什么是等位基因?什么是杂交?祥细点
等位基因指位于同源染色体相同位置上控制相对性状的基因,分为显性和隐性,杂交是指基因型不同的个体相互交配,但实际操作时则用不同品种的个体相互交配。
什么是等位基因,什么是非等位基因,帮忙解释一下
等位基因一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。非等位基因就是位于同源染色体的不同位置上或非同源染色体上的基因.这里相同字母(可以是大小写)就是等位基因,不同字母之间就是非等位基因(包括不在一条染色体上的)。望采纳哦~
为什么等位基因是一对的
等位基因表现的是不同形状,为什么错等位基因,是位于相同位置,控制同类形状的不同表现型的基因;比如控制耳垂的基因,有耳垂和无耳垂是一对等位基因;非等位基因就是不符合上述条件的基因,比如控制耳垂的基因和控制单眼皮还是双眼皮的基因就是非等位基因;两个控制双眼皮的基因也是非等位基因定义1:位于同源染色体的同一位置上的基因。定义2:单个基因座上一个基因的不同形式定义3:处于一对同源染色体的相同位置上的基因。定义4:在一对同源染色体的同一基因座上的两个不同形式的基因。通俗的说是同样生物同一形状的不同表现形式,如人的头发:直发和卷发、黄色和黑色。但黄色和卷发就不是等位等位基因中有显性和隐形之分,显性用大写,隐形用小写。用A来表示的话有AA/Aa/aa一对等位基因中只要有一条是显性,该形状是显性,无显性基因时该形状显为隐形及AA/Aa为显性形状如有耳垂,aa为隐形形状如无耳垂
B C 中,哪个是A基因的等位基因
C解析:等位基因(英语:allele),又称对偶基因,是染色体内的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸DNA序列,其在细胞有丝分裂时的染色体上的两个基因位点是对应排列的,故在早期细胞遗传学里称其为等位。在一个生物体里,某个基因的基因型是由该基因所拥有的一对等位基因所决定。例如在人和其它二倍体生物,也就是每条染色体都有两套的生物,其等位基因的两个位点决定了该基因的基因型。等位基因两个位点来自父辈和母辈的遗传,其基因型决定了生物的表现型。 生物的表现型由一对等位基因的一个位点决定的,称为显性基因, 而由两个位点决定的,则称为隐性基因。例如等位基因一个位点的突变,可产生癌基因,而两个位点的突变或丢失,则可导致肿瘤抑制基因,或抑癌基因的突变。这些基因的改变是肿瘤发生的分子基础。
等位基因是一个基因,还是两个基因?谢谢回答
初学遗传学可以认为是两个比如说控制毛色黑,白的基因为一对等位基因,黑为显性,用A表示,白为隐性,用a表示(完全显性)AA,,Aa为黑色aa为白色深入学习就会知道等位基因可能有三个以上比如说基因变异出黄色,显性顺序为黑,黄,白,设黄色用A1表示(完全显性)那么就会出现AA,AA1,Aa为黑色A1A1,A1a为黄色aa为白色
等位基因是什么?举例说明
位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。 等位基因(gene)是同一基因的另外“版本”也就是在减数分裂间期复制染色体。例如,控制卷舌运动的基因不止一个“版本”,这就解释了为什么一些人能够卷舌,而一些人却不能。有缺陷的基因版本与某些疾病有关,如囊性纤维化。值得注意的是,每个染色体(chromosome)都有一对“复制本”,一个来自父亲,一个来自母亲。这样,我们的大约3万个基因中的每一个都有两个“复制本”。这两个复制本可能相同(相同等位基因allele),也可能不同。下图显示的是一对染色体,上面的基因用不同颜色表示。在细胞分裂过程中,染色体的外观就是如此。如果比较两个染色体(男性与女性)上的相同部位的基因带,你会看到一些基因带是相同的,说明这两个等位基因是相同的;但有些基因带却不同,说明这两个“版本”(即等位基因)不同。这样就会产生变异或突变。
什么是等位基因,求详细解释
等位基因主要考在遗传的基因重组方面,就是基因控制性状,通过不同的性状表达,来考的。具体情况要具体分析,多做题目,就可以知道哪些性状是显性还是隐性控制。等位基因(allele又作allelomorph)一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。它可能出现在染色体某特定座位上的两个或多个基因中的一个。摩根学派在其早期的发现中特别使他们感到奇怪的是相邻的基因一般似乎在功能上彼此无关,各行其是。影响眼睛颜色、翅脉形成、刚毛形成、体免等等的基因都可能彼此相邻而处。具有非常相似效应的“基因”一般都仅仅不过是单个基因的等位基因。等位基因(allele):位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。 例如,人类RH血型基因的座位是在1号染色体短臂的3区5带,位于两条1号染色体相同座位的Rh的RH就是一对等位基因。 在一个群体内,同源染色体的某个相同座位上的等位基因超过2个以上时,就称作复等位基因。例如,人类 ABO 血型基因座位是在9号染色体长臂的末端,在这个座位上的等位基因, 就人类来说,有IA、IB、i三个基因,因此人类的 ABO血型是由3个复等位基因决定的。但就一个具体人类来说,决定 ABO 血型的一对等位基因, 是A、B、O三个基因中的两个,即IAIA、IBIB、IAIB、ii、IAi、IBi当一个生物体带有一对完全相同的等位基因时,则该生物体就该基因而言是纯合的(homozygous)或可称纯种(true-breeding);反之,如果一对等位基因不相同,则该生物体是杂合的(heterozygous)或可称杂种(hybrid)。等位基因各自编码蛋白质产物,决定某一性状,并可因突变而失去功能。
什么是等位基因,什么是非等位基因?
等位基因(allele),又称对偶基因,是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。大部分时候是脱氧核糖核酸序列,有的时候也被用来形容非基因序列。它可能出现在染色体某特定位置上的两个或多个基因中的一个。非等位基因就是位于同源染色体的不同位置上或非同源染色体上的基因,如:高茎基因D与红花基因C。扩展资料在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。等位基因(gene)是同一基因的另外“版本”。例如,控制卷舌运动的基因不止一个“版本”,这就解释了为什么一些人能够卷舌,而一些人却不能。有缺陷的基因版本与某些疾病有关,如囊性纤维化。值得注意的是,每个染色体(chromosome)都有一对“复制本”,一个来自父亲,一个来自母亲。参考资料来源:百度百科-等位基因参考资料来源:百度百科-非等位基因
等位基因和相同基因的区别
等位基因是两个互相配对的染色体相同位置的基因,控制同一个形状,相同基因是更高的一级,他把等位基因包括在内,基因相同,其等位基因肯定一样的是针对不同的生物个体说得
等位基因是什么举例说明
等位基因介绍:一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。它可能出现在染色体某特定座位上的两个或多个基因中的一个。若一个座位上的基因以两个以上的状态存在,便称为复等位基因。若成对的等位基因中两个成员完全相同,则该个体对此性状来说成为纯合子。若两个等位基因各不相同,则该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。 举例:决定血型的基因,有A、B、I。如果含A和B,那么血型就是AB;如果含有AA,血型就是A。
等位基因是什么?
等位基因的概念是:同源染色体上的同一位置共同控制同一性状的不同表现的一对基因。举例说说A控制单眼皮a控制双眼皮A和a互为等位基因
等位基因
等位基因是位于一对同源染色体上,占有相基因座的一对基因,它控制一对相对性状,就是说等位基因是两个基因,分别位于两条同源染色体的相同位置上,而且他们控制的性状是同一个,比如都控制眼色、花色等。等位基因可以是两个,也可以是很多。很多叫做复等位基因(具体见参考网站),比如某基因a控制眼色(这只是假设),a1控制的是红色,a2控制的是蓝色,a3控制黑色等等。还有拟等位因,见参考。
什么是等位基因
等位基因(allele又作allelomorph)一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。它可能出现在染色体某特定座位上的两个或多个基因中的一个。若一个 染色体上的等位基因座位上的基因以两个以上的状态存在,便称为复等位基因。若成对的等位基因中两个成员完全相同,则该个体对此性状来说成为纯合子。若两个等位基因各不相同,则该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。某些成对基因的两个成员为共显性的,即彼此间没有显性和隐性的关系。例如人类的ABO血型系统:AB血型的人有一个等位基因决定A,一个等位基因决定B(既无A又无B等位基因的人的血型为O型)。多数性状由两个以上的等位基因决定。可存在着多样形式的等位基因,但减数分裂时只有两个等位基因附着于一定的基因座位上。有些性状由两个或多个基因座位决定。以上两种情况均使有关的等位基因数目增加。所有遗传性状均为等位基因相互作用的结果。突变、交叉及环境条件选择性地改变种群内部的表现型(也就相当于其等位基因)的频率。 以上来自《大英百科全书中文版》 allele 等位基因条。国内个别教材上D和D,d和d不是等位基因的说法是错误的。错误在于,没有理解所谓等位基因是多个基因中的一个,而是从中文字面上望文生义,想当然的认为只有两个基因,才能相互之间叫做等位基因,所以才会有D和D是不是等位基因的问题。而且更进一步认为,只有D和d才能相互之间叫做等位基因,这就更不对了。(注:国内高中课本必修二课本将等位基因定义为:控制一对相对性状的基因。而由于D与D不是控制相对性状的基因所以不能称作等位基因.) 在一个个体里,某个基因的基因型是由该基因所拥有的一组等位基因所决定。例如,二倍体生物,也就是每条染色体都有两套的生物,两个等位基因决定了该基因的基因型。 位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。靠等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。
等位基因
呵呵,楼主真可爱。 等位基因:位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。 不是数的。 因为一般的细胞都是二倍体,即有两个染色体组。所以,控制某一性状的基因就有两个,即位于一对同源染色体(一条来自父本,一条来自母本)上。 简单地说,等位基因就是位于一对同源染色体上相对等的位置上的两个基因。 注意: D和d,是一对等位基因,控制甲的某一种性状。 R和r,是一对等位基因,控制乙的某一种性状;Y和y,是乙的另一对等位基因,控制乙的另一种性状。 ————————————————————————————————————————————————————————————————————————————— 回答补充: 楼主,你误解了等位基因的概念。 等位基因:位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。 一定要注意:等位基因是控制“一种”性状。 乙细胞核,当然不是具有4个等位基因。 因为,R和r、Y和y分别控制两种性状,不是一种性状。 比如在豌豆中,R和r控制种子的圆皱(R,圆形;r,皱形);Y和y控制种皮的颜色(Y,种皮黄色;y,种皮绿色)。 另外,等位基因是针对哪一种性状来说的。 不能说:某某细胞核有几个等位基因。 因为,一个细胞核内的染色体上有很多基因,控制很多性状的表达。 一般,体细胞都是二倍体,所以控制某一性状的等位基因就只有2个。 希望这次,楼主能够彻底明白。
什么是等位基因
等位基因(allele):位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形式的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。等位基因主要特性:等位基因是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。大部分时候是脱氧核糖核酸列,有的时候也被用来形容非基因序列。等位基因(allele):位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。例如,人类RH血型基因的座位是在1号染色体短臂的3区5带,位于两条1号染色体相同座位的Rh的RH就是一对等位基因。在一个群体内,同源染色体的某个相同座位上的等位基因超过2个以上时,就称作复等位基因。例如,人类ABO血型基因座位是在9号染色体长臂的末端,在这个座位上的等位基因,就人类来说,有IA、IB、i三个基因,因此人类的ABO血型是由3个复等位基因决定的。但就一个具体人类来说,决定ABO血型的一对等位基因,是A、B、O三个基因中的两个,即IAIA、IBIB、IAIB、ii、IAi、IBi当一个生物体带有一对完全相同的等位基因时,则该生物体就该基因而言是纯合的(homozygous)或可称纯种(true-breeding);反之,如果一对等位基因不相同,则该生物体是杂合的(heterozygous)或可称杂种(hybrid)。等位基因各自编码蛋白质产物,决定某一性状,并可因突变而失去功能。参考资料:等位基因
等位基因是指
等位基因一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。它可能出现在染色体某特定位置上的两个或多个基因中的一个。若一个染色体上的等位基因位置上的基因以两个以上的状态存在,便称为复等位基因。若成对的等位基因中两个成员完全相同,则该个体对此性状来说成为纯合子。若两个等位基因各不相同,则该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。某些成对基因的两个成员为共显性的,即彼此间没有显性和隐性的关系。例如人类的ABO血型系统:AB血型的人有一个等位基因决定A,一个等位基因决定B(既无A又无B等位基因的人的血型为O型)。参阅dominance及recessiveness。多数性状由两个以上的等位基因决定。可存在着多样形式的等位基因,但减数分裂时只有两个等位基因附着于一定的基因位置上。有些性状由两个或多个基因位置决定。以上两种情况均使有关的等位基因数目增加。所有遗传性状均为等位基因相互作用的结果。突变、交叉及环境条件选择性地改变种群内部的表现型(也就相当于其等位基因)的频率。
生物:什么是等位基因?详细!
