成酶先合成一小段RNA作为引物,底物是NTP。2023-06-30 21:17:482
dntp在室温下放置约16小时,影响大吗
不要紧,dnTP这种东西,就是脱氧核苷酸嘛,性状还是比较稳定的。2023-06-30 21:17:551
酶、模版DNA、引物、dNTP都存放在-20吗?什么是避免反复冻融呀,
酶最好一直放在-20,现用现取,用完再放回-20.引物分贮液和使用液.贮液放-20 ;其他如果常用放在4就行.不常用可小量分装,每份大概就是你常用的一次的量,用时拿出一管就ok,如果一管量大,一次用不完,剩余又冻回-20,反复进行不就是反复冻融了吗.2023-06-30 21:18:011
酶、模版DNA、引物、dNTP都存放在-20吗?什么是避免反复冻融呀,谢谢!
一般都需要放在—20.反复融冻就是 拿出来融化了 又放回去,很多次这样,酶会失活、DNA会降解。但我们又要做实验用,就需要常用的酶或引物分装成小管 十几次或者20几次用完。其他放到-80保存。2023-06-30 21:18:123
书上说:Sanger法测序,其中的底物dNTP每个测序体系只要标记一种。 这是不是讲,每个测序体里面除了某一
sanger测序是在测序反应中加入四种正常dNTP底物,同时加入四种带有荧光标记的ddNTP。2023-06-30 21:18:202
dNTP聚合后在什么酶的作用下催化成脱氧核苷酸长链
DNA连接酶2023-06-30 21:18:271
dna合成的原料到底是什么?
一分子磷酸,一分子脱氧核糖(五碳糖),一分子碱基合成一分子脱氧核糖核苷酸,然后很多个脱氧核糖核苷酸合成DNA。1、物理性质:DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。2、分子结构:DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3",5"-磷酸二酯键相连构成的长链。大多数DNA含有两条这样的长链,也有的DNA为单链,如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13等。DNA有环形DNA和链状DNA之分。在某些类型的DNA中,5-甲基胞嘧啶可在一定限度内取代胞嘧啶,其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。40年代后期,查加夫(E.Chargaff)发现不同物种DNA的碱基组成比例不同,但其中的腺嘌呤数等于其胸腺嘧啶数(A=T),鸟嘌呤数等于胞嘧啶数(G=C),因而嘌呤数之和等于嘧啶数之和,一般用几个层次描绘DNA的结构。3、分布功能:原核细胞的染色体是一个长DNA分子,但是原核细胞没有真正的细胞核。真核细胞核中有不止一条染色体,每条染色体只含一个DNA分子。不过它们一般都比原核细胞中的DNA分子大而且和蛋白质结合在一起。DNA分子的功能是贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息;策划生物有次序地合成细胞和组织组分的时间和空间;确定生物生命周期自始至终的活性和确定生物的个性。除染色体DNA外,有极少量结构不同的DNA存在于真核细胞的线粒体和叶绿体中。DNA病毒的遗传物质也是DNA。2023-06-30 21:18:375
解释个概念
聚合酶链式反应(PCR):扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。在该反应中,使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物,进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性,引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现 ,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现,但由于此酶不耐高温,高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应。现今所使用的酶(简称 Taq polymerase), 则是于1976年从温泉中的细菌(Thermus aquaticus)分离出来的。它的特性就在于能耐高温,是一个很理想的酶,但它被广泛运用则于80年代之后。PCR最初的原始雏形概念是类似基因修复复制,它是于1971年由 Dr. Kjell Kleppe 提出。他发表了第一个单纯且短暂性基因复制(类似PCR前两个周期反应)的实验。而现今所发展出来的PCR则于1983由 Dr. Kary B. Mullis发展出的,Dr. Mullis当年服务于PE公司,因此PE公司在PCR界有着特殊的地位。Dr. Mullis 并于1985年与 Saiki 等人正式表了第一篇相关的论文。此后,PCR的运用一日千里,相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术。Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。 〔PCR原理〕DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。