使用离心机时,为了缩短时间,可以超速离心吗

题主是否想询问“超速离心机配平密度是什么意思？”超速离心机是用来分离混合物中的不同组分的一种实验设备，配平密度是在超速离心机中进行样品分离时需要注意的一个重要问题。根据查询相关公开信息显示，超速离心机配平密度指的是在使用超速离心机进行样品分离时，为了获得更好的分离效果而在样品中加入一定量的配平剂，使得样品中不同组分的密度差异减小，从而有利于它们在离心时分离。

使用超速离心机。超速离心机是一种离心机，其转速可以高达几万转每分钟，可以产生高离心力，适用于分离某些较小的细胞器，如线粒体、溶酶体、内质网等。在超速离心机中，需要使用高速离心离心管或超速离心离心管，这些离心管可以在高速离心下保持稳定，不会破裂或漏液。超速离心机通常还配备了冷却系统，可以在离心过程中降低离心管的温度，避免样品因高温而受到破坏。

【答案】：D考点：离心技术分类。[解析]依据离心机转头的旋转速度，可将离心机分为低速离心（4000r/min以内）、高速离心（20000r/min、最大相对离心力可达45000g）和超速离心（30000r/min以上、最大相对离心力可达645000g）三种类型。

最大相对离心力可达45000g。经查环球网校官方网数据记录结果，超速离心机的相对离心力可达45000g，低速离在4000转每分钟。超速离心机，对于生化方面提取、分离、纯化后的物质进行分析和制备。可应用于生物化学、生物医学等部门。

你问的是超速离心机type100钻头样品精确到小数点多少位吗？这个机器精确到小数点4位。type100超速离心机的钻头样品可以精确到小数点后4位，这是由于它采用了高精度的编码器，可以提供更高的精度和稳定性。该机器钻头样品精确的4位小数点，可以更好的用来分离出悬浮液中的悬浮物，也可以用来分离出溶液中的溶质。

3个多小时。转头完全停下来需要3个多小时，因为转头腔是在真空下，空气的摩擦力很小，在打开门之前，必须等待转头完全停下来为止，当转头在运转的时候，决不要接触它，当离心机长期不使用时，保持关闭电源断路器。

可以。贝克曼超速离心机是一种用于生物学领域的分析仪器，于2019年4月26日启用。超速离心机由专人保管专人使用，非专管人员严禁擅自操作。离心管要对称、同量、同液放置，使用水平转子时一定要检查离心管是否挂牢，配平需精确到小数点后三位数。

1、停止离心机，等待数分钟，检查是否存在过载。2、检查离心机内是否有异常物质或异味，并清除它们。3、重新启动离心机并观察运行情况，如果离心机再次跳闸或出现警报，立即停止使用它并寻求专业帮助。

亚细胞器的分离需要用超速离心机。细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分，观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为，转速为10～25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/mi。

差速离心法，密度梯度离心法。利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有：差速离心法，密度梯度离心法。细胞分离所属现代词，指的是活细胞繁殖其种类的过程，是一个细胞分裂为两个细胞的过程。

有事。根据查询离心机相关功能数据表明，超速离心机不能连续工作超过6小时，超过会导致离心机的内核损坏，导致无法使用，即超速离心机不能工作一夜是有事的。超速离心机是离心机是借离心力分离液相非均一体系的设备。

可以。根据查询相关资料显示，贝克曼超速离心机可以放普通管子。超速离心机，对于生化方面提取、分离、纯化后的物质进行分析和制备。可应用于生物化学、生物医学等部门。

【答案】：B按转速分类：分为低速离心机、高速离心机、超速离心机。低速离心机：转速在10000r／min以内，高速离心机：转速在10000～30000r／min，超速离心机：转速在30000r/min以上。

能。传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出来。超速离心机最初于1940年由瑞典物理化学家斯维德伯格（T.Svedberg）设计制造，经过不断改进，已成为现代生物化学和分子生物学常用的技术之一。

会。dna提取需要将dna和其他物质分离，需要使用离心机，贝克曼超速离心机可以在更短时间内实现更有效的分离，广泛应用于质粒DNA、亚细胞器以及病毒的分离。

Sigma超速离心机是由Sigma公司制造，上世纪80年代在中国市场推出后，起初一般作为实验室离心机使用，由于该种机型有较好的离心性能，又采用微电脑芯片进行中央控制，自动化程度较高，有一定的故障自诊断功能，目前广泛应用于生物制药行业的梯度离心工艺。超速离心机多数是20世纪90年代的产品，使用时间较长，设备故障率逐年递增，特别是其速度控制系统较为复杂，故障点较多，80%以上的离心机故障发生在速度控制系统。

离心机操作步骤 1.接通电源,打开离心机盖。 2.按要求装配好离心管。 3.按要求安装离心转头。 4.关上离心机盖。 5.输入离心数据,编离心程序。 6.抽真空,并开始...2.离心管的选用 1.玻璃离心管绝对不能在高、超速离心机上使用。 2.PA管:化学性能稳定...3.使用注意事项 1、对称平衡:当离心转速达1～5万(转/分)时,如对称管相差1克,转头半径...4.保养注意事项 1.清洁离心机腔体和转头,并擦干腔内冷凝水。 2.使用完后要打开门,直至腔...

斯维德伯格(1884—1971)，瑞典物理学家。他发明了超速离心机，并用于高分散胶体物质的研究，因此获得1926年诺贝尔化学奖。斯维德伯格出生在瑞典的一座美丽的港口城市耶夫勒。父亲是这个港口城市造纸厂的经理，家里祖孙几代都在这里开办造纸厂。

当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。像红血球大小的颗粒，直径为数微米，就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。此外，物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的绝对的。扩散与物质的质量成反比，颗粒越小扩散越严重。而沉降是相对的，有条件的，要受到外力才能运动。沉降与物体重量成正比，颗粒越大沉降越快。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等，它们在溶液中成胶体或半胶体状态，仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的。因为颗粒越小沉降越慢，而扩散现象则越严重。所以需要利用离心机产生强大的离心力，才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。离心力(F)的大小取决于离心转头的角速度(ω，r/min)和物质颗粒距离心轴的距离(r，cm)。它们的关系是：F=ω2R 为方便起见，F常用相对离心力也就是地心引力的倍数表示。即把F值除以重力加速度g (约等于9.8m/s2.)得到离心力是重力的多少倍，称作多少个g。例如离心机转头平均半径是6cm，当转速是60 000r/min时，离心力是240 000×g，表示此时作用在被离心物质上的离心力是日常地心引力的24万倍。因此，转速r/min和离心力g值之间并不是成正比关系，还和半径有关。同样的转速，半径大一倍，离心力(g值)也大一倍。转速(r/min)和离心力(g值)之间的关系可用下式换算：RCF=F离心力/F重力=mω2r/mg= ω2r/g = (2πr/r×rpm)2r/g（注意单位统一换算为标准单位）式中：r为半径(cm)，g为离心力(g值)

一般来说超出设备的临界转速6~7倍即可称之为超速离心机。临界转速与设备的形状、材料、重量等有关，故不同的离心机临界转速不同。但相同的特点有都采用挠性轴，并有浮动阻尼器。