位于同源染色体的同一位置上的基因. 简单来说就是这样 AaBb中A和a 或 B和b 就叫等位基因 A和B 或A和b 或 a和B 或 a和b叫非等位基因 细说呢就是:我们先铺垫一些基本概念哈~生物的形态、结构、生理特征称为性状,比如人的眼睑形态就是一种性状,这种性状有不同的表现形式:单眼皮、双眼皮,其中双眼皮为显性,单眼皮为隐性.我们把它们称为相对性状(其概念是同种生物同一性状的不同表现类型).性状又是由基因控制的,控制显性性状的为显性基因(用大写字母,如A),控制隐性性状的为隐性基因(用小写字母,如a),基因在体细胞中成对存在,所以一个个体的基因型就有:AA,Aa,aa.A和a就是一对等位基因.它们的定义为:同源染色体的相同位置上,控制相对性状的一对基因.
什么基因是等位基因?
位于一对同源染色体的相同位置上,控制相对性状的一对基因。如图,A与a,B与b,D与d均为等位基因。A与B,b,D,d,均不是等位基因。假如a换成A,A与A就是位于同源染色体上的相同基因。
什么是相同基因,什么是等位基因
1、同一基因座可能有的全部基因称为等位基因 是指位于一对同源染色体某一座位上所具有的不同形式的基因(如基因A与a),它们影响着同一相对形状的形成. 关于等位基因新教材的定义是:“等位基因是指在同源染色体的某一位点上所具有的不同形式的基因如基因A与基因a 复等位基因(multiple alleles) 同源染色体上占有同一基因座的两个以上的等位基因.在二倍体生物的个体中,每一基因座上只有两个等位基因.但在生物群体中,等位基因的成员可以在两个以上,甚至多到几十个.这样,在同一基因座上的许多不同的等位基因就构成了一组复等位基因,其作用相似,都影响同一器官或组织的形状和性质.复等位基因来源于某基因座上某个野生型等位基因的不同方向的突变.通常用1个英文字母作为该基因座的基本符号,不同的等位基因就在字母的右上方作不同的标记,字母的大、小写则表示该基因的显隐性. 2如同A与A为相同基因
基因突变为什么产生的是等位基因
基因突变一般是指在基因尺度上的DNA序列的变化,用来区分染色体突变。 一般基因突变会包括少数碱基对的突变,或者一段或几段序列的插入或者删除,而这些突变之后,原有基因的绝大部分序列并没有变化,因此原先在一对染色体上的配对基因仍然能够配对和同源重组。 我们一般上把能否发生同源重组,即在染色体水平上,两个基因所在的染色体区域能否配对作为是否是等位基因的标准。 因此基因突变以后,产生了新的基因,该基因与原基因所在的相对另一条染色体上的基因仍能配对,互称等位基因。
在生物学上什么叫一对等位基因?并举例说明
控制生物体的一对相对形状的基因叫等位基因例如:人有酒窝由基因A控制,没有酒窝由基因a控制,那么A与a就是一对等位基因!人有耳垂由基因B控制,没有耳垂由基因b控制,那么B与b就是一对等位基因!
等位基因和相同基因
问题一:相同基因是否属于等位基因 等位基因是指在一对同源染色体上,占有相同座位的一对基因,它控制一对相对性状。例如,人类RH血型基因的座位是在1号染色体短臂的3区5带,位于两条1号染色体相同座位的Rh的RH就是一对等位基因。 在一个群体内,同源染色体的某个相同座位上的等位基因超过2个以上时,就称作复等位基因。例如,人类 ABO 血型基因座位是在9号染色体长臂的末端,在这个座位上的等位基因, 就人类来说,有A、B、O三个基因,因此人类的 ABO血型是由3个复等位基因决定的。但就一个具体人类来说,决定 ABO 血型的一对等位基因, 是A、B、O三个基因中的两个,即AA、BB、OO、AO、BO、AB。 问题二:等位基因`相同基因有何区别,如何区分 等位基因与非等位基因的区别如下: 非等位基因就是位于同源染色体的不同位置上或非同源染色体上的基因,等位基因是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。 控制同一性状的为等位基因,如人的身高,若控制高的基因为显,则此人长得高,若没有此基因,则此人身高由控制矮的隐性基因控制,于是长得矮。非等位基因则控制不同性状,如狗毛的长短和狗毛的颜色。 等位基因,分别位于一对同源染色体上 相同位置的一对基因.非等位基因,不同位置上的两个或以上的基因. 等位基因 :位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因 (注意:是一对同源染色体,而不是同一同源染色体,它位于不同染色体上!!!!!) 相同基因是指基因所包含的遗传信息相同,比如任何染色体或者DNA上的相同DAN片段,就是一个基因的多个拷贝
等位基因结构上的区别
1.等位基因的根本区别是脱氧核苷酸排列顺序不同的原因:1)等位基因是指:同源染色体上,相同位置,控制相对性状的一对基因。如A和a基因互为等位基因。2)基因是指:是具有遗传效应的DNA片段。基因的基本组成单位是4种脱氧核苷酸,脱氧核苷酸排列顺序不同,则基因不同。所以,等位基因的根本区别是脱氧核苷酸排列顺序不同。2.等位基因上的遗传信息不相同。1)遗传信息是指:基因中的碱基排列顺序(或脱氧核苷酸的排列顺序)。2)等位基因如A和a基因,A为显性基因,a为隐性基因,二者的碱基排列顺序是不同的。所以,等位基因上的遗传信息不相同。
相同位置一定是等位基因吗
相同的基因不是等位基因:我们之所以称A(a)为等位基因,这是对应于a(A)而言的,而A不是由a突变而来的,更不是a的另一种表现形式。等位基因也有复等位基因,如控制ABO血型系统遗传的基因。出现两个以上基因的原因,是由于一个基因位点上发生过若干次突变。所以,理解等位基因不能简单地从字面上去认识,应该明确它是一个特指的概念。同上所述,Dd、Tt是等位基因;而DD、TT或dd、tt都不是“等位基因”,应称为相同的基因。等位基因概念:等位基因(allele又作allelomorph)一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。它可能出现在染色体某特定座位上的两个或多个基因中的一个。若一个座位上的基因以两个以上的状态存在,便称为复等位基因。若成对的等位基因中两个成员完全相同,则该个体对此性状来说成为纯合子。若两个等位基因各不相同,则该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。某些成对基因的两个成员为共显性的,即彼此间没有显性和隐性的关系。例如人类的ABO血型系统:AB血型的人有一个等位基因决定A,一个等位基因决定B(既无A又无B等位基因的人的血型为O型)。多数性状由两个以上的等位基因决定。可存在着多样形式的等位基因,但减数分裂时只有两个等位基因附着于一定的基因座位上。有些性状由两个或多个基因座位决定。以上两种情况均使有关的等位基因数目增加。所有遗传性状均为等位基因相互作用的结果。突变、交叉及环境条件选择性地改变种群内部的表现型(也就相当于其等位基因)的频率。
等位基因和同源染色体怎么区分
等位基因是同源染色体上位于相同的位置,且决定一对相对性状的基因。基因是具有遗传效应的DNA片段,由此可以看出一个DNA分子可以有许多个基因;而DNA主要分布在染色体上。所以说一条染色体上可以有多个基因。同源染色体一条来自父方,一条来自母方,在两条染色体的相同位置,所具有的基因往往决定一对相对性状,所以称为等位基因。简单地说,在父方的染色体上任意找到一个基因,在它的同源染色体上(来自母方)的相似位置一般会存在它的等位基因。
相同基因是否属于等位基因?
相同的基因不是等位基因:我们之所以称A(a)为等位基因,这是对应于a(A)而言的,而A不是由a突变而来的,更不是a的另一种表现形式。 等位基因也有复等位基因,如控制ABO血型系统遗传的基因。出现两个以上基因的原因,是由于一个基因位点上发生过若干次突变。所以,理解等位基因不能简单地从字面上去认识,应该明确它是一个特指的概念。 同上所述,Dd、Tt是等位基因;而DD、TT或dd、tt都不是“等位基因”,应称为相同的基因。等位基因概念:等位基因(allele又作allelomorph)一般指位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。它可能出现在染色体某特定座位上的两个或多个基因中的一个。若一个座位上的基因以两个以上的状态存在,便称为复等位基因。若成对的等位基因中两个成员完全相同,则该个体对此性状来说成为纯合子。若两个等位基因各不相同,则该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。某些成对基因的两个成员为共显性的,即彼此间没有显性和隐性的关系。例如人类的ABO血型系统:AB血型的人有一个等位基因决定A,一个等位基因决定B(既无A又无B等位基因的人的血型为O型)。多数性状由两个以上的等位基因决定。可存在着多样形式的等位基因,但减数分裂时只有两个等位基因附着于一定的基因座位上。有些性状由两个或多个基因座位决定。以上两种情况均使有关的等位基因数目增加。所有遗传性状均为等位基因相互作用的结果。突变、交叉及环境条件选择性地改变种群内部的表现型(也就相当于其等位基因)的频率。
相同基因是否属于等位基因
相同的基因不是等位基因等位基因位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。等位基因(gene)是同一基因的另外"版本"。例如,控制卷舌运动的基因不止一个"版本",这就解释了为什么一些人能够卷舌,而一些人却不能。有缺陷的基因版本与某些疾病有关,如囊性纤维化。值得注意的是,每个染色体(chromosome)都有一对"复制本",一个来自父亲,一个来自母亲。这样,我们的大约3万个基因中的每一个都有两个"复制本"。这两个复制本可能相同(相同等位基因allele),也可能不同。下图显示的是一对染色体,上面的基因用不同颜色表示。在细胞分裂过程中,染色体的外观就是如此。如果比较两个染色体(男性与女性)上的相同部位的基因带,你会看到一些基因带是相同的,说明这两个等位基因是相同的;但有些基因带却不同,说明这两个"版本"(即等位基因)不同。非等位基因之间也存在相互作用。位于同一染色体的不同基因座,或位于不同染色体上的非等位基因,都可能影响到同一性状。例如,某些性状只有同时存在若干个非等位基因时才会出现,当其中任何一个非等位基因发生改变时,都会导致产生同一种突变性状。这些非等位基因称为互补基因(complementary gene)。又如,有些基因本身没有可观察到的表型效应,但可以抑制其他非等位基因的活性,这就是抑制基因(inhibitor)。上位效应(epistasis)则指一对基因可以掩盖另一对非等位基因的显性效应的现象,这是非等位基因之间的掩盖作用,也可以称为异位效应。非等位基因之间的相互作用实质上是基因表达的顺式调控或反式调控的结果。
什么是等位基因?
