DNA图谱 / 问答 / 问答详情

重组DNA技术有哪几个步骤

2023-06-28 09:57:38
TAG: DNA 重组DNA
共1条回复
阳光下的日耳曼尼亚

重组DNA技术一般包括以下几步:

  1. 获得目的基因;

  2. 与克隆载体连接,形成新的重组DNA分子;

  3. 用重组DNA分子转化受体细胞,并能在受体细胞中复制和遗传;

  4. 对转化子筛选和鉴定;

  5. 对获得外源基因的细胞或生物体通过培养,获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物。

在具体工作中选择哪条技术路线主要取决于基因的来源、基因本身的性质和该项遗传工程的目的。

相关推荐

DNA重组技术是怎样的原理

原理是将两种DNA分子通过限制性内切酶和连接酶拼接到一起发挥作用。重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如,如果运载体是质粒,受体细胞是细菌。一般是将细菌用氯化钙处理,以增大细菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。扩展资料:基因工程利用重组技术,在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,对各种生物的核酸(基因)进行改造和重新组合,然后导入微生物或真核细胞内,使重组基因在细胞内表达,产生出人类需要的基因产物,或者改造、创造新特性的生物类型。从实质上讲,基因工程的定义强调了外源DNA分子的新组合被引入到一种新的寄主生物中进行繁殖。这种DNA分子的新组合是按工程学的方法进行设计和操作的,这就赋予基因工程跨越天然物种屏障的能力,克服了固有的生物种间限制,扩大和带来了定向改造生物的可能性,这是基因工程的最大特点。
2023-06-28 08:18:562

DNA重组的理解

基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生于亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密相连,发生联会。这个结构称为二阶体,二阶体的每条染色体单元称为染色单体,染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体之间。扩展资料:基因重组的运用:1、2003年,美国得克萨斯的一家公司宣布,采用基因技术,他们已经研制出能发荧光的小型热带鱼——这是一种“光芒四射”的荧光宠物鱼,属于斑马鱼类。该类斑马鱼是一种常见的观赏鱼,荧光斑马鱼被分别转入了水母绿色荧光蛋白或者珊瑚虫红色荧光蛋白的基因,在紫外线的照射下,能够发出绿光或红光。荧光鱼作为观赏鱼在市场上销售,是第一种上市的转基因动物。2、2007年,日本利用基因工程培育出的蓝色月季,用的是三色堇和鸢尾里的两个基因。蔷薇科的花没有产生蓝色的基因,想培育蓝色月季就只能依靠转基因技术。这些采用基因技术生产出来的蓝色的月季花就是后来被众多年轻人热捧的所谓“蓝色妖姬”。参考资料来源:百度百科-基因重组
2023-06-28 08:19:091

什么是重组DNA

dna分子重组(dnarecombination)指dna分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型,广泛存在于各类生物。体外通过人工dna重组可获得重组体dna,是基因工程中的关键步骤。
2023-06-28 08:19:291

什么是重组DNA技术?

这是用人工手段对DNA进行改造和重新组合的技术。包括对DNA分子的精细切割、部分序列的去除、新序列的加入和连接、DNA分子扩增、转入细胞的复制繁殖、筛选、克隆、鉴定和序列测定等等,是基因工程技术的核心。重组DNA技术来源于两个方面的基础理论研究——限制酶和基因载体。重组DNA技术中所用的基因载体主要是质粒和温和噬菌体两类。1972年美国的分子生物学家伯格等将动物病毒SV40的DNA与噬菌体P22的DNA连接在一起,构成了第一批重组体DNA分子。1973年美国的分子生物学家科恩等又将几种不同的外源DNA插入质粒pSC101的DNA中,并进一步将它们引入大肠杆菌中,从而开创了遗传工程的研究。
2023-06-28 08:19:381

重组dna技术包括哪些主要步骤

DNA重组技术步骤如下:一、质粒DNA提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA1. 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中,加pUC18-CAT 质粒20mL,加入3mL酶切反应液,lmL BamHI和HindIII酶的混合液,无菌双蒸水补到30mL,37℃反应过夜。3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:在10mL DNA样品中,加T4 DNA连接酶缓冲液1mL,T4 DNA连接酶1mL,14℃(室温)过夜,然后做大肠杆菌的转化。三、转化感受态细胞1. 制备的感受态细胞(-20℃保存的)。2. 在100mL的融化后处于冰浴的感受态细胞中,加入10mL连接产物,混匀,冰上放置30分钟,以后的操作参照实验一进行。同时做未加CAT片段的空白pQE-31载体质粒连接处理后的感受态细胞转化的对照。实验结果过夜培养后,实验组和对照组的两个培养皿上都可能会出现一些菌落。如果实验组的菌落数明显多于对照组的菌落,则是好征兆,但实验组中出现的菌落是否含有所需的DNA重组子还须进一步鉴定。
2023-06-28 08:19:461

体外DNA重组是怎样操作的?