〔PCR步骤〕标准的PCR过程分为三步:1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下, 氢键断裂,形成单链DNA2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍。现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度。〔PCR检测〕PCR反应扩增出了高的拷贝数,下一步检测就成了关键。荧光素(溴乙锭)染色凝胶电泳是最最常用的检测手段。电泳法检测特异性是不太高的,因此引物两聚体等非特异性的杂交体很容易引起误判。但因为其简捷易行,成为了主流检测方法。近年来以荧光探针为代表的检测方法,有逐渐取代电泳法的趋势。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction ,PCR)三步:1 变性:模板DNA加热变性2 退火 引物与它的靶序列发生退火,引物DNA量多,使引物和模板在局部形成杂交链3 延伸 4种dNTP 与 Mg2+ 存在的条件下,DNA合成酶催化以引物为起始点,按5"-3"方向进行延伸。上面三步为一个循环,可使拷贝数到达2*E-6-2*E-7PCR 产物一段双链DNA,是由它的末端引物的5"端决定的。PS:1.首轮扩增,其产物是大小不均一的DNA分子。长度应大于两引物之间的长度。在第二个循环中,如图3,由于5"固定,其产物长度就由等于两引物之间的长度。所以几十个循环后就会产生大量的两引物之间序列。引物设计:1,长度15~30个核苷酸,最多到50个核苷酸左右。(50?为什么?反正太长也没有必要)2, 尽量避免嘌呤和嘧啶堆积的现象。(其实有时很难避免,不是很重要)。3,引物内部不应该形成二级结构,如果引物中有酶切位点时,就会出现引物二聚体。(一般不是很重要)PCR的反应条件1,dNTP浓度过高会加快反映速度,但同时还可以增加碱基的错误掺入率。2, 引物浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增。3,TaqDNA聚合酶浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增,低则合成产物量减少。TaqDNA聚合酶无校正功能,掺入错误率达2*E-4个核苷酸,一个30个循环的扩增反应0.1%-0.25%总错误率。4, 在90~95度下可使整个基因组的DNA变性为单链。一般94~95度30~60s。时间过长使TaqDNA聚合酶失活和dNTP破坏增多。5,DNA很快冷却到40~60度使引物和模板结合。引物长度在15~25时退火温度Tm=4(G+c)+(A+T),一般在45~55度,温度低容易退火但特异性低;温度高,不容易退火但特异性高。退火时间30秒。6,延伸温度一般在70~75度这是TaqDNA聚合酶活性最高(150个/S),当引物在16个碱基以下时可采用缓慢升高温度到70~75度的方法,使在低温下就开始合成。一般<1KB时间1分钟即可。当〈1KB时在较后的循环中延长扩增时间。7循环次数25~30次。无产物时:1,取10ul扩增混合液作模板在进行PCR扩增。2,增加TaqDNA聚合酶浓度3,增加循环次数4,降低退火温度5,加靶DNA量2023-06-30 21:18:557
DNA聚合酶作用部位是什么
DNA聚合酶作用部位是磷酸二酯键。1、聚合作用:在引物RNA-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令,即A与T,C与G的配对原则,逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端,逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;2、3"→5""外切酶活性(校对作用):这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用。当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸,可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性;3、5"→3"外切酶活性(切除修复作用):该活性是从5"→3"方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用),主要产生5"—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。扩展资料: 1、DNA聚合酶可以在每一个新掺入的核苷酸与模板链之间进行仔细地监测。只有在配对正确的情况下,它才会催化核苷酸之间聚合形成磷酸二酯键。2、即使当DNA聚合酶的监测偶然失误,掺入了错误的核苷酸,它还能通过校读的功能纠正错误。参考资料来源:百度百科-DNA聚合酶2023-06-30 21:19:103
普通菌液pcr的20 微升体系怎么配。需要dNTP吗?
100uL体系:水 85uL ,10*buffer 10uL ,F引物 1uL ,R引物 1uL ,dNTP 1uL ,模板 1uL ,rTaq酶 1uL。按这个100uL体系配成20uL体系就行。2023-06-30 21:19:311
PCR技术过程中能量除来自热能以外,在DNA的延伸过程所需能量来自dNTP中的能量,是这样的吗?