1、 低速离心机，一般指最高转速小于8000r/min即8000转每分钟；2、常速离心机，一般指最高转速小于15000r/min即15000转每分钟；3、高速离心机，一般指最高转速大于15000转但小于30000转每分钟的，但也有一种界定认为高速离心机指最高转速大于8000转但小于30000转每分钟的；4、超高速离心机一般指最高转速大于30000转每分钟，对于某些特殊的离心机，其最高转速甚至可以达到80000转，但这种超高速离心机一般都是体积相对较大的落地式的，应用于一些特殊行业的，通常普通实验室是用不到的。扩展资料：离心原理当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时，由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关，并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。象红血球大小的颗粒，直径为数微米，就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。此外，物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的绝对的。扩散与物质的质量成反比，颗粒越小扩散越严重。而沉降是相对的，有条件的，要受到外力才能运动。沉降与物体重量成正比，颗粒越大沉降越快。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等，它们在溶液中成胶体或半胶体状态，仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的。因为颗粒越小沉降越慢，而扩散现象则越严重。所以需要利用离心机产生强大的离心力，才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力，加快液体中颗粒的沉降速度，把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。

这种方法是选择不同转速的离心，分别分离各个不同组分。例如先用低速沉降大颗粒和上清液，在高速离心上清沉降中等颗粒，最后超速离心上清沉降小颗粒。采用逐级提高离心力分离上情液的方法，把不同大小的颗粒分开。这种方法比较简单，方便。分离的组份沉到管底，因此可以迅速浓缩所要的组份，减少体积。但回收率和纯度是有矛盾的，要提高回收率，势必提高转速或延长离心时间，这样大小相近的颗粒也会沉到管底。因此该法多用于粗提纯或初步浓缩样品。 本法是将样品放在一个连续的密度梯度液体上，通过离心，大颗粒沉降快，小颗粒沉降慢。经过一段时间，相同的颗粒就在同一深度形成一条带子，因此把各种组份分开来。它适用于分离密度相同、而大小不同的物质，如不同的蛋白质组份密度都差不多，但分子量不一样，用本法很容易将其分开。但对密度不同、大小类似的物质则不易分离。蔗糖梯度是一种常用的介质。用不同浓度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度，用于梯度离心。再分别进行收集处于不同区带里的各个组份。 这是静力学的方法。在离心管中形成一个液体梯度，在离心时各组份以不同的速度下沉，但最终停留在与自己相同的密度中，形成一条狭窄的平衡带，并保持相对的稳定。为了使样品所有组份都能达到它们的平衡位置，需要长时间离心。这种方法适用于分离大小相似但密度不同的物质，如核酸的分离。氯化铯梯度是常用于平衡离心的介质，分辨率很高，可区别密度相差0.05的组分，但离心时间需十几到几十小时，且价格很贵。已有一种商品名叫Percoll的聚蔗糖溶液可以代替氯化铯梯度。该介质能迅速形成梯度，使离心时间大大缩短到1-2h而仍有很好的分离效果。并且有配套的标记珠（Density marker beads）可以测定样品的密度。

1923年，斯维德伯格受聘为美国威斯康星州大学的教授，专门研究胶体化学。他发明了超速离心机，对研究蛋白质化学起了很大的促进作用。每分钟旋转8万转以上的超速离心机，可以得到比在地球表面上的重力加速度大几十万倍的力场。利用这种离心机，人们可以很容易测定蛋白质的分子量。

国际转速计量单位是n/s，即 转每秒 ，而中国法定计量单位中转速单位是r/min 即 转每分。 离心机的转速单位按分钟还是秒，具体要看是遵循国际计量单位还是我国法定计量单位，遵循国际计量单位就是按 秒，遵循我国法定计量单位就是按 分。离心机是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。 目前市场应用的离心机转速如下：三足式离心机（转速600-1200r/min）平板式离心机（转速600-1200r/min）台式离心机（多用于实验室转速0-22000r/min）卧式离心机（转速870-6000r/min）碟式分离机（转速4000-10000r/min）管式高速分离机（转速30000r/min 国内生产销售的离心机目前转速最高的有30000r/min，销售的进口离心机转速最高的有150000rmp，如美国Beckman Optima MAX-XP台式超速离心机的最高转速是150000rpm，日立的CS-GXII 系列微量超速离心机最高转速可达150000rpm。

离心机使用注意事项：1、离心机应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配并要求有良好的接地线。2、开机前应检查机腔有无异物掉入。3、样品应预先平衡使用离心机微量离心时，离心套管与样品应同时平衡。4、挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏以免侵蚀机腔或造成事故。5、每次操作完毕，应做好使用情况记录，应定期对机器各项性能进行检修。6、离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。7、定期清洁机腔。8、使用离心机时遵守左右手分开原则，只以右手操作仪器。9、使用冷冻离心机时，除注意以上各项外，还应注意擦拭机腔的动作要轻柔，以免损坏机腔内温度敏感器。离心机的使用步骤：1、离心前用天平保证离心管的绝对平衡。2、打开电源歼关，离心机自检后，开启盖门。3、选择所需转头，用扳手安装转头，松紧适当。

1、按照转速分类，离心机一般可以分为以下几种：普通离心机(低速)min;高速离心机8000 ～30000r/rain;超速离心机30000 ～80000r/min;超高速离心机>80000r/min。 2、通常情况下，医心机属低速离心机，一般不超过5000r/min，用水平转子就可以了，并且可以满足大容量的需求。学校，单位等实验室用离心机，一般需要高速离心机(大于5000r/min)，用小容量的角转子。 3、实验室在选择离心机时，可以根据实的和实验需要，选择不同容量、不同转速、不同温度控制的离心机。

VLDL。脂蛋白电泳将脂蛋白分为位于原点不移动的乳糜微粒脂蛋白区带，相当于超速离心法中的VLDL。超速离心机最初于1940年由瑞典物理化学家斯维德伯格设计制造，经过不断改进，已成为现代生物化学和分子生物学常用的技术之一。

按照转速分类，离心机一般可以分为以下几种： 普通离心机(低速)<8000r/min; 高速离心机8000 ～30000r/rain; 超速离心机30000 ～80000r/min; 超高速离心机>80000r/min。 通常情况下，医用离心机属低速离心机，转速一般不超过5000r/min，用水平转子就可以了，并且可以满足大容量的需求。学校，科研单位等实验室用离心机，一般需要高速离心机(大于5000r/min)，用小容量的角转子。 实验室在选择离心机时，可以根据实验目的和实验需要，选择不同容量、不同转速、不同温度控制的离心机。

低速离心机。按转速分，离心机可分为低速离心机、高速离心机、超速离心机等。一般来说，转速小于10000rpm/min的称为低速离心机。10000rpm/min一30000rpm/min的称为高速离心机，大于30000rpm/min的称为超高速离心机，所以是低俗离心机。

RPM =rotation per minute 每分钟转数. 高速离心机：10000-30000rpm. 低速离心机：10000rpm以下. 超速离心机：30000-150000rpm.