DNA的体外重组即用人工方法,使目的基因与载体相结合。对目的基因和载体采用限制性内切酶处理,从而产生互补黏性末端,再把两者放在较低的温度(56摄氏度)下混合“退火”,由于每一种限制性内切酶所切断的双链DNA片段的黏性末端有相同的核苷酸组分,所以当两者相混时,凡黏性末端上碱基互补的片段,就会因氢键的作用而彼此吸引,重新形成双链。这时,在外加连接酶的作用下,供体的DNA片段与质粒DNA片段的裂口处被“缝合”,形成一个完整的有复制能力的环状重组体。由于这些工作都在生物体外进行,所以基因工程操作又叫体外DNA重组。
2023-06-28 08:19:551

载体DNA是什么还有重组DNA是什么

表达载体就是用来装载某一目的基因,使之在特定细胞内表达的载体。它含有适应这一特定细胞的元件,如启动子等。重组dna顾名思义就是重组了的dna,插入外源基因的表达载体本身就属于重组dna的一种。当然也有在细胞内部以rna载体形式表达的载体,但构建时一般都是dna。
2023-06-28 08:20:041

简述重组DNA技术的原理及技术。

广义的遗传工程包括细胞水平上的遗传操作(细胞工程)和分子水平上的遗传操作,即重组DNA技术(有人称之为基因工程)。狭义的遗传工程则专指后者。重组DNA技术来源于两个方面的基础理论研究——限制性核酸内切酶(简称限制酶)和基因载体(简称载体)。限制酶的研究可以追溯到1952年美国分子遗传学家S.E.卢里亚在大肠杆菌中所发现的一种所谓限制现象——从菌株甲的细菌所释放的噬菌体能有效地感染同一菌株的细菌,可是不能有效地感染菌株乙;少数被感染的菌株乙的细菌所释放的同一噬菌体能有效地感染菌株乙可是不能有效地感染菌株甲。经过长期的研究,美国学者W.阿尔伯在1974年终于对这一现象提出了解释,认为通过噬菌体感染而进入细菌细胞的DNA分子能被细菌识别而分解,细菌本身的DNA则由于已被自己所修饰(甲基化)而免于被分解。但有少数噬菌体在没有被分解以前已被修饰了,这些噬菌体经释放后便能有效地感染同一菌株的细菌。被甲(或乙)这一菌株所修饰的噬菌体只能有效地感染甲(或乙),而不能有效地感染乙(或甲),说明各个菌株对于外来DNA的限制作用常常是专一性的。通过进一步的研究发现这种限制现象是由于细菌细胞中具有专一性的限制性核酸内切酶的缘故。重组DNA技术中所用的载体主要是质粒和温和噬菌体(见转导)两类,而在实际应用中的载体几乎都是经过改造的质粒或温和噬菌体。英国微生物遗传学家W.海斯和美国微生物遗传学家J.莱德伯格等在1952年首先认识到大肠杆菌的F因子(见细菌接合)是染色体外的遗传因子。1953年法国学者P.弗雷德里克等发现大肠杆菌产生大肠杆菌素这一性状为一种染色体外的大肠杆菌素因子所控制。1957年日本学者发现了抗药性质粒。后两类质粒都是在遗传工程中广泛应用的质粒。重组DNA技术中广泛应用的噬菌体是大肠杆菌的温和噬菌体λ,它是在1951年由美国学者E.莱德伯格等发现的。到70年代初,生物化学研究的进展也为重组DNA技术奠定了基??972年美国的分子生物学家P.伯格等将动物病毒SV40的DNA与噬菌体P22的DNA连接在一起,构成了第一批重组体DNA分子。1973年美国的分子生物学家S.N.科恩等又将几种不同的外源DNA插入质粒pSC101的DNA中,并进一步将它们引入大肠杆菌中,从而开创了遗传工程的研究。
2023-06-28 08:20:156

怎样进行基因重组?

基因重组是一项十分精细的技术。只有掌握了这一高技术,才能在改造生物和创造生物中有所作为。因为这是在分子水平上的操作,其难度也就可想而知了。但是,再难也难不倒我们的科学家。一般来说,基因重组分为4个步骤。首先,是获得具有目的基因的片段,即DNA片段。这个片段的取得既可用工具酶,也可以用机械方法剪取DNA片段。用化学合成人工基因片段,是另一种比较简便的有效的方法。第二,是把含有目的基因的片段与载体(质粒或病毒)DNA分子重组在一起。第三,是把重组好的DNA分子导入宿主细胞。第四,让这些重组的DNA分子在细胞内与宿主的DNA组合在一起,让它表达出来,选育出含有所需要的重组DNA宿主细胞。对宿主细胞进行培育,如果是植物,它就会长成一棵新植物;如果是大肠杆菌,它就会变成能合成目的基因控制的化学有机物;是动物细胞,就会形成具有新性状的动物。这在理论上是可以成立的,而且实践也证明,基因重组技术的确可以用来改造生物和创造生物。基因工程问世之后,发展之快令人目不暇接。不论是微生物还是植物、动物,用基因重组技术都得到了许多新品种。基因工程已成了改造和创造生物种的最有力的手段。
2023-06-28 08:20:331

