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国航是在北京首都国际机场的T3航站楼。
国航值机柜台分布:
超高端值机:A值机区;
国际值机:H值机区、J值机区东侧;
国内两舱值机:F值机区西侧;
国内值机:J值机区西侧、K值机区、L值机区东侧;
快线值机:B值机区东侧。
北京首都国际机场航空公司分布:
T1航站楼为海南航空集团国内航班专用(包括海南航空、大新华航空、大新华快运、首都航空、天津航空);
T2航站楼为中国东方航空、中国南方航空、厦门航空、深圳航空、重庆航空、海南航空(国际航班),以及天合联盟和非联盟的国外航空公司运营航班。
T3航站楼为中国国际航空、深圳航空、山东航空、上海航空、四川航空,以及星空联盟、寰宇一家和非联盟的国外航空公司运营航班。
扩展资料
首都机场打造“互联网+”机场
2015年04月01日,微信团队公布了智慧机场解决方案,并宣布与北京首都国际机场合作,打造全国首家微信智慧服务示范机场。
微信智慧机场未来全面落地后,乘客通过微信即可完成航班、机场地图等查询业务、微信值机、扫码安检等自助服务。而商圈里的近200家商家、门店将会实现更流动的品牌营销新模式。
首都国际机场以微信公众账号(bj-airport)作为线上服务的统一入口,设立了“机场百科”、“逛机场”、“航班查询”三大模块,为旅客提供航班查询,及流程、周边交通等指引;并实现了从出发到登机的自助流程。围绕旅客出发前和到达前的两个节点,首都机场正在简化和改造值机、安检、行李托运、登机和贵宾服务等公共服务流程和形式。
参考资料来源:百度百科-北京首都国际机场
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国航公务舱需要值机。公务舱可以优先登机。公务舱的旅客可优先办理值机手续,还能免费托运30公斤行李。可进入贵宾厅等候休息,贵宾厅会提供餐食以及舒适的休息环境。登机前会有专门的航司工作人员进行提醒,并且可以优先登机,通常会有单独的安检通道,不用排队。上飞机后乘务员会优先引导公务舱的旅客入座。2023-07-27 08:57:351
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问题一:飞机什么时候开始值机 机场一般是提前2小时左右开始值机,看机场通知。 问题二:订好票以后什么时候能在网上办理值机 起飞当日,或提前24小时,具体的时间要以航空公司网站公布的时间为准。 问题三:国航网上值机可提前多少时间办理? 网上值机会根据城市机场不同而有差异。 以北京为例,航班起飞前36小时即可办理北京始发国航实际运营国内航班的乘机手续,航班起飞前2小时停止办理。故请乘客不晚于航班起飞前20分钟到达指定登机口登机。国际航班国内段暂不办理。 问题四:订购机票后多久可以值机 起飞前两小时内可以去机场值机,如果你在代售点购买的们一般正规的可以当场值机,网上购买的要问代理商了。值机之后不能退改签了。。。如果需要退改签需要去机场柜台办理 问题五:值机时间已到了 为什么不能办理网上值机 再耐心等待一下,如果还是不行打航空公司的电话确认一下。值机现在一般都用空铁管家APP,你试试。 问题六:值机开放时间什么意思 就是允许你在网上选座位的时间 问题七:网上值机一般是在什么时候关闭? 一般是起飞前两小时! 问题八:国航网上值机可提前多少时间办理? 2015-09-28 国航官网的国内航班值机说明(不同地区的提前的时间不同): airchina/....shtml 问题九:飞机去值机柜台最多可以多长时间值机 一般柜台值机开放时间是起飞前3小时左右,大概起飞前30-45分钟就停止柜台值机了。网上值机一般可以提前24小时办理 问题十:坐飞机最晚提前多久登机 1、为确保顺利登机,国内航班建议在航班起飞前1.5小时到达航站楼,航班起飞前30分钟将停止办理乘机手续;国际航班建议最晚在航班起飞前2.5-3小时到达航站楼,值机柜台截止办理手续的时间为航班起飞前30-60分钟不等,各航空公司具体规定不同,敬请留意机票说明; 2、请随身携带护照、签证、旅行证件、现金、票据等贵重物品。 祝旅途愉快2023-07-27 08:57:422
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目前,摩登天空旗下拥有包括EDC陈冠希、痛仰、**青年旅店、谢天笑、张曼玉、左小祖咒、新裤子、马頔、尧十三、Tizzy T、万妮达等在内的80余组风格各异的乐队及音乐人。过去的二十年间,摩登天空已出品200余张唱片,囊括中国原创独立音乐精华,其中包括:痛仰、谢天笑、舌头、新裤子、清醒、PK14、左小祖咒、重塑雕像的权利、后海大鲨鱼、周云蓬、万晓利、超级市场等,这些都是中国独立音乐发展路途中无法抹去的重要名字。如今这些音乐人早已成为各自领域里的佼佼者乃至领军人物,这些唱片也为摩登天空赢得了无数国内、海外音乐奖项。2023-07-27 08:54:461
滴水贷怎么查看总额度
滴水贷查看总额度:手机端:iOS12打开滴滴出行APP“钱包”栏“保险”选项,找到“借钱”栏打开后,便出现一个诱人的画面:最高可贷款额度200000元,页面最上方还有“滴水贷”三个字(在进入APP界面后,这已经是4步操作了)。点击页面下方的“优先获取滴水贷名额”,后台提示称“会逐步扩大开放规模,届时将以短信息形式通知”。而且,滴水贷最高额度是30万元,但实际额度可能达不到这么高,滴水贷的额度一般在几万元,如果滴滴司机资历老、订单多、信用好,借到30万难度应该不大。因为滴水贷要对你进行综合评定,根据评定结果来决定贷款额度。滴水贷使用周期为3-36期,如果你有需求,可下载滴水贷APP在线申请,提交贷款申请后,通常当天就可以审核完。如果遇到放款失败,一般是如下原因:首先是,资质不符申请滴水贷要求滴滴司机跑满2000单以上,并且实名制手机已经使用半年多,芝麻分超过600分,没有逾期记录。据网友反馈,滴水贷是查征信并且上征信的,对于信用这一块看得比较重。 另外,滴水贷开放的最高可申请额度是20万元,使用周期最长可达12个月,申请的时候所需的资料也比较简单,主要是身份认证、收款卡及收款卡绑定手机号验证。它的借款利息是按日计算的,日利率最低可至0.02%,也就是说,在滴水贷上申请10000元的贷款,每天的利息只要2元。根据下款用户反馈,一般首次借款的时候,都会有电话回访本人的,请大家保持电话通畅,注意及时接听。最后,滴水贷是查征信上征信的一款借款产品,滴水贷的合作方都是银行机构像新网银行,中原消费,杭银之类的银行机构,在申请时候要是征信不是很好的话是很容易被拒的,资质较好的客户可以去试试申请。2023-07-27 08:54:481
黑绒鳃金龟怎样危害核桃叶子的?