等位基因(allele),又称对偶基因,是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。大部分时候是脱氧核糖核酸序列,有的时候也被用来形容非基因序列。它可能出现在染色体某特定位置上的两个或多个基因中的一个。非等位基因就是位于同源染色体的不同位置上或非同源染色体上的基因,如:高茎基因D与红花基因C。扩展资料在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。等位基因(gene)是同一基因的另外“版本”。例如,控制卷舌运动的基因不止一个“版本”,这就解释了为什么一些人能够卷舌,而一些人却不能。有缺陷的基因版本与某些疾病有关,如囊性纤维化。值得注意的是,每个染色体(chromosome)都有一对“复制本”,一个来自父亲,一个来自母亲。参考资料来源:百度百科-等位基因参考资料来源:百度百科-非等位基因
等位基因的概念
问题一:等位基因和非等位基因的概念。 定义:位于同源染色体上同一位置,控制相对性状的不同形态的基因。等位基因(gene)是同一基因的另外“版本”也就是在减数分裂间期复制染色体。 非等位基因就是位于同源染色体的不同位置上或非同源染色体上的基因 如:高茎基因D与红花基因C 问题二:等位基因频率的概念 等位基因频率是群体遗传学的术语,用来显示一个种群中基因的多样性,或者说是基因库的丰富程度。等位基因频率的定义如下:如果 1)一个染色体中存在某特定基因座,2)该基因座上有一个基因,3)一个种群中的每一个个体的体细胞都有n个该特定基因座(例如二倍体生物的细胞中有两个该特定基因座),4)该基因有等位基因或变种;那么等位基因频率为-------等位基因在这个种群中 所有该等位基因在特定基因座中 所占的百分比。举例来说,如果在某种群中一个等位基因的基因频率为20%,那么在种群的所有成员中,1/5的染色体带有那个等位基因,而其他4/5的染色体带有该等位基因的其他对应变种--可以是一种也可以是很多种。如人们熟悉的人的MN血型,它是由一对共显性等位基因M和N所决定,产生3种基因型M/M、M/N和N/N,而相应的表型是M、MN和N,而且比例是1/4M、1/2MN和1/4N。这个原理可以推广到一般群体内婚配,如以群体中MN表型(基因型)的具体样本数被所观察到总数相除即可得到(转换)相对频率数。 问题三:什么叫等位基因和非等位基因? 简单来说就是这样 AaBb中的 A和a 或 B和b 就叫等位基因. A和B 或 A和b 或 a和B 或 a和b 就叫非等位基因 问题四:什么是等位基因 我们先铺垫一些基本概念哈~生物的形态、结构、生理特征称为性状,比如人的眼睑形态就是一种性状,这种性状有不同的表现形式:单眼皮、双眼皮,其中双眼皮为显性,单眼皮为隐性。我们把它们称为相对性状(其概念是同种生物同一性状的不同表现类型)。性状又是由基因控制的,控制显性性状的为显性基因(用大写字母,如A),控制隐性性状的为隐性基因(用小写字母,如a),基因在体细胞中成对存在,所以一个个体的基因型就有:AA,Aa,aa。A和a就是一对等位基因。它们的定义为:同源染色体的相同位置上,控制相对性状的一对基因。 问题五:相同基因是否属于等位基因 等位基因是指在一对同源染色体上,占有相同座位的一对基因,它控制一对相对性状。例如,人类RH血型基因的座位是在1号染色体短臂的3区5带,位于两条1号染色体相同座位的Rh的RH就是一对等位基因。 在一个群体内,同源染色体的某个相同座位上的等位基因超过2个以上时,就称作复等位基因。例如,人类 ABO 血型基因座位是在9号染色体长臂的末端,在这个座位上的等位基因, 就人类来说,有A、B、O三个基因,因此人类的 ABO血型是由3个复等位基因决定的。但就一个具体人类来说,决定 ABO 血型的一对等位基因, 是A、B、O三个基因中的两个,即AA、BB、OO、AO、BO、AB。
等位基因是什么?任意两对等位基因一定能自由组合吗?
等位基因(对偶基因)指的是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸,即位于一对同源染色体的相同位置上控制着相对性状的一对基因。若一个座位上的基因以两个以上的状态存在则为复等位基因。等位基因大部分时候指的是脱氧核糖核酸序列,也可以被用来形容非基因序列。等位基因分为杂合子和纯合子,两个等位基因互不相同则为杂合子,相同则是纯合子。在杂合子中又有隐性基因和显性基因,它门能使生物表现出不同的性状。 等位基因是位于同一染色体上相同位置但控制不同性状的基因,等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。其中有拟等位基因和复等位基因。拟等位基因指的是表型效应相似,功能密切相关,在染色体上的位置又紧密连锁的基因。它们象是等位基因,而实际不是等位基因。非常靠近的基因之间的交换只能在极其大量的试验样品中才能观察到,由于它们的正常行为好像是等位基因,因此称为拟等位基因。复等位基因指的是同源染色体上同一位置上的等位基因的数目在两个以上的基因,任何一个二倍体个体只存在复等位基因中的二个不同的等位基因。在完全显性中,显性基因中纯合子和杂合子的表型相同。在不完显性中杂合子的表型是显性和隐性两种纯合子的中间状态。 等位基因之间存在着相互作用,当一个等位基因决定生物性状的作用强于另一等位基因并使生物只表现出其自身的性状时,就出现了显隐性关系。作用强的是显性,作用被掩盖而不能表现的为隐性。一对不同的等位基因各有自己特定的产物和表型,杂合子同时表现出双亲的特性,则是共显性。
什么是等位基因
等位基因,是指位于一对同源染色体相同位置上控制同一性状不同形态的基因。注释:同源染色体是在二倍体生物细胞中,形态、结构基本相同的染色体,并在减数第一次分裂(参考减数分裂)的四分体时期中彼此联会(若是三倍体及其他奇数倍体生物细胞,联会时会发生紊乱),最后分开到不同的生殖细胞(即精子、卵细胞)的一对染色体,在这一对染色体其中的一条来自母方,另一条来自父方。先了解一些基本概念:生物的形态、结构、生理特征称为性状,比如人的眼睑形态就是一种性状,这种性状有不同的表现形式:双重睑(俗称双眼皮)、单重睑(superiorepiblepharon上睑赘皮,俗称单眼皮),其中单重睑为隐性,双重睑为显性。我们把它们称为相对性状(其概念是同种生物同一性状的不同表现类型)。性状又是由基因控制的,控制显性性状的为显性基因(用大写字母,如A),控制隐性性状的为隐性基因(用小写字母,如a),基因在体细胞中成对存在,所以一个个体的基因型就有:AA,Aa,aa,不过也有发生了染色体变异导致有多个基因。A和a就可以表示一对等位基因。它们的定义为:同源染色体的相同位置上,控制相对性状的一对基因。复等位基因:若同源染色体上同一位置上的等位基因的数目在两个以上,就称为复等位基因。任何一个二倍体个体只存在复等位基因中的二个不同的等位基因。在完全显性中,显性基因中纯合子和杂合子的表型相同。在不完显性中杂合子的表型是显性和隐性两种纯合子的中间状态。这是由于杂合子中的一个基因无功能,而另一个基因存在剂量效应所致。完全显性中杂合体的表型是兼有显隐两种纯合子的表型。此是由于杂合子中一对等位基因都得到表达所致。比如决定人类ABO血型系统四种血型的基因IA、IB、i,每个人只能有这三个等位基因中的任意两个。1910年美国遗传学家摩尔根(T.H.Morgan)证明基因位于染色体上,并把位于同一条染色体上的基因称为连锁群。大多数真核生物的体细胞是二倍体细胞,细胞里的染色体是成对存在的,二者互为同源染色体;而生殖细胞里每种染色体都只有一条,所以是单倍体细胞。二倍体细胞每个基因也是成对存在的,每一对基因分别位于来自双亲的染色体的同一位置上,这个位置称为基因座。
什么是等位基因?
等位基因(英语:allele),又称对偶基因,是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。大部分时候是脱氧核糖核酸列,有的时候也被用来形容非基因序列。定义 位于同源染色体上同一位置,控制相对性状的不同形态的基因 所以D和D,d和d不是等位基因。 在一个个体里,某个基因的基因型是由该基因所拥有的一组等位基因所决定。例如,二倍体生物,也就是每条染色体都有两套的生物,两个等位基因决定了该基因的基因型。 位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。靠等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。 等位基因(gene)是同一基因的另外“版本”也就是在减数分裂间期复制染色体。例如,控制卷舌运动的基因不止一个“版本”,这就解释了为什么一些人能够卷舌,而一些人却不能。有缺陷的基因版本与某些疾病有关,如囊性纤维化。值得注意的是,每个染色体(chromosome)都有一对“复制本”,一个来自父亲,一个来自母亲。这样,我们的大约3万个基因中的每一个都有两个“复制本”。这两个复制本可能相同(相同等位基因allele),也可能不同。下图显示的是一对染色体,上面的基因用不同颜色表示。在细胞分裂过程中,染色体的外观就是如此。如果比较两个染色体(男性与女性)上的相同部位的基因带,你会看到一些基因带是相同的,说明这两个等位基因是相同的;但有些基因带却不同,说明这两个“版本”(即等位基因)不同。这样就会产生变异或突变。
等位基因
等位基因是指位于一对同源染色体相同位置上控制同一性状不同形态的基因。如果在同源染色体上的基因(或基因座)上的两个等位基因是相同的,那么该个体对此性状来说成为纯合子。如果等位基因不同,该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。等位基因的性质:等位基因里的性状是由基因控制,显性基因和隐性基因成对存在。等位基因还包括有拟等位基因和复等位基因。等位基因之间具有相互作用的关系,当一个等位基因决定生物性状的能力强于另一个,则表现为显性和隐形的关系。
什么叫等位基因?举个例子
等位基因是指位于一对同源染色体相同位置上控制同一性状不同形态的基因。如果在同源染色体上的基因(或基因座)上的两个等位基因是相同的,那么该个体对此性状来说成为纯合子。如果等位基因不同,该个体对该性状来说是杂合子。在杂合子配对中,显性等位基因使隐性等位基因的性状得不到表现。某些成对基因的两个成员为共显性的,即彼此间没有显性和隐性的关系。例如人类的ABO血型系统:AB血型的人有一个等位基因决定A,一个等位基因决定B(既无A又无B等位基因的人的血型为O型)。多数性状由两个以上的等位基因决定。扩展资料不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。例如,人类RH血型基因的座位是在1号染色体短臂的3区5带,位于两条1号染色体相同座位的Rh和RH就是一对等位基因。参考资料来源:百度百科-等位基因
等位基因的概念
等位基因:在一对同源染色体的同一位置上控制着相对性状的基因。非等位基因:位于非同源染色体上或同源染色体的不同位置上控制着不同性状的基因。位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。靠等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别。在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他形式(隐性的)表达得多。相对性状:同种生物同一性状的不同表现类型。显性性状:两个纯合亲本杂交,把杂种F1中显现出来的那个亲本性状叫作显性性状。隐性性状:两个纯合亲本杂交,把杂种F1中未显现出来的那个亲本性状叫作隐性性状。扩展资料基因的相互作用:告诉学生基因相互作用的两种形式----等位基因的相互作用和非等位基因的相互作用。等位基因的相互作用表现为显隐性关系,而非等位基因的相互作用表现统称为上位效应。等位基因之间存在相互作用。当一个等位基因决定生物性状的作用强于另一等位基因并使生物只表现出其自身的性状时,就出现了显隐性关系。作用强的是显性,作用被掩盖而不能表现的为隐性。一对呈显隐性关系的等位基因,显性完全掩盖隐性的是完全显性(complete dominance),两者相互作用而出现了介于两者之间的中间性状。显隐性关系中强调两点:一是显隐性关系的相对性,如致死基因、从性显性基因等,甚至于也可以说致癌基因和抑癌基因的概念是相对的;二是复等位基因即一对相对性状受受两个以上的等位基因控制。
等位基因出现的原因
等位基因是基因突变的结果。 无论是碱基对的改变、增添或者是缺失都使碱基对的排列顺序发生改变,从而改变了基因结构,形成了新的基因。 而这个基因原来是控制那个性状的将来还控制同一个性状,只不过使同一个性状具有了相对不同,也就是所谓的等...2.怎样确定两个基因是等位基因还是非等位基因答:位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因.不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化.等位基因控制相对性状的显隐性关系及遗传效应,可将等位基因区分为不同的类别.在个体中,等位基因的某个形式(显性的)可以比其他...3.老师,等位基因在图中的表示是怎样的?答:等位基因 (英语:allele),又称对偶基因,是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。大部分时候是脱氧核糖核酸序列,有的时候也被用来形容非基因序列。 概念:位于同源染色体上同一位置,控制相对性状的不同形态的基因. 等位基因(ge...4.等位基因表现的是不同形状,为什么错答:等位基因表现的是不同形状,为什么错 等位基因,是位于相同位置,控制同类形状的不同表现型的基因;比如控制耳垂的基因,有耳垂和无耳垂是一对等位基因;非等位基因就是不符合上述条件的基因,比如控制耳垂的基因和控制单眼皮还是双眼皮的基因就...5.【生物】如果红色是基因,那等位基因是怎样分布的...答:显然是(3)正确,(2)是位于姐妹染色单体上的相同基因,(1)啥也不是,没那种情况。等位基因是位于同源染色体的相同位置且控制相对性状的基因。6.什么叫等位基因?答:等位基因是指同源染色体上控制相对性状的一对基因。注意一下相对性状的概念,它是指某种性状的不同表现形式,如同样是颜色,可表现为黑和白两种形式,那么黑和白就是一对相对性状。A与a分别控制显性和隐性性状,所以它们是等位基因,而A与A、a与...7.“等位基因关系”什么意思答:首先你应该了解什么是等位基因,等位基因也就是决定生物性状的一对相关基因,比如平时做题经常看到的显性基因大A和隐性基因a,他们共同决定了生物后代的某一个特征比如(单眼皮或双眼皮),当然组合上就有三种可能了(AA,Aa,aa).突变改变了什么呢?基...8.“等位基因是同一基因的不同形式”是什么意思?问:“等位基因是同一基因的不同形式”这句话是什么意思?9.等位基因中的A和a是不是控制不同形状的啊?答:不是。 等位基因是控制相对性状的基因。 注意这里的相对性状其实是生物的某一性状的不同表现。10.等位基因和非等位基因定义是什么?谢谢.答:等位基因:位于一对同源染色体的相同位置上控制某一性状的不同形态的基因。不同的等位基因产生例如发色或血型等遗传特征的变化。 非等位基因:不在染色体同一位置,控制不同性状的基因。
一个基因可以有不止一个转录起始位点吗
基因 5" 末端虽只有一个转录起始位点, 但也有异常的基因,所以这个出现在选择题里就是错的
增强子往往距离基因转录起始位点较远,它是如何调控基因转录的?