DNA重组技术是怎样的原理 ,高中生物拜托各位大神

DNA重组技术是怎样的原理 ,高中生物拜托各位大神 最基本的原理是核酸内切酶的特异切割活性(高中一般只提粘性末端)和连线酶的连结活性,以及碱基互补配对。通过使用特定的核酸内切酶,将目的片段和经改造后的特定载体(质粒、病毒核酸链,其上有特异的切割位点,转录启动、终止序列,以及用于筛选表达的序列)切割,形成能够互补的粘性末端,再通过连线酶进行聚合形成重组子。将重组质粒(以质粒为例)汇入感受态细胞,培养,筛选,最后进行表达 采纳哦 求文件: 高中生物选修3DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶(简称限制酶):用于切割载体和目的基因,有专一性,只可形成一种粘性末端。(目的基因和质粒要用同一种限制酶进行切割,为保证粘性末端相同) 2.DNA连线酶:用于连线目的基因与载体(它没有专一性~~可以连线任意粘性末端~~不要把它和DNA聚合酶还有RNA连线酶搞混哦~~) 3.载体:一般选用质粒(细菌中科自主复制的小型环状DNA)还可以用动、植物病毒。 载体的选用需满足的要求:1 要可在受体细胞内自主复制 2 有多个限制酶切点 3 有标记基因,以便筛选含重组基因的细 胞 4 对受体细胞无害 浙江高中生物好学吗,我想选生物,拜托各位大神给点建议 高中的生物没有什么难度,实力中等的人都可以比较好的学习。我是江苏的,实力一般,选的生物,高考A+。也做过其他省的试卷,并不是很难。上课好好听,做做笔记就可以了。说白了,生物其实是半文科半理科,平时多翻翻书就行了。 高中生物各种技术或生物学原理的应用 基因工程的原理是基因重组(也叫基因拼接或者你说的转基因技术)。 抗虫棉的培育,乳腺反应器,膀胱反应器,基因检测,基因治疗这些都是基因工程的应用当然原理也是基因重组。 植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。 微型繁殖,作物脱毒,人工种子,花药离体培养,细胞产物的工厂化生产都是植物组织培养的应用,原理当然也是植物细胞的全能性。 植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性(原生质体融合的过程)和细胞的全能性(杂种细胞发育成杂种植株) 像白菜甘蓝,番茄马铃薯等都是植物体细胞杂交的应用。 动物细胞培养的原理是细胞增殖。 蛋白质生物制品的生产,面板移植材料的培育,疫苗等都是动物细胞培养的应用。 动物细胞融合的原理是生物膜的流动性和细胞增殖。 单克隆抗体的制备,单抗诊断盒,生物导弹都是动物细胞融合的应用。 核移植,克隆技术的原理是动物细胞核的全能性。 加速家畜遗传改良,保护濒危物种,克隆器官等都是克隆技术的应用。 手机上一个字一个字敲的,累死了快,希望对你有用。 高中生物(基因重组) 基因重组发生在:减数分裂的减数一期的中期 → 后期过程中,随着同源染色体的分离,非同源染色体就会发生自由组合,即基因重组! 精卵结合的过程,精卵各自的基因都是一定的,不存在什么基因重组的说法! 基因重组是指在原有的基因里发生重新组合,排列,就是说基因重组是指在同一个个体中发生的,而受精作用是异体基因第一次的组合,无所谓重组。。。 高中生物必修三人体三道防线疑问拜托各位大神 不对 谁有高中生物必修2 重组DNA技术种子下载,感激不尽 高中生物必修2 重组DNA技术种子下载地址: thunder:QUFodHRwOi8vYWlrYW5keS5vcmcv6auY5Lit55Sf54mp5b+F5L+uMiDph43nu4RETkHmioDmnK8uYXZpP2ZpZD0qM2pIVVJ6cVpsZypCS2tTYjNsZFo5QmFoTUlBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBQUFBJm1pZD02NjYmdGhyZXNob2xkPTE1MCZ0aWQ9RTUxREQ3QkMwMUE5MjgyQkE3N0VDMUMzQkVCM0NCRjcmc3JjaWQ9MTIwJnZlcm5vPTFaWg== 麻烦选为满意答案,谢谢! 高中生物生物技术实验 高中毕业生可参加普通高等学校招生全国统一考试。截至2016年5月30日,全国高等学校共计2879所,其中:普通高等学校2595所(含独立学院266所),学生们可以根据考试成绩自主择校。 高中生物知识点散乱,怎么从整体上把握?拜托各位大神 有一本书挺好的,不贵6.8元 绿卡凯尔 里面有整个高中的知识点的总结。
2023-06-28 08:20:581

DNA重组技术步骤?