黑绒鳃金龟Maladera orientalis Mots,又名黑绒金龟甲。成虫体长7~8毫米,宽4.5~5毫米;卵圆形,前狭后宽;雄虫略小于雌虫。初羽化为褐色,后渐转黑褐以至黑色,体表具丝绒般光泽。唇基黑色,有强光泽,前缘与侧缘均微翘起,前缘中部略有浅凹,中央处有一微凸起的小丘。触角10节,赤褐色,棒状部3节。前胸背板宽为长的2倍,前缘角呈锐角状向前突出,侧缘生有刺毛;前胸背板上密布细小刻点。鞘翅上各有9条浅纵沟纹,刻点细小而密,侧缘列生刺毛。前足胫节外侧生有2齿,内侧有1刺。后足胫节有2枚端距。卵椭圆形,长1.2毫米,乳白色,光滑。幼虫,乳白色,3龄幼虫体长14~16毫米,头宽2.5~2.6毫米。头部前顶毛每侧1根,额中毛每侧1根。臀节腹面钩状毛区的前缘呈双峰状;刺毛列由20~23根锥状刺组成弧形横带,位于腹毛区近后缘处,横带的中央处有明显中断。蛹,长8毫米,黄褐色,复眼朱红色(彩图48)。黑绒鳃金龟广泛分布东北、华北、西北、华东、华中、西南大部省(直辖市、自治区),为害苹果、梨、核桃、板栗、杏、杨140余种植物。据郭士英等研究河北、宁夏、甘肃等地均为1年1代,一般以成虫在土中越冬。翌年4月中旬出土活动,4月末至6月上旬为成虫盛发期,在此期间可连续出现几个高峰。高峰出现前多有降雨,故有雨后集中出土的习性。6月末虫量减少,7月份很少见到成虫。成虫活动适温为20~25℃。日均温10℃以上,降雨量大、温度高有利于成虫出土。成虫有假死性和趋光性。飞翔力强,傍晚多围绕发芽开花的苹果树、梨树、杏树、柳树、核桃树、桃树、榆树等树冠飞翔、栖落取食幼芽及嫩叶。雌、雄交尾呈直角形,交尾时雌虫继续取食,交尾盛期在5月中旬。雌虫产卵于10~20厘米深的土中,卵散产或10余粒集于一处。产卵量与雌虫取食寄主种类有关,以榆叶为食的产卵量大。一般一雌产卵数十粒。卵期5~10天。幼虫以腐殖质及少量嫩根为食,对农作物及苗木危害不大。幼虫共3龄,1龄历期41天,2龄约21天,3龄约18天,共需80天左右。老熟幼虫在20~30厘米较深土层化蛹,预蛹期7天左右,蛹期11天。羽化盛期在8月中、下旬。当年羽化成虫个别有出土取食的,但大部分不出土即蛰伏越冬。防治方法:(1)灯光诱杀成虫。(2)人工捕杀,傍晚用捕虫网捕捉集中杀死。(3)喷药防治,傍晚树冠和地面喷25%马拉硫磷乳油2000倍液,75%辛硫磷乳油1000倍液。2023-07-27 08:54:501
七宗罪是哪七罪 七罪的来历
七宗罪七宗罪(注:天主教正式译名为"七罪宗",包括"骄傲、贪婪、迷色、忿怒、嫉妒、贪饕、懒惰")属于人类恶行的分类,并由13世纪道明会神父圣多玛斯.阿奎纳列举出各种恶行的表现。天主教教义中提出‘按若望格西安和教宗额我略一世的见解,分辨出教徒常遇到的重大恶行"。‘重大"在这里的意思在于这些恶行属于原罪,例如盗贼的贪婪源于欲望。这些恶行最初是由希腊神学修道士庞义伐草撰出8种损害个人灵性的恶行,分别是贪食、色欲、贪婪、伤悲、暴怒、懒惰、自负及傲慢。庞义伐观察到当时的人们逐渐变得自我中心,尤以骄傲为甚。懒惰在这里是指‘精神上懒惰"。六世纪后期,教宗额我略一世将那8种罪行减至7项,将自负归并入骄傲,懒惰归并入伤悲,并加入妒忌。他的排序准则在于对爱的遗背程度。其顺次序为:傲慢、妒忌、暴怒,伤悲、贪婪、贪食及色欲。较后期的神学家如圣多玛斯"阿奎纳则对这个排序方式抱有不同的意见。罪行但丁在神曲里根据恶行的严重性顺序排列七宗罪,其次序为:色欲-色欲泛指堕落的行为,道德的不完全,对刺激的追求,或过份希望他人的认同或接受。不合法礼的性欲,例如通奸。同时亦指过强的性欲,例如兽性。强暴、通奸、鸡奸等,都是色欲最极端的罪行。(但丁的标准是‘过份爱慕对方",而这样便会贬低了神对人们的爱)。 贪食-现代的观点认为“贪食”指浪费食物,或是过度放纵食欲、酗酒或屯积过量的食物,虽然在过去,任何因轻率而剩下的,都包括在贪食的定义中。而贪食也可以包括一些破坏性的行为,尤其指运动上(例如赢得奖杯),物质滥用或酗酒。贪食的定义中包括了“沉迷”,所以,贪食除了指食物外,对任何事物的过份沉迷也给包括了。(但丁的观点是‘过份贪图逸乐")。 贪婪-与贪食一样,是一种希望占有比所需更多为之贪婪,尤其是指金钱上的过份追求。Thomas Aquinas认为贪婪是“背向神的罪恶,正如所有朽坏的罪恶一样,是人为了会腐败的东西,放弃永恒的东西。”与贪婪有关的罪恶包括背叛、不忠、叛国、尤其是为了个人利益的。搜括及聚积过量财富,偷窃,打劫,尤其是以暴力或欺诈的形式,或借助权力而得到的财富。(或是以但丁的观点,贪婪是‘过度热衷于寻求金钱上或权力上的优越")。 懒惰-懒惰及浪费时间 懒惰被宣告为有罪是因为:其他人需更努力工作以填补缺失因应该的事情还没有做好,对自己是百害而无一利均衡:一方比另一方付出更多(从但丁的神学观念上去看,懒惰是‘未能全心爱上帝,未能全副精神爱上帝,未能全人之心灵爱上帝"-具体来说包括懒惰、怯懦、缺乏想像力、满足及无责任心。 暴怒-源自憎恨而起的不适当(邪恶的)感觉,复仇或否定他人,在律法所赋与的权力以外,行使惩罚他人的意欲亦被归作愤怒。过份的警戒、对他人有伤害的意图。它也包括对他人无理的愤怒,例如因种族引起的歧视。因暴怒而引起的罪都是大罪,例如杀人、歧视、大屠杀等等。(但丁描述为"把对公义的爱护歪曲为复仇和憎恨")。 妒忌-妒忌跟贪婪一样,是一种因为不能满足的欲望而产生的罪恶。首先,贪婪通常跟物质财产有关,而妒忌则跟其他方面有关,例如爱情,或他人的成功。第二,妒忌的人的欲望,通常建基于他人的失去。妒忌可以令人对他人的不幸袖手旁观,甚至为他人的悲惨遭遇而感到快乐。因对方所拥有的资产比自己丰富而心怀怨怒(但丁说:“对自己资产的喜爱变质成了忌恨其他更美好事物的拥有者的欲望”)。 傲慢-傲慢被认为是七宗罪中最原始,最严重的一项。期望他人注视自己或过度爱好自己,(因拥有而感到比其他人优越)(把自己定位成比上帝或他人更优秀的存在。傲慢被认为是所有罪中最致命的,因为路西法就是因为傲慢而堕落,最后成为了与神对抗的魔鬼撒旦。自负与自恋都是这种罪恶的产物。但丁对骄傲的解释是“对自己的喜爱变质成对相邻者的憎恨和轻蔑”)。 神权政体贪婪,失控的欲望,是七宗罪中的重点。其他的罪恶只是无理欲望的补充。:色欲: 肉体的欲望 贪食: 胡为的欲望 妒忌: 财产的欲望 懒惰: 逃避的欲望 傲慢: 卓越的欲望 暴怒: 复仇的欲望 各种罪行其实环环相扣,所以各种各样的动机也被假设成是与各种罪行相连。例如骄傲(过度迷恋自己)其实暗示了贪食(过份消耗或浪费食物),其余各种罪行亦有相同的连系。每种罪行其实在表现出自视比神更重要,因而未能全心全意全神地投入去爱神。学者和神学家们也利用了属性(attribute)和原因(substance)设立图解(schema)来解释这些罪行。惩罚色欲: 在硫磺和火焰中熏闷贪食: 强迫进食老鼠,蟾蜍和蛇贪婪: 在油中煎熬懒惰: 丢入蛇坑暴怒: 活体肢解妒忌: 投入冰水之中傲慢: 轮裂在神曲中有类似惩罚的设想。2023-07-27 08:54:531