增强子 作为调节基因的顺式元件。招募结合凡是因子,通过DNA 拓扑结构或简单LOOP环折叠到调节基因的启动子区,那些反式作用因子就将启动子DNA松弛同时招募更多转录激活因子及聚合酶!
RNA聚合酶III结合的类型III启动子是基因内启动子,是不是转录起始位点在上游,启动子本身也会被转录?
基因内的启动子,肯定就是位于转录起始位点上游咯,类型III启动子应该是基因外启动子吧,它本身不会转录的
一个基因是否有多个转录起始位点?谢谢
我觉得一个基因只有一个转录起点,因为基因的本质是具有遗传效应的DNA片段,一个DNA分子上有多个基因,这些基因可以使连续的,也可以是不连续的,但是每个基因的核苷酸应该是连续的,因此,应该只有一个启动子和一个终止子
如何查找一个基因的转录起始位点
你看自己做的那个物种有没有基因组序列,如果有在NCBI中先找到自己要做的基因,然后找到基因组序列,做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基,然后用软件分析,一般就找到转录起始位点了,转录起始位点也就在启动子位置。如果没有基因组序列,就比较麻烦,需要用染色体位移技术,先克隆到哪个序列,在用软件做分析。用软件分析后,还需要用实验验证,才能完全确定你需要的转录起始位点。
如何确定基因的转录起始位点
你看自己做的那个物种有没有基因组序列,如果有在NCBI中先找到自己要做的基因,然后找到基因组序列,做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基,然后用软件分析,一般就找到转录起始位点了,转录起始位点也就在启动子位置。如果没有基因组序列,就比较麻烦,需要用染色体位移技术,先克隆到哪个序列,在用软件做分析。用软件分析后,还需要用实验验证,才能完全确定你需要的转录起始位点。
如何确定基因的转录起始位点
你看自己做的那个物种有没有基因组序列,如果有在NCBI中先找到自己要做的基因,然后找到基因组序列,做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基,然后用软件分析,一般就找到转录起始位点了,转录起始位点也就在启动子位置。如果没有基因组序列,就比较麻烦,需要用染色体位移技术,先克隆到哪个序列,在用软件做分析。用软件分析后,还需要用实验验证,才能完全确定你需要的转录起始位点。
如何寻找一个基因的转录起始位点
你看自己做的那个物种有没有基因组序列,如果有在NCBI中先找到自己要做的基因,然后找到基因组序列,做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基,然后用软件分析,一般就找到转录起始位点了,转录起始位点也就在启动子位置。如果没有基因组序列,就比较麻烦,需要用染色体位移技术,先克隆到哪个序列,在用软件做分析。用软件分析后,还需要用实验验证,才能完全确定你需要的转录起始位点。
有谁知道怎么从ncbi上查找某个基因的转录起始位点
你看自己做的那个物种有没有基因组序列,如果有在NCBI中先找到自己要做的基因,然后找到基因组序列,做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基,然后用软件分析,一般就找到转录起始位点了,转录起始位点也就在启动子位置。如果没有基因组序列,就比较麻烦,需要用染色体位移技术,先克隆到哪个序列,在用软件做分析。用软件分析后,还需要用实验验证,才能完全确定你需要的转录起始位点。
环状dna怎么去找蛋白质编码基因起始位点
乙肝是一种由乙型肝炎病毒(HBV)感染机体后所引起的疾病,而HBV的基因组结构和编码蛋白包括如下:HBV基因组又称为HBVDNA,其结构独特而精密,由不完全的环状双链DNA组成,长的为负链,短的为正链。负链含3200个碱基,正链的长度可变。HBV基因组中4个开放读码框(ORF)均位于负链,分别为S区、C区、P区、X区。S区又分为前S1、前S2及S三个编码区,分别编码包膜上的前S1蛋白、前S2蛋白及HBsAg。前S蛋白有很强的免疫原性,HBV的嗜肝性主要由前S蛋白与肝细胞受体之间的识别和介导的。C区又分为前C基因和C基因,编码HBeAg和HBcAg。从前C基因开始编码的蛋白质经加工后分泌到细胞外即为HBeAg;从C基因开始编码的蛋白质为HBcAg。P区是最长的读码框架,编码一个大分子碱性多肽,分子量约为90KD,含有多种功能蛋白。X基因编码X蛋白,即HBxAg。HBxAg具有反式激活作用,可激活HBV本身的、其他病毒的或细胞的多种调控基因,促进HBV或其他病毒(如艾滋病病毒)的复制。
如何查找ars是dna复制起始位点,在酵母基因组中通常有数百个这样的序列
转录起始位点是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应DNA链上的碱基,通常为一个嘌呤(A或G)。一般转录起始位点的上游都有雨RNA聚合酶结合的启动子区域,是不是可以根据这个来大致确定一下你的转录起始位点。
怎么找基因的终止子,多聚a位点
已知基因的结构包括编码区和非编码区,编码区分上游和下游,真核生物基因的编码区还分外显子和内含子.即基因的结构是非编码区上游、编码区、非编码区的下游.在编码区的上游有启动子,其上含有转录起始位点(TSS)、在编码区先有起始密码子编码序列(ATG),最后有终止密码子编码序列(TGA)、在非编码区的下游有终止子,其上含有转录终止位点(TTS),所以在一个典型的基因内部,以上四种序列的排列顺序是TSS-ATG-TGA-TTS.