DNA重组技术步骤如下:一、质粒DNA提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA1. 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中,加pUC18-CAT 质粒20mL,加入3mL酶切反应液,lmL BamHI和HindIII酶的混合液,无菌双蒸水补到30mL,37℃反应过夜。3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:在10mL DNA样品中,加T4 DNA连接酶缓冲液1mL,T4 DNA连接酶1mL,14℃(室温)过夜,然后做大肠杆菌的转化。三、转化感受态细胞1. 制备的感受态细胞(-20℃保存的)。2. 在100mL的融化后处于冰浴的感受态细胞中,加入10mL连接产物,混匀,冰上放置30分钟,以后的操作参照实验一进行。同时做未加CAT片段的空白pQE-31载体质粒连接处理后的感受态细胞转化的对照。实验结果过夜培养后,实验组和对照组的两个培养皿上都可能会出现一些菌落。如果实验组的菌落数明显多于对照组的菌落,则是好征兆,但实验组中出现的菌落是否含有所需的DNA重组子还须进一步鉴定。
2023-06-28 08:21:051

什么是dna重组技术,实验室dna重组需要哪些步骤

  基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。  重组DNA技术一般包括四步:  ①产生DNA片段;  ②DNA片段与载体DNA分子相连接;  ③将重组DNA分子导入宿主细胞;  ④选出含有所需要的重组体DNA分子的宿主细胞。  在具体工作中选择哪条技术路线。主要取决于基因的来源、基因本身的性质和该项遗传工程的目的。
2023-06-28 08:21:131

什么是DNA分子重组

DNA分子重组(DNA recombination)指DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程.包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型,广泛存在于各类生物.体外通过人工DNA重组可获得重组体DNA,是基因工程中的关键步骤.
2023-06-28 08:21:221

基因重组和DNA重组有什么区别?

1、基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。 在人类的生殖细胞中发现的46条染色体,发生在生物体内基因的交换或重新组合。基因重组是生物遗传变异的一种机制,包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。DNA重组:DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型,广泛存在于各类生物。体外通过人工DNA重组可获得重组体DNA,是基因工程中的关键步骤。2、基因重组重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密相连,发生联会。这个结构称为二阶体,二阶体的每条染色体单元称为染色单体,染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体(非姐妹染色单体)之间。DNA重组是基因组中或基因组间发生遗传信息的重新组合。3、基因重组是指一个基因的DNA序列是由两个或两个以上的亲本DNA组合起来的。基因重组是遗传的基本现象,病毒、原核生物和真核生物都存在基因重组现象。减数分裂可能发生基因重组。基因重组的特点是双DNA链间进行物质交换。DNA重组:同源重组是指发生在两段同源序列之间的DNA片段交换。两段同源序列既可以完全相同,也可以存在差异,既可以位于两个DNA分子上,也可以位于一个DNA分子中。真核生物的同源染色体交换及姐妹染色单体交换、细菌的转导和转化、噬菌体的重组都属于同源重组。扩展资料基因重组和DNA重组的意义1、参与DNA复制。2、参与DNA修复。3、参与基因表达调控。4、在真核细胞分裂时促进染色体正确分离。5、维持遗传多样性。6、在胚胎发育过程巾实现程序性基冈重排。参考资料来源:百度百科-基因重组参考资料来源:百度百科-DNA重组
2023-06-28 08:21:311

基因重组是什么意思?

基因重组  是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。  发生在生物体内基因的交换或重新组合。包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。是生物遗传变异的一种机制。  指整段DNA在细胞内或细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,并能在新的位置上复制、转录和翻译。在进化、繁殖、病毒感染、基因表达以致癌基因激活等过程中,基因重组都起重要作用。基因重组也归类为自然突变现象。基因工程是在试管内按人为的设计实施基因重组的技术,也称为重组DNA。
2023-06-28 08:21:471

重组DNA技术在现代分子生物学发展中的意义?

可以提取可用于基因治疗的基因工程细胞,进一步了解基因调控机制和疾病分子基理,也对于人类医学的发展具有重要意义另外,根据重组技术所制造的基因芯片,基因芯片即通过微价格技术将特定序列DNA片段(基因探针)固定与硅片上,基因芯片可用于基因测序,寻找有用的目的基因或对基因的序列进行分子水平上的分析。根据还可以从分子水平上了解疾病这主要是说重组DNA技术在现在分子水平上对生物医学发展的意义,你也看到了,基本上所说的都和疾病的治疗有关.我知道也就这些了,看看课本说不定还会有新的思路。
2023-06-28 08:22:222

重组DNA可以从哪几个方面进行筛选和鉴定

第一:可以在重组的DNA中提前插入一个标记基因,一般是抗·抗生素基因(抗四环素、抗链霉素···),那么如果目的基因的插入点在一个标记基因中的话,观察那个标记基因的表达。第二:DNA探针第三:抗原抗体杂交技术第四:直接检查产物
2023-06-28 08:22:422

简述DNA重组技术的基本步骤,并列举出三种常用的基因载体!