qpcr20ul体系的引物量
2umol每升。qpcr20ul是一种荧光定量,其体系的引物量是2umol每l,在终反应体系里是10的浓度,即20ul体系中,上游引物加入2ul,下游引物加入2ul。2023-07-27 08:54:531
东北大黑鳃金龟的防治方法
(1)加强预测预报。由于蛴螬为土栖昆虫,生活、为害于地下,具隐蔽性,并且主要在作物苗期猖獗,一旦发现严重受害,往往已错过防治适期。为此,对此类害虫必须加强预测预报工作。调查的时间一般从秋后到播种前进行。调查的方法是分别按不同土质、地势、水腮条件、茬口等选择有代表性地块,采取双对角线或棋盘式定点,每10000m2—3个样点,每点查1m2,掘土深度30—50cm,细致检查土中脐增及其它土栖害虫种类、发育期、数量、入土深度等,分别记入调查表中,统计每m2中蛴螬平均头数,以辽宁省的防治指标衡量,1头/m2为轻发生,1—3头/m2为中等发生,3头以上/m2为严重发生,必须采取防治措施。(2)农业技术措施防治:一是对于蛴螬发生严重的地块,在深秋或初冬翻耕土地,不仅能直接消灭一部分蛴螬,并且将大量蛴螬暴露于地表,使其被冻死、风干或被天敌啄食、寄生等,一般可压低虫量15%—30%,明显减轻第二年的为害。二是合理安排茬口。前茬为豆类、花生、甘薯和玉米的地块,常会引起蛴螬的严重为害,这与蛴螬成虫的取食与活动有关。三是避免施用未腐熟的厩肥。金龟子及其他一些蔬菜害虫,如菠菜潜叶蝇、种蝇等,对未腐熟的厩肥有强烈趋性,常将卵产于其内,如施入田中,则带入大量虫源。而腐熟的有机肥可改良土壤的透水、通气性状,提供土壤微生物活动的良好条件,使根系发育快,苗齐苗壮,增强作物的抗虫性,并且由于蛴螬不喜食腐熟的有机肥,也可减轻其对作物的为害。四是合理施用化肥。碳酸氢铵、腐植酸铵、氨水、氨化过磷酸钙等化学肥料,散发出氨气对蛴螬等地下害虫具有一定的驱避作用。五是合理灌溉。土壤温湿度直接影响着蛴螬的活动,对于蛴螬发育最适宜的土壤含水量为15%—20%,土壤过干过湿,均会迫使蛴螬向土壤深层转移,如持续过于或过湿,则使其卵不能孵化,幼虫致死,成虫的繁殖和生活力严重受阻。因此,在蛴螬发生区,在不影响作物生长发育的前提下,对于灌溉要合理地加以控制。六是在温室、温床、大棚等保护地里,由于气温高,幼苗又集中,往往受害早、受害重。应及早发现蛴螬的活动并及时采取防治措施。(3)药剂防治:要选用50%辛硫磷乳油1000倍液、25%爱卡士乳油1000倍液、40%乐果乳油1000倍液、30%敌百虫乳油500倍液或80%敌百虫可溶性粉剂1000倍液喷洒或灌杀。其他方法参见网目拟地甲。2023-07-27 08:54:571
滴水贷上征信吗
滴水贷是上征信的,目前有消息称已经接入央行征信系统,因此大家在滴水贷上面借钱之后,一定要按时还款,不要逾期,免得在征信报告上面留下记录,成为一个网黑。另外在申请滴水贷的时候,后台也是要查征信的,信用情况不好的用户,很有可能是贷不下来。【拓展资料】一、滴水贷怎么样?就现在的反馈来看,滴水贷的综合情况还不错,下款速度快,操作非常简单,最高额度可以拿到30万,一般初始借款额度在几万块左右,如果是资历比较久、订单多、信用好的老滴滴司机,很有可能申请到高额。利息是月息0.833%左右,借5万用一年,利息就是4998元,在同类贷款口子中并不算高,而且滴水贷下款速度快,基本上都是当天到账。二、滴滴下架滴水贷要还吗?滴滴下架后在应用市场是不能再下载APP了,但并不表示之前的欠款就一笔勾销了,要知道欠债还钱天经地义,就算贷款平台倒闭了也是必须得进行还款的,跟别提滴滴现在还只是下架而已,并没有传出关闭的消息。虽说APP是下架了,滴滴金融系统还是有各位用户的借贷记录的,只要未及时还款就会采取相应的催收措施,像短信、电话催收,金额大逾期时间长的要做好被上门,甚至起诉的准备了,并且一旦逾期还会影响个人信用,不利于贷款信用卡申请。如果把滴滴APP删除了现在又找不到地方下载,如果知道绑定的银行卡是哪一张,以及知道还款日是哪一天,只要在还款往卡里存够钱等系统自动扣款就行了。如果打算提前结清不能在APP上操作,这就得要联系滴滴客服解决 。三、滴滴金融滴水贷无法还款怎么办?一般是不会出现不能还款的情况,基本都是在提前还款时出问题。像有网友反馈,自己滴水贷提前还款失败,试了4张银行卡都没用,打电话竟然说是银卡有问题,可关键是这些卡在微信、支付宝都能正常充值提现的。像这种建议去各大平台投诉,比如聚投诉,黑猫投诉平台平台等,提出自己的诉求,让平台联系滴滴金融,滴滴金融就会进行解决的。不要觉得麻烦,这可能是解决不能还款最快最有效的方法了。2023-07-27 08:54:261
谁有后海大鲨鱼man on the moon的歌词啊贴个出来
maybe this time you are heremaybe this time i am theremaybe next time we will be wrongwe‘ll be latemaybe this timemaybe next timenobody knowsi wanna go down the linei wanna go down the roadi wanna go down the line to find where in the world you are cryingi wanna go down the line to find youmaybe this time you are alonemaybe this time i am alonemaybe next time we all are wrongwe'll be latemaybe this timemaybe next timeit is on the mooni wanna go down the linei wanna go down the roadi wanna go down the line to find where on the planet you are cryingi wanna go down the line to find youi will see you again in another dayi will see you again in another towni will see you again in another hotel roomi wanna go down the linei wanna go down the roadi wanna go down the line to find where on the moon you are cryingi wanna go down the line to find youmaybe this timemaybe next timei will see you again 我听了好多遍啊!希望你采纳为最佳答案啊!谢谢了!2023-07-27 08:54:241
人类《七宗罪》是哪七宗?
