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为什么信使RNA的SD序列不需要被识别?

Shine-Dalgarno (SD)是细菌和古细菌中信使RNA中核糖体结合位点序列。通常位于翻译起始密码子AUG上游约8~10个碱基位置。SD序列帮助招募核糖体RNA,并将核糖体比对并结合到信使RNA(mRNA)的起始密码子,从而开始蛋白质合成。一旦被招募,tRNA可以按照密码子的指令顺序添加氨基酸,从翻译起始位点向下游移动进行蛋白质合成。扩展资料SD序列与起始密码子之间的精确距离保证了mRNA在核糖体上定位后,翻译起始密码子AUG正好处于核糖体中的P位,这是翻译启动的前提条件。在很多情况下,SD序列位于AUG之前大约7个碱基处,在此间隔中少一个或多一个碱基,均会导致翻译起始效率不同程度的降低。大肠杆菌中的起始tRNA分子可以同时识别AUG、GUG和UUG3种密码子,但其识别频率并不相同,通常GUG为AUG的50%,而UUG只及AUG的25%。mRNA 5"端非编码区自身形成的特定二级结构能协助SD序列与核糖体结合,任何错误的空间结构均会不同程度地削弱mRNA于核糖体的结合强度。参考资料来源:百度百科-SD序列

哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的

简单点说-35(RNA聚合酶结合位点).-10(RNA荣合酶起始位点)启序列终止;复杂点我给提供段内容(留意参考资料少答案哈)转录程包括启、延伸终止启RNA聚合酶确识别DNA模板启并形由酶、DNA核苷三磷酸(NTP)构三元起始复合物转录即自始DNA模板启区域含TATAATG顺序称普布诺(Pribnow)盒或P盒复合物核苷三磷酸般GTP,少数ATP,原始转录产物5′端通三磷酸鸟苷(pppG)或腺苷三磷酸(pppA)第核苷三磷酸与第二核苷三磷酸缩合3′-5′磷酸二酯键,则启阶段结束进入延伸阶段延伸σ亚基脱离酶留核酶与DNA结合变松较容易继续往前移核酶模板专性能转录模板任何顺序包括转录加工待切除居间顺序脱离核酶σ亚基与另外核酶结合参与另转录程随着转录断延伸DNA双链顺打,并接受新碱基配合新磷酸二酯键核酶向前移已使用模板重新关闭起恢复原双链结构般合RNA链DNA模板具高度忠实性RNA合速度原核25~50核苷酸/秒真核45~100核苷酸/秒终止转录终止包括停止延伸及释放RNA聚合酶合RNA原核物基或操纵末端通段终止序列即终止;RNA合终止原核细胞转录终止需要种终止ρ(四亚基构蛋白质)帮助真核物DNA能转录终止信号已知真核DNA转录单元3′端均含富AT序列〔AATAA(A)或ATTAA(A)等〕相隔0~30bp现TTTT顺序(通3~5T),些结构能与转录终止或者与3′端添加聚A顺序关

真核基因mRNA为多顺反子,有多个SD序列,多个起始位点.这句话对吗

不对,SD序列是原核基因中的,真核是TATA框等.予希493 2014-10-03追问:把真核基因换成原核基因是否正确 请问? 请具体说明激素与维生素的异同点追答:这句话把SD去掉,就对了。 原核单顺反,单起点。 激素、维生素、你按照性质、分别列出结构特点,脂水溶性、体内功能,代谢去向就差不多可以了。追问:第一个问题:可是书上有一章说原核的mRNA为多顺反子 另一章又是单顺反子 …… 第二个问题:具体区别是啥?追答:原核、单顺反子、你多查查权威书。正版的人卫版、高教版、科学版。 第二个问题方向给你了,自己查权威书。 动点脑子不吃亏。

原核细胞内DNA的合成引物是什么?RNA还是DNA

真核复制: (1)DNA解旋,由DNA解旋酶和DNA拓扑异构酶催化王成; (2)合成RNA引物,由引物酶催化形成,并使RNA引物与DNA复制子按碱基配对原则相结合。 (3)在DNA聚合酶的帮助下,各种碱基在RNA引物上添加DNA碱基,合成的是前导链。 (4)滞后链的合成,形成岗其片段 (5)核酸酶切除引物RNA,连接酶和DNA聚合酶1连接和填补空隙。 (6)由拓扑异构酶将DNA子链冲洗螺旋话,形成最终的DNA分子; 原核的比较复杂,有3种形式的复制,滚环复制,θ环复制,不对称复制。 (1)滚环复制:如大肠杆菌,其DNA为环状的,不同与真核的线状,所以采用这种方式。其是先再环状的DNA上打开一个缺口,但只是打开一条链,另一条链不打开,然后打开缺口的链逐渐与没有打开的链相分离,与此同时,新的碱基不段的补充,待到一条链分离的时候,另一条链已经合成了。 (2)θ环复制,跟上面有点类似,不过是打开两条链,双向进行,形成θ状。 (3)不对称复制,出现在线粒体,叶绿体或者特殊核酸的微生物上的,因为有些线粒体是单链或者成双链与单练之间的特殊结构,过其复制很复杂,主要是通过添加碱形成的,一般没有什么规律。

催化rna引物生成的是

引物合成酶。催化引物RNA合成的是一种特殊的RNA聚合酶,称为引物合成酶。引物酶是用来引导RNA引物、引子的合成,从而引导DNA聚合酶介导的DNA链的合成,引物酶需引发前体护送才能催化引物合成。

DNA聚合酶是蛋白质还是核酶(RNA)?

是蛋白质。 大多数酶的本质是一种蛋白质,不管什么酶都一样。但是你既然问这个问题我想你应该学到了DNA的复制过程,这里面涉及了一个引物酶就是RNA

DNA聚合酶I能否合成RNA引物

不能,DNA复制之所以要引物,就是因为DNA不能从头合成核酸链。如果能从头合成引物,就不需要引物了。

体内DNA复制需要以RNA为引物 对还是错

是的。需要RNA为引物,记得采纳额。

存在RNA聚合酶吗

当然有了。看看吧: RNA聚合酶(RNA polymerase):以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。 催化转录的RNA聚合酶是一种由多个蛋白亚基组成的复合酶。如大肠杆菌的 RNA聚合酶有五个亚基组成,其分子量为480000,含有α,β,β",δ等4种不同的多肽,其中α为两个分子,所以全酶(holoenzyme)的组成是α2ββ"δ。α亚基与RNA聚合酶的四聚体核心(α2ββ")的形成有关;β亚基含有核苷三磷酸的结合位点;β"亚基含有与DNA模板的结合位点;而Sigma因子只与RNA转录的起始有关,与链的延伸没有关系,一旦转录开始,δ因子就被释放,而链的延伸则由四聚体核心酶(core enzyme)催化。所以,δ因子的作用就是识别转录的起始位置,并使RNA聚合酶结合在启动子部位。 细菌的RNA聚合酶,像DNA聚合酶一样,具有很复杂的结构。其活性形式(全酶)为15S,由5种不同的多肽链构成,按分子量大小排列分别为β"(155000),β(151000),σ(7000),α(36500)和ω(11000)。每分子RNA聚合酶除有两个α亚基外,其余亚基均只有一个,故全酶为β"βα2σω(450000) 如果全酶为球状,则可计算其直径约为100A,即约为双链DNA的30bp节段的长度。然而全酶可结合约60个核苷酸,提示其形状应为椭圆球形。 σ亚基和其他肽链的结合不很牢固。当σ亚基脱离全酶后,剩下的β"βα2ω称为核心酶。核心酶本身就能催化核苷酸间磷酸二酯键的形成,不论有无σ存在的利福平(rifampicin)和利福霉素(rifamycin)能结合在β亚基上而对此酶发生强烈的抑制作用。它抑制RNA合成的起始而不抑制其延长。β亚基的基因rpoB的突变可使细菌对利福平有抗性。而另一种抗生素链霉溶菌素(streptolydigin)能抑制RNA链的延长,rpoB的突变却可使细胞对链霉溶菌素亦发生抗性。总的看来β亚基似乎是酶和核苷酸底物结合的部位。肝素能与DNA竞争与RNA聚合酶相结合。肝素是一种多价阴子,能和β"亚基结合,从而在体外抑制转录作用。可见β"亚基的碱性较强,适于与模板DNA相结合。α亚基的功能现尚未知。然而,当噬菌体T4感染E.coli时,其α亚基即在精氨酸上被ADP-核糖化。这种修饰作用使该RNA聚合酶全酶对其原先识别的启动子的亲和力减弱。所以有人认为,α亚基的功能可能是识别其相应的启动子。 为什么细菌的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多,仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明,噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子;它们不能识别其他启动子。例如噬菌体T3和T7的RNA聚合酶分子很相似,二者都不过是一条多肽链,分子量约11000。它们能很快合成RNA。其速率在37℃时可达约200核苷酸/秒。 相比之下,宿主细胞的RNA聚合酶却能转录细胞内的许多转录单位(>1000个)中的任意一个。这些转录单位中有一些可由RNA聚合酶直接转录,不需要其他因子的帮助。但大多数这些转录单位仅在更多的蛋白质因子存在下才能被该RNA聚合酶所转录。所以,可以想像宿主细胞所以要求这样大和复杂,至少部分反映了它需要和许多其他因子相互作用,而不是其催化活性的固有的要求。 E.coli的RNA聚合酶各亚基的基因(除ω亚基的基因尚不详外)均存在于三个操纵子中,这些操纵子还含有蛋白质合成和DNA合成所需的基因。P71主要启动子(P)均在操纵子的左侧,RNA则向右方合成。次要启动子(p)包括σ操纵子中的一个启动子(PHS,是在热休克条件下才有活性的启动子),均位于操纵子之内。这些次要启动子仅启动在其右侧的基因。β操纵子的前面两个基因L11和L1,有时被认为组成另一个独立的操纵子,因为在L10基因之前另有一启动子。这些基因编码50个左右核糖体蛋白质中的某些蛋白质。σ操纵子中还含有复制所需的蛋白质,即DNA引物酶的基因。现在还不清楚这些操纵子是如何进行调节的。 σ操纵子有两个连续的启动子,就像rRNA的操纵子一样。受到ppGpp分子的调控,故与生长速度有关。这些操纵子中的基因并不是相等地被转录的:在σ和β操纵子开始中的核糖体蛋白质基因的后面有衰减子(attenuators),可使其后的RNA聚合酶基因的转录大为降低。因此,在每个细胞中RNA聚合酶亚基的数目(约3000个)要大大少于核糖体蛋白质的分子数(约20000个),这是符合细菌的需要的。然而令人不解的是DNA引物酶基因位于σ基因之前,然而在细胞内σ亚基的数目反而要比引物酶分子数多60倍(3000比50)。这可能是因为编码引物酶的mRNA节段要比其余mRNA部分不稳定得多。这些操纵子内都有几个次要的启动子,包括σ操纵子内的一个可被热休克所激活,说明实际的调控作用还要更为复杂得多。 RNA聚合酶(RNA polymerase)的作用是转录RNA。有的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。如大肠杆菌RNA聚合酶有四条多肽链,另有一个促进新RNA分子合成的σ因子,因此它的组成的是α2ββσ。这种结构称为全酶(holoenzyme),除去了σ因子的酶称为核心酶。噬菌体RNA聚合酶则没有亚基。 真核生物的RNA聚合酶分三类。RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中,转录rRNA顺序。RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中,转录大多数基因,需要“TATA”框。RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中,转录很少几种基因如tRNA基因如5SrRNA基因。有些重复顺序如Alu顺序可能也由这种酶转录。上面提到的“TATA”框又称Goldberg –Hogness顺序,是RNA聚合酶Ⅱ的接触点,是这种酶的转录单位所特有的。它在真核生物的转录基因的5"端一侧,在转录起点上游20至30个核苷酸之间有一段富含AT的顺序。如以转录起始点为0,则在-33到27个核苷酸与-27至21核苷酸之间,有一个“TATA”框。一般是7个核苷酸。原核生物中也类似“TATA”框的结构。RNA聚合酶作用在“TATAAT”(Pribnow)盒和“TTGA-CA”框附近。