　　8000以上。　　按照转速分类，离心机一般可以分为以下几种：　　普通离心机(低速)<8000r/min;　　高速离心机8000 ～30000r/rain;　　超速离心机30000 ～80000r/min;　　超高速离心机>80000r/min。　　通常情况下，医用离心机属低速离心机，转速一般不超过5000r/min，用水平转子就可以了，并且可以满足大容量的需求。学校，科研单位等实验室用离心机，一般需要高速离心机(大于5000r/min)，用小容量的角转子。　　实验室在选择离心机时，可以根据实验目的和实验需要，选择不同容量、不同转速、不同温度控制的离心机。

国际转速计量单位是n/s，即 转每秒 ，而中国法定计量单位中转速单位是r/min 即 转每分。 离心机的转速单位按分钟还是秒，具体要看是遵循国际计量单位还是我国法定计量单位，遵循国际计量单位就是按 秒，遵循我国法定计量单位就是按 分。离心机是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。 目前市场应用的离心机转速如下：三足式离心机（转速600-1200r/min）平板式离心机（转速600-1200r/min）台式离心机（多用于实验室转速0-22000r/min）卧式离心机（转速870-6000r/min）碟式分离机（转速4000-10000r/min）管式高速分离机（转速30000r/min 国内生产销售的离心机目前转速最高的有30000r/min，销售的进口离心机转速最高的有150000rmp，如美国Beckman Optima MAX-XP台式超速离心机的最高转速是150000rpm，日立的CS-GXII 系列微量超速离心机最高转速可达150000rpm。国内目前最快的离心机转速数据处于保密中，无从得知（浓缩铀离心机等）。

　　8000以上。　　按照转速分类，离心机一般可以分为以下几种：　　普通离心机(低速)<8000r/min;　　高速离心机8000～30000r/rain;　　超速离心机30000～80000r/min;　　超高速离心机>80000r/min。　　通常情况下，医用离心机属低速离心机，转速一般不超过5000r/min，用水平转子就可以了，并且可以满足大容量的需求。学校，科研单位等实验室用离心机，一般需要高速离心机(大于5000r/min)，用小容量的角转子。　　实验室在选择离心机时，可以根据实验目的和实验需要，选择不同容量、不同转速、不同温度控制的离心机。

一、要根据分离目标体和分离精度要求结合你的分离设备来确定的，一般分离血清常见的就是小型的试验型离心机分离血清样本。1、普通生化检查分离血清，这个是用低速离心机转速在3000—3500转。一般在3分钟之内就可以了，分析分离效果，可以酌情调节转速和时间。2、试验型离心机分离血清生产疫苗，这个有着严格的工艺规范，只能照做，不能随意更改参数。二、取血后，静置1-2小时，置于离心机内以3000P/m离心15分钟，用移吸管吸出分离的血清（上层乳黄色的上清液），置于4℃冰箱保存。测定时移至室温下30分钟解冻。剩下的应该是血浆了。淋巴细胞不可能从剩下的血浆分离了。扩展资料：离心机操作方法：1、使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围，每个离心机不同的转头有各自的允许差值，转头中绝对不能装载单数的管子，当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。2、若要在低于室温的温度下离心时，转头在使用前应放置在冰箱或置于离心机的转头室内预冷。3、离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。4、每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。每一转头都要有一份使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用限时，则须按规定降速使用。5、装载溶液时，要根据各种离心机的具体操作说明进行，根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀，而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。参考资料来源：百度百科——离心机

Sigma超速离心机是由Sigma公司制造，上世纪80年代在中国市场推出后，起初一般作为实验室离心机使用，由于该种机型有较好的离心性能，又采用微电脑芯片进行中央控制，自动化程度较高，有一定的故障自诊断功能，目前广泛应用于生物制药行业的梯度离心工艺。超速离心机多数是20世纪90年代的产品，使用时间较长，设备故障率逐年递增，特别是其速度控制系统较为复杂，故障点较多，80%以上的离心机故障发生在速度控制系统。超速离心机的速度控制系统由速度检测电路、超速保护电路、速度控制电路以及电机驱动电路组成，系统将速度检测电路所获得的速度信号，通过放大和修饰电路转换成较为标准的方波信号，速度信号进入速度控制电路，根据微机主控板给出的加减速控制信号，进行加速、减速和保持速度的控制，速度控制信号输送到电机驱动电路，通过对电机驱动电路的控制，达到对驱动电机转速的控制，从而控制离心转子的速度，离心转子的速度又通过速度检测电路形成对速度控制系统的反馈信号

在超速离心机中，应用强大的离心力分离、制备、分析物质的方法。

离心机是借离心力分离液相非均一体系的设备。主要目的是达到液-液或固-液的分离。离心分离是液-液分离，离心过滤、离心沉淀是固-液分离。是利用旋转运动的离心力，以及物质的沉降系数或浮力密度的差别进行分离、浓缩、提纯的方法。(一)根据转速区分1.普通(低速)离心机：一般最大转速在10000 rpm以下，最大相对离心力小于10000×g，主要是固液沉降分离，转子有角式和外摆式，通常不带冷冻系统，于室温下操作。2.高速离心机：一般最大转速为10000～30000 rpm，最大相对离心力为90000×g左右，也是固液沉降分离，转头配有各种角式转头、荡平式转头、区带转头、垂直转头和大容量连续流动式转头、一般都有制冷系统和真空系统，离心室的温度可以调节和维持在0～4℃，通常主要用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等的分离与纯化工作，但不能有效地沉降病毒、小细胞器(如核蛋白体)或单个分子。3.超速离心机：转速可达50000～80000 rpm，相对离心力最大可达510000×g左右，分离的形式为差速沉降分离和密度梯度区带分离。可以分离细胞的亚细胞器结构，也可以分离病毒、核酸、蛋白质和多糖等生物大分子。(二)根据用途区分离心机的种类工业用途低速离心机(N<10000rpm)高速离心机(N=10000～30 000rpm)超速离心机(N>30000rpm)实验用途制备用途普通离心机水平式离心机斜角式离心机冰冻离心机大容量冰冻离心机高速冰冻离心机超速冰冻离心机分析用途：分析超速离心机(三) 其他根据离心形式　可分为过滤、沉降、分离；根据驱动方式可分为：手摇式、气动式、油涡轮式、磁悬式、电动式等；根据使用温度可分为：冷冻和无冷冻；根据结构特点可分为：角式和外摆转子、分析型转子和区带转子；以旋转轴位置分为：立式、水平式、倾斜式；根据工作性质可分为：通用型、专用型、小型和大型。

F=mω2rω：旋转角速度(弧度／秒) r:旋转体离旋转轴的距离(cm) m：颗粒质量相对离心力 Relative centrifugal force (RCF)RCF 就是实际离心力转化为重力加速度的倍数g为重力加速度(9.80665m/s2)同为转于旋转一周等于2π弧度，因此转子的角速度以每分钟旋转的次数(每分钟转数n或r/min)表示： 一般情况下，低速离心时常以r／min来表示。3、分离因素计算公式：RCF=F离心力／F重力= mωu02c62r/mg= ωu02c62r/g= （2*π*r/r*rpm） u02c62*r/g 注：rpm应折换成 转/秒例如：直径1000mm，转速1000转/分的离心机，分离因素为：RCF(1000)=(2*3.1415*16.667)^2*0.5/9.8=104.72^2*0.5/9.8=560

根据不同细胞器的密度不同。http://www.chem17.com/article/show/16081.html细胞离心技术离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段。一般认为，转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min，离心力超过500Kg。 （一）、差速离心（differential centrifugation） 在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器。 在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为：核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。 由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠，而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中，一般重复2～3次效果会好一些。 差速离心只用于分离大小悬殊的细胞，更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。 速度逐渐提高，样品按大小先后沉淀 （二）、密度梯度离心（density gradient centrifugation） 用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯，蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求：1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；2）PH中性或易调为中性；3）浓度大时渗透压不大；4）对细胞无毒。 A等速度沉降，B等密度沉降 1、速度沉降 速度沉降（velocity sedimentation）主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。这种降方法所采用的介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。 生物颗粒（细胞或细器）在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。 2、等密度沉降 等密度沉降（isopycnic sedimentation）适用于分离密度不等的颗粒。 细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和是够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的细胞或细胞器分离。 等密度沉降通常在较高密度的介质中进行。介质的最高密度应大于被分离组分的最大密度，而且介质的梯度要求较高的陡度，不能太平缓。再者，这种方法所需要的力场通常比速率沉降法大10~100倍，故往往需要高速或超速离心，离心时间也较长。大的离心力、长的离心时间都对细胞不利。大细胞比小细胞更易受高离心力的损伤，而且停留在等密度介质中的细胞比处在移动中的细胞受到更大的损伤。因此，这种方法适于分离细胞器，而不太适于分离和纯化细胞。http://www.bioon.com/biology/cellular/167879.shtml