罪行按严重程度递增依次为傲慢、嫉妒、愤怒、懒惰、贪婪、淫欲和暴食。七宗罪(英语:Seven deadly sins),应为七罪宗,七宗罪是错误的说法。(七个天主教的罪过,简称七宗罪)。宗为来源、根源的意思。拓展资料:七宗罪(Seven deadly sins),罪恶的来源有七种。13世纪道明会神父圣多玛斯·阿奎纳列举出各种恶行的表现。天主教教义中提出“按若望格西安和宗教格里高利一世的见解,分辨出教徒常遇到的重大恶行”。“重大”在这里的意思在于这些恶行属于罪恶的来源,例如盗贼的欲望源于贪婪。这些恶行最初是由希腊神学修道士庞义伐草撰出8种损害个人灵性的恶行,分别是暴食、淫欲、贪婪、愤怒、懒惰、伤悲、自负或傲慢。庞义伐观察到当时的人们逐渐变得自我中心,尤以骄傲为甚。懒惰在这里指“精神上懒惰”。六世纪后期,教宗艾文略一世将那8种罪行来源减至7项,伤悲并归入懒惰,自负并入傲慢,并加入妒忌。他的排序准则在于对爱的违背程度。其顺次序为:傲慢、嫉妒、愤怒、懒惰、贪婪、淫欲、暴食。中世纪著名的神学家圣·托马斯·阿奎那在评注亚里士多德的《尼各马可伦理学》时,撰写了《论恶》(On Evil)一书,书中对宗教罪做出了具体的描述,顺序是:偏见(Prejudice)、嫉妒(Envy)、懒惰(Sloth)、愤怒(Wrath)、贪婪(Greed)、暴食(Gluttony)和淫欲(Lust)。“重大恶行”与不可饶恕的大罪是不可混而一谈。百度百科——七宗罪2023-07-27 08:54:241
“蛴螬”是什么意思?
蛴 螬 蛴螬是金龟甲的幼虫,别名白土蚕、核桃虫。成虫通称为金龟甲或金龟子。除危害荔浦芋外,还危害多种蔬菜。 蛴螬咬食幼苗嫩茎,薯芋类块根被钻成孔眼,当植株枯黄而死时,它又转移到别的植株继续危害。此外,因蛴螬造成的伤口还可诱发病害发生。芋基部被钻成孔眼后,伤口愈合留下的凹穴,极大的影响了芋的质量。 http://baike.baidu.com/view/45121.htm2023-07-27 08:54:222
如何设计含attb位点的pcr引物
使用Multisitegateway技术构建载体的方法 Multisite gateway 实验步骤如下 设计含有attB位点的PCR引物建议使用Vector NTI Advance 软件来设计含有attB和attBr的引物。 上游引物必须同时满足以下条件 含有2225 bp的attB位点 至少1825 bp的模板或插入片段特异性的序列 multisitegateway引物序列的特异性 Fig specificsequences Multisitegateway 下游引物的设计也需满足以上三个条件。 因为我们要在E coli 体内表达蛋白 所以设计上游引物时 要在attB位点之前加上SD Shine Dalgarno 序列来保证翻译的准确性。同时为了保证阅读框的正确性 需要在attB位点之前加上两个核苷酸 但不能是AA AG和GA 因为它们会和attB位点末端的胸腺嘧啶核苷酸T形成终止密码子。 得到PCR产物并电泳检测PCR程序设置和电泳方法同上 需要指出的是 若PCR的模板是包含卡那抗性基因 kanamycin resistance gene 的质粒 需要在电泳检测和纯化PCR产物前对其进行消化 使用的酶是Dpn 作用是为了去除模板对后续反应的干扰。 消化的体系和过程 在50μl的PCR反应体系中 加入5 μl10X REact Dpn37 孵育15 min 65 热激15 min使Dpn BP反应得到entryclone 反应体系如下 BP反应的引物组分Table BPreaction Components Sample Negative control positive control attB PCR product 20 50 fmoles pDONRTMvector 150 ng pMSGW control plasmid 100 ng TEBuffer pH 其中携带attB位点的PCR产物的量可以用以下公式来计算 50 fmoles 2500 bp 660 fg fmoles ng106fg 82 PCRproduct required 实验步骤如下 按上面计算方法和反应体系加入合适体积的pDONRTMvector 和PCR产物 20冰箱里拿出BP Clonase II enzyme mix 放在冰盒上两分钟左右使其解冻。 轻轻涡旋BP酶两次每次两秒钟 BPClonaseII enzyme mix 并立即将其送回 20 冰箱里 样品轻轻涡旋几次使其混合均匀。 25孵育1 蛋白酶K37 孵育10 min。 之后进入转化环节后续实验流程同经典载体构建 最终得到含有attL位点的entry clone。 LR反应组分Table LRreaction Component Sample Negative Control attL4 attR1entry clone 10 fmoles attL2entry clone 10 fmoles attR2 attL3entry clone 10 fmoles pDEST R4 R3 Vector II 20 fmoles TEBuffer pH 使用Infusion方法快速大量构建载体的方法 fusion是一种不依赖于限制性内切酶Restriction Free 的克隆方法 引入此方法的最初动机是为了在一个载体的任意位置引入外源DNA片段。此方法基于DNA片度的扩增 得到的大量的DNA可以作为线性载体扩增的模板。这个方法可实现将多个不同的外源基因同时插入某一个特定的载体的任意我们感兴趣的位置 从而弥补了位点特异性重组系统中对特异位点和特殊系统的需求 为分子克隆和蛋白表达的调控提供广阔的思路和方法。这种方法的原理是DNA片段之间的同源重组 现在应用比较广泛的是由Clontech公司提供的In FusionTM system它可以实现以下克隆需求 同时克隆多个DNA片段 Simultaneous cloning 基因的替换 Gene replacement 多位点突变 Multisite mutagenesis 多组分重组 Multi componentassembly 同时插入和删除基因 Simultaneous insertionand deletion 引物设计及目的基因片段扩增该方法的原理和步骤同前in fusion PCR 只是这个方法中PCR产物需用Dpn 将模板消化。载体线性化载体线性化的方法既可以用特异性酶切消化也可以通过常规PCR 使用PCR的方式使载体线性化消除了对特异性酶切位点的依赖和限制 同时彻底实现载体和片段之间的无缝连接 消除后续由于特殊碱基序列的加入对实验结果的影响 同时大华 35大节省了时间和成本投入。