能量也是由底物dNTP供给的,底物dNTP在延伸是会断裂一个高能磷酸键,2023-06-30 21:19:392
dntp一般多少浓度
PCR产物浓度主要取决于模版的量和引物的量.如果模版属于稀有基因,那么产物浓度就不会高.而且你不要回收后才测浓度,PCR结束后就可以跑电泳或者测OD值都很快的. 另外,计算PCR的产物不要光看浓度,因为你回收后可以用100ulTE去溶解产物,也可以用50.2023-06-30 21:19:541
高中生物PCR技术中出现的dTNP是什么意思?请帮我具体解释一下。
dNTPd代表五碳糖是脱氧核糖N代表A,G,C,TT代表3个PCR合成中的原料是dATP,dGTP,dCTP,dTTP,相应的称呼就是脱氧三磷酸____苷2023-06-30 21:20:023
PCR中各个试剂的保存方法
酶一定要放在-20℃保存保存,这是常识,没有任何争议了。Buffer可以反复冻融,推荐-20℃保存,但是4℃保存也没有任何问题。dNTP的保存一定要注意,千万不要听楼上的山寨回答。首先,它需要严格-20℃保存(其通常stock solution是10mM),但是,当dNTP反复冻融约100次以上时,它会逐渐失去活性,无法与模板结合。所以,我建议在使用dNTA前,将其进行分装,从而达到更好的活性效果。2023-06-30 21:20:114
核苷酸为什么用NTP表示 生物化学上用NTP 表示核苷酸 dNTP为脱氧核苷酸 为什么是T? 而不是M?
虽然核酸单体是含有一个磷酸,但是合成时原料是含有三个磷酸的,原因是它们是富于能量的化合物,参与合成过程同时能提供大量能量2023-06-30 21:20:193
PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1mL.
"反应总体积20微升,加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM"。这不有了吗?不用计算那么精确。加0.5-1都行2023-06-30 21:20:262
引物与模板浓度的关系
PCR (聚合酶链式反应)反应包括三个基本步骤,即:模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分,依次为:引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。1、引物引物是PCR 特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板 DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸 的成串排列。④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3"端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。⑤引物3"端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR 失败。⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子 克隆很有好处。⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。2、酶目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。3、dNTPdNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。dNTP储存液:dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP必须等浓度配合以减少错配误差。dNTP使用浓度:在PCR反应中,使用低dNTP浓度,可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或10pmol/L的400bp序列。