11. 有关原核生物mRNA分子上的S-D序列,下列哪项是错误的 A. 以AGGA为核心 B. 发现者是Shine-Dalgarno C.

C. 可与16S-rRNA近3′-末端处互补B. 30%E. 泛醌在线粒体内膜中的活动范围较大D. 两条DNA链均可作为模板链,不同基因的模板链不一定在同一条DNA链上C. 丙酮酸激酶A. 环型受体D. 是在肝细胞内直接从胆固醇合成的C. 分解(代谢)物基因激活蛋白C. 全酶形式存在B. 随从链上生成的不连续DNA片段

真核基因mRNA为多顺反子,有多个SD序列,多个起始位点. 这句话对吗?

不对,SD序列是原核基因中的,真核是TATA框等。

引物酶为什么需要RNA做引物而不直接起始一条DNA链

RNA是临时的,不校对也不修复,可以从头合成;DNA是永久的,所以有修复和校正机制,在确定前面的序列正确之后才能往下合成。这就成了一个死循环,所以不能从头合成。

DNA复制时所用的引物酶属于RNA聚合酶吗?

应该不是。。RNA是引物,RNA聚合酶催化转录,但没有RNA聚合酶是引物酶的说法。。。

原核生物DNA复制所需的引物酶DnaG与转录所需的RNA聚合酶有什么不同?

引物酶,合成一小段RNA,用来引导DNA聚合酶起始DNA链的合成。RNA聚合酶是以DNA或RNA为模版合成RNA的酶。这是初步的了解,建议你看看生化课本,南开黄煕泰的那本,上面比较详细~

为什么DNA 复制时要用RNA聚合酶来合成引物,而且引物是RNA??

DNA的合成必须3-OH,也就是说核苷酸必须要连接在3-OH上才能够合成延伸RNA引物就是提供3-OH的作用。而RNA的合成不需3-OH,所以引物用RNA比较好。事实上,只要是能提供3-OH的核苷酸,都有是DNA复制延伸的可能。

参与合成cDNA的酶是A.RNA聚合酶B.转肽酶C.引物酶D.逆转录酶

【答案】:D参与蛋白质合成的主要酶包括氨基酰一tRNA合成酶、转肽酶、转位酶等,参与合成CDNA的酶是逆转录病毒。

DNA和RNA各有几种合成方式,各由什么酶催化?

对于生物体内,DNA合成来源主途径要有:复制和逆转录。DNA的复制方式是半保留复制,没有真核原核的差别。在平时DNA是超螺旋结构,复制时要先解开,这里起作用的是拓扑异构酶Ⅰ;复制需要解开双螺旋,起解开作用的是DNA解链酶(一般是DnaB和DnaA),解开之后需要保持DNA单链的稳定,这里需要的是SSB蛋白(单链结合蛋白)两条DNA键的复制过程是不一样的,但是都是需要引物来引发复制的,引物是一段RNA,是由一种叫引物酶的RNA聚合酶参与的。之后一条键是按5"到3"连续复制的,称前导键,只需要DNA聚合酶(一般是聚合酶Ⅲ)参与。另一条键的复制不是连续的,是先合成许多冈崎片段再通过连接酶连接起来的,这些片段的合成也需要引物(这里的引物叫引发体,由6种蛋白和引物酶组装),复制用的酶也是DNA聚合酶Ⅲ,再由RNaseH降解引物并由DNA聚合酶Ⅰ将缺口补齐,再由DNA连接酶将相邻两个片段连接,最后形成大分子DNA.复制终止后DNA拓扑异构酶Ⅳ使复制叉解体,释放DNA分子。逆转录产生DNA主要有两个步骤:cDNA的合成和DNA双链的合成,先由逆转录酶产生互补的cDNA,之后在DNA聚合酶作用下合成另一条DNA链,RNA的来源主要还是从DNA转录,RNA病毒的自主复制是少量的,根据产物的差别、处理的不同,转录是个复杂的过程,大体需要的酶有拓扑异构酶Ⅰ、DNA解链酶、RNA聚合酶、核心酶,而且真核原核还有差异,真核生物还存在RNA编辑和修饰的过程,经过这些过程才能形成成熟的RNA,

RNA合成的过程?

RNA聚合酶进入DNA非编码区的酶切位点,解旋DNA使成为单链,核糖核苷酸由碱基互补配对法则形成RNA链(信使RNA)。RNA的合成即DNA的转录:DNA复制最重要的特征是半保留复制,即DNA复制时,DNA双链中的互补碱基之间的氢键断裂,解为两条单链,各以一条单链为模板,按碱基互补原则合成新的互补链,新合成的两个DNA分子和亲代DNA分子是完全一致。在子代DNA分子中一条单链来自亲代,另一条是新合成的,这种复制方式称半保留复制(semiconservative replication)。遗传信息按这种方式忠实地从亲代传给子代。 目前有关复制的知识主要来自于原核生物实验,所以主要以原核生物来叙述。

rna引物在dna复制过程中的作用是

提供复制所需的3′羟基。DNA聚合酶没有催化两个游离dNTP聚合的能力,RNA核苷酸聚合酶和引物酶都可以催化游离NTP聚合,在适当的位置按照DNA模板的配对序列,由RNA聚合酶(引物酶)催化,NTP聚合生成引物,引物合成的方向也是5′端至3′端,这样已合成的引物必然会留有3′-OH末端,而不是5′磷酸末端,此时在DNA聚合酶Ⅲ(DNA-polⅢ)催化下,靠酶的β-亚基辨认引物,第一个新链的dNTP就与引物3′-OH末端生成磷酸二酯键,已聚合的新链同样在每一反应完成后留有3′-OH端,则复制就可进行下去。

参与合成cDNA的酶是A.RNA聚合酶B.转肽酶C.引物酶D.逆转录酶

【答案】:D1.转肽酶功能:在蛋白质生物合成过程中肽键的形成具有必须的作用。转肽酶识别特异多肽,催化不同的转肽反应。2.RNA在逆转录酶的催化下合成cDNA。

每轮DNA合成的起始需要合成RNA。大肠杆菌RNA聚合酶受抗生素利福平抑制,而引物酶则对利福平有抗性。

【答案】:进行合成的所有分子都将完成合成,但剩余的分子不会起始。因而,生长周期中随机分散的一群细胞将继续合成一代DNA。$由于在氨基酸饥饿期间,所有分子都已完成合成,所以没有合成发生。

关于前导链上rna引物的合成

在质粒、拟核等环形DNA中,不存在5"末端缺失问题而线性的DNA末端,由于5"末端引物的切除,而逐渐变短。所以线性DNA的末端存在着端粒结构。正常细胞由于线性DNA复制后5"末端消失,所以随着细胞不断增殖,端粒逐渐缩短。所以在永生性细胞系中,如肿瘤细胞中,为了防止线性DNA端粒截短,而存在一种端粒酶,它以自身的RNA为模板,反转录形成端粒序列,以补偿端粒损失。

生物:DNA解旋酶与RNA解旋酶的区别?

DNA解旋酶解开DNA双链结构RNA解旋酶解开RNA双链结构

解旋酶、限制性内切酶、DNA连接酶、RNA聚合酶分别有何作用?

解旋酶 是DNA复制时将DNA的反向双螺旋解开 限制性内切酶 能将特定的DNA序列切开一个个粘性端口 这样有利于外源DNA的进入 也就是 质粒的导入 DNA连接酶 顾名思义 连接酶就是拿来连接的 就是在导入质粒后 用来连接主链DNA的外面的DNA链 RNA聚合酶 是催化以DNA为模板(template)、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶 与细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关 我写的很辛苦 记得给我最佳哦

解旋酶,DNA聚合酶,RNA聚合酶,逆转录酶,限制酶,DNA链接酶

1. 化学本质都是蛋白质,2. 合成位置一般都在核糖体内。3. 作用:解旋酶:就是作用DNA的, 一般用在PCR技术中来打开一些DNA的二级结构。例如一些发卡结构,有利用DNA的复制。DNA聚合酶:在PCR过程中, 以DNA或cDNA为模板,以引物, dNTP, Mg2+等试剂为原料复制DNA所用到的一种不可或缺的酶。RNA聚合酶和DNA聚合酶一样,只是他是用来复制RNA的。逆转录酶:以RNA为模板, 把RNA转变为单链的cDNA. 以利于后续的DNA克隆以及文库构建。限制酶: 就是通常所说的限制性内切酶, 不同酶的作用位点不一样切断DNA,一般用于分子克隆与载体构建等基因工程技术。DNA边接酶: 就是将限制性内切酶切断的DNA片断又重新连接成一条DNA。连接的DNA片断一定是同一个限制性内切酶切割产生同样粘端的片段,或者是不同酶切割产生平端的片段,但是这样的连接效率一般较低。4. 这些酶一般通过克隆,表达获得。存在不同生物体内。