真核基因mRNA为多顺反子,有多个SD序列,多个起始位点.这句话对吗
不对,SD序列是原核基因中的,真核是TATA框等.予希493 2014-10-03追问:把真核基因换成原核基因是否正确 请问? 请具体说明激素与维生素的异同点追答:这句话把SD去掉,就对了。 原核单顺反,单起点。 激素、维生素、你按照性质、分别列出结构特点,脂水溶性、体内功能,代谢去向就差不多可以了。追问:第一个问题:可是书上有一章说原核的mRNA为多顺反子 另一章又是单顺反子 …… 第二个问题:具体区别是啥?追答:原核、单顺反子、你多查查权威书。正版的人卫版、高教版、科学版。 第二个问题方向给你了,自己查权威书。 动点脑子不吃亏。
如何克隆一个基因?具体说明
(一)DNA复制的引发 复制的引发阶段包括DNA复制起点双链解开,通过转录激活步骤合成RNA分子,RNA引物的合成,DNA聚合酶将第一个脱氧核苷酸加到引物RNA的3"-OH末端复制引发的关键步骤就是前导链DNA的合成,一旦前导链DNA的聚合作用开始,滞后链上的DNA合成也随着开始,在所有前导链开始聚合之前有一必需的步骤就是由RNA聚合酶(不是引物酶)沿滞后链模板转录一短的RNA分子。在有些DNA复制中,(如质粒ColE),该RNA分子经过加式成为DNA复制的引物。但是,在大部分DNA复制中,该RNA分子没有引物作用。它的作用似乎只是分开两条DNA链,暴露出某些特定序列以便引发体与之结合,在前导链模板DNA上开始合成RNA引物,这个过程称为转录激活,在前导链的复制引发过程中还需要其他一些蛋白质,如大肠杆菌的dnaA蛋白。这两种蛋白质可以和复制起点处DNA上高度保守的4个9bp长的序列结合,其具体功能尚不清楚。可能是这些蛋白质与DNA复制起点结合后能促进DNA聚合酶Ⅲ复合体的七种蛋白质在复制起点处装配成有功能的全酶。DNA复制开始时,DNA螺旋酶首先在复制起点处将双链DNA解开,通过转录激活合成的RNA分子也起分离两条DNA链的作用,然后单链DNA结合蛋白质结合在被解开的链上。由复制因子X(n蛋白),复制因子Y(n"蛋白),n"蛋白,i蛋白,dnaB蛋白和dnaC蛋白等6种蛋白质组成的引发前体(preprimosome),在单链DNA结合蛋白的作用下与单链DNA结合生成中间物,这是一种前引发过程。引发前体进一步与引物酶(primase)组装成引发体(primosome)。引发体可以在单链DNA上移动,在dnaB亚基的作用下识别DNA复制起点位置。首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物,然后,引发体在滞后链上沿5"→3"方向不停的移动(这是一种相对移动,也可能是滞后链模板在移动,见后),在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用,引发体中许多蛋白因子的功能尚不清楚。但是,这些成份必须协同工作才能使引发体在滞后链上移动,识别合适的引物合成位置,并将核苷酸在引发位置上聚合成RNA引物。由于引发体在滞后链模板上的移动方向与其合成引物的方向相反,所以在滞后链上所合成的RNA引物非常短,一般只有3-5个核苷酸长。而且,在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似的序列,表明引物酶要在DNA滞后链模板上比较特定的位置(序列)上才能合成RNA引物。 为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后,由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。(二)DNA链的延伸 DNA新生链的合成由DNA聚合酶Ⅲ所催化,然而,DNA必须由螺旋酶在复制叉处边移动边解开双链。这样就产生了一种拓扑学上的问题:由于DNA的解链,在DNA双链区势必产生正超螺旋,在环状DNA中更为明显,当达到一定程度后就会造成复制叉难再继续前进,从而终止DNA复制。但是,在细胞内DNA复制不会因出现拓扑学问题而停止。有两种机制可以防止这种现象发生:[1]DNA在生物细胞中本身就是超螺旋,当DNA解链而产生正超螺旋时,可以被原来存在的负超螺旋所中和;[2]DNA拓扑异构酶Ⅰ要以打开一条链,使正超螺旋状态转变成松弛状态,而DNA拓扑异构酶Ⅱ(旋转酶)可以在DNA解链前方不停地继续将负超螺旋引入双链DNA。这两种机制保证了无论是环状DNA还是开环DNA的复制顺利的解链,再由DNA聚合酶Ⅲ合成新的DNA链。前已述及DNA生长链的延伸主要由DNA聚合酶催化,该酶是由7种蛋白质(多肽)组成的聚合体,称为全酶。全酶中所有亚基对完成DNA复制都是必需的。α亚基具有聚合功能和5"→3"外切酶活性,ε亚基具有3"→5"外切酶活性。另外,全酶中还有ATP分子它是DNA聚合酶Ⅲ催化第一个脱氧核糖核苷酸连接在RNA引物上所必需的,其他亚基的功能尚不清楚。 在DNA复制叉处要能由两套DNA聚合酶Ⅲ在同一时间分别进行复制DNA前导链和滞后链。如果滞后链模板环绕DNA聚合酶Ⅲ全酶,并通过DNA聚合酶Ⅲ,然后再折向与未解链的双链DNA在同一方向上,则滞后链的合成可以和前导链的合成在同一方向上进行。 这样,当DNA聚合酶Ⅲ沿着滞后链模板移动时,由特异的引物酶催化合成的RNA引物即可以由DNA聚合酶Ⅲ所延伸。当合成的DNA链到达前一次合成的冈崎片段的位置时,滞后链模板及刚合成的冈崎片断便从DNA聚合酶Ⅲ上释放出来。这时,由于复制叉继续向前运动,便产生了又一段单链的滞后链模板,它重新环绕DNA聚合酶Ⅲ全酶,并通过DNA聚合酶Ⅲ开始合成新的滞后链冈崎片段。通过这样的机制,前导链的合成不会超过滞后链太多(最后只有一个冈崎片段的长度)。而且,这样引发体在DNA链上和DNA聚合酶Ⅲ以同一速度移动。 按上述DNA复制的机制,在复制叉附近,形成了以两套DNA聚合酶Ⅲ全酶分子、引发体和螺旋构成的类似核糖体大小的复合体,称为DNA复制体。复制体在DNA前导链模板和滞后链模板上移动时便合成了连续的DNA前导链和由许多冈崎片段组成的滞后链。在DNA合成延伸过程中主要是DNA聚合酶Ⅲ的作用。当冈崎片段形成后,DNA聚合酶Ⅰ通过其5"→3"外切酶活性切除冈崎片段上的RNA引物,同时,利用后一个冈崎片段作为引物由5"→3"合成DNA。最后两个冈崎片段由DNA连接酶将其接起来,形成完整的DNA滞后链。(三)DNA复制的终止 过去认为,DNA一旦复制开始,就会将该DNA分子全部复制完毕,才终止其DNA复制。但最近的实验表明,在DNA上也存在着复制终止位点,DNA复制将在复制终止位点处终止,并不一定等全部DNA合成完毕。但目前对复制终止位点的结构和功能了解甚少在NDA复制终止阶段令人困惑的一个问题是,线性DNA分子两端是如何完成其复制的?已知DNA复制都要有RNA引物参与。当RNA引物被切除后,中间所遗留的间隙由DNA聚合Ⅰ所填充。但是,在线性分子的两端以5"→3"为模板的滞后链的合成,其末端的RNA引物被切除后是无法被DNA聚合酶所填充的。 在研究T7DNA复制时,这个问题部分地得到了解决。T7DNA两端的DNA序列区有160bp长的序列完全相同。而且,在T7DNA复制时,产生的子代DNA分子不是一个单位T7DNA长度,而是许多单位长度的T7DNA首尾连接在一起。T7DNA两个子代DNA分子都会有一个3"端单链尾巴,两个子代DNA的3"端尾巴以互补结合形成两个单位T7DNA的线性连接。然后由DNA聚合酶Ⅰ填充和DNA连接酶连接后,继续复制便形成四个单位长度的T7DNA分子。这样复制下去,便可形成多个单位长度的T7DNA分子。这样的T7DNA分子可以被特异的内切酶切开,用DNA聚合酶填充与亲代DNA完全一样的双链T7DNA分子。 在研究痘病毒复制时,发现了线性DNA分子完成末端复制的第二种方式。痘病毒DNA在两端都形成发夹环状结构。DNA复制时,在线性分子中间的一个复制起点开始,双向进行,将发夹环状结构变成双链环状DNA。然后,在发夹的中央将不同DNA链切开,使DNA分子变性,双链分开。这样,在每个分子两端形成一个单链尾端要以自我互补,形成完整的发夹结构,与亲代DNA分子一样。在真核生物染色体线性DNA分子复制时,尚不清楚末端的复制过程是怎样进行的。也可能像痘病毒那样形成发夹结构而进行复制。但最近的实验表明,真核生物染色体末端DNA复制是由一种特殊的酶将一个新的末端DNA序列加在刚刚完成复制的DNA末端。这种机制首先在四膜虫中发现。该生物细胞的线性DNA分子末端有30-70拷贝的5"TTGGGG3"序列,该细胞中存在一种酶可以将TTGGGG序列加在事先已存在的单键DNA末端的TTGGGG序列上。这样有较长的末端单链DNA,可以被引物酶重新引发或其他的酶蛋白引发而合成RNA引物,并由DNA聚合酶将其变成双链DNA。这样就可以避免其DNA随着复制的不断进行而逐渐变短。 在环状DNA的复制的末端终止阶段则不存在上述问题。环状DNA复制到最后,由DNA拓扑异构酶Ⅱ切开双链DNA,将两个DNA分子分开成为两个完整的与亲代DNA分子一样的子代DNA
如何查找一个基因的转录起始位点
你看自己做的那个物种有没有基因组序列,如果有在ncbi中先找到自己要做的基因,然后找到基因组序列,做blast后在基因组上选取上游的大概1000多个碱基,然后用软件分析,一般就找到转录起始位点了,转录起始位点也就在启动子位置。如果没有基因组序列,就比较麻烦,需要用染色体位移技术,先克隆到哪个序列,在用软件做分析。用软件分析后,还需要用实验验证,才能完全确定你需要的转录起始位点。
如何找一个基因的转录起始位点
需要用其基因中段一段已知序列作为3‘端引物,以mRNA为模板,逆转录做5"端RACE(Rapid amplification of cDNA End,如果不知道原理自己去查,太多不好解释),将扩增产物连接入质粒载体测序,其测序结果5"端即为转录起始位点。通常在真核生物中,转录起始位点距ATG翻译起始位点上游100bp左右,包含明显的TATA box序列。
在一个典型的基因内部,转录起始位点(TSS)、转录终止位点(TTS)、起始密码子编码序列(ATG)、终止密
已知基因的结构包括编码区和非编码区,编码区分上游和下游,真核生物基因的编码区还分外显子和内含子.即基因的结构是非编码区上游、编码区、非编码区的下游.在编码区的上游有启动子,其上含有转录起始位点(TSS)、在编码区先有起始密码子编码序列(ATG),最后有终止密码子编码序列(TGA)、在非编码区的下游有终止子,其上含有转录终止位点(TTS),所以在一个典型的基因内部,以上四种序列的排列顺序是TSS-ATG-TGA-TTS.故选:B.
真核生物基因翻译中如何识别起始位点?
起始位点是特定的序列(TATAbox……)有相对应的RNA酶识别那个位点很复杂的……
问题是:原核和真核基因转录起始位点上游区的结构有什么差别? 各位帮帮忙!急求啊!!~~~~
(1)启动子序列A:原核生物启动子序列:包括:①CAP-cAMP结合位点:结合CAP-cAMP,调节基因转录;②RNA聚合酶进入位点:a:在转录的-35附近,一个Sextama框,是RNA聚合酶的识别和初始结合位点;b:在转录的-10附近一段核苷酸序列,TATA序列,称为Pribnow框,是RNA聚合酶的结合位点。B:真核生物启动子序列(以RNA聚合酶Ⅱ启动子为例)a: 帽子位点:转录的起始位点b:TATA框,又称Hogness框,-25,类似于原核生物的Pribnow框,决定了转录起点的选择。c:CAAT框:-75附近,控制着转录起始的频率d:增强子:-100以上,对转录起着调节作用。(2)终止子序列:在在正确的时间和地点终止转录作用。
真核基因mRNA为多顺反子,有多个SD序列,多个起始位点. 这句话对吗?
不对,SD序列是原核基因中的,真核是TATA框等。
问题是:原核和真核基因转录起始位点上游区的结构有什么差别? 各位帮帮忙!急求啊!!~~~~
(1)启动子序列A:原核生物启动子序列:包括:①CAP-cAMP结合位点:结合CAP-cAMP,调节基因转录;②RNA聚合酶进入位点:a:在转录的-35附近,一个Sextama框,是RNA聚合酶的识别和初始结合位点;b:在转录的-10附近一段核苷酸序列,TATA序列,称为Pribnow框,是RNA聚合酶的结合位点。B:真核生物启动子序列(以RNA聚合酶Ⅱ启动子为例)a:帽子位点:转录的起始位点b:TATA框,又称Hogness框,-25,类似于原核生物的Pribnow框,决定了转录起点的选择。c:CAAT框:-75附近,控制着转录起始的频率d:增强子:-100以上,对转录起着调节作用。(2)终止子序列:在在正确的时间和地点终止转录作用。
如何确定基因的转录起始位点
已知基因的结构包括编码区和非编码区,编码区分上游和下游,真核生物基因的编码区还分外显子和内含子.即基因的结构是非编码区上游、编码区、非编码区的下游.在编码区的上游有启动子,其上含有转录起始位点(TSS)、在编码区先有起始密码子编码序列(ATG),最后有终止密码子编码序列(TGA)、在非编码区的下游有终止子,其上含有转录终止位点(TTS),所以在一个典型的基因内部,以上四种序列的排列顺序是TSS-ATG-TGA-TTS.故选:B.
在基因的转录,复制中,有哪些酶是在细胞核内合成的?
DNA聚合酶 解旋酶解旋酶: 把两条螺旋的双链解开DNA的复制是一个边解旋复制的过程。复制开始时,DNA分子首先利用细胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把两条螺旋的双链解开,这个过程叫解旋。然后,以解开的每一段母链为模板,以周围环境中的四种脱氧核苷酸为原料,按照碱基配对互补配对原则,在DNA聚合酶的作用下,各自合成与母链互补的一段子链,随着解旋酶过程的进行,新合成的子链也不断地延伸,同时,每条子链与其母链盘绕成双螺旋结构,从而各形成一个新的DNA分子。这样,复制结束后,一个DNA分子,通过细胞分裂分配到两个子细胞中去
DNA解旋酶能催化某基因水解为多个脱氧核苷酸
不对 DNA解旋酶只能把双链DNA打开成单链,而不能水解DNA。把DNA水解为多个脱氧核苷酸是外切核酸酶的功能。
基因文库是怎么回事?