fusion“连接”反应将纯化的DNA片段和载体按照2 1的摩尔比混合入250 EP管中必要时可以加入In fusionTM enzyme 由Clontech提供 和相应buffer 是反应总体系为10 μl。之后共同转入感受态细胞 进入筛选环节。 感受态细胞的制备在线虫载体构建的整个过程中 最重要的实验材料是各种促进反应进行的酶和高转化效率的感受态细胞。不同的载体因其携带筛选基因或者特异表达的宿主的不同 需要诸如DH5α、TOP10等不同类型的感受态细胞 例如在Multisite gateway反应中 通常需要借助ccdB的筛选机制 这种情况下就不能使用携带有ccdA基因的菌株 如TOP10F" 。所以 在不同方法的构建中 要严格选择感受态细胞类型。以下以实验室常用的感受态细胞DH5α为例 详述用氯化钙 CaCl2 法的制备过程。 用CaCl2法制备感受态细胞的原理是通过低渗的CaCl2溶液在低温 时处理快速生长的细菌从而得到感受态菌株细菌外形膨胀为球形 这样的形态结构有利于外源DNA分子形成抗DNA酶的羟基 钙磷酸复合物 这种复合物会粘附在细菌表面 如果热激 细胞对DNA的吸收将大大加强。 实验的关键是选取出于对数生长期的菌株 所有的操作必须尽可能保持在完全无污染无杂菌并且低温的条件下进行。实验材料及准备事项 100ml 胰化蛋白胨 CaCl2的制备称取22 CaCl2溶于200ml事先灭菌的水中 充分溶解后保存于4 冰箱中。 将浓度为100的甘油120 高温灭菌。 器材10 ml移液管 需灭菌玻璃大培养皿 内铺一张滤纸 需灭菌大、中、小枪头各一盒 需灭菌 50 ml离心管 mlEP管 用铁饭盒灭菌 100 ml SOB培养基需40个EP管 步骤如下 80冰箱里取出DH5α 常温使其冻融后通过接种环接种细菌与无抗培养皿中。将培养板放入3 将预先水浴锅灭菌的15ml离心管放在超净台中 紫外照射半个小时以上。从培养皿上挑取单个菌落 接种至离心管中 导入3 ml无抗培养基LB 37 摇床振荡过夜培养 转速为300 rpm 。次日取1 ml菌液接种至100 ml LB培养基中 以215 rpm的转速37 培养2 3小时。期间 要每隔半个小时测定一下600 nm的OD值。 停止培养将烧瓶置于冰上10 15分钟 同时将预先灭好菌的50 ml离心管也置于冰上冷却至0 在超净台中将菌液尽可能平均的分装入两个50 ml离心管中 以4000 rmp的转速离心10分钟。 弃上清将离心管倒置在滤纸上1分钟 以吸干残留的培养基。每个离心管中加入5 ml预冷的浓度为0 1M的CaCl2溶液 重悬菌体 并开始计时 可以用移液枪轻轻反复吹打30分钟。 将悬浮好的菌液再次以4000rmp的转速离心5分钟 去掉上清 吸干残余培养基后 每管加入2 ml预冷的浓度为0 M的CaCl2溶液反复吹打以重悬菌体 此时可以将两个离心管合为一个 放于冰上预冷20分钟 这期间 可以将已灭菌的1 mlEP管放于冰上预冷。 加入500 μl浓度为100 的甘油 mlEP管中。等全部分装完成时 投于液氮中1个小时 之后再转移到 80 冰箱中。 细菌转化效率的检测方法 设置阳性对照和阴性对照 阳性对照是为了估算细菌的转化效率 阴性对照是排除感受态细胞被污染的可能 及查明失败的可能因素。 阴性对照 只将感受态细胞涂于含某种抗性的平板上 而不加入任何DNA 正常情况下不应该有单菌落出现。 阳性对照 选择标准质粒 一般是pUC19 以50 pg、100 pg的量分别转化到感受态细胞里 将平板放于37 培养箱里过夜培养。数单菌落的个数以估计感受态的转化效率。 效率估算公式为 转化率 1000克隆 10pg DNA 当此值达到1 106时 可满足一般克隆的实验需求 当此值达到1 107时 可用作更复杂克隆的构建需求。 线虫的显微注射通过将外源基因显微注射到雌雄同体的线虫的性腺 gonad 能够获得有种系特异性的线虫。DNA片段可以通过染色体之间的同源和非同源的整合被传递到下一代中。显微注射的步骤如下 制作Pad将配置好的2 的琼脂糖放在水浴锅内防止其凝固。吸取100 μl于干净的载玻片上 并迅速将另一块载玻片轻压上面 待琼脂糖稍微干燥时取走载玻片 标记Pad的正反面之后放于干燥箱 80 中过夜。拉制电极常常用含有内芯的硼硅玻璃微电极作为注射用电极 该电极的外径为1 nm内径0 75 nm。用拉制仪拉制好的电极尖端是封闭的 在用之前需要打开一个开口 开口的大小要适宜。 准备注射液注射液的体系一般选取10 目的载体质粒的浓度范围为110 μl。其余体积用1TE补平。以12 000 rpm转速离心3分钟。 吸取1μl注射液到拉好的电极中 放置1520分钟 目的是为了使注射液通过内芯的虹吸作用流入电极尖端 并排除内气泡。 拿出注射要用的Pad在上面滴一滴油 保证有足够的油使线虫减慢干燥的过程 但不能太多以使其移动。 用一个干净的针needle 触碰到油上面 挑取N2时期的成虫 线虫挑取的区域应该远离菌斑所在位置 以避免将菌落带到pad上面。选择有容易辨别的gonad的线虫也同样重要。将线虫垂直放在pad上 使其gonad位于左侧 通常 线虫的阴部 vulva 会指向与needle的方向 两侧的gonad会直接与体壁对应。 当needle恰好位于载玻片上时将线虫聚焦在10 的物镜下 确定看到线虫的gonad。将线虫以和needle成15 到45 的角度摆放 通过轻轻降低needle使其和线虫出于同一水平。转换到40 物镜 聚焦到胞体的gonad 使用调试器上下移动needle 直到针尖对准胞体的gonad。 轻轻沿着needle移动线虫当needle插入线虫体内时 按照gonad和虫体壁处于相反位置的方式轻轻压线虫。轻旋调节器 knob 开始DNA注射液的流入 快速的开合 如果needle确定位于gonad处 此处部位会膨胀并充满液体。如果液体流动不畅 轻轻触碰桌面有助于解决此问题。要避免因加入液体过多导致液体沿着needle进入部位流散到线虫的其他部位。 将needle从线虫中拿出建议沿着逆时针方向。回到10 物镜下 滴一滴M9 buffer使线虫悬浮。使用眉毛挑将线虫放置于另外一个含有M9 buffer的板子上。这样做的目的是为了洗掉多余的油。再将线虫挑到含有细菌的板子上。一个板子上可以放置多条注射后的线虫。两三天后 数F1转基因线虫 并将折射成功的线虫单独转移到板子上以得到有稳定转基因种系的线虫。 显微注射线虫的gonadFig elegansgonad 3910 可能出现的问题及策略 注射后线虫破裂或者死掉的原因可能是needle太大了 或者线虫缺水死亡 方法可能是每注射一个线虫的gonad就换一个新的needle 如果线虫没有直立 原因可能是pad太薄或者需要没烘干 可以通过将板子放在罩子上几个小时来烘干 如果线虫干的太快 可以使用更薄的pad或者在注射前将线虫转移到较湿的板子上。 