RNA聚合酶具解旋作用吗

具有. 转录过程虽然需要解旋,但并不需要专门的解旋酶,而是RNA聚合酶的头部就兼具解旋的功能 RNA聚合酶与启动子结合后,在特定区域将DNA双螺旋两条链间的氢键断开,使DNA解旋,形成单链区,以非编码链为模板合成RNA互补链的过程就开始了

rna聚合酶在转录时有解旋的作用吗

有的,RNA聚合酶是一种复合酶,兼具有解旋的功能,所以在转录时只需要这一种酶即可,不需要解旋酶。该酶需要四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作为RNA聚合酶的底物,DNA为模板,二价金属离子Mg2+、Mn2+是该酶的必需辅因子。其催化的反应表示为:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA链的合成方向也是5"→3",第一个核苷酸带有3个磷酸基。其后每加入一个核苷酸脱去一个焦磷酸,形成磷酸二酯键,焦磷酸迅速水解的能量驱动聚合反应。与DNA聚合酶不同,RNA聚合酶无须引物,它能直接在模板上合成RNA链;RNA聚合酶能够局部解开DNA的两条链,所以转录时无须将DNA双链完全解开,RNA聚合酶无校对功能。扩展资料:RNA聚合酶催化RNA的合成,其与DNA聚合酶有许多相同的催化特点:①以DNA为模板;②催化核苷酸通过聚合反应合成核酸;③聚合反应是核苷酸形成3",5"一磷酸二酯键的反应;④以3"→5"方向阅读模板,5"→3"方向合成核酸;⑤按照碱基配对原则忠实转录模板序列。真核生物的3种细胞核RNA聚合酶的结构比原核生物复杂,3种RNA聚合酶都有2个不同的大亚基、2个类α亚基和1个类ω亚基,分别与大肠杆菌核心酶的β和β"、2个α亚基和ω亚基同源。除上述5个亚基外,三种RNA聚合酶还各含7~11个小亚基。合成RNA时,原核细胞依赖RNA聚合酶的各个亚单位就能完成转录过程,而真核细胞还需要一些蛋白质因子参与,并对转录产物进行加工修饰。参考资料:百度百科——RNA聚合酶

解旋酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 限制性核酸内切酶 DNA连接酶分别有什么区别?

简单的介绍下吧: 解旋酶:催化解旋DNA双链——DNA复制的前解旋的时候用 DNA聚合酶:将四种脱氧核苷酸催化合成DNA——DNA复制过程中用 RNA聚合酶:将四种核糖核苷酸催化合成RNA——RNA合成过程中用 限制性核酸内切酶:将一条DNA双链切割成两条DNA双链——基因工程中剪切DNA时用 DNA连接酶:将两条粘性末端碱基互补的DNA双链连接成一条长DNA双链——将目的基因与载体结合时用

在复制中催化小片段rna合成的酶是

在复制中催化小片段rna合成的酶是引物酶。引物酶(Primase) ,用来引导RNA引物/引子(RNA primer)的合成,从而引导DNA聚合酶介导的DNA链的合成。引物酶需引发前体护送才能催化引物合成。合成一小段RNA,用来引导DNA聚合酶起始DNA链的合成。引物酶需引发前体护送才能催化引物合成。引物酶依据模板的碱基序列,从5"→3"方向催化NTP(注意不是dNTP)的聚合,生成的短链的RNA引物;以合成的引物,必然留有3"-OH末端,此时就可能进入DNA的复制延长,在DNA-polⅢ催化下,引物末端与dNTP生成磷酸二酯键;新链每次反应后亦留有3"-OH,复制就可以进行下去。酶(enzyme)是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。酶的催化作用有赖于酶分子的一级结构及空间结构的完整。若酶分子变性或亚基解聚均可导致酶活性丧失。酶属生物大分子,分子质量至少在1万以上,大的可达百万。酶是一类极为重要的生物催化剂(biocatalyst)。由于酶的作用,生物体内的化学反应在极为温和的条件下也能高效和特异地进行。随着人们对酶分子的结构与功能、酶促反应动力学等研究的深入和发展,逐步形成酶学(enzymology)这一学科。

rna聚合酶有解旋作用吗

RNA聚合酶没有解旋这个功能,这是解旋酶的功能. RNA聚合酶是催化DNA转录时以核糖核苷酸为底物通过磷酸二酯键聚合成RNA的酶. 关于转录,有下面两类观点 1、 不需要解旋酶:DNA复制需要解旋酶,可是与DNA复制相类似的转录过程并不需要解旋酶,基因的转录是由RNA聚合酶催化进行的.基因的上游具有结合RNA聚合酶的区域,叫做启动子.启动子是一段具有特定序列的DNA,具有和RNA聚合酶特异性结合的位点,决定了基因转录的起始位点.RNA聚合酶与启动子结合后,在特定区域将DNA双螺旋两条链之间的氢键断开,使DNA解旋,形成单链区,以非编码链为模板合成RNA互补链的过程就开始了.(从这一类看RNA聚合酶的头部是有解旋作用.) 2、需要解旋酶:在真核细胞中,RNA聚合酶通常不能单独发挥转录作用,而需要与外切酶等其他转录因子共同协作,有些辅助功能的转录因子就是解旋酶.这是我们高中要求的RNA聚合酶的作用:1、识别DNA模板链上的启动子并与之结合; 2、保证以DNA为模板的进行转录,合成mRNA. 这个问题对不同的生物来说不一样,原核生物RNA聚合酶有解旋作用,而对真核生物来说,转录的时候是需要RNA聚合酶和解旋酶一起来发挥解旋作用的.

解旋酶、限制性内切酶、DNA连接酶、RNA聚合酶分别有何作用?

解旋酶:dna复制时,解开dna的拓扑双链。也就是解开双螺旋的作用。本质:切断碱基间的氢键限制性内切酶:识别特异的碱基序列,并切割成黏性末端或平末端。本质:切断磷酸二酯键dna连接酶:是将两个dna片段连接到一起本质:连接磷酸二脂键rna聚合酶:是在一个rna片段上逐个添加核苷酸本质:连接磷酸二脂键

DNA聚合酶,解旋酶,RNA聚合酶各自的作用对象和作用时期(详细)

DNA聚合酶以脱氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、或dTTP,四者统称dNTPs)为作用对象,作用时期为DNA复制时期。解旋酶以DNA双链的氢键为作用对象,作用时期为DNA或RNA复制时期。RNA聚合酶以四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)为作用对象,作用时期为转录时期。扩展资料1、DNA聚合酶特性聚合作用:在引物RNA-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令,即A与T,C与G的配对原则,逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端,逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;3"→5""外切酶活性(校对作用):这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸,可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性;5"→3"外切酶活性(切除修复作用):该活性是从5"→3"方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用),主要产生5"—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。2、DNA解旋酶(DNA helicase)通常为流体蛋白环,通过ATP水解产生的能量由解旋酶装载器装载到DNA单链上(单链穿过环中央),有3"→5"或5"→3"方向极性,该极性就是它结合的单链的极性。它像DNA聚合酶一样具有延伸性。与解旋酶装载器结合,装载到单链DNA上之前,DNA解旋酶是没有活性的,只有解旋酶装载器将它装载到单链DNA上,解旋酶装载器自动离开之后,DNA解旋酶的活性才被激活。直到双链全部解开,运动到单链末端时,它才从单链上离开。注意DNA解旋酶结合的是DNA单链而不是双链,至于它结合的单链,是由起始子蛋白作用到被称为复制器的DNA区段使该区段发生双链解旋才产生的。3、RNA聚合酶该酶需要四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作为RNA聚合酶的底物,DNA为模板,二价金属离子Mg2+、Mn2+是该酶的必需辅因子。其催化的反应表示为:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA链的合成方向也是5"→3",第一个核苷酸带有3个磷酸基。其后每加入一个核苷酸脱去一个焦磷酸,形成磷酸二酯键,焦磷酸迅速水解的能量驱动聚合反应。与DNA聚合酶不同,RNA聚合酶无须引物,它能直接在模板上合成RNA链;RNA聚合酶能够局部解开DNA的两条链,所以转录时无须将DNA双链完全解开,RNA聚合酶无校对功能。参考资料来源:百度百科-DNA聚合酶参考资料来源:百度百科-解旋酶参考资料来源:百度百科-RNA聚合酶

解旋酶、限制性内切酶、DNA连接酶、RNA聚合酶分别有何作用?其本质又是什么?

解旋酶:DNA复制时,解开DNA的拓扑双链。也就是解开双螺旋的作用。本质:切断碱基间的氢键限制性内切酶:识别特异的碱基序列,并切割成黏性末端或平末端。本质:切断磷酸二酯键DNA连接酶:是将两个DNA片段连接到一起本质:连接磷酸二脂键RNA聚合酶:是在一个RNA片段上逐个添加核苷酸本质:连接磷酸二脂键

DNA聚合酶,解旋酶,RNA聚合酶各自的作用对象和作用时期(详细)

DNA聚合酶以脱氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、或dTTP,四者统称dNTPs)为作用对象,作用时期为DNA复制时期。解旋酶以DNA双链的氢键为作用对象,作用时期为DNA或RNA复制时期。RNA聚合酶以四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)为作用对象,作用时期为转录时期。扩展资料1、DNA聚合酶特性聚合作用:在引物RNA-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令,即A与T,C与G的配对原则,逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端,逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;3"→5""外切酶活性(校对作用):这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸,可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性;5"→3"外切酶活性(切除修复作用):该活性是从5"→3"方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用),主要产生5"—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。2、DNA解旋酶(DNA helicase)通常为流体蛋白环,通过ATP水解产生的能量由解旋酶装载器装载到DNA单链上(单链穿过环中央),有3"→5"或5"→3"方向极性,该极性就是它结合的单链的极性。它像DNA聚合酶一样具有延伸性。与解旋酶装载器结合,装载到单链DNA上之前,DNA解旋酶是没有活性的,只有解旋酶装载器将它装载到单链DNA上,解旋酶装载器自动离开之后,DNA解旋酶的活性才被激活。直到双链全部解开,运动到单链末端时,它才从单链上离开。注意DNA解旋酶结合的是DNA单链而不是双链,至于它结合的单链,是由起始子蛋白作用到被称为复制器的DNA区段使该区段发生双链解旋才产生的。3、RNA聚合酶该酶需要四种核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作为RNA聚合酶的底物,DNA为模板,二价金属离子Mg2+、Mn2+是该酶的必需辅因子。其催化的反应表示为:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA链的合成方向也是5"→3",第一个核苷酸带有3个磷酸基。其后每加入一个核苷酸脱去一个焦磷酸,形成磷酸二酯键,焦磷酸迅速水解的能量驱动聚合反应。与DNA聚合酶不同,RNA聚合酶无须引物,它能直接在模板上合成RNA链;RNA聚合酶能够局部解开DNA的两条链,所以转录时无须将DNA双链完全解开,RNA聚合酶无校对功能。参考资料来源:百度百科-DNA聚合酶参考资料来源:百度百科-解旋酶参考资料来源:百度百科-RNA聚合酶