基因文库是指某一生物类型全部基因的集合。这种集合是以重组体形式出现。某生物DNA片段群体与载体分子重组,重组后转化宿主细胞,转化细胞在选择培养基上生长出的单个菌落(或噬菌斑)(或成活细胞)即为一个DNA片段的克隆。全部DNA片段克隆的集合体即为该生物的基因文库。 构建基因文库的意义不只是使生物的遗传信息以稳定的重组体形式贮存起来,更重要的是它是分离克隆目的基因的主要途径。对于复杂的染色体DNA分子来说,单个基因所占比例十分微小,要想从庞大的基因组中将其分离出来,一般需要先进行扩增,所以需要构建基因文库。在很多情况下目的基因的分离都离不开基因文库。此外基因文库也是复杂基因组作图的重要依据。基因文库构建包括以下基本程序: ① DNA提取及片段化,或是cDNA的合成。 ② 载体的选择及制备。 ③ DNA片段或cDNA与载体连接。 ④ 重组体转化宿主细胞。 ⑤ 转化细胞的筛选。当获得了含重组体的宿主细胞时,即完成了基因的克隆。基因的克隆只是分离基因的基础,基因克隆后还要对克隆的基因进行分离,即利用各种手段把目的基因从文库中分离出来。分离出目的基因还必须对其进行必要的检测与分析:如进行序列测定,体外转录及翻译、功能互补实验等。通过这些实验确定出基因的结构及功能。到这时才能算分离到了目的基因。所以,基因的克隆、克隆基因的分离、分离基因的鉴定是利用基因文库技术分离目的基因的主要内容。一、基因文库的类别 1. 基因组文库与cDNA文库 根据基因类型,基因文库可分为基因组文库及cDNA文库。基因组文库是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上而形成的集合。 cDNA文库是指某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。 基因组文库根据DNA来源又有核基因组文库、叶绿体基因组文库及线粒体基因组文库。 基因组文库与cDNA文库的区别在于cDNA文库是有时效性的。文库构建时的信息供体是某一时空条件下的细胞总mRNA,它是在转录水平上反映该生物在某一特定发育时期,某一特定组织(或器官)在某种环境条件下的基因表达情况,并不能包括该生物有机体的全部基因。在某种意义上讲它可以表现基因组的功能信息。再者,cDNA文库只反映mRNA的分子结构。cDNA中不含有真核基因的间隔序列及调控区,确切说cDNA并不是真正意义上的基因。基因组文库构建时遗传信息供体是基因组DNA,因而无发育时期及组织器官特异性,在一个完全的基因组文库中包含着基因组DNA上的所有编码区及非编码区序列的克隆。生物有机体的每一个基因在文库中都有其克隆,该克隆的基因片段里包括着间隔序列,所以基因组文库可真实地显示基因组的全部结构信息。目前这两类基因文库在基因工程中都得到有效应用。选择哪一种,主要是根据实验目的。在分离RNA病毒基因,研究功能蛋白序列,分离特定发育阶段或特定组织特异表达的基因时应构建cDNA文库。在研究mRNA分子中不存在的序列及基因组作图时必须构建核基因组文库。 2. 克隆文库及表达文库从基因文库的功能上看可分为克隆文库及表达文库。克隆文库由克隆载体构建。载体中具复制子、多克隆位点及选择标记,可通过细菌培养使克隆片断大量增殖。表达文库是用表达载体构建。载体中除上述元件外,还具有控制基因表达的序列(如启动子、SD序列、ATG、终止子等),可在宿主细胞中表达出克隆片段的编码产物。表达载体又有融合蛋白表达载体及天然蛋白表达载体之分。 从克隆文库中分离目的克隆时主要利用核酸探针,可以是根据蛋白质序列合成的寡核苷酸探针,也可以是同种或同属生物的同源序列探针。从表达文库中分离目的克隆时,因克隆片段的表达产物蛋白质具有抗原性及生物活性,所以除核酸探针外,还可以利用免疫学探针及生物功能进行筛选。表达文库适合于那些不知道蛋白质的氨基酸序列、不能用核酸类探针筛选的目的基因的分离。 3.不同载体的基因文库 目前用于构建基因文库的载体主要有质粒、噬菌体、黏粒及人工染色体四大类。每类中又有许多不同的载体。不同的载体适于构建不同的基因文库。(1). 质粒文库 质粒是最早用于基因克隆的载体。现已有各种适用于不同工作的如克隆、表达、测序等专用商品质粒。但在构建基因文库上,由于质粒相对较小并只能容纳比自身更小的片段,因此它不能用于构建核基因组文库,通常只用来构建短序列的克隆文库。例如叶绿体DNA分子较小,可以用质粒构建叶绿体DNA文库。质粒载体可用于生物cDNA文库构建。但只适合于高丰度的mRNA。(2). 噬菌体文库 目前用于基因克隆的噬菌体载体及其衍生载体很多,如单链的M13噬菌体载体、λ噬菌体载体、P1噬菌体载体、噬菌粒(phagemid或phasmid)等。其中使用最多的是入噬菌体。 λ-DNA为双链结构,长49kb。线性分子两端各有一条12个核苷酸的黏性末端称cos位点。分子中有约15kb可去掉的非必要基因区,又称“填充区”, “填充区”两侧的序列含有其增殖所必需的全部基因,称为左、右臂。“填充区”可被外源DNA取代,构成重组体,这是它成为克隆载体的结构基础。由于噬菌体头部包装容量的限制,重组λ-DNA分子大小只能在39—52kb之间。(3). 黏粒文库 黏粒(cosmid)也称柯斯质粒,是人工构建的由λ噬菌体的COS序列、质粒的复制子序列及抗生素抗性基因序列组合而成的一类特殊的质粒载体。COS序列是DNA包装进噬菌体颗粒所必须的。复制子通常是使用ColEl或pMBl的复制起始位点。黏粒具有λ噬菌体的某些性质,在克隆了大小合适的外源DNA片段并且在体外被包装成噬菌体颗粒后,能高效转导对入噬菌体敏感的大肠杆菌宿主细胞。在宿主细胞内按λ噬菌体方式环化,但不能通过溶菌周期,无法形成子代噬菌体颗粒(因分子中不具入噬菌体全部必要基因)。它也具有质粒载体的主要性质,在宿主细胞内可以像其他质粒一样复制,并与松弛型质粒相同,适量的氯霉素可促进扩增。因具抗生素基因,可以通过抗生素抗性筛选重组子。黏粒载体在构建时也加上了设在插入失活基因内的多克隆位点。黏粒载体的分子较小(2.8—24kb),但克隆容量很高,对外源DNA长度的要求是30~45 kb,上限几乎是入噬菌体载体容量(23 kb)的2倍,所以黏粒载体在核基因组文库构建上具有相当的优势,可克隆包括3,和5"调控区在内的完整的植物基因。(4).人工染色体文库 人工染色体载体是利用真核生物染色体或原核生物基因组的功能元件构建的能克隆大于50kbDNA片段的人工载体。其中有的载体既可用于克隆,又能直接转化,是进行基因功能研究的良好载体。近年来陆续发展起来的人工染色体文库有YAC库、BAC库、BIBAC库、PAC库及TAC库。二、核基因组文库构建核基因组文库构建主要使用λ噬菌体置换型载体或黏粒载体。 1. 随机文库克隆数目随机文库指代表基因组各部分DNA的摩尔数相等。对于随机文库: N = ln(1-P) ; ln(1-x/y) N:克隆数目 P:设定的概率值(如:0.99,表示在片段随机分布时,从文库中找到任一序列的概率不低于0.99) x:插入片段平均大小(15~20kb) y:基因组的大小(以kb计) 如果插入片段平均大小为20kb,某基因组大小为4X108bp,P = 0.99时,根据上式N = 1X105。含1XlO5个克隆的基因文库相当覆盖了5倍的基因组,在片段随机分布时,从文库中找到任一序列的概率不低于0.99。随机片段可通过机械切割或限制酶消化产生。机械切割法可获得较均一的随机片段,但片段不能直接用于克隆,需经末端修饰、甲基化,连上接头后再用限制性内切酶消化产生黏性末端。用限制酶消化的方法虽然可直接产生黏性末端,但片段的随机性较差,所以采用后种方法时,文库的克隆数目应大于计算值。三、利用PCR技术构建c DNA文库 cDNA文库构建的起始信息物质是mRNA。因此构建cDNA文库首先要考虑的问题是mRNA的含量及质量。生物细胞中mRNA含量较低。通常cDNA文库构建需要ug级的mRNA。对于低丰度的mRNA(<0.5%),要通过富集或增大克隆数目来保证构建的文库中能够含有它们的克隆
生物大神们。基因文库里是不是已经构建好了表达载体了?
不是,基因文库里只有目的基因,构建表达载体是从基因文库里提取目的基因后构建
基因组文库提取目的基因,在表达载体后为什么要先导入受体细胞再分离出目的基因
一般是提取目的基因,连接到克隆载体,导入受体细胞进行扩增,提取携带目的基因的克隆载体,再将目的基因转接到表达载体,导入受体细胞进行基因表达,这么个大致过程。如果直接连接的表达载体,导入受体细胞再分离目的基因也是如通过测序为了验证目的基因序列的正确性等一些操作。
以RNA为遗传物质的生物体,如何进行基因的翻译和表达?