实验结果与讨论实验中用到的质粒的构建方法 在前言部分和方法部门已做了详细阐述 需要研究的相关基因的启动子的信息 诸如启动子大小 表达部位等 借助于相关文献的报道 在Wormbase中截取特定长度的DNA序列 在NCBI中查找此基因的上下游序列和基因方向 借助网页UCSC提供的序列信息最终得到启动子序列。但在设计启动子引物时 必须留意到序列中3"端和5"端的序列可以根据引物的匹配性在小范围内适当调整。还有一些神经元的位置因为缺乏确切表达谱的启动子而无法最终确定。线虫有302个神经元 标记这些神经元需要大量的质粒构建。在实验初期 我们通过传统酶切连接方法和改造的常用线虫载体组成的BP反应来实现。但随着课题的发展和方法的改进 我们发现Multisite gateway方法更为便捷和高效 特别是在购买了雌雄同体线虫启动子库后 这种技术不仅被用来标记线虫神经元 更多的用在rescue实验和钙信号的测定的构建中。同时 为了使整个课题有一套完整的体系 我们又花费大量的精力将之前不太标准的由gateway反应得到的构建进行了改造 得到一个可以通用的表达体系。 改造Multisitegateway 中的载体pDESTR4 R3为pPD49 26 R4 R3 在使用Multisite gateway 技术构建多克隆载体的过程中 我们发现 这个系统并不是完美的 因为这个系统中各个重组位点的序列有一定的相似性 所以如果想要插入载体的片段的序列 特别是与引物匹配的那一段 与重组位点有相似性时 可能会导致这个技术中所涵盖的反应失败。同时 当我们想用一个启动子驱动不止两个以上基因的表达时 不能直接只用Invitrogen公司提供的试剂盒中的pDESTR4R3 因为外源基因在线虫体内表达时 需要3"UTR稳定整个翻译过程中的顺利进行 但该公司试剂盒提供的载体中不含我们需要的3"UTR 因此 我们改造了一个新的LR反应的载体pPD49 26 R4R3 因为pPD49 26中含带unc54 3"UTR 而且实验证华 41明我们改造的载体同样有很高的反应效率 1在Multisitegateway反应中验证pPD49 26 R4 R3的有效性 Pgpa 4特异性标记ASI神经元 可以驱动TagRFP t在此神经元中表达。 为明场与荧光共定位的图。Fig pPD4926 R4 R3 LRreaction multisitegateway ASI can 改造attL1Promoter attL2为attL4 promoter attR1 验证adaptor clone 如前所述 我们将携带attB1 attB2位点的启动子进行改造得到了标准Multisite gateway反应中的第一个entry clone 在这个改造的过程中 需要引入一个中间反应物 adaptor clone。如果我们可以观察到改造后的启动子能够驱动荧光蛋白在特定部位表达 由此可以验证adaptor clone的有效性。在本课题中 我们使用改造后的启动子Pdaf 7驱动荧光蛋白在神经元ASI里表达 由此adaptor clone的有效性得到验证。2023-07-27 08:54:191
初中生剃平头好看吗?
每个人的气质不同,适合的发型也就不同要根据自己的气质而选择发型,有的人适合平头,有的人就不适合好好的镜子看看相信一定可以找到自己的发型。个人认为平头还是符合初中生的形象的。2023-07-27 08:54:187
七宗罪是哪七宗?各代表什么恶魔?
七宗罪指:饕餮、贪婪、懒惰、淫欲、傲慢、嫉妒和暴怒。1、路西法(Lucifer):傲慢(最美丽的大天使)。2、玛门(Mammon):贪婪 (财宝和贪婪的错误之神)。3、阿斯莫德(Asmodeus):淫欲 (激怒或色欲的魔神之始祖)。4、萨麦尔(Samae):暴怒(愤怒的化身,圣经中以“魔王”相称)。5、别西卜(Beelzebub):贪食(苍蝇君主,圣经中以“鬼王”相称呼)。6、利维坦(Leviathan):妒忌 (象征邪恶,吞噬一切的传说海怪)。7、贝尔芬格(Belphegor):懒惰(原为亚述的魔神之一)。七宗罪,应为七罪宗,七宗罪是错误的说法。(七个天主教的罪过,简称七宗罪)。宗为来源、根源的意思。天主教教义中提出“按若望格西安和教宗格里高利一世分辨出教徒常遇到的重大恶行”。“重大”在这里的意思在于这些恶行会引发其他罪行的发生,例如盗贼的欲望源于贪婪。七宗罪(Seven deadly sins),罪恶的来源有七种。13世纪道明会神父圣多玛斯·阿奎纳列举出各种恶行的表现。天主教教义中提出“按若望格西安和宗教格里高利一世的见解,分辨出教徒常遇到的重大恶行”。2023-07-27 08:54:171
滴水贷靠谱吗,滴水贷的额度怎么样
滴水贷是正规平台。滴水贷是有正规放款资质的滴水贷采用的是纯信用贷款模式,无需大家提供抵押和担保。滴水贷是滴滴金融旗下的贷款产品,而滴滴金融已经有支付、网络小贷、融资租赁三块金融牌照。因此,用户是可以放心申请滴水贷的。滴水贷主要是为滴滴司机提供信贷服务,滴滴司机注册不少于半年,接单数不低于2000笔等,才能申请滴水贷。以上内容仅供参考,不做任何贷款建议,网贷有风险,选择需谨慎!之前我自己也是生意周转需求,用过几个小额贷款产品,我第一个申请的是度小满有钱花(原百度金融),刚好10W整的额度(平台最高支持20W),利息也很低(年化最低7.2%),给我的差不多4厘左右还是比较低的。全部提出来分了12期。百度金融是正规持牌消费金融公司,申请过程及到帐全程不需要任何费用。度小满-有钱花(秒批)点击在线测额度小满-有钱花特别注意下:1、有钱花出了额度以后要尽快提现,因为隔久了额度可能会失效。2、提现时最好全额提,因为我看别人帖子说,如果提的太少,系统风控可能会误认为你需要(或者重新判定你不是优质客户)而导致在提现环节被拒,至少提60%比较稳妥。额度可循环使用哦!我第二个申请的是360借条,毕竟都是大平台,所以就优先申请了,额度是5.5W,利息和有钱花差不多。360借条最高借款20万!点击在线测额申请360也有个技巧,刚开始简单填资料后出来的额度只是一个基础额度,比如5000,1W5等等,如果你觉得额度不够用,可以先不要提现,直接去申请里面的尊享贷,这个是大额的,只要你有基础额度,尊享贷一定会过而且额度会大幅度提高,而且尊享贷支持24期。我的基础额度是9000,升级尊享贷后是5.5W。第三个是平安银行新一贷(快贷)最高可借50万!0抵押0担保:无需任何担保,仅凭个人信用,申请门槛低:月平均收入4000元以上即可申请(公积金、房贷、保单都可以)平安新一贷点击在线测额2023-07-27 08:54:171
美国三大帮派是什么?