请帮我区分一下这几种酶。DNA聚合酶,RNA聚合酶,逆转录酶,DNA解旋酶

DNA连接酶:可以连接被限制酶切割开磷酸二酯键,连接的是DNA片段DNA聚合酶:DNA复制,连接磷酸二酯键,把单个脱氧核苷酸连接到与模板链互补的链上。DNA解旋酶:使DNA两链中的H键断开RNA聚合酶:在转录过程,是以一条DNA为模板,通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶, 逆转录酶:是以RNA为模板合成DNA的酶。把单个脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链上,连接磷酸二酯键。

cRNA文库的概念和应用是什么?

cDNA文库(cDNA library):是指某生物某一发育时期所转录的mRNA全部经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板,逆转录形成的互补DNA(cDNA)与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中,在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因,因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同,基因组DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA。真核生物基因组DNA十分庞大,其复杂程度是蛋白质和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重复序列。采用电泳分离和杂交的方法,都难以直接分离到目的基因。这是从染色体DNA为出发材料直接克隆目的基因的一个主要困难。高等生物一般具有10^5种左右不同的基因,但在一定时间阶段的单个细胞或个体中,都仅有15%左右的基因得以表达,产生约15000种不同的mRNA分子。可见,由mRNA出发的cDNA克隆,其复杂程度要比直接从基因组克隆简单得多。cDNA文库在研究具体某类特定细胞中基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方便具有特殊的优势,从而使它在个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值,是研究工作中最常使用到的基因文库。

以RNA为遗传物质的生物体,如何进行基因的翻译和表达?

体及免疫细胞受体是典型得生物文库. 在免疫系统中, 文库设计, 合成以及优化的整个过程都由生物体自己控制. 只有抗原结构和形成胚胎因子的遗传信息是外部的条件, 其余均是由内在因素自发控制. 因为免疫系统使用蛋白质结构文库, 它们将氨基酸作为文库的基本因素. 因为肽或以含氨基酸形成的蛋白质都是通过翻译遗传信息而合成的初产品, 需要序列的蛋白质能容易地藉由向微生物如细菌或病毒体内插入修改后的遗传信息来获得. 微生物文库合成有几大优点. 可以克隆微生物使每种微生物只制造一种蛋白质, 而且即使只有一个细胞也可以利用细胞增殖简单克隆出足够数量. 使用生物的最大好处是他们能自我繁殖, 只需给予充足的补给. 这是对使用微生物的蛋白质合成过程的简短描述. 在合成用于制造目的蛋白质序列的DNA链之后, 合成其互补链, 如果需要的话使用酶. 为使合成的DNA在微生物中恰当的复制并翻译, 需要用病媒动物(vector)压缩它然后进入微生物之内. 蛋白质在微生物的表面上被表达, 下一步是寻找目的蛋白质. 制造文库需要多种遗传信息. 随机DNA合成或切片cDNA或某种生物全基因组DNA都可使用. 制造特定蛋白质的 DNA序列片断能被修改以制造突变蛋白质文库. 考虑到体积限制和微生物繁殖的表达速率, 可以制得109(十亿)种文库. 与106到107种合成文库相比, 这可是个大数. 5单元肽的数量是205(320万)种, 6单元的是6400万, 7单元肽的数量超过10亿. 因此, 如果改变了超过7氨基酸的肽, 就仅能制出没有包含全部可能组合的不完全文库. 但这并不意谓着我们不能制造超过7氨基酸的蛋白质. 对于长链蛋白质, 7个不同的氨基酸能被单独选择而且替换. 当DNA随机合成的时候, 可以重复DNA密码而指定相同的氨基酸, 并且改变产生的频率. 因此, 为得到所有可能的组合, 需要更多的克隆体. ::::抗菌素文库:::: 抗菌素文库是最著名的蛋白质文库法之一. 抗菌素寄居宿主体内, 是一种含有衣壳和遗传物质的病毒. 这种方法在80年代中期发明, 在90年代开始用于多种领域. M13和Lambda病毒是最著名的. M13和lambda病毒 <http://www.cvm.msu.edu/courses/mic569/docs/parasite/> <http://www.hal.rcast.u-tokyo.ac.jp/genome/Present.htm> M13 是一种薄长的病毒, 由于它的基因组体积小, 可以容易地制出多种文库. 不同于其他病毒, 它能到宿主细胞的外面而不损坏它们或抑制它们的生长. 已知M13在宿主细胞中增殖其遗传信息并且以包着衣壳的形式出现, 它能制造10种类型的蛋白质, 而且通常在pVIII, pIII衣壳中合成文库. pVIII蛋白质包围其整个身体, 含有约50个氨基酸. 通常每一病毒表达2700个. 因为它的氨基端伸出衣壳, 可以修饰它以在其上表达一个不同的肽. 通常一个长肽不能够表达, 但是6单位的肽是可能的. 由于同时表达大量相同的文库分子, 尽管相对较短, 用它于多种配体反应是可以的. pIII 蛋白质在病毒末端表达, 而且通常是含有406个氨基酸的3到5种蛋白质. 它能表达相当大的蛋白质因而可以将它用在全蛋白质或抗体文库种. 正常的抗体使用Fab, 即抗原识别区域, 或者说Fvs链. 抗菌素文库和杂种细胞是制造抗体的最著名的方法. M13是制造随机肽文库的理想材料, 而且病毒能够足够稳定的被沉淀和浓缩, 因而在1-10mL体积中筛选109种文库成为可能. 不同于M13, Lambda病毒在细胞质中包裹着衣壳, 当有足够数量后穿出衣壳而不是总是戴着衣壳出现. 换句话说, 如果表达不同的蛋白质, 它将会折叠的形状出现并具有恰当的功能. pV和D蛋白质普遍用于文库合成. 如同能在抗菌素表面表达蛋白质一样, 还有随机肽, 天然蛋白质碎片, 特异性突变蛋白质文库和部份抗体碎片, 他们可用于色谱材料, 蛋白质-蛋白质反应, 受体结合位搜索和药物发现. ::::细菌及酵母文库:::: 不仅带有衣壳的病毒, 还有带有细胞壁和细胞膜的细菌也能用于文库表达. 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都能用来在细胞表面表达蛋白质, 还有大肠杆菌(E. coli), 一种革兰氏阴性菌, 也普遍使用. 大肠杆菌是如此有名, 以致于外行如我者也知道两种细菌: 一是大肠杆菌, 另一种是其余的. 细菌文库可以找出一种能够与抗体紧密结合的抗原, 然后将其用作疫苗. 细菌文库也可用于表达诊断抗体或受体文库, 以用于特定材料的分析. 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 <www.meddean.luc.edu/.../DeptWebs/ microbio/med/gram/tech.htm> <http://www.hhmi.org> 高等动物的蛋白质被蛋白质合成后的磷化作用或糖加成修饰的功能称为翻译修饰翻译修饰. 但是细菌作为一种原核生物 没有这种功能, 因而合成了一个蛋白质后要么它由于溶解度低而沉淀, 要么失活. 因此, 酿酒酵母, 一种真核细胞就被利用. 尽管酿酒酵母如细菌一般是单细胞, 它有翻译修饰功能并且能够使合成的蛋白质与原始的极为相似. 酵母 <news.bbc.co.uk/hi/english/health/ newsid_761000/761884.stm> 与病毒不同, 由于它有微米大小的细胞所以可以使用FACS(萤光活性细胞分类)技术. 文库中的蛋白质在细胞表面表达, 然后经过FACS机的细管, 这样萤光标记的目标分子就被加到其上. FACS根据萤光颜色和活性强度分类每个细胞. 分类不同颜色的目标分子并分类不同活性和选择性的细胞是可能的. 另外的优点是液相筛选, 它不必分离紧密附着的分子. 分类后的细胞再一次繁殖, 然后再筛选. ::::淘洗(Biopanning):::: 下面是一个合成的微生物文库的实例. 它的目的是寻找一种能够跟特定分子紧密连接的酶. <http://www.hort.purdue.edu/CFPESP/Hasegawa/ha00002.htm> 首先,目标分子平均地被置于检光板上. 制备了的微生物文库被加到板上. 只有与目标分子紧密结合的微生物能够存留, 其余的都到了溶液中. 一段时间后, 除去没有结合的微生物, 然后以恰当的溶液洗涤弱结合或偶然结合的微生物. 目标分子结合的紧密程度决定了洗涤过程. 仍然存留的微生物可通过加入低pH或高浓度的目标分子而分离, 通过繁殖增加数量. 有时结合程度太强时分离它们而不致死细菌是困难的. 如果它是噬菌体, 而不是分离, 那就可以直接感染宿主细胞. 由于存在偶然未考虑的微生物种类, 第一次增殖的微生物直接进行重复筛选-增殖的过程以增加含有活性蛋白质的克隆体数量. 最后在低浓度下培养后, 每个克隆体得以分离. 通常选出几十个克隆体用于DNA序列分析. 如果从DNA信息得到的肽结构是可识别的而且大多数克隆体表现出相同的肽序列, 那就意味着成功了. 然而, 因为蛋白质可能对多种克隆体表现出毒性而且 DNA表达率能改变, 总是有一种可能性存在, 即克隆体增殖速度和表达效果均好于期望的筛选结果. 因此, 通过测量肽合成及键强度的证实步骤是必需的. 即使在被获得的DNA或肽中有重要的药物候选者, 它们也将在蛋白质激酶的作用下在体内迅速水解. 因此, 用具有相似肽结构的人造分子取代它们是必需的, 尽管这个步骤非常困难. 几年以前麻州理工学院的Peter Kim小组报道了一个有趣的实验, 他们用D-氨基酸取代其光学异构体天然L-氨基酸以降低水解率. 他们使用人造D-氨基酸作为靶分子, 用天然L-氨基酸筛选发现了高亲合的肽. 因为真正的受体是由L-氨基酸构成, 也即其镜像, 于是他们合成了已发现的L-肽的镜像, 即D-肽. 当D-肽被用于天然受体的时候, 它仍然表现了高活性. Perter Kim, 过去一直作HIV感染途径和治疗方面的工作, 现在正在Merk工作, 他是在Sung-ho Kim博士那一代之后最强有力的韩国诺贝尔奖候选人. ::::DNA, RNA 文库:::: 微生物蛋白质文库技术基本基于活体生物的自我再生能力. 那就是, 通过放大(饲养)少量已获得的候选分子来提高纯度和数量. 蛋白质是活体生物利用遗传信息的产物这一点也非常重要. 如果用DNA或RNA而不是蛋白质可以吗? PCR(DNA扩增技术)的发展, 使得自90年代早期以来使用核酸做文库成为可能. 因为DNA和RNA是由4种单位构成, 10长度的低聚体有410(约106=一百万)种, 20长度的低聚体文库有约1012种. 通过使用自动固相DNA合成机, 序列中的5"端和3"端被修饰, A, T, C和G随机放置, 每个约占序列的25%. 当有了一条链后, 就通过使用酶或PCR扩增复制它. 通常约1014-15个分子被合成和使用, 但是时常存在大约40个随机引入位(1024种), 有时他们以不完全文库系列开始. 对于DNA文库, 基本使用DNA本身, 而对于RNA文库, 需要T7 RNA 聚合酶转录. 制备的文库按照与靶分子结合程度筛选;用PCR扩增DNA, 用RT-PCR扩增RNA. 蛋白质, 不同的核酸, 糖类和小分子都可用作靶分子. 放大了的文库的筛选和扩增过程被重复直到1014-15 的起始数量降至几百, 然后分析获得的候选分子的序列, 并且测量每个的亲合强度. SELEX <http://web.uvic.ca/sciweb/Courses/B300/B300.Outline.html> 这些已获得的DNA和RNA叫做智能配体(aptamers), 它们表现出对蛋白质靶分子的强亲合性, 高1nM Kd. 智能配体抑制靶分子在体内的功能, 但是它很快地被体内的核酸酶破坏. 为了解决这个问题, 文库的一些部份用人造核酸取代以增强对核酸酶的抵抗性. 在他们之中, 核酶(ribozymes), 一种可以催化其它化学反应的催化剂, 也被发现而且可以确认RNA界假说. 参考资料:http://www.nyu.edu/classes/ytchang/book/c006.html