获得载体,提取目的基因片段,将目的基因片段连到载体上获得重组DNA,将重组DNA导入到宿主细胞中。常用载体有质粒(一般克隆10bp左右的DNA片段)、噬菌体(与质粒相比,噬菌体可以克隆较大的DNA片段,噬菌体M13可以使DNA以单链形式被提取出来)、黏粒(可以克隆45bp左右的DNA片段)。另外还有BAC即细菌人工染色体和YAC即酵母人工染色体等。
2023-06-28 08:22:511

基因重组有几种形式,各有什么特点

基因重组是指一个基因的DNA序列是由两个或两个以上的亲本DNA组合起来的。基因重组是遗传的基本现象,病毒、原核生物和真核生物都存在基因重组现象。减数分裂可能发生基因重组。基因重组的特点是双DNA链间进行物质交换。真核生物,重组发生在减数分裂期同源染色体的非姊妹染色单体间,细菌可发生在转化或转导过程中,通常称这类重组为同源重组(homologous recombination),即只要两条DNA序列相同或接近,重组可在此序列的任何一点发生。然而在原核生物中,有时基因重组依赖于小范围的同源序列的联会,重组只限于该小范围内,只涉及特定位点的同源区,把这类重组称作位点专一性重组(site-specific recombination),此外还有一种重组方式,完全不依赖于序列间的同源性,使一段DNA序列插入另一段中,在形成重组分子时依赖于DNA复制完成重组,称此类重组为异常重组(illegitimate recombination),也称复制性重组(replicative recombination)。自然重组自然界不同物种或个体之间的基因转移和重组是经常发生的,它是基因变异和物种进化的基础。自然界的基因转移的方式有:接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA就可从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌),这种类型的DNA转移称为接合作用(conjugation )。转化作用(transformation) 通过自动获取或人为地供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型。转导作用:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(受体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用(transduction)。转座:大多数基因在基因组内的位置是固定的,但有些基因可以从一个位置移动到另一位置。这些可移动的DNA 序列包括插入序列和转座子。由插人序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition )。基因重组:在接合、转化、转导或转座过程中,不同DNA分子间发生的共价连接称基因重组。基因重组包括位点特异性的重组和同源重组两种类型。有整合酶催化的在两个DNA序列特异位点间发生的整合,产生位点特异的重组。特异重组依赖特异的DNA序列,如λ噬菌体的整和酶可识别噬菌体DNA和宿主染色体的特异靶位点,并进行选择性整合;反转录病毒整合酶识别整合反转录病毒cDNA的长末端重复序列等。另外有发生在同源序列间的同源重组,又称基本重组。同源重组依赖两分子间序列的相同或相似性,将外源DNA整合进宿主染色体。噬菌体历史:1936年F. M. Burnet发表了噬菌体能产生突变体的观点,其噬菌斑的外形和野生型的有明显区别,可惜未能引起重视,以致噬菌体遗传学延迟了十几年才得以建立。1946年第11届冷泉港学术讨论会上,在宣布一基因一酶学说的胜利,及Ledernerg、Tatum细菌杂交实验报告的同时,Hershey和Luria宣布发现了噬菌体的r,h突变,Delbrück和Hershey发表了他们各自发现的噬菌体重组,这四项重大的发现分别在1958年和1969年获得了诺贝尔奖。后两项的发现有力地推动了噬菌体遗传学的发展。噬菌体的基因重组和细菌不同,而和真核的重组十分相似。杂交是用标记不同的噬菌体之间进行。然后计算重组噬菌体占总的子代噬菌体的比例来确定重组值。一般可以选用2-4个基因差异的噬菌体来混合感染细菌。首先把不同类型的噬菌体混合起来和细菌一起涂布在固体培养基上,细菌的浓度要达到可以长成菌苔(lawn)的水平,噬菌体的浓度要很稀。每个噬菌体感染一个细菌,经过裂解周期,宿主细胞破裂后,释放出的子噬菌体又去感染周围的细菌,结果在菌苔上形成一个圆形清亮的斑,称为噬菌斑(plaque),而一个噬菌斑来自最初涂布平板时的一个噬菌体。噬菌斑的形态必须选择容易区别的,以表示噬菌体的相应表型。单个的噬菌体只能在电镜下才可观察其形态,突变引起其形态变化没有电镜是无法鉴别的,但突变影响到生活周期,会产生不同的噬菌斑,因此通过噬菌斑的观察我们很容易观察基因型的变化与重组。Hershey等用T2噬菌体的两个不同表型特征:噬菌斑的形态和宿主范围来进行杂交。一个噬菌体的基因型是h+r,另一个噬菌体的基因型是h r+。h+表示宿主范围(hostrange),是野生型,能在E.coliB菌株上生长,r 表示快速溶菌(rapid lysis),产生的噬菌斑大,边缘清楚。h噬菌体能在E.coli B和B/2品系上生长,r+产生小而边缘模糊的噬菌斑,能产生透明的噬菌斑,而h+因只能裂解E.coli B,所以在B和B/2的混合菌上产生的噬菌斑是半透明的。杂交时hr+和h+r混合感染E.coli B和B/2,在B和B/2混合菌苔上出现了四种噬菌斑,表明h r+ 和h+r之间有一部分染色体在B菌株的细胞中进行了重组,释放出的子噬菌体有一部分的基因型为h+r+和h r。我们利用下面的公式就可以计算出和两个位点的重组值:重组值=(h+r++h r)/总噬菌斑数×100%此重组值也表示两个连锁基因之间的遗传距离。
2023-06-28 08:23:011

为什么基因工程又叫DNA重组技术?