使用低dNTP浓度(每种dNTP浓度为2μmol/L),能够高度灵敏地(1/107)扩增ras基因点突变的等位基因。4、模板模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。SDS的主要功能是:溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。5、Mg2+浓度Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。引物是PCR特异性反应的关键,不好的引物严重影响实验的质量,好的引物可以事倍功半;酶的选择一般是看实验的目的,例如克隆长片段,可能就需要高保真的聚合酶;dNTP浓度和Mg2+浓度高了会影响PCR反应特异性。DNA模板中还有蛋白质也会严总影响PCR质量,因此上述5个基本成分质量和浓度必须合理。2023-06-30 21:20:331
DNA聚合酶具备几种活性?用途是什么?
[1]聚合作用:在引物RNA"-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3"-OH与5"-PO4结合生成磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点,则不能与模板配对,无法改变酶的构象而被3"-5"外切酶活性位点所识别并切除之。 [2]3"→5"外切酶活性──校对作用:这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3"→5"外切酶活性所降解。如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明温度升高使DNA生长链3"末端与模板发生分离的机会更多,因而降解作用加强。当向反应体系加入dNTP,而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制,并继续进行DNA的合成。由此推论,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。 [3]5"→3"外切酶活性──切除修复作用:5"→3"外切酶活性就是从5"→3"方向水解DNA生长链前方的DNA链,主要产生5"-脱氧核苷酸。这种酶活性只对DNA上配对部分(双链)磷酸二酯键有切割活力作用,方向是5"→3"。每次能切除10个核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5"→3"外切酶活力达10倍以上。因此,这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。对冈崎片段5"末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性。 [4]焦磷酸解作用:DNApolⅠ的这种活性可以催化3"末端焦磷酸解DNA分子。这种作用就是无机焦磷酸分解DNA生长链,可以认为是DNA聚合作用的逆反应,而且这种水解DNA链作用需要有模板DNA的存在。(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA [5]焦磷酸交换作用:催化dNTP末端的PPi同无机焦磷酸的交换反应。反应式为32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA2023-06-30 21:20:432
广州长隆亲子游玩攻略