基因工程检测MRNA能叫DNA分子探针么

基因工程检测MRNA时所用的探针也是目的基因单链制成的,若目的基因转录成功,则转录的mRNA能够与该探针完全杂交(即碱基互补配对),当然可以叫做DNA分子探针(或基因探针)

基因探针是DNA还是RNA,是单链还是双链

……作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,……基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(dna或rna)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基基因探针因的一部分;可以是dna本身,也可以是由之转录而来的rna。

基因探针是DNA还是RNA,是单链还是双链

基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。

DNA复制与RNA转录各有何特点

一、DNA复制的特点1、需要引物:DNA聚合酶必须以一段具有3"端自由羟基(3"-OH)的RNA作为引物,才能开始聚合子代DNA链。RNA引物的大小,在原核生物中通常为50~100个核苷酸,而在真核生物中约为10个核苷酸。2、半保留复制:是以最开始的双链分子中的一条作为模板进行DNA复制,产生两个完全一致的DNA分子。3、DNA复制不能沿滞后链进行:从头到尾的DNA链,直到已经复制了足够长度的DNA分子,否则DNA复制不会继续沿着模本链进行复制,DNA复制于是从新合成复制叉处分开。4、双向复制:DNA复制时,以复制起始点为中心,向两个方向进行复制。但在低等生物中,也可进行单向复制。5、有一定的复制起始点:DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段,即复制起始点(复制子)。在原核生物中,复制起始点通常为一个,而在真核生物中则为多个。二、DNA转录的特点1、以特定的DNA片段作为模板:转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。2、转录产生引物:在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。3、转录仅以DNA的一条链作为模板:被选为模板的单链叫模板链,又称无义链;另一条单链叫非模板链,又称编码链、有义链、信息链。扩展资料DNA复制与转录的区别:1、过程不同复制的过程:DNA解旋,以两条链为模板,按碱基互补配对原则,合成两条子链,子链与对应母链螺旋化。转录的过程:DNA解旋,以其一条链为模板,按碱基互补配对原则,形成mRNA单链,进入细胞质与核糖体结合。2、发生的过程不同对具有细胞结构的生物而言,DNA复制发生于细胞分裂过程中,转录则发生于细胞分裂、分化等过程。3、形式不同DNA复制是边解旋边复制,半保留复制。转录是边解旋边转录,DNA双链全保留。转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程,并不是一个DNA分子通过转录可生成一个RNA分子,实际上,转录是以基因的一条链为模板合成RNA的过程。参考资料来源:百度百科-DNA复制参考资料来源:百度百科-转录

能被称作转录形成的RNA只是信使RNA吗

还有rRNA和tRNA都是通过转录合成的,还有病毒RNA的合成转录(Transcription)是蛋白质生物合成的第一步,也是tRNA和rRNA的合成步骤。转录 (transcription)是以DNA中的一条单链为模板,游离碱基为原料,在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。与DNA的复制相比,有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取被复制为mRNA,就是说一特定的DNA片断作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂的合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物。在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。RNA聚合酶合成RNA时不需引物,但无校正功能。

外显子、内含子、mRNA、CDS、ORF的区别与联系

更多内容,请访问我的 个人博客 。 mRNA(messenger RNA,信使RNA)信使 RNA 是由 DNA 经 hnRNA 剪接而成,携带遗传信息的能指导蛋白合成的一类单链核糖核酸。 基因 DNA 分为编码区和非编码区,编码区包含外显子和内含子,一般非编码区具有基因表达的调控功能,如启动子在非编码区。编码区则转录为 mRNA 并最终翻译成蛋白质。 外显子和内含子都被转录到 mRNA 前体 hnRNA 中,当 hnRNA 进行剪接变为成熟的 mRNA 时,内含子被切除,而外显子保留。实际上真正编码蛋白质的是外显子,而内含子则无编码功能。 内含子存在于DNA 中,在转录的过程中,DNA 上的内含子也会被转录到前体 RNA 中,但前体 RNA 上的内含子会在 RNA 离开细胞核进行翻译前被切除。 Sequencecodingfor aminoacids in protein 蛋白质编码区 CDS 是 Codingsequence的缩写,是编码一段蛋白产物的序列,是结构基因组学术语。 开放读码框是从一个起始密码子开始到一个终止密码子结束的一段序列;不是所有读码框都能被表达出蛋白产物,或者能表达出占有优势或者能产生生物学功能的蛋白。 CDS,是编码一段蛋白产物的序列。 CDS 必定是一个 ORF 。但也可能包括很多 ORF 。 反之,每个 ORF 不一定都是 CDS 。 外显子与 CDS 区不是完全一致的,CDS 区一定属于外显子,但是外显子不一定是 CDS 区,也就是说外显子不一定都能翻译成蛋白的。 mRNA 包括 UTR 和 CDS !

为什么说RNA分子中,成熟区是外显子。

●外显子就是在成熟mRNA中保留下的部分,也就是说成熟mRNA对应于基因中的部分。 ●内含子是指在mRNA加工过程中被剪切掉的部分,在成熟mRNA中不存在的部分。 二者都是对于基因而言的,编码的部分为外显子,不编码的为内含子,内含子没有遗传效应。所谓mRNA就是信使mRNA,是将来可以翻译成蛋白质的一种核糖核酸。生物体的各种表型效应都是由于基因的最终产物蛋白质引起的。 虽然以前认为内含子是没有什么功能的,但现在的研究认为内含子可能有一定的功能,比如在mRNA加工过程中起帮助作用、可能对机体有一定的调控作用,并且内含子只是对一个特定的基因而言是它的内含子,此内含子对于其它的基因而言,也有可能是外显子或者外显子的一部分。

tRNA编码区

你有些概念混淆了,tRNA是不编码的,tRNA是none code的小分子RNA

mRNA上所有的密码子均来自编码区的转录么?有可能来自非编码区的转录么?

是的,均来自编码区的转录。不可能来自非编码区。————————基因分为:编码区,非编码区。编码区是指能够转录信使RNA的部分,它能够合成相应的蛋白质;而非编码区是不能够转录信使RNA的DNA结构,但是它能够调控遗传信息的表达。 真核生物的基因组成是编码区和非编码区,其中编码区是由外显子和内含子组成的,但是其中内含子又是非编码序列,所以说真核细胞基因结构中,非编码区和内含子是非编码序列 。 内含子属于编码区。含有内含子的基因能转录出前体RNA,再由内含子转录出来的部分进行自我切割,才得到成熟的mRNA,没有内含子也就没有自我切割。原核细胞只有编码区和非编码区!没有内含子和外显子之分。真核生物才有内含子和外显子。

基因中的编码区和非编码区都能够转录成RNA吗

非编码区不转录,主要起调控的作用。编码区都转录,转录之后剪切掉内含子序列。

mrna基因的编码区位于

“编码区可以转录mRNA,编码区位于基因上,基因位于DNA上,DNA是双链状,也就是说基因是双链状,也就是说编码区是双链状”你说的这些没有错,但编码区意思是可以转录mRNA的区段。也就是说只有这个区段上的基因才能转录,在转录之前,DNA必须先在解旋酶的作用下解螺旋,从而形成模板进行转录。

以mRNA为模板合成cDNA的酶是什么

  以mRNA为模板合成cDNA酶的是反转录酶。  反转录酶(也可写成逆转录酶)又称为依赖RNA的DNA聚合酶。1970年Temin等在致癌RNA病毒中发现了一种特殊的DNA聚合酶,该酶以RNA为模板,以dNTP为底物,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3"-OH末端上,根据碱基配对的原则,按5"-3"方向合成一条与RNA模板互补的DNA单链,这条DNA单链叫做互补DNA(complementaryDNA,CDNA)。  逆转录酶(M-MLV)从MoloneyMurineLeukemiaVirus分离出来,可用于合成第一链cDNA、制作cDNA探针、RNA转录、测序和RNA的逆转录反应。本酶是通过点突变使RNaseH活性缺失,所以它具有的DNA聚合酶的活性与野生型相同,同时其延伸能力也有显著提高。逆转录酶(M-MLV)一个活性单位定义为在37℃,10min条件下,使1nmol的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量。

RNA复制酶,逆转录酶存在于病毒中还是在宿主细胞中合成

RNA复制酶在宿主细胞中合成,逆转录酶是病毒中合成的。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在反转录酶的作用下,合成出互补的DNA(cDNA),由此可构建出cDNA文库,从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。病毒RNA进入宿主细胞后,可进行复制,即在RNA指导的RNA聚合酶催化进行RNA合成反应。RNA复制酶催化的合成反应是以RNA为模板,由5′向3′方向进行RNA链的合成。RNA复制酶缺乏校对功能的内切酶活性,因此RNA复制的错误率较高,RNA复制酶只是特异地对病毒的RNA起作用,而宿主细胞的RNA一般并不进行复制。扩展资料:多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。1、RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。2、RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子 。3、DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。参考资料来源:百度百科-逆转录酶参考资料来源:百度百科-RNA复制酶

转录酶的本质是蛋白质还是RNA?那逆转录酶呢?我混乱了!