光照派、黑手党、拉丁国王。光照派在其高峰期,曾拥有4000名成员,在大多数美洲国家都建立了分支。光照派吸引了大批的拥戴者和批评者。如美国第三任总统托马斯杰弗逊这样的大人物曾经盛赞光照派秉承的道德观念,同时则有一批人指责光照派秘密共谋用一个世界政府取代所有的民族和国家。黑手党是发源于意大利的一个秘密社会组织,18世纪欧洲掀起向美洲的移民浪潮,黑手党人涌向美国,扎根于纽约,活动于美国各地,操纵美国的赌博业、色情行业及贩卖毒品、走私军火,从事职业性的犯罪活动,诸如绑票、杀人、抢劫等。拉丁国王不仅在美国,而且在地球上许多地方都有分布,这个帮派的成员都是最高级和极端暴力罪犯组成的。在许多不同的场合,拉丁国王的成员都参与了一些极端暴力的活动,并且还有跨国暴力活动。这个美国团伙的活动已经蔓延到新泽西,甚至在纽约。美国帮派的组织特征:黑手党各家族内部还有为数众多的军团,通常每个家族有4个~6个军团,有些甚至可能更多约7个~9个、而每一军团由数量约20~30名的所组成,以执行具体行动,各军团均由一位指挥官领导。指挥官亦被称为一流的士兵,他们被二老板提名,但最终选择权在老板手中。黑手党自成立伊始,就是一个崇尚暴力的组织。他有为穷人出头、替百姓伸张正义的一面。但如果没有正确的理论作为指导,那么几乎可以肯定,它会走向自己的反面。随着时间的推移,黑手党的性质也发生了变化,它蜕变成为一个无恶不作令人切齿痛恨的犯罪团伙。他们凭借暴力控制了西西里岛上的畜牧、屠宰、果园和港口,并向私人业主收取保护费。通过暴力,黑手党在西西里岛确定了自己的权威,并把这种方式扩展到整个意大利,进而扩展到全世界。特别是在意大利,黑手党暗杀警方公诉人和法官可谓由来已久,目的是挫败警察机关的旺盛精力。2023-07-27 08:54:121
求后海大鲨鱼 猛犸mp3!!!
后海大鲨鱼歌曲大全在线听免费,百度网盘下载资源:链接:https://pan.baidu.com/s/1TT_Z57yu5ssRzDAc0wm-Qg?pwd=wyja 提取码:wyja简介: 后海大鲨鱼(Queen Sea Big Shark),是成立于2004年的中国内地摇滚乐队,由主唱付菡、吉他手曹璞和王梓、贝司手王静涵、鼓手伍晓东组成。2023-07-27 08:54:121
东北大黑鳃金龟的防治有哪些技巧?
东北大黑鳃金龟:6~8月为害猖獗,幼虫(蛴螬)取食下盘根、鳞茎盘,直至破坏整个鳞茎。防治方法:施肥前,用80%敌敌畏乳剂500~800倍液喷在粪肥上,拌匀后用塑料薄膜封盖,闷杀肥里的幼虫。为害期用50%马拉硫磷800~1000倍液,或25%辛硫磷、25%乙酸甲胺磷1000倍液浇灌土壤。2023-07-27 08:54:111
有哪位大虾们能帮忙解释一下RT-PCR中引物的碱基序列中上游的Tm值和下游的Tm值不一样不一样是什么原因?
上游引物跟下游引物Tm值不一样是很正常的,在设计引物时根据ATGC碱基含量的不同来计算,上下游引物Tm值不一样时,根据Tm值低的来计算退火温度,祝你实验顺利!2023-07-27 08:54:112
观大话西游之月光宝盒有感
剧情呢,山寨里、盘丝洞里占据了大部分的篇幅。 山寨里的篇幅较长,以前呢,只觉得轻松、好笑,现在呢,拭目以待吧。 二当家成功夺权。 先是二当家勾结昆仑三圣,在打斗中重伤大当家至尊宝。二当家出现的第一个镜头是带着小弟们在大鱼大肉,至尊宝出现的第一个镜头是在一个小茅草屋前拿着一把滑稽可笑的小扇子,而没有住在有水池的两层小别墅里,自然是被二当家夺权成功了,至于说为什么不直接杀了?以各位的聪明才智定是了解的了。 二当家起杀心。 挟天子令诸侯,总觉得如鲠在喉,杀人这种大事还是需要一个理由的嘛。当二当家发现春三十娘是蜘蛛精的时候,决定利用这个机会对至尊宝动手。先是引蜘蛛精到至尊宝的住所,接着发现行动失败,决定亲自下手,当失误砍到茅屋的横木上后,又打算用火烧,再次失败后,只能退而求其次,通过踩裆“灭火”。 大当家中伤痊愈。 中七伤拳,装斗鸡眼,倒立行走,不过都是大当家在演戏而已,到底要看看你二当家要做什么,结果呢,不是杀自己就是要绝了自己的后······透心凉的大当家决定,不装了,还要治你的死罪。 二当家的结局。 眼见大当家中伤痊愈,被逼着送死也是必然结果,好不容易靠演技忍辱负重躲过一劫,却又被师姐妹发现偷窥秘密,导致中了师姐的迷魂大法成为傀儡。 弱智的出场? 有些人的出场是踏着七彩祥云,而有些人,就是在沙漠里变成一串葡萄从天而降,对的,这个大神就是菩提老祖。也许有人会说他弱智,但是,更有可能的是,这里只是想告诉人们一些什么,比如,佛,也是生灵,只要是生灵,就会和人有各种的共性,人生在世,不必过于苛责自己,也不要过于崇拜神佛等等吧。 瞎子的生存哲学。 瞎子呢,有个不同寻常的身份,大当家的眼线,从大当家知道瞎子偷看二当家的屁股很容易得知。但是当二当家“治好”大当家的伤以后,又会替二当家解释求情,充当和事佬。然后当被困的师姐妹脱困以后,又会演戏假装掩护大当家,实则耍装死偷生的小机灵。 山寨总结。 其实就是一部剧情跌宕起伏、一波三折的官场或者说职场大戏。当然,大当家、二当家、瞎子,大师兄、二师兄、沙师弟,对的,导演大篇幅的讲述山寨里的转世三师兄弟,也是为了,凸显一个啰嗦的奶爸(爱家里那个同样啰嗦的她),唐三藏。 再说盘丝洞,这里的篇幅呢相对山寨呢,显得稍短,剧情也略平淡,更多的是几人之间的爱恨纠葛罢了。 猪八戒现世。 没什么说的,到盘丝洞后,大当家不再是大当家,但至少还是个人,二当家却变成了猪,剧情转折比较剧烈,更多的是导演在讽刺这样的人吧。 此处省略一万字。 大神之死。 有些人,不对,有些妖是为了爱情轰轰烈烈而死,而有些大神,却是被一个想跳崖而死结果没死成的妖怪拖累意外坠崖而死(我的天,能一遍懂的逻辑666),对的,这个家伙,还是菩提老祖,但是,最有可能的是,自己的任务已经完成,开溜了而已。 智障有机缘 。 小沈阳说,为什么这么说呢?事情是这样,至尊宝想用挖隧道的方法穿过石门,结果呢,大家看到了,机智聪明的孙悟空转世从离石门好几米的地方就开始挖了······话说,如果我是月光宝盒,我都会觉得,我去,坑爹啊······ 接着写。 算了,放弃了,真的对这部分感情戏码不太感兴趣······ 盘丝洞总 结。 