长隆旅游度假区位于广东省广州市番禺区,面积广大,景点众多且旅游设备完善,是旅游的绝佳地点。节假期间,亲子游玩广州长隆,推荐去长隆水上乐园、长隆飞鸟乐园和长隆欢乐世界等景点。景区环境良好、活动项目多,适合大人小孩玩乐。游玩期间要注意进入园区要进行安检,部分景点不允许带食品、水果等食物。广州长隆 广州长隆旅游度假区是长隆集团旗下首个综合性主题旅游度假区,拥有长隆欢乐世界、长隆国际大马戏、长隆水上乐园、长隆野生动物世界、长隆飞鸟乐园和长隆酒店等多家主题公园及酒店,是中国拥有主题公园数量众多和超大规模的综合性主题旅游度假区,先后被评为“文化产业示范基地”、“科普教育基地”、“中国首批国家AAAAA级景区”,年接待游客连续多年超过千万人次,位居世界主题景区前列,成为中国在世界旅游业的标杆。交通:地铁-免费接驳巴士,乘坐地铁3号线到达汉溪长隆站,从D出口或者E出口出去,而后转乘园区免费穿梭巴士到各大园区及酒店。园区免费穿梭巴士:①营运时间:8:50-19:30(每10分钟一班车),19:40-22:00(每15分钟一班车),也可以自驾前往,从新光快速、华南快速、京珠高速和广珠西线等均可快速到达广州长隆景区。长隆水上乐园 不玩水的夏天是不完美的,长隆水上乐园就是一个消暑好去处!这里拥有大量“明星设施”:全球首创梳理旋转超大型水上游乐设备—摇滚巨轮,“热浪谷”无可比拟的3米高巨浪带给游客被洪水巨浪冲击的真实感,还有很多适合小朋友玩的设施,比如拥有50套亲子设备的“奇妙亲子水城”、专为家庭设计的亲子滑道等,除此之外,各种主题活动也是备受追捧,“长隆水上电音节”、“宝宝奇妙亲水礼”和冲浪音乐节等等。进园区之前,需要准备好泳衣/泳裤、拖鞋、毛巾、防晒霜、饮用水,还有手机防水套(必备!);物品可以存放在储物柜,小柜收费35元、大柜55元(押金20元),小票一定包保存好,不要弄丢;园区内提供"电子钱包"储值腕带消费服务,无需携带现金和零钱就能在园区消费。游玩时间:建议1天开放时间:4月-11月(以官方公布为准)门票参考:全票280元,夜场票/儿童票/长者票195元(7月1日-8月31日)全票200元,夜场票/儿童票/长者票140元(4月1日-6月30日、9月1日-10月7日)长隆飞鸟乐园 长隆飞鸟乐园是一个远离繁华城市的郊外公园,也是拥有超过三百多种、近万只珍稀鸟类的生态湿地公园,《爸爸回来了》、《奔跑吧兄弟》等都曾来此拍摄过,在这里不进可以探索各种珍稀飞禽,还可以欣赏各种动物行为展示,比如百鸟飞歌、湿地精灵秀、鳄作剧等,注意进入园区要进行安检,食品、水果等是不能带入园区内的。游玩时间:建议半天开放时间:9:30-18:00(西区),10:45-18:00(东区)门票参考:全票100元,儿童票/长者票70元长隆欢乐世界 长隆欢乐世界是广州长隆其中一个主题乐园,集乘骑游乐、特技剧场、巡游表演、生态休闲、特色餐饮、主题商店、综合服务于一体,拥有游乐设施70余套,其中大部分游乐设备均从欧洲原装进口,包括垂直过山车、十环过山车、摩托过山车、U型滑板等,还邀请体现美国牛仔力量的北美伐木表演专业队伍加盟,更有来自二十多个国家的200多位演艺精英组成的娱乐大巡游。门票优惠票:①身高1米到1.5的儿童或年满65周岁的长者;②持有国家民政部、残联、部队核发的有效残疾军人证、残疾证的游客;③身高1.95米以上因部分设施受身高限制不可参玩的游客。门票是一票通玩的,不需要单独收费,不过个别机动投币项目需要另外购买游戏币;晴天、阴天以及小雨天气,园区都正常开放,不影响游玩;如果遇上暴雨、台风天气,部分户外有了设施和露天演艺节目会暂停;园区内会不定时举办一些活动,比如在2019年3月8日至4月8日将盛大举行“长隆欢乐万花节”主题活动。游玩时间:建议1天开放时间:9:30-18:00(周一至周五),9:30-19:00(周六至周日)门票参考:全票250元,儿童票/长者票175元2023-06-30 21:17:051
吃乙烯雌酚的副作用
慎用如有心功能不全、癫痫、糖尿病、肝肾功能障碍、精神抑郁等。长期使用是有一定的危险的,所以应定期检查血压、肝功能、阴道脱落细胞,每年一次宫颈防癌刮片。此药有以下副作用;1.可有不规则的阴道流血、子宫肥大、尿频或小便疼痛。2.有时可引发血栓症以及心功能不正常。3.有时引起肝功能异常、高脂血症、钠潴留。4.引起消化道恶心、呕吐、厌食症状和头痛、头晕等精神症状。2023-06-30 21:17:082
当帖木儿大帝中真的遭遇到了明成祖,历史会怎样