转录酶和逆转录酶都是蛋白质.酶,绝大多是是由蛋白质构成的,但少数是由RNA构成的. 逆转录酶由于其执行的功能相当于转录的逆过程,所以有翻译为逆转录酶.而其催化进行的过程是转录的反方向,是从RNA到DNA,所以也有翻译为反转录酶的.

RNA通过逆转录酶逆转录成DNA的过程是怎样的啊?

转录过程 包括启动、延伸和终止。  启动 RNA聚合酶正确识别DNA模板上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)构成的三元起始复合物,转录即自此开始。DNA模板上的启动区域常含有TATAATG顺序,称普里布诺(Pribnow)盒或P盒。复合物中的核苷三磷酸一般为GTP,少数为ATP,因而原始转录产物的5′端通常为三磷酸鸟苷(pppG)或腺苷三磷酸(pppA)。真核DNA上的转录启动区域也有类似原核DNA的启动区结构,和在-30bp(即在酶和DNA结合点的上游30核苷酸处,常以—30表示,bp为碱基对的简写)附近也含有TATA结构,称霍格内斯(Hogness)盒或TATA盒。第一个核苷三磷酸与第二个核苷三磷酸缩合生成3′-5′磷酸二酯键后,则启动阶段结束,进入延伸阶段。  延伸 σ亚基脱离酶分子,留下的核心酶与DNA的结合变松,因而较容易继续往前移动。核心酶无模板专一性,能转录模板上的任何顺序,包括在转录后加工时待切除的居间顺序。脱离核心酶的σ亚基还可与另外的核心酶结合,参与另一转录过程。随着转录不断延伸,DNA双链顺次地被打开,并接受新来的碱基配对,合成新的磷酸二酯键后,核心酶向前移去,已使用过的模板重新关闭起来,恢复原来的双链结构。一般合成的RNA链对DNA模板具有高度的忠实性。RNA合成的速度,原核为25~50个核苷酸/秒,真核为45~100个核苷酸/秒。  终止 转录的终止包括停止延伸及释放RNA聚合酶和合成的RNA。在原核生物基因或操纵子的末端通常有一段终止序列即终止子;RNA合成就在这里终止。原核细胞转录终止需要一种终止因子ρ(四个亚基构成的蛋白质)的帮助。真核生物DNA上也可能有转录终止的信号。已知真核DNA转录单元的3′端均含富有AT的序列〔如AATAA(A)或ATTAA(A)等〕,在相隔0~30bp之后又出现TTTT顺序(通常是3~5个T),这些结构可能与转录终止或者与3′端添加多聚A顺序有关。

RNA逆转录到DNA需要什么酶

主要是逆转录酶,个别还需要RNA酶。逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一,需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。

用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗?

这个是不行的,需要用random primers来做反转录引物。oligo dT适合真核生物的mRNA的反转录,而这个 rRNA不同于mRNA,没有polyA尾巴,因此用oligo dT是不能反转录出rRNA的。反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(cDNA)。反转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有反转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。扩展资料实际上,用18S rRNA做内参,反转录RNA用Oligo dT,能够扩增出来时,对结果也不要表示怀疑.因为普通条件下的反转不会很纯粹,mRNA的含量在总RNA中只占5%,反转时不是仅有它被反转录,即使是rRNA也是可以部分反转成CDNA的。要不分离纯mRNA怎么要用试剂盒进行进行磁珠吸附呢。另外,没有反转的rRNA和tRNA如果没用RNA酶处理也是可以存在很长时间才会完全降解的。这样的18S rRNA做内参是不合适的,它的表达会隋时间推移降低的。

转录酶的本质是蛋白质还是RNA?那逆转录酶呢?我混乱了!

转录酶和逆转录酶都是蛋白质.酶,绝大多是是由蛋白质构成的,但少数是由RNA构成的. 逆转录酶由于其执行的功能相当于转录的逆过程,所以有翻译为逆转录酶.而其催化进行的过程是转录的反方向,是从RNA到DNA,所以也有翻译为反转录酶的.

dna聚合酶,rna聚合酶,反转录酶的区别

DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板,从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的共同特点是:(1)需要提供合成模板;(2)不能起始新的DNA链,必须要有引物提供3"-OH;(3)合成的方向都是5"→3"(4)除聚合DNA外还有其它功能。所有原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3"-OH上加核苷酸使链延伸,其速率为1000 Nt/min。加什么核苷酸是根据和模板链上的碱基互补的原则而定的。RNA聚合酶(RNA polymerase):以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。RNA聚合酶(RNA polymerase)的作用是转录RNA。有的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。如大肠杆菌RNA聚合酶有四条多肽链,另有一个促进新RNA分子合成的σ因子,因此它的组成的是α2ββσ。这种结构称为全酶(holoenzyme),除去了σ因子的酶称为核心酶。噬菌体RNA聚合酶则没有亚基真核生物的RNA聚合酶分三类。RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中,转录rRNA顺序。RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中,转录大多数基因,需要“TATA”框。RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中,转录很少几种基因如tRNA基因如5SrRNA基因。有些重复顺序如Alu顺序可能也由这种酶转录。上面提到的“TATA”框又称Goldberg –Hogness顺序,是RNA聚合酶Ⅱ的接触点,是这种酶的转录单位所特有的。它在真核生物的转录基因的5"端一侧,在转录起点上游20至30个核苷酸之间有一段富含AT的顺序。如以转录起始点为0,则在-33到27个核苷酸与-27至21核苷酸之间,有一个“TATA”框。一般是7个核苷酸。原核生物中也类似“TATA”框的结构。RNA聚合酶作用在“TATAAT”(Pribnow)盒和“TTGA-CA”框附近。 反转录酶:RNA指导的DNA聚合酶,具有三种酶活性,即RNA指导的DNA聚合酶,RNA酶,DNA指导的DNA聚合酶。在分子生物学技术中,作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。在基因工程中起作用。

求助:反转录后必须RNase H 酶消化RNA吗

在逆转录病毒复制过程中,降解RNA-DNA杂化链中的RNA,需要有逆转录病毒中具有RNase活性或被感染细胞中独立的RNase H催化。当然,在体外培养时,可直接用碱除去杂化双链中的RNA。

rna聚合酶和反转录酶分别作用于什么部位?是磷酸二酯键吗还是什么,要准确的!

都作用于五碳糖与磷酸基之间,使之形成磷酸二酯键是的

那些只含RNA病毒的RNA逆转录酶哪里来的?

同学,首先要理解,含有RNA病毒繁殖方式主要有以下几个:RNA病毒,一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶。然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RNA,最后病毒RNA和衣壳蛋白自我装配成成熟的病毒颗粒。这类病毒很多,如ssRNA噬菌体、脊髓灰质炎病毒、鼻病毒、TMV等。另一类ssRNA病毒,它们的复制特点是病毒颗粒中的ssRNA病毒为负链,进入寄主后不能直接作为mRNA,而是先以负链RNA为模板由转录酶转录出与负链RNA互补的RNA,再以这个互补RNA作为mRNA翻译出遗传密码所决定的蛋白质。这类病毒称之为负链非侵染型病毒,如滤泡性口腔炎病毒、流感病毒、副流感病毒、莴苣坏死黄化病毒等。最后,还有一类特殊的ssRNA病毒即反转录病毒。该类病毒通常引起人和动物的肿瘤,其中包括造成人免疫性缺陷症的艾滋病病毒、白血病病毒、肉瘤病毒等。在它们的髓核中携带反转录酶,能使RNA反向转录成DNA,丰富和发展了分子生物学的中心法则。它们的复制有其特有的特点,一是单链RNA的基因组必须反转录成双链DNA;二是随后这种DNA必须整合到细胞DNA中;三是整合状态长期持续下去并传给子代细胞,也可能转录RNA,生产子代病毒或使细胞转化;四是感染细胞不会死亡,分裂不停止。也就是说这类病毒的潜伏期很长,有时可以终身带毒而不发病。所以说,RNA病毒种类如此多,有的用不着逆转录酶,有的自带逆转录酶,有的则直接利用细胞内现成的逆转录酶。明白了吗?

以mRNA为模板合成cDNA的酶是 ( ) DNA连接酶 B. TaqDNA聚合酶 C. 末端转移酶 D. RNA酶 E. 逆转录酶

是逆转录酶。由于这一反应中的遗传信息的流动方向正好与绝大多数生物转录生成方向(即DNA模板转录生成RNA的方向)相反,所以此反应称为逆转录作用。逆转录酶具有三种酶活性:①RNA指导的DNA合成反应;②DNA指导的DNA合成的反应;③RNA的水解的反应。扩展资料:①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子 。③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。

RNA到DNA 逆转录中是否只能发生在含有逆转录酶的病毒中?