高校科研用离心机强烈推荐贝克曼库尔特这个牌子的。引领全球离心技术70多年的贝克曼库尔特公司是一家集离心机研发设计、生产、销售、服务于一体的公司。通过提供高效可靠的离心分离技术、独特的转头设计、创新的离心管和配件以及先进的离心软件，贝克曼库尔特为您精心准备了多种不同配置的顶尖离心机产品。各种超速离心机、台式离心机和高速离心机等，可满足您对离心容量、速度以及温度的不同需求。贝克曼库尔特生命科学事业部一直致力于改善全世界人类的健康。在过去的一百年里，“贝克曼”、“库尔特”品牌的各种仪器已被世界各地医务人员和科研工作者所普遍接受和认可。他们为广大科研、商业实验室的生命科学研究工作者们提供优异的仪器系统、试剂和全球性的技术服务与支持，不断促进生物学科研的新技术发展。他们的技术支持和售后服务网络遍及全球，营销达至130多个国家。公司主要产品包括流式细胞仪、离心机、实验室自动化系统、细胞与颗粒计数器以及粒度分析仪等，其产品主要用于前沿的重要研究领域，包括基因组学、蛋白质组学、细胞组学以及生物制药等。

离心机分类离心机的种类很多，我们习惯从几个方面分类：按照转速的大小可分为：低速离心机，高速离心机和超高速离心机；按照对温度的要求可分为：普通离心机和冷冻离心机；按照离心机体积大小可分为：落地式离心机，台式离心机，掌上离心机等。1.转速：离心机根据最大转速的不同分为低速离心机（<10,000rpm/min），高速离心机（10,000rpm/min---30,000rpm/min）2. 容量：每次需要离心多少个样品管，每个样品管需要多少容量，这些因素决定一个离心机的总容量，简单的来说离心机的总容量=每个离心管的容量×离心机管个数，总容量和工作量的大小是相匹配的。3. 转子：离心机的转子主要分为两种，水平转子：运转时吊篮处于水平状态，与转轴成直角，样品将沉淀集中于离心管的底部；角转子：离心容器与转轴成一固定角度，样品将沉淀集中于离心管 底部及靠近底部的侧壁。如果希望分离的样品集中于离心管的底部就选择水平转子，如果希望样品集中于离心管的底部和靠近底部的侧壁上就选择角转子。还有一些特殊实验或特殊样本需要特殊的转子如：大容量吊篮（多应用于血站），酶标板转子，载玻片转子，PCR转子，试管架转子和毛细管转子等。转子都有固定的规格，它是和离心机的容量结合起来的，如12*5ml的角转子，既决定了转子的类型也决定了离心机的容量，所以转子的选择非常重要。4. 控制系统：高档的离心机都采用了微电脑控制系统，这些控制系统不但能确保离心机安全的运行还能自动完成工作任务。现在很多离心机都有较好的人性化的控制系统，比如：转子识别功能，安全锁功能，故障提示功能，加速和减速曲线等。离心机的主要部件是电机，电机分为带碳刷电机和无碳刷电机。前者已经淘汰，现在的离心机大多数都是无碳刷电机，有的电机还带有刹车功能。冷冻离心机在制冷方面也有区别，现在环保的技术当然是无氟制冷。除此之外还要考虑噪音问题，尽量选择噪音较小的离心机，这样能保持舒适的实验环境。在配件方面也要谨慎，有些实验要用特殊的离心管（离心有毒样品或者需要超高速离心的样品），这样的离心管必须有相应的管套，才能更安全。还有一些特殊的样品容器（不规则样品瓶，血袋等），这些细节和配件都要在选择离心机的时候考虑周详，否则就不能进行正常的工作。