基因工程又叫基因拼接技术或dna重组技术.这种技术是在生物体外,通过对dna分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物.通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向改造生物的遗传性状.故答案为:√
2023-06-28 08:23:091

在基因工程实验中,DNA重组体是指( )

答案是A。所谓基因工程(geneticengineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新技术。它克服了远缘杂交的不亲和障碍。
2023-06-28 08:23:181

什么是基因重组?

问题一:什么是基因重组 简单说,就是生物体内细胞中 DNA序列的改变。例如插入另外的序列,两条染色体配对然后断裂和重连。重组既有正常生理状态的(例如 *** 和卵子细胞结合后形成细胞的分裂),也有外部因素使之改变的(例如使用工具酶切割和插入D攻A片段)。 问题二:基因重组是什么? 基因突变发生在DNA复制的过程中,所以常见有两种情况:有丝分裂的间期和减一前的间期都有可能发生,基因突变指的是碱基对的增添缺失或改变,能产生新基因和新的基因型,为生物进化提供原材料,是变异的根本来源。 基因重组是发生在进行有性生殖的生物中,一般发生在减数分裂过程中,包含两种情况,一种是减一后期同源染色体上的等位基因彼此分离,非同源染色体上的非等位基因彼此结合;另一种情况是联会时期的交叉互换。除此之外,基因工程也可以看做特殊情况下的基因重组,基于此,你问题中的第二句可以说是错的。基因重组只能产生新的基因型不能产龚新基因,是生物变异的主要来源(注意不是根本)。 希望这些对你有用,满意请采纳。 问题三:基因重组是什么意思? 发生在减数第一次分裂前期(联会时期),同源染色体交叉互换 和福一次分裂后期,非同源染色体间的自由组合 可以产生新的基因型和表现型 问题四:基因的自由组合和基因重组有什么区别? 5分 基因重组是遗传方式, 基因的自由组合是遗传规律。 基因重组时符合基因自由组合定律。此外,基因工程也属于 基因重组!
2023-06-28 08:23:251

基因重组会有什么后果

基因重组会是指整段DNA在细胞内或细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,并能在新的位置上复制、转录和翻译。基因重组也归类为自然突变现象。基因工程是在试管内按人为的设计实施基因重组的技术,也称为重组DNA。基因重组一般不会出现什么坏的结果,只是会在原有生命体的特征上增加新的特性以此来增加生命体对适应环境的能力
2023-06-28 08:23:354

什么是基因重组,在原核微生物中哪些方式可引起基因重组。

定义:造成基因型变化的核酸的交换过程。包括发生在生物体内(如减数分裂中异源双链的核酸交换)和在体外环境中用人工手段使不同来源DNA重新组合的过程。原核生物的基因重组有转化、转导和接合等方式。受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片段,并使它整合到自己的基因组中,从而获得供体细胞部分遗传性状的现象,称为转化。通过噬菌体媒介,将供体细胞DNA片段带进受体细胞中,使后者获得前者的部分遗传性状的现象,称为转导。自然界中转导现象较普遍,可能是低等生物进化过程中产生新的基因组合的一种基本方式。供体菌和受体菌的完整细胞经直接接触而传递大段DNA遗传信息的现象,称为接合。细菌和放线菌均有接合现象。高等动植物中的基因重组通常在有性生殖过程中进行,即在性细胞成熟时发生减数分裂时同源染色体的部分遗传物质可实现交换,导致基因重组。基因重组是杂交育种的生物学基础,对生物圈的繁荣昌盛起重要作用,也是基因工程中的关键性内容。基因工程的特点是基因体外重组,即在离体条件下对DNA分子切割并将其与载体DNA分子连接,得到重组DNA。1977年美国科学家首次用重组的人生长激素释放抑制因子基因生产人生长激素释放抑制因子获得成功。此后,运用基因重组技术生产医药上重要的药物以及在农牧业育种等领域中取得了很多成果,预计下世纪在生产治疗心血管病、镇痛和清除血栓等药物方面基因重组技术将发挥更大的作用。
2023-06-28 08:23:442

什么是基因重组

  基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。从广义上讲,任何造成基因型变化的基因交流过程,都叫做基因重组.而狭义的基因重组仅指涉及DNA分子内断裂—复合的基因交流.。  基因(遗传因子)是遗传的物质基础,是DNA(脱氧核糖核酸)分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段。基因通过复制把遗传信息传递给下一代,使后代出现与亲代相似的性状。人类大约有几万个基因,储存着生命孕育生长、凋亡过程的全部信息,通过复制、表达、修复,完成生命繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。基因是生命的密码,记录和传递着遗传信息。生物体的生、长、病、老、死等一切生命现象都与基因有关。它同时也决定着人体健康的内在因素,与人类的健康密切相关。  基因是一个包含必要的信息,在可控制的方式生产功能的RNA产物的核酸段。它们包含这个产品是在什么条件下发号施令的监管区域,转录区域发号施令RNA的产品序列,和/或其他功能序列。身体发育和生物体的表型可以想到作为一个相互交融的基因与环境的产品,可以继承的单位和基因。主要发生在减数第一次分裂前期的交叉互换和后期的非同源染色体自由组合。
2023-06-28 08:24:054