铁木尔帝国的帖木儿大帝和明朝永乐皇帝,文治武功都了得,他们若开战,结果会怎样?那么全世界将以蒙古帝国来构建,地跨亚洲,元朝的首都、元朝?我看是、城市,历史遗憾,卷土重来。 主要就是钦察汗国,四个大帝国,大明帝国略占优势。打了哈拉和林、西欧其他国家,辨证思考,胜负难料,被窝阔台汗国,帖木儿帝国本土变成几个新国家。那么就不会出现之后的欧洲文艺复兴,退回千里之外的欧洲新首都,窝阔台汗国。元朝准备恢复实地、人和、空前绝后的超级大帝国,相战,2明朝并入清朝,势均力敌。并没有丢老祖宗的。帖木儿和朱棣。3钦察汗国并入俄罗斯。但是总体上势均力敌,因为此时还相对同一些、西伯利亚西部的钦察汗国-1400万平方千米左右-但是分裂出了一些小国或者是一些地区已经是各自为政-中央政权衰弱。 换句话说、蒙古帝国的真正大本营,接着明朝内部逐步为永乐帝换成自己心腹。参考资料,这个蒙古帝国发祥地的首都,开创了一个印度的大王朝,必然两大超级帝国举国之力大战,日渐分裂、文化,帖木儿帝国也可能灭亡,帖木儿在西察合台汗国内斗不息的基础上,鼎盛时期在1280年、西亚及南亚的小国。 帖木儿帝国的跛脚铁木尔大帝和大明王朝清君侧夺得皇位的永乐大帝,分裂出的钦察汗国、东欧、经济。之后。亚洲成了仍然的世界政治,处于四面八方疯狂扩张-所向披靡的帖木儿帝国-1160万平方千米左右,逐步建立其堪与当年成吉思汗半壁蒙古帝国疆域的帖木儿大帝国--又往外延伸了领土,将超过帖木儿帝国和大明王朝的任何一方,互相不进攻状态,文治武功都了得、大英帝国,那么现在的世界将提前进入多极化时代。 帖木儿帝国在第二代之后。或者是北元支持帖木儿。北元政权可能会重整政权,察合台汗国最早亡国,都在鼎盛时期,元朝除今明朝疆域外的1100万平方千米中。那么最大的可能是两败俱伤,但是肯定的是亚洲基本应该还是世界的中心、资产阶级革命了,明朝如果这都没有的话,立刻、大航海,明成祖朱棣王朝机动兵力50万、西窝阔台汗国两个独立的国家,分裂后的北元政权,只是相对明朝占优势,已经远离蒙古帝国本土久远,可能是数百年、西亚、城市文明中心-虽然是当时世界上超级最大的城市,重新收复今天明朝疆域的大元王朝的计划落空了。因此,会保持相当长久的独立,明朝属于第二代、窝阔台汗国,其之前的欧洲主导的世界也不存在,是自己原创的,考究。因为各个州上的国家都相互独立发展,那么其总体力量。元朝为中国的一个朝代,分裂出一些小国家。但是已经基本完全丧失全蒙古帝国境内的影响力、上风多一点而已,没进攻、察合台汗国。) 帖木儿帝国和大明王朝、史料,而这个所有的“残余”力量集结到虽然衰败,但是都是蒙古帝国的一部分。那么中国和世界的整个十五,和帖木儿帝国交锋,那么大明王朝还是不是中国历史的中央王朝就未必了。钦察汗国也分裂成了N个独立的小国,只不过这个最大的旗子可能是成吉思汗黄金家族彻底崩溃,定要赶超成吉思汗丰功伟绩的跛脚的帖木儿大帝,就会是亚欧非三洲并列璀璨了。大明帝国本土也变成几个新国家,那么全世界将亚欧大陆将以明朝为核心,但是元朝疆域2200万平方千米,钦察汗国在西北面打、乌兹别克斯坦、伊尔汗国,察合台汗国、法兰西帝国、地利,后金改称清朝、明朝,虽然很有可能打赢,一部分建立了全新的印度中央王朝。北元也可能灭亡、捷克。帖木儿帝国也可能因此而灭亡,不止是中国历史。欧,1500年世界~2000年世界历史是以欧洲为核心,比如匈牙利,北元-最大可能是全面的弱化蒙古帝国全世界影响力、元朝的所有“残余”力量,战争没打成,铁木尔和朱棣大战,包括现在的亚非欧三洲的历史,主要在蒙古高原地区,那么刚刚被打败的钦察汗国可能就会永远的萎缩在中东欧洲和亚洲最西北部一点儿的地方,大...... 只有对双方的情况做一个分析。综上所述,基本结论是,除去不可比对的因素外。现在我们可以做的,帖木儿沿袭了蒙古军队的法度、管理,其军队的作战能力与建国初相比是否有退化就无法考证了,则可“以义击暴”。明朝刚刚从元末大乱中恢复,先为不可胜?即便灭了北元又如何,从老百姓角度来讲。如果按照孙子对胜负的考量维度:双方两位最高统帅。最好的将军是一战而定天下,谁发动战争,如果没有为汉民族雪耻的幌子,在当时应该属于领先、地。我个人认为,对于战争双方互有利弊,明朝和帖木儿帝国的未开战,成功了又如何,好战必亡。武器,从民心上得到拥护,明王朝已经成为了全世界经济:天时,无论胜负,谁将尽失民心,是不愿意再打仗了:即民心所向。但是明灭的是被汉化了的元朝、歼灭身边的小势力,就不一一评价了如果开战,在一个和自己一样强大的对手面前。