质粒DNA的超速离心分离中科院上海生物化学研究所，上海 200031 余兴明 一、简述 近代质粒DNA分离纯化以从大肠杆菌中分离为代表，鉴于大局杆菌（E.coli）在分子生物学研究中的重要地位，从E.coli中分离纯化质控DNA〈Piasmid DNA〉成为近年来超离心技术中一个重要课题。而质粒DNA的快速分离纯化又对超离心设备（超速离心机、转头和附属设备）提出了更高要求。 E.coli是典型的原核细胞生物，由于原核细胞缺乏其核细胞所具有的那种由单位膜组成的可把多种功能组分分隔为专一化的和局部独立区域的内膜系统，因而没有其核细胞所包含的细胞器（核、内质网、高尔基体、线拉体、溶酶体等等）。电镜显微照片显示E.coli有两个可以区别的内部区域一一细胞质和核质，在它们外面围着一层较薄的细胞质膜和很厚的细胞壁，在细胞壁外部附着一些一端游离的鞭毛。质粒DNA位于核区，以细丝状存在，这种细丝状物在多种情况下是极长的环状DNA的一些片断所折叠起来的聚密体。 针对E.coli的显微结构待点，在进行超离心分离纯化质粒DNA之前的预处理顺序是： E.coli→用溶菌酶去细胞壁→用表面活性剂如SDS、Trit X-100等EE细胞膜→用乙酸锅使DNA、RNA及蛋白质大部分沉淀(90%以上)。 沉淀物可以在加入TE缓冲液(10m-MTris-HCL lmMEDTA,pH8.0)后分子筛上住去蛋白,去RNA;也可以用超速离心法去蛋白居,去RNA，去级状DNA或DNA断片。本文将综述后一种方法在近年来的新进展.二、质粒DNA超速离心分离的最新进展 1、 传统的分离方法：数年前，由于受设备条件限制，质粒DNA的分离一般用CsCl平衡等密度离心法，自形成梯度。以10~12ml单管容量为例，用甩平转头分离，36.000rpm×60小时，用角式转头分离45,OOOrpm×36小时，前者包括加减速在内共用去1.3亿转驱动部寿命，后者也要用去1亿转驱动部寿命，这对当时超速离心机总寿命为100~200亿转来看，无疑每次实验费用过高，加上CsCl用量多、价格贵等因素，使这类分离纯化工作成为非常昂贵的实验。 2、新进展：（1）超速垂直管转头的离心分离（钦合金或碳纤维制造的）：从1975年垂直管转头向世后，近年来各主要离心机生产商开发的垂直管转头，单管容量0.2ml到4Oml，最高转速从50,000rpm到120,000rpm,RCFmax可达700,OOOXg，90年代开发的新机型和转头己能够使质粒DNA垂直管离心分离实验做起来得心应手。使用垂直管转头分离纯化质粒DNA的待点是：.·由于沉降距离最短，离心时间最短，高效、低耗：·离心管纵向剖面积远大子横向截面积，离心沉降时纯祥品区带的容量较大，在没有沉淀附着或沉淀附着很紧很密的条件下分离纯度高，样品加载量也较大；流体静压力,不会因静压过高而使生物体颗粒受到损伤.离心管内样品颗粒受到的流体静压为：ω：角速度r：样品颗粒所在位置与旋转中心距离（以厘米计）r1:转头最小离心半径即rmin（厘米），在使用gmax离心时是液面和旋转中心的距离。Pa:起始密度（对预形成梯度时为最小密度,对自形成梯度离心,为离心结束时最小密度）。a：梯皮斜率在超速离心中，P值相当大，一般认为P≤150Okg/cm2,才不致损伤生物体颗粒，垂直管转头（r-r1）很小,相对说P也相当小（102数量级），而对甩平转头，在离心前往往要进行P值校核，过大时，应降低转速。在用垂直管进行质粒DNA分离纯化时，RNA沉淀附在离心管壁部，在减速、梯度方向转换时,质粒DNA区带从沉淀区"擦"过，使DNA中混入少量RNA而影响纯度。在极高转速离心时（如大于80,OOOrpm），由于RNA附着壁部较紧,这种影响较小。 (2)近垂直管转头离心分离：为了消除垂直管转头用于质粒DNA离心在壁部形成的RNA沉淀对已形成的DNA区带的污染，同时也为了改进一般斜角式转头（倾角25·~35·）由于沉降距离较长，因而分离时间也较长的缺点，近几年开发了多种近垂直管转头（即Near VerticalTube Rot时,简称NVT转头或Neo Angle Rotor,小假角转头,简称NT).它们的离心管纵剖面中心轴线与离心机驱动轴线之间夹角在7.5·~10·之间,转速从65,000rpm到120,OOOrpm，RCFmax可达646,000×g单管容量从2ml至13.5ml。NVT（或NT）转头的开发主要是为质粒DNA分离而设计，当然它也适用于线粒体DNA、染色体DNA、RNA及血清脂蛋白的分离·纯化。使用NVT（NT）转头分离纯化质控DNA的特点是:离心所需时间比垂直管转头稍长（增加30%~40%），但比一般斜角式转头短（为同类斜角式转头分离时间的60%~70%）。 虽然因为倾角小而使RNA版离心管外壁下滑分力较小，但在加入表面活性剂(如0.1%~0.001%Trimn X-100）后，RNA沉淀可以较快地滑向离心管底部（即在自形成梯度时,RNA已到达底部），在梯度转换过程中不影响质位DNA纯度；流体静压小，极高速运转时也不会损伤生物体颗粒；离心管纵剖面比一般角式及甩平转头部大，分离纯度高，样品加入量较大。 （3）不连续阶梯梯度分离:质校DNA分离纯化传统方法是采用金管CsCl自形成梯度平衡等密度离心法，离心开始时金管CsCl密度均一，样品均匀分布其中。CsCl自形成梯度的离心时间可以用下式计算：式中N：实际转速(rpm)P:样品（如质粒DNA）在CsCl的浮动密度r:从旋转中心到纯样品带中心的距离（厘米），作为初步结算，对质粒DNA离心，r位置可定在离心管中部，r平均刊点再偏外-10%。（rmax-rmin）。F:取决于梯度材料及溶液初始密度的常系数〈表1〉。S20.w：样品（质粒DNA）在20℃水中沉降系数，可参照有关文献决定。[注]表中TCA为三氯乙酸,TFA为三氟乙酸 用以上公式算出的离心时间和实际离心结果非常接近。从公式可以看出T反比子（N4、r2），显然在CsCi不结晶析出的前提下提高（N4、r2）将会减少离心时间,而增加转速的效果特别明显。但是对于某些较低转速转头（如 65,000rpm以下）CsCl自形成梯度所需时间过长（10小时）以上，因此质粒DNA纯样品区带形成的时间也比较长. 作为对全管初始等密度条件的改进，近几年发展了阶梯形不连续CsCl梯度的平衡等密度离心，即离心管初始梯度分二部分：下部：高密度区（p=1.80-1.81g/cm3），占总容量1/3。上部：低密度区（p=1.46-1.48g/cm），占总容量2/3，实验证明，二阶不连续CsCl梯度可比全管等密度离心所需时间要短得多（以12ml垂直管转头为例，质粒DNA，CsCl梯度55,000rPm，20℃；不连续二阶梯度离心为5.5小时,全管等密度离心为8小时）。二阶不连续梯度离心，样品加在靠离心管底部的高密度区，无论对何种转头，其r很大；而且只存在样品的上浮而不存在低密度区（低离心力口速度区）样品的沉降；在接近DNA浮动 密度区初始密度差较大,自形成梯度，时间较短；由于以上原因缩短了离心时间。（4）超高速多级（转速）分离：很明显，根据T公式提高转速将会加速CsCl梯度的形成，离心时间也会相应缩短。但是，在某温度下的高转速，长时间离心分离对于较高密度的CsCl来说很可能产生局部结晶析出，而局部结品析出不仅会影响梯度，而且会因析出的固态CsCl因损伤离心管壁而造成离心失败或事故.为此,对于质粒DNA离心分离实验，由于新型超速机的可编程序运转的特点。可以从极高转速逐渐向稍低转速推移，每次实验分成很多转速挡，既提高了效率，又保证了实验成功和安全。当然，这类实验是要经过多次摸索，才能形成常用的离心程序，美国Beckman公司和日本Hitact1i ko ki株式会社都在各自的先进的超速机上做了大量实验，并向用户推荐可靠、高效的离心理序[2、31。三、典型的质粒DXA超速离心分离举例1.传统分离举例： 例（1）单管容量为12rnl，最高转速在50,000rpm以下的角式转头，12PA密封管，各厂新型超速机。样品+TE液（配成pH8.0），EB加入量0.2mg/ural，加入CsCl配成全管p=1.57g/ml45,000rpm×36小时，20℃，慢减速或55,000rprn×16小时+40,000rpm×1小时，20oC慢减速-分离结果:管中部稍下形成纯质粒DNA带，中部稍上出现DNA片断带，近底部为RNA沉淀，上浮物为蛋白质。 特点：分离结果较好，但纯样品带较宽，分离时间很长，用去近1亿转驱动部寿命。 例（2）单管容量为5ml，最高转速为65,000rpm的铁吊椅甩平转头，5PA管，样品配置同例（1） 特点：同例（5） （用去0.2亿转驱动部寿命）。36,000rpm×55小时,20℃,或32,000rpm×70小时,20·c。·分离结果及特点：分离结果很理想，质粒DNA带很窄，RNA沉降于离心管球底。但离心时间过长，成本较高（用去1.1亿~1.3亿转驱动部寿命）。2.垂直管转头离心分离： 例（3）日本日立cp100α主机，P100VT转头（700,000×g,8×5ml），5PA密封管，样品及梯度配置同例(1)100,000rpm×1小时50分,20℃,慢减速(7档)。·特点:离心结果与例(1)相似,由于转速极高，壁部RNA沉淀很紧，在降速过程中对DNA污染很少。离心时间很短，高效，低成本(用去0.12亿转驱动部寿命)。例(4)最高转速为50,000rpm的钦垂直管转头，容量8×40ml，40PA密封管，样品配置如例〈1〉50,000rpm×24小时，20℃，慢减速。特点：大容量分离，RNA沉淀对DNA带稍有污染。3.近垂直管转头分离 例（5）Beclunar1NVT90转头XL-90主机，8×5时，5PA密封管，转头最高转速90,OOOrpm，646,000×g。 样品+TE液（配成pH8.0），E·B加入量为0.2mg/mh，TritmX-100加入量为0.01%，加入Cscl配成p=1.55g/ml。78,000rpm×4小时，20℃，慢减速。 特点：由于Triton X-100的作用，RNA沉淀加速滑向离心管底，转头减速过程中对DNA没有污染，分离结果很理想（用去0.2亿转驱动部寿命）。 例（6）日本日立CS12OEX或美Beckman TLX微量超速机，最高转速为120,OOOrpm的NVT（NT）转头，8×2时，2PA密封管，样品及梯度液配置基本同例（5），但CsCL配成p=1.55z/ml,120,000rprnX3小时，20℃，慢减速。4.不连续阶梯梯度分离： 例（7）日本日立SRP83VT转头，80,000rprm，549,000g，8×5时，5PA密封管（日立CPα，β系列机或SC夏系列机），梯度液配置：先配置TE液+Cscl，p=1.47g/时，共3.5ml，先注入5PA密封管。再配置TE液+样品+CsCl配成p=1.81g/mh E.B.0.2mg/ml，共1.5ml用注射器伸入管底缓缓注入使原先的p=1.47液上浮。83,ooorpm×1小时，20℃，慢加速，慢减速，结果同例(3)。 特点：由于使用了二阶不连续梯度,CsCl自形成梯度时间缩短。超高转速，RNA沉淀很紧，对DNA带污染很小，高效，低成本（只用去0.05亿转驱动部寿命）。缺点是样品加入量稍小。 例〈8〉日本日立RP55VF：转头，55,000rpm，293,000×g，12×5时，样品及梯皮液配置同例（7） 55,000rpm×4.5小时，20·c，慢加、减速。结果与例〈7〉相似。5.超高速多级（转速）分离： 例（9）：BeckmanXL-90超速机，NVT-90转头90,000rpm，645,000xg，8×5ml，5.1PA密封管，样品及梯度液配置同例（5）。 多级分离：90,000rpm×l.5小时+87,000rpm×0.25小时+83,000rpm×0.25小时+81,000rpm×0.50小时+80,000rpm×0.50小时，20℃，慢减速。（以上实验亦可在日本目立CP100α或90α主机上做用PlOOVT转头，结果相同）。 特点：结果同例(5)，但时间降为3小时（0.16亿转） 例（10）Hitact1i微量超速CS-120EX或CS-10OEX微量超速机，SlOOAT5角式转头，100,OOOrpm，550,000×g，8×5ml，样品及梯度液配置与例(3)基本同，但样品+TE液配成p=1.55g/ER1。100,ooorpm×4.5小时+98,ooorpm×15分+96.ookpm×30分+94,ooorpm×30分+90,OOOrpm×25分+85.OOOrpmX30分（共7小时），20℃，慢减速。 特点：使用角式转头，微量超速机，在离心力较小的条件下（与大型超速机相比），离心时间较短，RNA沉向管底，分离结果很理想。四、质粒DNA超速离心分离注意事项 1.防止污染 防止脱氢酶污染：脱氢酶能使DNA降解或变性，而它又无处不在（皮肤上，没清洗并没消毒的器具表面……），所以，在质粒DNA分离实验的每一个环节都要注意这一点．有效的办法是器具（离心管、盖、注射器、移液器、盛器等等）的消毒（蒸气消毒或0.1%焦破酸二乙商消毒）。虽然，我们可以加DFP（二异丙基确酸氟）或PMSF（苯用基确院氛）来抑制脱氢酶的降解使用,但主要手段还是清洗和消毒。为防止皮肤上核糖体污染，操作时应戴上手术用手套。 2.防止重金属盐中存在的重金属离子和DNA结合成复合物：CsCl为电离介质，在离心前CsCl应过柱以消除Cs离子，对接触样品的器皿也要清洗，并用去离子水冲洗。 3.样品的加载量 祥品加入量与样品浓度有关，为了提高分辨率，样品加入量应加以控制，合适的加入量应以前人实验作参考。自行试验时，每毫升梯度液样品量约为10μZ~20μg。 4.对于角式、垂直、近垂直转头的自形成梯度平衡等密度分离，可用。0~100Orpm快加速及1,000rprn~0慢减速，阶梯梯度则要求慢加速，慢减速，近代起这机都提供了很好的范例，供用户选择加、减速速率时参考。 5.转头在离心开始时温度应和离心运转时工作温度基本一致（土5·C），转头预冷温度过低（10oC以下）在极高转速，短时间离心时，可能因来不及升温而出现CsCl析出，使实验失败或发生事故。 6.合适的取样方法：质粒DNA超速离心分离加样较简易，离心后取样方法和操作水平将决定回收率和样品纯度。首先，取样环境应和离心工作温度相近（士5℃）；取样时实验台上应无振动源；根据实验室条件相应选择横向穿刺、底部空孔、离心管切割或用梯度仪收集。但无论哪一种方法部必须小心行事。 7.合适的pH值，核酸类佯品在实验全过程中都应保持在pH8.0的TE液中，pH值过高过低也会使DNA变性。 8.离心管及加液量：由于近代质位DNA的超速离心分离使用了非常高的转速，对7可心管材质要求也很高，一般做这类实验的离心管只用一次。最好是用密封管，而且一段以选择PA管为好。离心管存放朔不超过2~3年，使用密封管或有盖薄壁管样品要加满。使用甩平转头液面EE管口2~3毫米以防止弯月面溢液或管口翻卷。