体及免疫细胞受体是典型得生物文库. 在免疫系统中, 文库设计, 合成以及优化的整个过程都由生物体自己控制. 只有抗原结构和形成胚胎因子的遗传信息是外部的条件, 其余均是由内在因素自发控制. 因为免疫系统使用蛋白质结构文库, 它们将氨基酸作为文库的基本因素. 因为肽或以含氨基酸形成的蛋白质都是通过翻译遗传信息而合成的初产品, 需要序列的蛋白质能容易地藉由向微生物如细菌或病毒体内插入修改后的遗传信息来获得. 微生物文库合成有几大优点. 可以克隆微生物使每种微生物只制造一种蛋白质, 而且即使只有一个细胞也可以利用细胞增殖简单克隆出足够数量. 使用生物的最大好处是他们能自我繁殖, 只需给予充足的补给. 这是对使用微生物的蛋白质合成过程的简短描述. 在合成用于制造目的蛋白质序列的DNA链之后, 合成其互补链, 如果需要的话使用酶. 为使合成的DNA在微生物中恰当的复制并翻译, 需要用病媒动物(vector)压缩它然后进入微生物之内. 蛋白质在微生物的表面上被表达, 下一步是寻找目的蛋白质. 制造文库需要多种遗传信息. 随机DNA合成或切片cDNA或某种生物全基因组DNA都可使用. 制造特定蛋白质的 DNA序列片断能被修改以制造突变蛋白质文库. 考虑到体积限制和微生物繁殖的表达速率, 可以制得109(十亿)种文库. 与106到107种合成文库相比, 这可是个大数. 5单元肽的数量是205(320万)种, 6单元的是6400万, 7单元肽的数量超过10亿. 因此, 如果改变了超过7氨基酸的肽, 就仅能制出没有包含全部可能组合的不完全文库. 但这并不意谓着我们不能制造超过7氨基酸的蛋白质. 对于长链蛋白质, 7个不同的氨基酸能被单独选择而且替换. 当DNA随机合成的时候, 可以重复DNA密码而指定相同的氨基酸, 并且改变产生的频率. 因此, 为得到所有可能的组合, 需要更多的克隆体. ::::抗菌素文库:::: 抗菌素文库是最著名的蛋白质文库法之一. 抗菌素寄居宿主体内, 是一种含有衣壳和遗传物质的病毒. 这种方法在80年代中期发明, 在90年代开始用于多种领域. M13和Lambda病毒是最著名的. M13和lambda病毒 <http://www.cvm.msu.edu/courses/mic569/docs/parasite/> <http://www.hal.rcast.u-tokyo.ac.jp/genome/Present.htm> M13 是一种薄长的病毒, 由于它的基因组体积小, 可以容易地制出多种文库. 不同于其他病毒, 它能到宿主细胞的外面而不损坏它们或抑制它们的生长. 已知M13在宿主细胞中增殖其遗传信息并且以包着衣壳的形式出现, 它能制造10种类型的蛋白质, 而且通常在pVIII, pIII衣壳中合成文库. pVIII蛋白质包围其整个身体, 含有约50个氨基酸. 通常每一病毒表达2700个. 因为它的氨基端伸出衣壳, 可以修饰它以在其上表达一个不同的肽. 通常一个长肽不能够表达, 但是6单位的肽是可能的. 由于同时表达大量相同的文库分子, 尽管相对较短, 用它于多种配体反应是可以的. pIII 蛋白质在病毒末端表达, 而且通常是含有406个氨基酸的3到5种蛋白质. 它能表达相当大的蛋白质因而可以将它用在全蛋白质或抗体文库种. 正常的抗体使用Fab, 即抗原识别区域, 或者说Fvs链. 抗菌素文库和杂种细胞是制造抗体的最著名的方法. M13是制造随机肽文库的理想材料, 而且病毒能够足够稳定的被沉淀和浓缩, 因而在1-10mL体积中筛选109种文库成为可能. 不同于M13, Lambda病毒在细胞质中包裹着衣壳, 当有足够数量后穿出衣壳而不是总是戴着衣壳出现. 换句话说, 如果表达不同的蛋白质, 它将会折叠的形状出现并具有恰当的功能. pV和D蛋白质普遍用于文库合成. 如同能在抗菌素表面表达蛋白质一样, 还有随机肽, 天然蛋白质碎片, 特异性突变蛋白质文库和部份抗体碎片, 他们可用于色谱材料, 蛋白质-蛋白质反应, 受体结合位搜索和药物发现. ::::细菌及酵母文库:::: 不仅带有衣壳的病毒, 还有带有细胞壁和细胞膜的细菌也能用于文库表达. 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都能用来在细胞表面表达蛋白质, 还有大肠杆菌(E. coli), 一种革兰氏阴性菌, 也普遍使用. 大肠杆菌是如此有名, 以致于外行如我者也知道两种细菌: 一是大肠杆菌, 另一种是其余的. 细菌文库可以找出一种能够与抗体紧密结合的抗原, 然后将其用作疫苗. 细菌文库也可用于表达诊断抗体或受体文库, 以用于特定材料的分析. 革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌 <www.meddean.luc.edu/.../DeptWebs/ microbio/med/gram/tech.htm> <http://www.hhmi.org> 高等动物的蛋白质被蛋白质合成后的磷化作用或糖加成修饰的功能称为翻译修饰翻译修饰. 但是细菌作为一种原核生物 没有这种功能, 因而合成了一个蛋白质后要么它由于溶解度低而沉淀, 要么失活. 因此, 酿酒酵母, 一种真核细胞就被利用. 尽管酿酒酵母如细菌一般是单细胞, 它有翻译修饰功能并且能够使合成的蛋白质与原始的极为相似. 酵母 <news.bbc.co.uk/hi/english/health/ newsid_761000/761884.stm> 与病毒不同, 由于它有微米大小的细胞所以可以使用FACS(萤光活性细胞分类)技术. 文库中的蛋白质在细胞表面表达, 然后经过FACS机的细管, 这样萤光标记的目标分子就被加到其上. FACS根据萤光颜色和活性强度分类每个细胞. 分类不同颜色的目标分子并分类不同活性和选择性的细胞是可能的. 另外的优点是液相筛选, 它不必分离紧密附着的分子. 分类后的细胞再一次繁殖, 然后再筛选. ::::淘洗(Biopanning):::: 下面是一个合成的微生物文库的实例. 它的目的是寻找一种能够跟特定分子紧密连接的酶. <http://www.hort.purdue.edu/CFPESP/Hasegawa/ha00002.htm> 首先,目标分子平均地被置于检光板上. 制备了的微生物文库被加到板上. 只有与目标分子紧密结合的微生物能够存留, 其余的都到了溶液中. 一段时间后, 除去没有结合的微生物, 然后以恰当的溶液洗涤弱结合或偶然结合的微生物. 目标分子结合的紧密程度决定了洗涤过程. 仍然存留的微生物可通过加入低pH或高浓度的目标分子而分离, 通过繁殖增加数量. 有时结合程度太强时分离它们而不致死细菌是困难的. 如果它是噬菌体, 而不是分离, 那就可以直接感染宿主细胞. 由于存在偶然未考虑的微生物种类, 第一次增殖的微生物直接进行重复筛选-增殖的过程以增加含有活性蛋白质的克隆体数量. 最后在低浓度下培养后, 每个克隆体得以分离. 通常选出几十个克隆体用于DNA序列分析. 如果从DNA信息得到的肽结构是可识别的而且大多数克隆体表现出相同的肽序列, 那就意味着成功了. 然而, 因为蛋白质可能对多种克隆体表现出毒性而且 DNA表达率能改变, 总是有一种可能性存在, 即克隆体增殖速度和表达效果均好于期望的筛选结果. 因此, 通过测量肽合成及键强度的证实步骤是必需的. 即使在被获得的DNA或肽中有重要的药物候选者, 它们也将在蛋白质激酶的作用下在体内迅速水解. 因此, 用具有相似肽结构的人造分子取代它们是必需的, 尽管这个步骤非常困难. 几年以前麻州理工学院的Peter Kim小组报道了一个有趣的实验, 他们用D-氨基酸取代其光学异构体天然L-氨基酸以降低水解率. 他们使用人造D-氨基酸作为靶分子, 用天然L-氨基酸筛选发现了高亲合的肽. 因为真正的受体是由L-氨基酸构成, 也即其镜像, 于是他们合成了已发现的L-肽的镜像, 即D-肽. 当D-肽被用于天然受体的时候, 它仍然表现了高活性. Perter Kim, 过去一直作HIV感染途径和治疗方面的工作, 现在正在Merk工作, 他是在Sung-ho Kim博士那一代之后最强有力的韩国诺贝尔奖候选人. ::::DNA, RNA 文库:::: 微生物蛋白质文库技术基本基于活体生物的自我再生能力. 那就是, 通过放大(饲养)少量已获得的候选分子来提高纯度和数量. 蛋白质是活体生物利用遗传信息的产物这一点也非常重要. 如果用DNA或RNA而不是蛋白质可以吗? PCR(DNA扩增技术)的发展, 使得自90年代早期以来使用核酸做文库成为可能. 因为DNA和RNA是由4种单位构成, 10长度的低聚体有410(约106=一百万)种, 20长度的低聚体文库有约1012种. 通过使用自动固相DNA合成机, 序列中的5"端和3"端被修饰, A, T, C和G随机放置, 每个约占序列的25%. 当有了一条链后, 就通过使用酶或PCR扩增复制它. 通常约1014-15个分子被合成和使用, 但是时常存在大约40个随机引入位(1024种), 有时他们以不完全文库系列开始. 对于DNA文库, 基本使用DNA本身, 而对于RNA文库, 需要T7 RNA 聚合酶转录. 制备的文库按照与靶分子结合程度筛选;用PCR扩增DNA, 用RT-PCR扩增RNA. 蛋白质, 不同的核酸, 糖类和小分子都可用作靶分子. 放大了的文库的筛选和扩增过程被重复直到1014-15 的起始数量降至几百, 然后分析获得的候选分子的序列, 并且测量每个的亲合强度. SELEX <http://web.uvic.ca/sciweb/Courses/B300/B300.Outline.html> 这些已获得的DNA和RNA叫做智能配体(aptamers), 它们表现出对蛋白质靶分子的强亲合性, 高1nM Kd. 智能配体抑制靶分子在体内的功能, 但是它很快地被体内的核酸酶破坏. 为了解决这个问题, 文库的一些部份用人造核酸取代以增强对核酸酶的抵抗性. 在他们之中, 核酶(ribozymes), 一种可以催化其它化学反应的催化剂, 也被发现而且可以确认RNA界假说. 参考资料:http://www.nyu.edu/classes/ytchang/book/c006.html
高中生物 为什么基因文库里的受体菌不能直接用来表达目的基因 还要从基因文库里提取目的基
一、DNA文库和cDNA文库的概念将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。二、DNA文库和cDNA文库的构建原理DNA文库:用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。cDNA文库:以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。三、DNA文库和cDNA文库的用途基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA
高中生物 为什么基因文库里的受体菌不能直接用来表达目的基因 还要从基因文库里提取目的基
一、DNA文库和cDNA文库的概念将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。二、DNA文库和cDNA文库的构建原理DNA文库:用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。cDNA文库:以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。三、DNA文库和cDNA文库的用途基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA
能在大肠杆菌表达吗 cDNA文库的基因,还是基因组基因,还是都可以?为什么?
是cDNA文库的基因,大肠杆菌本身是原核生物,真核生物基因组基因往往含有内含子,在真核生物中转录后会被修饰,剪切下来的,而在大肠杆菌中,不能被剪切,所以转基因的时候最好转的是cDNA文库的基因,已切除内含子.另外,不是所有外源基因都适合用大肠做表达菌的,还要具体问题具体分析哦~
基因表达谱?
基因表达谱(gene expression profile),指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特定细胞或组织在特定状态下的基因表达种类和丰度信息,这样编制成的数据表就称为基因表达谱
构建基因组文库中 将所有基因导入受体细胞是仅仅用来储存还是使基因在受体细胞中表达
基因组文库的构建的定义:某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体储存于某一受体菌的群体中,这个群体就称为该生物基因组的文库。 目的:a)分离有用的目的 基因b)保存某种生物的全部基因所以是为了储存
基因组文库中的每个基因是否能在每个细菌体内复制及表达?
细胞内的基因是选择性表达的,所以不是每个基因都会复制表达。
基因文库到底是什么意思,它是不是你将不知道的核苷酸序列的dna导入到受体菌群,看哪个受体表达的是你
一个生物体内的所有基因组成基因文库,基因文库里的基因都是已知的,想要用的时候拿出来就可以,这叫目的基因的获取
利用基因组文库获得人的胰岛素基因通过基因工程转移至细菌中为什么不能表达为什么?
基因组文库中获得的人的胰岛素基因含有内含子,细菌没有人细胞所具有的编辑功能(删除内含子),所以不能表达。
为什么构建基因文库?直接从生物体内提取不行吗
当然不能直接提取。基因是一个人为概念,但从分子角度上看,基因与非基因没有分子水平的差异。而我们要操作分子,必须找到目标靶序列。所以,不可能直接提取任何一个基因,只能通过探针或者其他方式找到基因,并作相应的处理。使之可以识别。另外,不同基因在体内的拷贝数和表达频率差异都很大,例如指导胚胎发育的基因在成体内不表达,不可能从成体体内找到其表达产物,也就无法定位该基因,而例如核糖体DNA之类的基因,表达活跃,拷贝数多,它们往往掩盖了低丰度基因的检测。所以必须构建基因文库,使得高丰度与低丰度的基因都能被覆盖并检测到。最后,理论上,可以直接提取,但是实际和理论是由很大差异的。所以人们才构建许多方法以达到要求。所以不能光因理论可行,就忽略实际情况。
cDNA克隆与基因组克隆有何不同?
cdna文库以mrna为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cdna,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cdna,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mrna信息的cdna克隆集合称为该组织细胞的cdna文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cdna文库具有组织细胞特异性。cdna文库显然比基因组dna文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组dna文库获得的基因与从cdna文库获得的不同,基因组。dna文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cdna文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cdna基因组文库用限制性内切酶切割细胞的整个基因组dna,可以得到大量的基因组dna片段,然后将这些dna片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组dna片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。将某种生物的基因组dna切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组dna片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。
cDNA文库中的基因是逆转录来的,不含内含子,那么,虽然内含子不表达,但没有内含子的的基因还能用吗?就是
理论上可以,但是内含子也参与表达调控。实验室用的一般没有内含子。
获取目的基因的方法有哪些(详细)
..刚好学到 基因工程流程的第一步就是获得目的DNA片段,如何获得目的DNA片段就成为基因工程的关键问题。所需目的基因的来源,不外乎是分离自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选 直接获取 1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了(基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下:① 选用特定限制性内切酶, DNA进行部分酶解,得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA。③ 经适当处理,将基因组DNA限制性片段与λ噬菌体载体进行体外重组。④ 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。⑤ 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌,形成大量噬菌斑,从而形成含有整个DNA的重组DNA群体,即文库。)经典解释 2.cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因,但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多,相关工作量同样大得多。更为重要的是,在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子,但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列的存在,所以大肠杆菌不能从真核生物基因的初级转录本中去除间隔序列,即不能表达真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列(已在拼接过程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA为模板,逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此,在基因工程中,cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。 3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是:用限制酶(即限制性内切酶)将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法吧带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫,抗病毒的基因都可以用上述方法获得。 用“鸟枪法”获取目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。 人工合成 1.(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。 2.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑 他只是给目的基因的扩增 好累~....