简述DNA重组与分子克隆化基本原理与过程

1.获得目的基因,并进行酶切 获得粘性末端2.将载体也进行酶切 获得相同的粘性末端3.将载体与目的基因相连4.将重组好的载体导入宿主细胞中进行表达 克隆的基本过程是先将含有遗传物质的供体细胞的核移 植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后(罗斯林研究所克隆羊采用的时间约为 6天)再被植入动物子宫中使动物怀孕使可产下与提供细胞 者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。
2023-06-28 08:24:211

什么是基因重组

基因重组:指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。在人类的体细胞中发现的23对染色体发生在生物体内基因的交换或重新组合。包括同源重组、位点特异性重组、转座作用和异常重组四大类。是生物遗传变异的一种机制。基因重组主要发生在减数第一次分裂前期的交叉互换和后期的非同源染色体自由组合。
2023-06-28 08:24:314

基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的四个必要条件是(  )A.目的基因、限制性核酸内切酶

A、目的基因、限制性核酸内切酶、运载体是基因工程必需具备的条件,但体细胞不一定是受体细胞,A错误;B、重组DNA是由目的基因和质粒重组形成的,RNA聚合酶是转录需要的酶,细胞中具有该种酶,因此不是基因工程必需的条件,B错误;C、mRNA是基因转录的产物,基因工程中不需要提供该物质,质粒是运载体中的一种,除了质粒还有动植物病毒和噬菌体衍生物,因此质粒不是基因工程中必须的,C错误;D、限制酶和DNA连接酶属于工具酶,另外运载体、目的基因和受体细胞是基因工程中的必需具备的条件,D正确.故选:D.
2023-06-28 08:24:471

基因重组 与 转基因 有什么区别?

一、指代不同1、基因重组 :指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。2、转基因:指利用DNA重组、转化等技术将特定的外源目的基因转移到受体生物中,并使之产生可预期的、定向的遗传改变。二、原理不同1、基因重组 :发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生于亲本不同的重组染色体。2、转基因:转基因技术是指将一种生物的优良基因利用基因重组原理整合到另一种生物的基因组里,从而使获得优良基因的生物的基因得到改善并能进行表达和遗传,进而使生物获得优良性状如抗虫性、抗逆性、抗倒伏、抗盐碱性等。三、作用不同1、基因重组 :来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密相连,发生联会。这个结构称为二阶体,二阶体的每条染色体单元称为染色单体,染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体(非姐妹染色单体)之间。2、转基因:主要运用在转基因育种方面,我国政府对转基因技术一向重视,作为世界人口大国,转基因技术的利用可以有效地缓解环境压力和经济压力。如作物的抗虫性可以减少农药使用、间接保护环境,耐除草剂性可以减少资源的浪费进而提高粮食产量。参考资料来源:百度百科-转基因技术参考资料来源:百度百科-基因重组
2023-06-28 08:24:574

基因工程的实质为什么是基因重组?

我随便点儿回答你就是基于基因采取各种工程手段使它服务于人类。所以能用基因做的东西是很多的,也不一定都是基因重组,它只是浩大工程中的一部分。像我们这种搞医药的,基因治疗,有时候直接是引导沉默或敲除基因,这和重组一样也是一门技术,做诊断的,有时候就是做个杂交,像这样的例子还有很多。下面有百度百科上的解答~~你可以看看专业点儿的解答~狭义的基因工程仅指用体外重组dna技术去获得新的重组基因;广义的基因工程则指按人们意愿设计,通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。如用重组dna技术,将外源基因转入大肠杆菌中表达,使大肠杆菌能够生产人所需要的产品;将外源基因转入动物,构建具有新遗传特性的转基因动物;用基因敲除手段,获得有遗传缺陷的动物等。
2023-06-28 08:25:132

生物染色体变异,DNA变异,染色体重组,DNA重组,DNA突变,有什么区别??谢谢!

DNA是脱氧核糖核酸分子;染色体是由DNA分子也即脱氧核糖核酸分子组成;所以染色体变异与DNA变异本质都是一样的,就是脱氧核糖核酸分子发生变异,而变异和突变也是一个概念,所以 生物染色体变异、DNA变异、DNA突变三者无本质区别。染色体重组与DNA重组也是一样无本质区别。所以现在只要区别DNA变异和重组了变异是只DNA分子的组成成分、位置顺序发生变化,包括碱基的增减与顺序捣乱;重组是指指DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型,广泛存在于各类生物。
2023-06-28 08:25:202

重组DNA技术在现代分子生物学发展中的意义?