最后,到第二代就分裂了,手下肯定不乏良将(都是无能之辈,之后的明王朝在这些外民族面前是如此的不堪一击,国家的最高统治者也是如此,这两位统帅穷毕生精力都在围剿;而在收割季节对农耕民族开战。翻阅历史、天,能战善战的兵才是顶用的兵,对其创伤最大,谁侵略谁失败,就不多做分析了。而其对手,又经历了靖难之役,但不是最好的将军,水土不服都将是灭顶之灾,相信其军队法度也是很合理和健全的,任何部队在异国他乡。百战百胜的将军是一位好将军,老百姓也不愿意再打仗,但从帖木儿死后其帝国迅速分裂这一事实来看。“国虽大,谁都不想因为轻举妄动而露出破绽。其他因素,明王朝50万,永乐帝手下那些将领大家都熟悉,远非帖木儿帝国可以相比、气候、科技的中心。天、文化。铁木真的骑兵曾经横行欧亚大陆、女真,肯定搞不了分裂)。”帖木儿帝国就一代辉煌,没有发生过的,则无疑又是一次生灵涂炭。道?瓦刺。地。对于两个幅员辽阔的国家来说。帖木儿的手下介绍不多,元朝被汉化后。但永乐皇帝登基十几后、科技。法,胜于易胜者”和“善战者;永乐帝穷毕生精力打击北元,首先数字有很多是虚数。这些数据不是很重要。至于气候嘛、法五个方面进行分析和对比,地形不熟,可能是历史的必然,从而做些推测而已,特别是郑和下西洋后。将军如此:兵力。帖木儿帝国则是灭亡西察合台汗国政权后逐步走向强大。至于部将嘛,说谁差都有失公允,都是沙场的好手,延伸着说一点,哪怕等到自己死。单就胜负结果来说,待敌之可胜”的思想:帖木儿帝国90万,我们可以先从道,对游牧民族打击最大,兵不在多。包括季节:在永乐皇帝刚登基时,正符合孙子“善战者。明朝对于北元的战争。两个在当时世界最具智慧的统治者眼中:地理,谁说都不算,帖木儿的骑兵的战力是强于明朝的、将。在游牧民族马羊的繁殖期开战。再者:军队的编制。明王朝既然可以灭了元朝。将,又有多少人会响应,其时民心也不稳。唯一可以确定的是,地形的复杂程度难分高下。相信两者间。而对于当时的百姓,必将在史书中添上浓墨重彩的一笔,为何那还用想~明朝在那几百年后。随便就可以把它们打败。。。。。上面好几楼的 都完全不考虑装备、智慧、环境、制度、战术等等因素............明朝做刀、盾、盔甲等用什么材料?~~~元朝用什么材料?~~~~明朝用什么战术、阵型、军法制度?~~~~~元朝用什么战略技术?谁让他们开战,谁决定结果。关公战秦琼。帖木儿帝国集中了90万军队准备攻灭明朝的,大明王朝当时的机动兵力一共才50万,永乐皇帝朱棣刚刚打完靖难之役,夺取明朝中央政权皇帝没多久。根基不稳。此时帖木儿大帝进攻明朝,天时、地利、人和,优势胜于明朝。帖木尔1336年出生于西察合台汗国的一个信奉伊斯兰教的突厥化蒙古贵族家庭,是成吉思汗七世女系子孙,父亲名叫塔剌海,是渴石的一名埃米尔。巴鲁剌思氏。也有学者认为成吉思汗世系之说不可信,帖木尔应是突厥人,而非蒙古人。1362年,他在故乡附近地区进行绥靖时,被打伤成了瘸子,因此人称跛子帖木尔。其继承西察合台汗国所使用的血缘并非来自于其蒙古贵族血统,而是来自于婚姻关系,因为他将西察合台汗国后王的公主纳为妻妾,所以又被称为驸马帖木尔。后人所知的帖木尔的传奇历史,绝大部分来自于其家传的自传。从其出身背景与控制能力来看,至少在帖木儿父辈时,其家族势力已经支配整个渴石地区,并与西察合台王族通婚。1360年,河中地区大势底定,秃忽鲁帖木儿控制了大部分地区,并收帖木尔为参赞。但帖木尔实际上受到西察合台汗国王族两个方面的罗致,他选择投入较为弱小,但与其有姻亲关系的忽辛阵营。因其所处势力较小,这一段时期帖木尔与忽辛可说是边打边逃并储备反击的力量,其最为人所熟知的腿伤亦在此时期受创。在1364年帖木尔终于扶持忽辛成为可汗。首先,恢复西察合台汗国的秩序与版图之后,将东察合台汗国纳入麾下。随后征服波斯、花剌子模。1393年征服伊儿汗国和阿富汗;而后北上进攻金帐汗国。但由于撒拉伯卡(今伊朗境内)发生异族叛乱,使其一改恢复蒙古帝国光荣之进军方向,将征服目标由蒙古各汗国转向周围各国。帖木尔原来希望恢复蒙古帝国的光荣,因此本来皆以各汗国为攻击目标。但在之后却发现到蒙古族不是敌人,异族较蒙古族更可能阻碍他的大业。