逆转录又称反转录,这一现象很常见。当然不是只能发生在病毒中。具体可百度百科“反转录酶”,是广泛存在的。但是RNA的自身复制这一现象目前来说只发现在病毒中

病毒RNA的反转录步骤

反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程,是DNA生物合成的一种特殊方式。反转录酶的作用是以dNTP为底物,以RNA为模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3′桹H末端上,按5′→3′方向,合成一条与RNA模板互补的DNA单链,这条DNA单链叫做互补DNA(complementaryDNA, cDNA),它与RNA模板形成RNADNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此,完成由RNA指导的DNA合成过程。

反转录RNA浓度如何统一

反转录前必须要测浓度,不同浓度的RNA反转录效率不同,并且试剂盒说明RNA量不要超过一定浓度。 不测浓度怎么知道是不是超过浓度限制。 一般来说,总RNA量相同,反转录后PCR内参基本平行,因此不需要测cDNA浓度。一般提取组织后测RNA的浓度,然后反转录的时候保证reaction mixture里面RNA的量是一样的。然后你反转录成了cDNA。这个时候不必要测浓度。因为反转录体系都是一样的,理论上讲(建议用multipipetide)生成的cDNA也是一样的。反转录RNA(Reverse Transcription,RT-PCR)又称为逆转录RNA。其原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。而获得目的基因或检测基因表达。使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。Money 鼠白血病病毒(MMLV)反转录酶:有强的聚合酶活性,RNA酶H活性相对较弱。最适作用温度为37℃。2. 禽成髓细胞瘤病毒(AMV)反转录酶:有强的聚合酶活性和RNA酶H活性。最适作用温度为42℃。3.Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜热微生物的热稳定性反转录酶:在Mn2 存在下,允许高温反转录RNA,以消除RNA模板的二级结构4.MMLV反转录酶的RNase H-突变体:商品名为SuperScript 此种酶较其它酶能多将更大部分的RNA转换成cDNA,这一特性允许从含二级结构的、低温反转录很困难的mRNA模板合成较长cDNA。

逆转录病毒是通过何种过程哪些酶的作用将rna整合到宿主细胞

首先要知道逆转录的定义:是以rna为模板,依靠逆转录酶的作用,以四种脱氧核苷三磷酸(dntp)为底物,产生dna链,又称为反转录。简单地说就是以rna为模板合成dna的过程,即rna指导下的dna合成。是rna病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。不是所有的病毒都在宿主细胞中进行逆转录,有些单链的rna病毒,在病毒rna聚合酶的作用下复制病毒rna,最后病毒rna和衣壳蛋白自我装配成成熟的病毒颗粒。比如单链的噬菌体、脊髓灰质炎病毒、鼻病毒。像你说的利用宿主细胞进行逆转录的病毒我们称为反转录病毒,比如艾滋病病毒,反转录病毒的复制首先要在反转录酶的作用下转录为双链的dna,然后这种dna会整合到细胞dna中,整合状态长期持续下去并传给子代细胞,也可能转录rna,生产子代病毒或使细胞转化。也就是说反转录病毒会利用宿主细胞的物质和能量进行病毒生物大分子(dna和蛋白质)的合成。希望对你有帮助,有不懂的再问我

DNA是遗传物质,那RNA是什么物质

RNA(核糖核酸),是存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一、组成的区别:1、RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶。2、DNA 分子巨大,由核苷酸组成。核苷酸的含氮碱基为A腺嘌呤、G鸟嘌呤、C胞嘧啶及T胸腺嘧啶;戊糖为脱氧核糖。二、分类的区别:1、RNA可分为:mRNA:在蛋白分子合成过程中,作为“信使”分子,将基因组DNA的遗传信息(即碱基排列顺序)传递至核糖体,使核糖体能够以其碱基排列顺序掺入互补配对的tRNA分子,进而合成正确的肽链,实现遗传信息向蛋白质分子的转化。tRNA:把氨基酸搬运到核糖体上,tRNA能根据mRNA的遗传密码,依次准确地将它携带的氨基酸,掺入正在合成的肽链中,实现肽链的延伸。与正在进行翻译的mRNA结合,而后rRNA将各个氨基酸残基通过肽键连接成肽链进而构成蛋白质分子。rRNA:一般与核糖体蛋白质结合在一起,形成核糖体。2、DNA可分为:单链DNA:大部分DNA以双螺旋结构存在,但一经热或碱处理就会变为单链状态。单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、碱基反应性质等方面都和双链DNA不同。闭环DNA:没有断口的双链环状DNA,亦称为超螺旋DNA。由于具有螺旋结构的双链各自闭合,结果使整个DNA分子进一步旋曲而形成三级结构。从细胞中提取出来的质粒或病毒DNA都含有闭环和开环这二种分子。模板DNA:可以是单链分子,也可以是双链分子,可以是线状分子,也可以是环状分子(线状分子比环状分子的扩增效果稍好)。互补DNA:构成基因的双链DNA分子用一条单链作为模板,转录产生与其序列互补的信使RNA分子,然后在反转录酶的作用下,合成一条与mRNA序列互补的单链DNA,最后再以单链DNA为模板合成另一条与其互补的单链DNA,两条互补的单链DNA分子组成一个双链cDNA分子。三、功能的区别:1、RNA的功能:mRNA是依据DNA序列转录而成的蛋白质合成模板;tRNA是mRNA上遗传密码的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的部分,而核糖体是蛋白质合成的机械。细胞中还有许多种类和功能不一的小型RNA,可调节基因表达。而其他如I、II型内含子、RNase P、HDV、核糖体RNA等等都有催化生化反应过程的活性,即具有酶的活性,这类RNA被称为核酶。2、DNA的功能:DNA有传递遗传信息的功能,而蛋白质则是由 DNA的指令合成的。鉴定亲子关系用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、毛发、唾液、口腔细胞等都可以用于用亲子鉴定,十分方便。DNA是人身体内细胞的原子物质。每个原子有46个染色体,另外,男性的精子细胞和女性的卵子,各有23个染色体,当精子和卵子结合的时候。这46个原子染色体就制造一个生命,因此,每人从生父处继承一半的分子物质,而另一半则从生母处获得。

请详细解释一下DNA与RNA

RNA与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链,二是它的碱基组成与DNA的不同,RNA没有碱基T(胸腺嘧啶),而有碱基U(尿嘧啶)。所以导致他们有以下性质上的不同。 1.两性解离:DNA无,只有酸解离,碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键)。RNA有,有PI。 2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团。 3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解。 4.显色反应: 鉴别DNA和RNA+浓HCl RNA ------→ 绿色化合物 DNA ------→ 蓝紫色化合物苔黑酚 二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们。 DNA和RNA的鉴别染色 利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。 5.溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚来沉淀RNA。 6.紫外吸收:核酸的λm=260nm,碱基展开程度越大,紫外吸收就越厉害。当A=1时,DNA:50ug/ml,RNA和单链DNA:40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。用A260/A280还可来表示核酸的纯度。 7.沉降速度:对于拓扑异构体(核苷酸数目相同的核酸),其沉降速度从达到小依次为:RNA ; 超螺旋DNA > 解链环状DNA ; 松弛环状DNA ; 线形DNA也就是在离心管中最上层是线形DNA,最下面是RNA。 8.电泳:核苷酸、核酸均可以进行电泳,泳动速度主要由分子大小来决定,因此,电泳是测定核酸分子量的好方法。 9.DNA分子量测定最直接的方法:用适当浓度的EB(溴嘧啶)染色DNA,可以将其他形式的DNA变成线形DNA,用电镜测出其长度,按B-DNA模型算出bp数,根据核苷酸的平均分子量就可计算出DNA的分子量。 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。 PCR技术简史 PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。 PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制,只是在试管中给 DNA的体外合成提供以致一种合适的条件---摸板DNA,寡核苷酸引物,DNA聚合酶,合适的缓冲体系,DNA变性、复性及延伸的温度与时间。 PCR的改进与完善 Mullis最初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的 Klenow片段,其缺点是:①Klenow酶不耐高温,90℃会变性失活,每次循环都要重新加。②引物链延伸反应在37℃下进行,容易发生模板和引物之 间的碱基错配,其PCR产物特异性较差,合成的DNA片段不均一。此种以Klenow酶催化的PCR技术虽较传统的基因扩增具备许多突出的优点,但由于 Klenow酶不耐热,在DNA模板进行热变性时,会导致此酶钝化,每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期,给PCR技术操作程序添了不少困难。这使得 PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。1988年初,Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR,其扩增的DNA片段很均一,真实性也较高,只有所期望的一种DNA片段。但每循环一次,仍需加入新酶。1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌(thermus aquaticus) 中提取到一种耐热DNA聚合酶。此酶具有以下特点:①耐高温,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的 60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效 率,增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和效率,因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶I Klenow片段区别,将此酶命名为Taq DNA多聚酶(Taq DNA Polymerase)。此酶的发现使PCR广泛的被应用。 PCR技术基本原理 PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引 物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。 PCR的反应动力学 PCR的三个反应步骤反复进行,使DNA扩增量呈指数上升。反应最终的DNA 扩增量可用Y=(1+X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数,X表示平(Y)均每次的扩增效率,n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%, 但在实际反应中平均效率达不到理论值。反应初期,靶序列DNA片段的增加呈指数形式,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的DNA片段不再呈指数增加,而进 入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”,这种效应称平台期数、PCR扩增效率及DNA聚合酶PCR的种类和活性及非特异性产物的竟争等因素。大多数情 况下,平台期的到来是不可避免的。 PCR扩增产物 可分为长产物片段和短产物片段两部分。短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5"端之间,是需要扩增的特定片段。短产物片段和长产物片段是由于引物所 结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应周期中,以两条互补的DNA为模板,引物是从3"端开始延伸,其5"端是固定的,3"端则没 有固定的止点,长短不一,这就是“长产物片段”。进入第二周期后,引物除与原始模板结合外,还要同新合成的链(即“长产物片段”)结合。引物在与新链结合 时,由于新链模板的5"端序列是固定的,这就等于这次延伸的片段3"端被固定了止点,保证了新片段的起点和止点都限定于引物扩增序列以内、形成长短一致的 “短产物片段”。不难看出“短产物片段”是按指数倍数增加,而“长产物片段”则以算术倍数增加,几乎可以忽略不计, 这使得PCR的反应产物不需要再纯化,就能保证足够纯DNA片段供分析与检测用。 PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3"端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3"端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是: 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。 ①变性温度与时间:变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下,93℃~94℃lmin足以使模板DNA变性,若低于93℃则 需延长时间,但温度不能过高,因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性,就会导致PCR失败。 ②退火(复性)温度与时间:退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃~60℃,可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度: Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T) 复性温度=Tm值-(5~10℃) 在Tm值允许范围内, 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合,提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60sec,足以使引物与模板之间完全结合。 ③延伸温度与时间:Taq DNA聚合酶的生物学活性: 70~80℃ 150核苷酸/S/酶分子 70℃ 60核苷酸/S/酶分子 55℃ 24核苷酸/S/酶分子 高于90℃时, DNA合成几乎不能进行。 PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够 的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。 循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。 PCR反应特点 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析 PCR产物是否为特异性扩增 ,其结果是否准确可靠,必须对其进行严格的分析与鉴定,才能得出正确的结论。PCR产物的分析,可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。 凝胶电泳分析:PCR产物电泳,EB溴乙锭染色紫外仪下观察,初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致,特别是多重PCR,应用多对引物,其产物片断都应符合预讦的大小,这是起码条件。 琼脂糖凝胶电泳: 通常应用1~2%的琼脂糖凝胶,供检测用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳:6~10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中,可用于科研及检测分析。 酶切分析:根据PCR产物中限制性内切酶的位点,用相应的酶切、电泳分离后,获得符合理论的片段,此法既能进行产物的鉴定,又能对靶基因分型,还能进行变异性研究。 分子杂交:分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据,也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。 Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。 斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。