10X 3‘和5’基因表达文库有何不同?
关于10X 公司3‘和5"基因表达文库的差异,官方给出的解释如下: 这两者很相似,但在最终的文库中,捕获的是不同的多聚腺苷酸化转录本末端。两种方案都使用了polydT引物用于反转录,但在3‘方案中polydT序列位于凝胶珠oligo上,而在5‘方案中polydT则作为反转录的引物。在这两种方案中,都用到了一种模板转换引物(template switching oligo,TSO),目的是为了反转录全长转录本。 经过cDNA扩增后,分子在偏好300-400bp长度片段的条件下被随机片段化。片段化后,只有同时包含10X Barcode和Illumina Read 2的接头(它们在片段化后被连接于cDNAs上)的那些转录本,才会在Sample Index PCR过程中被扩增。因此,在最终的文库中,或者体现为3‘末端的转录本(因10X Barcode邻近转录本3‘末端的polyA尾),或者体现为5‘末端的转录本(因10X Barcode邻近转录本5"末端和TSO)。 下列示意图比较了两种方案的文库构建。请注意不同的单细胞3‘试剂盒版本(V2和V3)其文库构建是类似的,但V3的UMI更长。所需的测序循环数亦有不同。单细胞3‘V3 基因表达文库:单细胞3‘ V2基因表达文库:单细胞5‘ 基因表达文库:
构建基因文库的目的和意义?
基因文库技术分离目的基因 所谓文库(1ibrary)是指一种全体的集合。基因文库(gene library)则是指某一生物类型全部基因的集合。这种集合是以重组体形式出现。某生物DNA片段群体与载体分子重组,重组后转化宿主细胞,转化细胞在选择培养基上生长出的单个菌落(或噬菌斑)(或成活细胞)即为一个DNA片段的克隆。全部DNA片段克隆的集合体即为该生物的基因文库。 构建基因文库的意义不只是使生物的遗传信息以稳定的重组体形式贮存起来,更重要的是它是分离克隆目的基因的主要途径。对于复杂的染色体DNA分子来说,单个基因所占比例十分微小,要想从庞大的基因组中将其分离出来,一般需要先进行扩增,所以需要构建基因文库。在很多情况下目的基因的分离都离不开基因文库。此外基因文库也是复杂基因组作图的重要依据。基因文库构建包括以下基本程序: ① DNA提取及片段化,或是cDNA的合成。 ② 载体的选择及制备。 ③ DNA片段或cDNA与载体连接。 ④ 重组体转化宿主细胞。 ⑤ 转化细胞的筛选。当获得了含重组体的宿主细胞时,即完成了基因的克隆。基因的克隆只是分离基因的基础,基因克隆后还要对克隆的基因进行分离,即利用各种手段把目的基因从文库中分离出来。分离出目的基因还必须对其进行必要的检测与分析:如进行序列测定,体外转录及翻译、功能互补实验等。通过这些实验确定出基因的结构及功能。到这时才能算分离到了目的基因。所以,基因的克隆、克隆基因的分离、分离基因的鉴定是利用基因文库技术分离目的基因的主要内容。一、基因文库的类别 1. 基因组文库与cDNA文库 根据基因类型,基因文库可分为基因组文库及cDNA文库。基因组文库是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上而形成的集合。 cDNA文库是指某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。 基因组文库根据DNA来源又有核基因组文库、叶绿体基因组文库及线粒体基因组文库。 基因组文库与cDNA文库的区别在于cDNA文库是有时效性的。文库构建时的信息供体是某一时空条件下的细胞总mRNA,它是在转录水平上反映该生物在某一特定发育时期,某一特定组织(或器官)在某种环境条件下的基因表达情况,并不能包括该生物有机体的全部基因。在某种意义上讲它可以表现基因组的功能信息。再者,cDNA文库只反映mRNA的分子结构。cDNA中不含有真核基因的间隔序列及调控区,确切说cDNA并不是真正意义上的基因。基因组文库构建时遗传信息供体是基因组DNA,因而无发育时期及组织器官特异性,在一个完全的基因组文库中包含着基因组DNA上的所有编码区及非编码区序列的克隆。生物有机体的每一个基因在文库中都有其克隆,该克隆的基因片段里包括着间隔序列,所以基因组文库可真实地显示基因组的全部结构信息。目前这两类基因文库在基因工程中都得到有效应用。选择哪一种,主要是根据实验目的。在分离RNA病毒基因,研究功能蛋白序列,分离特定发育阶段或特定组织特异表达的基因时应构建cDNA文库。在研究mRNA分子中不存在的序列及基因组作图时必须构建核基因组文库。 2. 克隆文库及表达文库从基因文库的功能上看可分为克隆文库及表达文库。克隆文库由克隆载体构建。载体中具复制子、多克隆位点及选择标记,可通过细菌培养使克隆片断大量增殖。表达文库是用表达载体构建。载体中除上述元件外,还具有控制基因表达的序列(如启动子、SD序列、ATG、终止子等),可在宿主细胞中表达出克隆片段的编码产物。表达载体又有融合蛋白表达载体及天然蛋白表达载体之分。 从克隆文库中分离目的克隆时主要利用核酸探针,可以是根据蛋白质序列合成的寡核苷酸探针,也可以是同种或同属生物的同源序列探针。从表达文库中分离目的克隆时,因克隆片段的表达产物蛋白质具有抗原性及生物活性,所以除核酸探针外,还可以利用免疫学探针及生物功能进行筛选。表达文库适合于那些不知道蛋白质的氨基酸序列、不能用核酸类探针筛选的目的基因的分离。 3.不同载体的基因文库 目前用于构建基因文库的载体主要有质粒、噬菌体、黏粒及人工染色体四大类。每类中又有许多不同的载体。不同的载体适于构建不同的基因文库。(1). 质粒文库 质粒是最早用于基因克隆的载体。现已有各种适用于不同工作的如克隆、表达、测序等专用商品质粒。但在构建基因文库上,由于质粒相对较小并只能容纳比自身更小的片段,因此它不能用于构建核基因组文库,通常只用来构建短序列的克隆文库。例如叶绿体DNA分子较小,可以用质粒构建叶绿体DNA文库。质粒载体可用于生物cDNA文库构建。但只适合于高丰度的mRNA。(2). 噬菌体文库 目前用于基因克隆的噬菌体载体及其衍生载体很多,如单链的M13噬菌体载体、λ噬菌体载体、P1噬菌体载体、噬菌粒(phagemid或phasmid)等。其中使用最多的是入噬菌体。 λ-DNA为双链结构,长49kb。线性分子两端各有一条12个核苷酸的黏性末端称cos位点。分子中有约15kb可去掉的非必要基因区,又称“填充区”, “填充区”两侧的序列含有其增殖所必需的全部基因,称为左、右臂。“填充区”可被外源DNA取代,构成重组体,这是它成为克隆载体的结构基础。由于噬菌体头部包装容量的限制,重组λ-DNA分子大小只能在39—52kb之间。(3). 黏粒文库 黏粒(cosmid)也称柯斯质粒,是人工构建的由λ噬菌体的COS序列、质粒的复制子序列及抗生素抗性基因序列组合而成的一类特殊的质粒载体。COS序列是DNA包装进噬菌体颗粒所必须的。复制子通常是使用ColEl或pMBl的复制起始位点。黏粒具有λ噬菌体的某些性质,在克隆了大小合适的外源DNA片段并且在体外被包装成噬菌体颗粒后,能高效转导对入噬菌体敏感的大肠杆菌宿主细胞。在宿主细胞内按λ噬菌体方式环化,但不能通过溶菌周期,无法形成子代噬菌体颗粒(因分子中不具入噬菌体全部必要基因)。它也具有质粒载体的主要性质,在宿主细胞内可以像其他质粒一样复制,并与松弛型质粒相同,适量的氯霉素可促进扩增。因具抗生素基因,可以通过抗生素抗性筛选重组子。黏粒载体在构建时也加上了设在插入失活基因内的多克隆位点。黏粒载体的分子较小(2.8—24kb),但克隆容量很高,对外源DNA长度的要求是30~45 kb,上限几乎是入噬菌体载体容量(23 kb)的2倍,所以黏粒载体在核基因组文库构建上具有相当的优势,可克隆包括3,和5"调控区在内的完整的植物基因。(4).人工染色体文库 人工染色体载体是利用真核生物染色体或原核生物基因组的功能元件构建的能克隆大于50kbDNA片段的人工载体。其中有的载体既可用于克隆,又能直接转化,是进行基因功能研究的良好载体。近年来陆续发展起来的人工染色体文库有YAC库、BAC库、BIBAC库、PAC库及TAC库。二、核基因组文库构建核基因组文库构建主要使用λ噬菌体置换型载体或黏粒载体。 1. 随机文库克隆数目随机文库指代表基因组各部分DNA的摩尔数相等。对于随机文库: N = ln(1-P) ; ln(1-x/y) N:克隆数目 P:设定的概率值(如:0.99,表示在片段随机分布时,从文库中找到任一序列的概率不低于0.99) x:插入片段平均大小(15~20kb) y:基因组的大小(以kb计) 如果插入片段平均大小为20kb,某基因组大小为4X108bp,P = 0.99时,根据上式N = 1X105。含1XlO5个克隆的基因文库相当覆盖了5倍的基因组,在片段随机分布时,从文库中找到任一序列的概率不低于0.99。随机片段可通过机械切割或限制酶消化产生。机械切割法可获得较均一的随机片段,但片段不能直接用于克隆,需经末端修饰、甲基化,连上接头后再用限制性内切酶消化产生黏性末端。用限制酶消化的方法虽然可直接产生黏性末端,但片段的随机性较差,所以采用后种方法时,文库的克隆数目应大于计算值。三、利用PCR技术构建c DNA文库 cDNA文库构建的起始信息物质是mRNA。因此构建cDNA文库首先要考虑的问题是mRNA的含量及质量。生物细胞中mRNA含量较低。通常cDNA文库构建需要ug级的mRNA。对于低丰度的mRNA(<0.5%),要通过富集或增大克隆数目来保证构建的文库中能够含有它们的克隆
如何从一个表达基因文库中克隆某个已纯化的蛋白质基因
先对蛋白质测序,只要测头尾七八个氨基酸,然后翻译出其基因并据此合成引物,然后从基因文库中PCR即可
构建基因文库的目标是什么
通过构建cDNA表达文库不但可以保护濒危珍稀生物资源,而且可以提供构建分子标记连锁图谱的所用探针:cDNA文库的构建将在鱼类分子生物学方面起到更多的作用。