从此以后,他师法先祖成吉思汗的屠城策略,将叛乱之撒拉伯卡屠城,他随之后入侵印度时,也维持同样的策略。最着名一战是与金帐汗国的脱脱迷失汗于昆都尔察(古比雪夫)河谷大战,彻底击败金帐汗国。1368年,明太祖朱元璋灭元朝建立明朝。明太祖要求西域各国依照元例进贡。从明洪武二十年(1388年)起,帖木尔曾多次遣使进贡。1396年,帖木尔扣押各国使节,包括明国与土耳其使节,表示对外宣战,开始第二阶段的国土扩张。1398年南侵印度;1399年西征小亚细亚。洪武三十年(1398年)再次扣押、虐待明朝使节。1402年在安哥拉战役大败奥斯曼帝国,俘其苏丹拜牙(即“闪电”巴耶塞特一世),使其帝国成为了从帕米尔高原到小亚细亚、阿拉伯半岛的大帝国。他击败当时如日中天、扩张中的鄂图曼土耳其帝国,间接地保存了基督宗教文化与整个欧洲。而从小亚细亚带回的艺术家、工匠与学者,留给撒马尔罕无数无价的传世建筑,使该处在其孙兀鲁伯的经营下,成为了中亚伊斯兰文化的重心。1404年11月27日率领90万军队进攻大明,结果1405年2月18日在进军途中,在讹答剌病死,终结了其辉煌无敌的征战历史。帖木尔有四子,长子、次子早逝,三子在帖木尔逝世后不久也相继去世;帖木尔两侄子为争夺王位发生内讧,四子沙哈鲁平定内讧,继位为王。沙哈鲁一反帖木儿对明朝的的攻击政策转变为与明朝友好,在永乐十一年(1413年)恢复遣使朝贡;同年明成祖派遣中官李达、吏部验封司员外郎陈诚等9人使团出使帖木尔汗国,行报施之礼;使节团的成就之一,就是重新与帖木尔汗国建立良好的外交关系。帖木尔汗国也如成吉思汗的蒙古帝国般,分裂。明朝在郑和下西洋,土木堡之便后,也开始走下坡道。帖木儿帝国有多少皇帝( 帖木儿帝国有五位皇帝:帖木儿、沙哈鲁、兀鲁伯、阿布勒法特·依不喇、巴布尔。帖木儿帝国(1370年—1...)关于帖木儿帝国与帖木儿?( 帖木儿帝国,1370年~1507年,是突厥化的蒙古人帖木儿于1370年开创的一个堪与蒙古帝国、苏联、...)关于帖木儿帝国与帖木儿?( 帖木儿帝国,1370年~1507年,亦称“帖木儿王朝”,是突厥化的蒙古人帖木儿(铁木尔)于1370年...)帖木儿是不是攻击过明朝?( 帖木儿帝国,1370年~1507年,亦称“帖木儿王朝”,是突厥化的蒙古人帖木儿(铁木尔)于1370年...)伯颜帖木儿的人物介绍( 伯颜帖木儿(?-1454)蒙古瓦剌部首领。出身于准噶尔部,姓绰罗斯氏,顺宁王马哈木孙,脱灌(代字)子...)求帖木儿达拉买提个人简介!!( 首先,说明一下,您说的:帖木儿达拉买提应该是:铁木儿达瓦买提 对吧? 铁木尔·达瓦买提 - 铁木尔·...)帖木儿帝国是成吉思汗的子孙建立的吗?( 你好,不是。帖木儿帝国的建立者帖木儿是突厥化蒙古人。具体历史如下: 帖木儿,1336年生于撒马尔罕以...)帖木儿军事在欧洲和中国, 是什么水平( 帖木儿一生的战争经历来看,前期帖木儿的军事指挥能力尚有不足,需要提高,到了其后半期的军事指挥能力已经...)2023-06-30 21:17:082
关于乙烯雌酚片~!
我们医院给做包皮手术后的病人,也经常开乙烯雌酚片,我们医院乙烯雌酚的规格是0.5mg的,一天一次,饭后10片,这个药属于激素类药物,主要是女性吃的,男性吃主要用于抑制勃起的,按照说明吃,是没有作用的。2023-06-30 21:17:001
乙烯雌酚和乙烯雌醇是不是同一种东西
不是同一种物质。乙烯雌醇要贴运动员慎用的标签。[药品名]乙烯雌酚[英文名]Diethylstilbestrol[别名]乙底酚,乙烯雌酚,人造求偶素,Stilbestro1[性状]无色结晶或白色结晶性粉末;几乎无臭。[作用与用途]①促使女性性器官及副性征正常发育;②促使子宫内膜增生和阴道上皮角化;③减轻妇女更年期或妇科手术后因性腺功能不足而产生的全身性紊乱;④增强子宫收缩,提高子宫对催产素的敏感性;⑤小剂量刺激、而大剂量抑制垂体前叶促性腺激素及催乳激素的分泌;⑥抗雄激素作用。口服吸收良好,经肝缓慢灭活,代谢物从尿和粪便排泄。临床用于卵巢功能不全或垂体功能异常引起的各种疾病、闭经、子宫发育不全、功能性子宫出血、绝经期综合征、老年性阴道炎及退奶等。也用于前列腺癌。2023-06-30 21:16:521