RNA通过逆转录酶逆转录成DNA的过程是怎样的

转录过程包括启动、延伸和终止。启动RNA聚合酶正确识别DNA模板上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)构成的三元起始复合物,转录即自此开始。DNA模板上的启动区域常含有TATAATG顺序,称普里布诺(Pribnow)盒或P盒。复合物中的核苷三磷酸一般为GTP,少数为ATP,因而原始转录产物的5′端通常为三磷酸鸟苷(pppG)或腺苷三磷酸(pppA)。真核DNA上的转录启动区域也有类似原核DNA的启动区结构,和在-30bp(即在酶和DNA结合点的上游30核苷酸处,常以-30表示,bp为碱基对的简写)附近也含有TATA结构,称霍格内斯(Hogness)盒或TATA盒。第一个核苷三磷酸与第二个核苷三磷酸缩合生成3′-5′磷酸二酯键后,则启动阶段结束,进入延伸阶段。延伸σ亚基脱离酶分子,留下的核心酶与DNA的结合变松,因而较容易继续往前移动。核心酶无模板专一性,能转录模板上的任何顺序,包括在转录后加工时待切除的居间顺序。脱离核心酶的σ亚基还可与另外的核心酶结合,参与另一转录过程。随着转录不断延伸,DNA双链顺次地被打开,并接受新来的碱基配对,合成新的磷酸二酯键后,核心酶向前移去,已使用过的模板重新关闭起来,恢复原来的双链结构。一般合成的RNA链对DNA模板具有高度的忠实性。RNA合成的速度,原核为25~50个核苷酸/秒,真核为45~100个核苷酸/秒。终止转录的终止包括停止延伸及释放RNA聚合酶和合成的RNA。在原核生物基因或操纵子的末端通常有一段终止序列即终止子;RNA合成就在这里终止。原核细胞转录终止需要一种终止因子ρ(四个亚基构成的蛋白质)的帮助。真核生物DNA上也可能有转录终止的信号。已知真核DNA转录单元的3′端均含富有AT的序列〔如AATAA(A)或ATTAA(A)等〕,在相隔0~30bp之后又出现TTTT顺序(通常是3~5个T),这些结构可能与转录终止或者与3′端添加多聚A顺序有关。

RNA复制酶,逆转录酶存在于病毒中还是在宿主细胞中合成

RNA复制酶在宿主细胞中合成,逆转录酶是病毒中合成的。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在反转录酶的作用下,合成出互补的DNA(cDNA),由此可构建出cDNA文库,从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。病毒RNA进入宿主细胞后,可进行复制,即在RNA指导的RNA聚合酶催化进行RNA合成反应。RNA复制酶催化的合成反应是以RNA为模板,由5′向3′方向进行RNA链的合成。RNA复制酶缺乏校对功能的内切酶活性,因此RNA复制的错误率较高,RNA复制酶只是特异地对病毒的RNA起作用,而宿主细胞的RNA一般并不进行复制。扩展资料:多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性。1、RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高。2、RNaseH活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNaseH从RNA5′端水解掉RNA分子。3、DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。参考资料来源:百度百科-逆转录酶参考资料来源:百度百科-RNA复制酶

求问哪些酶的化学本质是RNA

1、端粒酶:是一种由催化蛋白和RNA模板组成的酶,在细胞中负责端粒的延长的一种酶,是基本的核蛋白逆转录酶,可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。 2、核酶:主要指一类具有催化功能的RNA,亦称RNA催化剂。自然界中已发现多种核酶,目前主要有四种核酶能用于反式切割靶RNA:四膜虫自身剪接内含子、大肠杆菌RNase P、锤头状核酶和发夹状核酶。 3、逆转录酶:是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。

有一条mRNA 我想要获得它的互补单链DNA 我该用RNA聚合酶还是反转录酶 为什么RNA聚合

肯定要用反转录酶.RNA聚合酶合成的原料是核糖核苷酸不能合成一条DNA单链

mrna需要逆转录酶吗

mrna需要逆转录酶,逆转录就是从mRNA到cDNA的过程,这个过程必须要用到逆转录酶,其是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。

常见病毒的核酸种类 常见病毒是DNA病毒 还是 RNA病毒 核酸种类都是什么??

这个大多数病毒都是DNA病毒,常见的要看具体是什么病毒,比如流感以及禽流感病毒就是RNA病毒,核酸就是核糖核酸.细菌病毒也就是噬菌体就是DNA病毒,核酸就是脱氧核糖核酸.艾滋病病毒也是RNA病毒.非典病毒即SARS病毒也是RNA病毒. 也就是说,烟草花叶病毒、HIV、SARS病毒、禽流感病毒、天花病毒等遗传物质是RNA,它们的遗传物质就是RNA,即核糖核酸; 而流感、禽流感病毒、噬菌体、乙肝病毒是DNA病毒,它们的遗传物质是DNA,即脱氧核糖核酸. 只有疯牛病病毒的遗传物质不是核酸,而是蛋白质,即朊蛋白.,7,大多数病毒是DNA的。 RNA病毒在高中主要有以下:艾滋病毒(HIV)、感冒病毒(包括禽流感病毒)、非典病毒、烟草花叶病毒。,2,一般病毒大多数是DNA,但是一些新型病毒,比如艾滋病,禽流感等都是RNA的,这也可以解释为什么新型病毒一变异,2,大部分病毒为DNA型,但是有些像乙肝病毒、禽流感病毒等为RNA病毒...,2,

DNA病毒和RNA病毒是如何分类的.急

以DNA为遗传物质的是DNA病毒,以RNA为遗传物质的是RNA病毒,其中DNA 又分为DNA单连病毒和双联病毒,RNA也分为单链和双链,单链又分为正意链病毒和反意链病毒。

高中生物DNA病毒和RNA病毒有哪些

RNA病毒:烟草花叶病毒、SRAS病毒、AIDS病毒DNA病毒:噬菌体

高中所学哪些病毒是DNA病毒,哪些是RNA病毒? 全面些 有什么记得技巧

DNA病毒很少,大多数的病毒还是RNA病毒,这样病毒更容易变异,高中学习的DNA病毒不多,乙肝病毒是比较常见的一个例子,然后还有噬菌体。RNA病毒就很多,HIV,烟草花叶病毒,SARS病毒,这些都是高中时常用的例子。记忆方面,我觉得DNA病毒的宿主倾向于动物,而RNA病毒更倾向于植物,个别不同的,只要特别记忆一下,应该不是太难。

DNA病毒与RNA病毒相比其遗传物质变异有什么特点

RNA与DNA最重要的区别一是RNA只有一条链,二是它的碱基组成与DNA的不同,RNA没有碱基T(胸腺嘧啶),而有碱基U(尿嘧啶)。所以导致他们有以下性质上的不同。 1.两性解离:DNA无,只有酸解离,碱基被屏蔽(在分子内部形成了H键)。RNA有,有PI。 2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子长度/直径决定,DNA为线状分子,RNA为线团。 3.碱的作用:DNA耐碱RNA易被碱水解。 4.显色反应: 鉴别DNA和RNA+浓HCl RNA ------→ 绿色化合物 DNA ------→ 蓝紫色化合物苔黑酚 二苯胺啡啶溴红(荧光染料)和溴嘧啶都可对DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的离心和电泳显色可用它们。 DNA和RNA的鉴别染色 利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。 它们在遗传物质变异中的特点有:结构决定的,首先是DNA螺旋双链结构。碱基由氢键连接。使它的热稳定性增强,抗环境变化能力增强。而且半保留复制严格遵循碱基互补配对,不易产生变异。自然选择也让它成为主要的遗传物质。RNA是单链,容易变异,不利于种群基因频率的继承。而且热不稳定。

你好 是DNA病毒多 还是RNA病毒多 为什么

在纯粹的数量上去讨论是没有意义的,但是在种类上去讨论,我们可以这么认为,dna的遗传稳定性是高于rna的这也是进化的结果,因此大部分的rna病毒被淘汰在进化的历史长河中,因此dna病毒是进化的主分枝,而rna病毒是个小分叉,种类上dna病毒肯定是多于rna病毒的。另外蛋白质病毒(朊病毒)至今只有一种。

常见的细菌病毒、DNA病毒、RNA病毒、蛋白质病毒有哪些?

高中生物还是大学生物啊?如果是高中生物以下是必须掌握的细菌病毒就是噬菌体RNA病毒:烟草花叶病毒车前草病毒流感病毒SARS病毒艾滋病病毒(HIV)顶长侈短侬的畴痊川花蛋白质病毒就是阮病毒疯牛病病毒

RNA病毒不是没有DNA吗

RNA病毒是没有DNA。有些RNA病毒复制时不需要DNA,病毒中的RNA进入寄主细胞后,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶。然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RNA,最后病毒RNA和衣壳蛋白自我装配成成熟的病毒颗粒。有些RNA病毒进入寄主细胞后不能直接作为mRNA,而是先以负链RNA为模板由转录酶转录出与负链RNA互补的RNA,再以这个互补RNA作为mRNA翻译出遗传密码所决定的蛋白质。还有一些RNA病毒称为反转录病毒,在病毒复制过程中需要DNA。该类病毒在它们的髓核中携带反转录酶,在进入寄主细胞后先利用反转录酶把RNA反向转录成DNA,再转录为mRNA,然后再翻译为相应的蛋白质。

病毒中DNA或RNA是双链还是单链

不一定不同的病毒并不相同,有一定的双链病毒,通常都比较大,不过很多病毒是单链的,出来之后,首先会先变成双链,然后开始大量复制和表达蛋白质,然后双链的DNA变成单链的装配到新的蛋白质外壳中,从寄主细胞释放到外面去。
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