错综复杂的感情。 说说一些有趣的设定和剧情吧。 名字。 剧里没有名字的主要人物都谁呢?二当家、春三十娘、瞎子。先分析二当家,导演说了,这种人我们身边就有,他就是头猪,不配有名字;再说春三十娘,至尊宝说了,爱我的人千千万,我不爱的记不住名字;最后说瞎子,他自己说了,作为一个看尽身边男人屁股的男人,你叫我瞎子就好。 发型。 剧里有两个人的发型最吸人眼球,二当家和瞎子。二当家呢,最令人气愤不过了,山寨里的发型就算了,到盘丝洞后是怎么回事?导演你出来说说,平头不是检验我们帅哥的唯一发型么?你给猪理了一个是几个意思啊???瞎子这里就简单了,秃顶嘛,无间道,想的多,很正常,理解。 家庭。 你说猪八戒和春三十娘?当然不是啦!这么说吧,三个师兄弟是三个孩子毋庸置疑(话说,家里有三个孩子的家庭,对应的老大、老二、老三的性格有很大的相似之处,不知各位发现没有······),奶爸呢,也没有疑问,那就是唐僧,至于老妈呢,剧里没几个女人,最合适的就是拥有降服孙悟空能力的观音姐姐,对的,这就是一家五口的设定。 感情。 感情戏呢,剧里占了很大的比重,而绝大部分都是围绕主人公至尊宝来的,角色呢,年轻女人就两个,最后的紫霞仙子这会儿不能算,所以呢,就是至尊宝和师姐妹的戏码,都知道师妹白晶晶到山寨根本就是与唐僧无关的,人家就是奔着臭猴子来的,师姐呢,这里就有点模糊了,她也喜欢臭猴子?答案是肯定的,第一,比师妹还着急,第一个来到山寨(一定是觉得感情的路上,师妹是领先自己的,所以,要更积极努力才行);第二,控制住山寨后,第一时间找脚底有三颗痣的人;第三,在山洞里竟然想强行,强行和至尊宝生孩子(好想哭)······你以为这部分说完了?幼稚,各位看官,注意一下,这是道必考题。已知:有两个师姐妹和一个山寨大当家,师姐春三十娘(漂亮的没边儿),师妹白晶晶(大当家手下都觉得口味重),求:大当家为什么喜欢师妹白晶晶而不喜欢师姐春三十娘?各位看官有没有会的?举手回答一下,没有吗?没人愿意回答么?没有我可点名了!(我的天,模仿老师真的爽啊!!!)正经点,这个问题呢,首先得分时间段,最初刚见面时间呢,作为武力排在第三的大当家,不是不想,是不能选择大当家,这会儿对师妹白晶晶也不是真的喜欢(这就,就好比,把一丑一美两个陌生的年轻女人,放到一个旱了一百年的光棍面前,他却说喜欢丑的那个,傻子才会相信吧······),当然了,一起经历了一些事后,这会儿的喜欢可以说的通;再说师姐这边,旱了那么多年的汉子,怎么会不喜欢美女?这么说吧,桃花过处,金钱落地,寸草不生(这段是编剧写的?还是导演加的?怎么像是实战利器小姐姐上门服务呢?事情描绘的是很艺术,但是,小朋友看到还是不好的呀,不过,我喜欢。),言归正传,把任何一个人放到大当家的位置上,做梦想的可能都是对手(人啊,很奇怪,越是看不惯,甚至厌恶的,就像是那人在自己的内心世界里画了一笔,色彩很浓厚很碍眼的一笔,),喜欢的感觉,早就不知道是什么样的了吧······ 为什么是蜘蛛精和白骨精? 从名字上可以分析,至尊宝代表主人公,蜘蛛精代表现在主人公身边那个跟长了八只手一样的漂亮、优秀的女人,白骨精代表过去主人公身边那个已经没有可能的丑的女人(这就解释通了为什么编剧用的不是什么狐狸精、白熊精等别的妖精,我实乃真天才也),其实,就是讽刺现在好多人总是活在回忆里,对过去念念不忘,对现在视而不见。 是谁打开了乾坤袋? 剧中给出的答案是旺财,当然大家都知道,师姐妹关于转世孙悟空和唐僧的消息都是从菩提老祖那里套出来的,这里问题就来了。第一,师姐妹不过是如来佛祖用的油灯其中一根灯芯的坐下弟子(根据第二部的信息,紫霞仙子作为盘丝大仙也就很短的时间,期间根本没收什么徒弟,师姐妹怕是自己强行认的师傅······),社会地位很低的;第二,社会等级制度森严的情况下,两人是怎么搭上菩提老祖这条线的?消息自然是故意泄露的,师姐妹也是被特意选中的。对的,有些机智的看客已经有了一些预测。佛家的目的是改变孙悟空,帮助唐三藏取经,弘扬佛法,那你收了师姐妹后之前的努力不久都白费了,重新选人啥的很麻烦的,所以,是菩提老祖自己放出了师姐妹,然后就阶级溜走,关注事情的发展就好了。 旺财的两次背锅 。总共就两个镜头,一次替二当家,一次替菩提老祖,当一只勤勤恳恳的看门狗?看门狗的工作可不只是看门了······ 师姐妹的真身? 盘丝大仙的徒弟?上面已经说过了,不再赘述,师姐就不用说了,镜头有给过一只蜘蛛,其实就是洞里的蜘蛛成精而已;师妹这里就需要耗费些脑细胞了,首先,从时间上来看,那定然是五百年前到孙悟空转世后的期间里成精的一具女性白骨,而且是在蜘蛛精之后;其次,从地理位置山来看当地人烟稀少应该不是猎户之女什么的,而且普通人的尸骨也很难有机遇成精;再者,盘丝大仙的洞府,空置了之后,竟然没有其它小妖占据,这点很奇怪,要知道,牛魔王的势力都已经扩散到了山寨了(说话的牛是证据)。所以,那具白骨到底是谁啊?有人知道么?答案就是盘丝大仙。为什么呢?第一,月光宝盒被埋在盘丝洞里,什么样的情况下主人才会埋自己的宝贝?答案就是被追杀,明知必死;第二,第二部最后猪八戒说师傅一直都是这么,嗯,不啰嗦,说明紫霞仙子已经死了是事实,只是被天兵天将杀死在盘丝洞,臆想一下,第二部根本就是一个佛祖改变孙悟空的一个梦境,否则,会出现文明支路或者改变历史的情况。 唐三藏究竟是不是猪八戒跟蜘蛛精的儿子,盘丝洞和水帘洞竟然是一个洞,······ 我不写了,我摊牌了。 嗯,还是说说觉得喜欢的细节和台词吧。 十五月圆之夜,年轻男女同处一室,女人会尸变,男人嘴对嘴过阳气给她能阻止一下······,什么意思啊?完全不懂啊······ 我打了个冷颤,好过瘾啊······ 你不怕我杀了你么?怕,不过没办法,因为我不希望你看着我的时候心里面却想着另外一个人。 你这么关心我,我愿意为你精尽人亡······ 道具。 月光宝盒和照妖镜。 二当家变成猪头的时候竟然是老实人经常理的平头······ 石门落下的那一瞬间两对男女才叫出相公和娘子······ 尴尬。 观世音画像刚出现时从中间开始烧的,然后下一个画面,中间复原了,又从旁边开始烧······ 我的天,脑细胞死了不知道多少······幻想好累······2023-07-27 08:54:101