超速离心机为什么要买日立的？Beckman Coulter是最好的。全球85%是贝克曼的，日本本土的贝壳曼机器比日立的还多的多。日本人自己都不买，我们还买？更何况技术上贝克曼毋庸置疑的鼻祖。CP70WE很便宜，看你配的转头，一般配置2个转头的话，不超过4.5万美金。这个型号很少见到，所以我也不能给你很确定的数据。

不能超过离心管体积的三分之二。这样做的目的一是为防止液体溢出，二是为了降低离心力从而保护离心机。离心机转子高速旋转时，当悬浮颗粒密度大于周围介质密度时，颗粒离开轴心方向移动，发生沉降；如果颗粒密度低于周围介质的密度时，则颗粒朝向轴心方向移动而发生漂浮。常用的离心机有多种类型，一般低速离心机的最高转速不超过6000rpm，高速离心机在25000rpm以下，超速离心机的最高速度达30000rpm以上。扩展资料实现方法1、穿刺法这是方便而又理想的部分收集方法。用一根金属空心针从离心管底刺人管内，不同区带内的组分自下而上地先后从针管内分别流出，然后用部分收集器分别收集。2、取代法在离心管口加一个带有收集导管的塞子，塞子上同时装有一根输液导管插入离心管的管底，从输液管中注入高密度的离心介质．其密度高于离心管中所形成的最大密度。当取代液不断注入时离心管中的溶液逐渐上升，并不断从收集导管中流出，然后用部分收集器分别收集。参考资料来源：百度百科-离心技术

分析超速离心机主要部分是一台制备离心机，它的光学系统可以在转子旋转时测量分子的分布。目前的仪器提供两种光学检测方式：吸光度检测（190－800nm）具有较高的灵敏度和专一性；Rayleigh干涉光学系统的折射检测，能够检测大多数的复合物，甚至包括缺乏明显吸光度特征的复合物（例如碳水化合物）。后一种方法除了能够迅速获取数据之外，还有较好的线性和动力学范围。

离心机是靠不同物质的沉降系数的不同，在一定的离心力的作用下，将不同的物质分离出来。台式低速离心机，一般可为3000-4000转，一般临床用于离心血液，科研用户用来离心培养细胞。高速离心机转速一般在12000-14000转，用来离心DNA和RNA。超速离心机转速一般在30000转以上，用来离心病毒等。

离心机温度制冷当转子高速旋转时,空气摩擦生热,转子温度会上升,试管中的样品温度也会升高。由于生物学样品对温度敏感。一般要求离心实验中温度保持4℃。没有电脑控制的智能化技术,是不可能做到±1℃的精度。因此,用制冷机对离心腔冷却,而达到冷却转子、冷却样品温度的目的。但测量旋转中的转子的实际温度极为困难,国内外都采用在离心腔底部离转子较近处理设温度传感器,间接测量转子温度。这里T样品=T腔+T补偿。T补偿又与转子的类别、转速及运行时间有关。离心机无刷电机直接驱动离心机是由电机带转子高速旋转的。过去的电机是带碳刷的直流电机,离心机运转时碳刷磨损,带来火花与噪声甚至振动,且有寿命,届时要更换碳刷万能再行运转。更严重的是碳刷的磨损带来碳粉尘的污染,不仅污染离心机,还会污染周围环境,这种污染对卫生行业是不合适的。离心机显示数字技术模拟技术典型的表现形式为拧旋钮选择操作参数(如转速、温度与时间等),以表盘的指针来显示数据。其缺点为:选择参数与数据的读数值受操作人与读数人的人为干扰多,控制精度差。而且每次操作都要这样,重复性差。有的离心机虽数字显示(如旋钮选值而数字显示),虽在读数上有改进,但取值原理未变仍属模拟技术;数字显示典型的表现形式为界面友好、键盘操作、数字化显示、可编程操作的全电脑控制,其核心为智能化控制,是由电脑来实现的。离心机操作所需要一切参数(如转速、温度、时间、加减速率档等),键盘操作输入,并以数字显示出来,因此选择操作参数与读取数误差极小。又由于是可编程操作,可把一组操作参数编成号码,可存取使用。

【实验目的】（1）了解实验的常规仪器、设备、耗材。（2）掌握本实验所用仪器的功能和使用方法。【实验内容】一、验室的常规仪器、设备(一) 温度控制系统：1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。2．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用来维持培养液的酸度（pH值）。37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。4. 水浴锅：用于保温。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。25-100℃水浴箱用于常规试验。5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。（二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质（Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ)）。2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质，其中常含有微量的有机物（树脂等）。13．超纯水：用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。（三）菌消毒设备：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。。1．蒸汽消毒锅：用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒2. 紫外线：75%乙醇 、0.1%SDS（消毒剂）一些耐高压、高温消毒且可用紫外线照射或乙醇和SDS浸泡。紫外线照射使用方便，且很方便，但灭菌效果与距离有关，且产生臭氧污染安全，用于无菌室，超净台和塑料用具的消毒。3. 滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。4. 煮沸消毒：主用于金属器械和针急需时采用。（四） 计量系统：1. 称量系统：（各种天平）台秤、托盘天平、钮力摆动天平、光电分子天平、精密电子分析天平2. 液体体积的度量：精：量筒、移液管、微量取液器粗：刻度试管、烧杯、锥形瓶3. pH值测量：pH计：测定溶液中H+的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生不同的电动势用pH值表示出来。pH试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的pH值的粗略估计。而大部分试剂的配制要求严格的pH值，需精确度高（小数点后两位）的pH计。4. OD值测量：光密度、分光光度计是利用物质在可见光和紫外线区域中的吸收光谱来鉴定该物质的性质及其含量的一种仪器。它是由光源、单色器、吸收池、接收器、测量仪表或显示屏幕所组成。OD值是许多溶液中溶质定量的方便指标之一，通过所产生的单色光而测定某一溶液对该单色光的吸收值，利用它可进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。（五）离心机：离心技术是研究生物的结构和功能中不可缺少的一种物理技术手段。因为各种物质在沉淀系数、浮力、和质量等方面有差异，可利用强大的离心力场，使其分离、纯化和浓缩。目前有各种各样的离心机。可供少于0.05ml到几升的样品离心之用。离心技术应用广泛，包括收集和分离细胞、细胞器和生物大分子等。据其转速的不同，可分为以下几种类型：1. 普通离心机：最大转速6000 r/m ，最大离心力6000g①医用或台式离心机：是离心机中最简单而廉价的，最常用于收集快速沉降系数的物质，如红细胞、粗大的沉淀物、酵母菌和细菌等。②低速冷冻离心机：主要用于细胞、细胞核、细胞膜和细菌的沉淀和收集等。 22. 高速离心机：最大转速25000 r/m ，最大离心力89000g有冷冻和常温两种，多用于制备和手收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等。3. 超速离心机：最大转速9000 r/m ，最大离心力694000g。4. 台式超速离心机：最大转速12000r/m ，最大离心力625000g。（六）超净工作台：内有紫外灯、照明灯、还应有酒精灯火焰、75%乙醇等灭菌的设备，是一种提供局部洁净度的设备。其原理是鼓风机驱动空气，经过低、中效的过滤器后，通过工作台面，使实验操作区域成为无菌的环境。超净台按气流方向的不同大致有几种类型：①侧流式：净化后气流，从左侧或右侧通过工作台面，流向对侧，或者从上往下或从下往上流向对侧，他们都能形成气流屏障而保障台面无菌。缺点：在净化气流和外边气体交界处，可因气体的流向而出现负压，使少量的未净化气体混入，而造成污染。②外流式：气流是面向操作人员的方向流动，从而保证外面气体不能混入。缺点：在进行有害物质实验时，对操作人员不利，但可采用有机玻璃把上半部分遮挡起来，使气流往下方流出。（七）电泳系统：电泳技术是检测、鉴定各种生物大分子的纯度、含量及描述它们的特征，甚至还是分离、纯化、回收和浓缩样品的工具之一。核酸和蛋白质等都带有电荷，当它们被置于电场中时，能够移动。电泳装置由两部分组成：电源装置和电泳槽装置。① 电泳装置：电源需经稳流通过稳压器，既能提供稳定的直流电，又能输出稳定的电压。可用于三种：常度稳压电泳仪：输出电压0-500v 0-15mA中度稳压电泳仪：输出电压400-1000v高度稳压电泳仪：输出电压1000以上的电源装置。② 电泳槽装置：分两种水平式电泳槽：一般分为微型电泳槽和大号水平式电泳槽垂直式电泳槽：分垂直平板电泳槽和圆柱形电泳槽装置。（八）PCR仪：Polymerase Chain Reaction仪，也称DNA热循环仪，基因扩增，它是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行的DNA变性，引物复性，DNA聚合酶催化的延伸反应三个过程。（九）凝胶成像分析系统:对电泳后含溴乙锭（EB）核酸样品的观察分析。（十）干燥设备： 31. 真空加热干燥箱：核酸在硝酸纤维素膜和尼龙膜上固定，用于杂交实验。2. 电泳凝胶干燥箱：电泳后的凝胶进行脱水干燥的仪器，一般可将凝胶干燥到一些玻璃纸上，干燥后的凝胶易于保存。3. 液氮冷冻干燥：适用于活性蛋白质样品的干燥与结晶。4. 真空泵：许多实验都需要抽真空。如：乙醇沉淀后核酸样品的干燥，电泳凝胶的干燥等。（十一） 其他1. 微波炉：便于一些溶液的快速加热和定温加热，电泳琼脂糖凝胶配制、溶化等。2. 制冰机：用于制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境，以减少核酸酶或蛋白质酶的水解。3. 层析装置：（色谱分离）是一种分离多组分混合物的有效物理方法。真空印记系统，DNA合成/测序仪：这些都是对核酸进行深入研究的必备仪器。4. 磁力搅拌器：多角度旋转混匀器、快速振荡混合器：用于混合仪器。5. 组织匀浆器：超声组织及细胞破碎器，用其进行样品的分离提纯实验。6. 通风橱：很多溶剂能逸出毒气，必备柜 ，放射性试验还要有有机玻璃屏蔽。7. 玻璃蒸馏器、电热加帽、变压器：用于酚等有机溶剂的蒸馏。8. Tip头、Eppendorf管：微管移液器tip头（吸液尖）、Eppendorf管（微量离心管）可洗涤，硅化消毒后反复使用。对一些要求严格的实验，如RNA的提取、保存等操作，应使用新的消毒tip头与Eppendorf管。另外还应备有常用规格的离心管（1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等）及96孔、24孔、12孔、6孔的细胞培养塑料平板等。9. 小型设备、用具：定时器、滤膜、保鲜膜、防护眼镜鸭嘴镊、常规的玻璃或塑料器皿（包括平皿、试管、烧杯、量瓶、试剂分液漏斗、避光保存的试剂应使用棕色试剂瓶，如饱和酚、巯基乙醇等）、记号笔、各种手套PE、乳胶、家用、防酸的等）二、本期实验所用主要仪器、 设备的功能及操作1. 酚的重蒸馏装置：空气冷凝式玻璃蒸馏器。一般酚是无色透明的结晶，如呈粉色或黄色，表明其中含有酚的氧化产物，如醌、二酸等，变色的酚不能用于实验，因其中的酚氧化物可破坏核酸的磷酸二酯键，并引起DNA链的交联。使用前必须在160℃-180℃重蒸馏以去除能引起RNA和DNA断裂和交联的污染杂质，从而得到纯净的酚。2. 磁力搅拌器：81-2型恒温磁力搅拌器将导电温度表用导线与二芯插头连接，插入后面的温度表孔内，当温度上升到预先调整好的度数时即自动停止加热（控温搅拌）。主要用于物质的快速搅拌、溶解和混匀。如配制试剂，制备酚的水饱和液等。 43. 蒸馏水器：1810B自动双重纯水蒸馏器，石英管加热式，本器的一次及二次蒸馏均有保护装置，使用安全可靠，热继电器当冷却水突然中断或缺水的情况下，即自动切断电源。干簧继电器控制二次蒸馏瓶内的水位，其高度应以在水位降低时能自动切断电源为准，从而达到自动控制水位的目的。该仪器主要用于制备双蒸水和三蒸水。4. 离心机：TGL-16G台式高速离心机，最大转速20000rpm，主要用于核酸提取时蛋白质的沉淀和有机相与水相的分层，PCR检测的瞬时离心。5. 微量取液器：主要用于精确量取微量液体体积和核酸水相的转移。6. 匀浆器：5ml、10ml玻璃匀浆器。主用于组织细胞的破碎。7. 凝胶成像分析系统主用于核酸样品琼脂糖凝胶和PCR电泳结果的紫外观察和照像。8. PCR仪：PTC-200基因扩增仪体外扩增核酸的仪器9. 蒸汽消毒锅：用于实验用试剂、器皿、用具等的灭菌清毒有电加热式、电炉加热式两种。10. 超净台：JJT-1300型洁净工作台，侧流式。原理：吸进气经过初、中级过滤皿（无纺布滤过）后，再通过风机经高级过滤器（超细玻璃纤维滤纸制成）而形成洁净空气。主要是在局部空气造成洁净空气环境，以使工作区域中的悬浮粒子及微生物控制在最低限度内。本台操作压为垂直层流压，因此出风面与操作位置不应放置多余的物品，以免妨碍气流的正常流动，影响洁净度，台面板上的孔作为通风孔，使用时避免有液体或其他物品漏入空中，以免影响内部构件。风速可调。使用：75%乙醇消毒2-3次，摆放好实验用品。插上电源，紫外消毒30分钟，启动风机5m后关灯，关灯后10分钟打开照明灯，即可使用。11. 电泳系统：①电泳仪：HV-3000型高度三恒多用电泳仪（恒压、恒流、恒功率）②电泳槽：水平式两种。12．微波炉：主要用于琼脂糖的快速溶解。

离心机的安装应根据离心机的性能选择合作的地点放置，对一般低速离心机(台式)可放在平稳、坚固的台面上(它的底座都装有橡皮吸脚，借助于大气力压力及仪器本身的重量，紧贴于台面)；大容量低速离心机和高速离心机和高速冷冻离心机要相应地安放在坚实的地面上，水平放置。超速离心机重达数百公斤，应放在很坚实的地面上并有防尘、防潮设备， 保证离心室达到一定的真空度，正常运行。选择合适的转头离心机工作前，应将负荷平衡，重量误差越小越好，否则会引起剧烈震动，损坏离心转子及转轴。离心器支架离心器分离支架必需安置离心管后运作，严禁空架运转。离心机启动时，转速开关或G值旋钮放在低挡位，启动后再逐步调节到所需要的数值。一次工作后，再将旋钮调至低挡位再次工作，在高转速或G挡禁止直接启动。转子的最高转速在下述情况下要降低转子的最高转速 转子的运转时间和运转次数达到规定的寿命时。当转子受到局部表面损伤或出现管孔内轻微腐蚀时。使用不锈钢离心管、套管、厚壁管或离心瓶时。样品平均密度超过1．2g／cm3时，其实用转速N为：，其中N 为实用转速，N 为最大转速。转子受到高温时。转子的保养转子在每次使用前要严格检查孔内是否有异物和污垢，以保持平衡。转子必需保持干燥清洁，切勿碰撞擦伤。如不慎失落，应对转子进行X光拍片检查，确认无内部损伤后方可使用。离心管离心管可由许多种不同材料制成， 如聚乙烯(PE)、纤维素(CAB)、聚碳酸脂(PC)、聚丙烯(PP)等。各种离心管的拉力强度和伸长度都不同， 应按需要选用。注意保证样品、溶剂及梯度材料不腐蚀离心管及盖组件过期、老化、有裂纹或已受腐蚀的离心管尽量不用或降速使甩控制塑料离心管的使用次数，注意规格配套。离心过程中不得不开启离心室盖，不得用手或异物碰撞正在旋转中的转子及离心管。低温离心样品应先将空的转子2000r／min预冷一定时间，预冷时控制温度在0℃左右，也可将转子放在冰箱中预冷数小时备用，离心杯可直接存放在冰箱中预冷。离心中的异常现象在离心过程中，如发现不正常噪音及振动立即停机检查，未找出原因前不得继续运转。主机保养三个月应对主机校正一次水平度。每使用5亿转处理真空泵油一次，工作500小时应检查驱动电机炭刷，最好用吸尘器将摩擦产生的炭粉除去，必要时需要更换炭刷或将整流子用细砂纸打光。每使用1500小时左右应清洗驱动部位轴承并四高速润滑脂，转轴与转子接合部应经常涂脂防锈，长期不用时应涂防锈油加油纸包扎。平时不用时，应每月低速成开机1—2次，每次半小时，保证各部位的正常运转。前面已经谈到离心转子的种类很多，形状不一， 对于彼此之间离心半径的换算比较麻烦，为此提出了离心转头的K因素法， 使各种离心转子间的换算简化。

差速离心技术是交替使用低速和高速离心，用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法。此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。超速离心机的离心速度为每分钟60000转或更多，离心力约为重力加速度的500000倍，可分成制备性超速离心机和分析性超速离心机两大类。