中心法则:http://baike.baidu.com/view/15948.html?wtp=tt由中心法则你可以知道重组的DNA可以表达新的蛋白,表达新的蛋白又可以调控DNA的转绿。我想我能给你提供的东西只有这么多。主要是你说的太大了。不好回答
2023-06-28 08:25:292

怎么理解基因重组

基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。基因是一个包含必要的信息,在可控制的方式生产功能的RNA产物的核酸段。它们包含这个产品是在什么条件下发号施令的监管区域,转录区域发号施令RNA的产品序列,和/或其他功能序列。身体发育和生物体的表型可以想到作为一个相互交融的基因与环境的产品,可以继承的单位和基因。主要发生在减数第一次分裂前期的交叉互换和后期的非同源染色体自由组合。扩展资料:基因重组技术获国家高技术产业化示范工程授牌:为充分发挥国家高技术产业化示范工程项目的带动示范作用,推动生物产业发展,鼓励全社会加强自主创新,加速科技成果转化。国家发展改革委决定,对近年实施并取得显著经济和社会效益的百泰生物药业有限公司基因重组人源化单克隆抗体h-R3等117项生物领域高技术产业化示范工程项目,授予“国家高技术产业化示范工程”牌匾,表彰其对我国生物产业高技术产业化工作所做的贡献。希望在今后工作中,进一步贯彻落实国家相关规划和政策的要求,积极推进自主创新成果产业化,促进高技术产业发展。同时认真总结项目建设和管理经验,在运行机制、管理模式等方面不断创新,进一步发挥国家高技术产业化示范工程的示范和带动作用,为加速推动我国高技术产业发展和产业结构调整做出应有的贡献。参考资料来源:百度百科-基因重组参考资料来源:中国网-领域国家高技术产业化示范工程授牌的决定
2023-06-28 08:25:397

什么是重组DNA技术?

这是用人工手段对DNA进行改造和重新组合的技术。包括对DNA分子的精细切割、部分序列的去除、新序列的加入和连接、DNA分子扩增、转入细胞的复制繁殖、筛选、克隆、鉴定和序列测定等等,是基因工程技术的核心。重组DNA技术来源于两个方面的基础理论研究——限制酶和基因载体。重组DNA技术中所用的基因载体主要是质粒和温和噬菌体两类。1972年美国的分子生物学家伯格等将动物病毒SV40的DNA与噬菌体P22的DNA连接在一起,构成了第一批重组体DNA分子。1973年美国的分子生物学家科恩等又将几种不同的外源DNA插入质粒pSC101的DNA中,并进一步将它们引入大肠杆菌中,从而开创了遗传工程的研究。
2023-06-28 08:26:254

DNA重组技术是怎样的原理

原理是将两种DNA分子通过限制性内切酶和连接酶拼接到一起发挥作用。重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如,如果运载体是质粒,受体细胞是细菌。一般是将细菌用氯化钙处理,以增大细菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。扩展资料:基因工程利用重组技术,在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,对各种生物的核酸(基因)进行改造和重新组合,然后导入微生物或真核细胞内,使重组基因在细胞内表达,产生出人类需要的基因产物,或者改造、创造新特性的生物类型。从实质上讲,基因工程的定义强调了外源DNA分子的新组合被引入到一种新的寄主生物中进行繁殖。这种DNA分子的新组合是按工程学的方法进行设计和操作的,这就赋予基因工程跨越天然物种屏障的能力,克服了固有的生物种间限制,扩大和带来了定向改造生物的可能性,这是基因工程的最大特点。
2023-06-28 08:26:341

重组DNA技术是如何实现的?

重组DNA技术主要包括四个步骤:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合的过程实际上是不同来源的DNA重新组合的过程,是基因工程的核心。3、将目的基因导入受体细胞用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。4、目的基因的检测和表达目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。扩展资料重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。重组DNA技术使用的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶。常用的载体有质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。参考资料来源:百度百科-重组DNA技术
2023-06-28 08:26:481

DNA重组技术步骤是什么?

DNA重组技术步骤如下:一、质粒DNA提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA1. 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中,加pUC18-CAT 质粒20mL,加入3mL酶切反应液,lmL BamHI和HindIII酶的混合液,无菌双蒸水补到30mL,37℃反应过夜。3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:在10mL DNA样品中,加T4 DNA连接酶缓冲液1mL,T4 DNA连接酶1mL,14℃(室温)过夜,然后做大肠杆菌的转化。三、转化感受态细胞1. 制备的感受态细胞(-20℃保存的)。2. 在100mL的融化后处于冰浴的感受态细胞中,加入10mL连接产物,混匀,冰上放置30分钟,以后的操作参照实验一进行。同时做未加CAT片段的空白pQE-31载体质粒连接处理后的感受态细胞转化的对照。实验结果过夜培养后,实验组和对照组的两个培养皿上都可能会出现一些菌落。如果实验组的菌落数明显多于对照组的菌落,则是好征兆,但实验组中出现的菌落是否含有所需的DNA重组子还须进一步鉴定。
2023-06-28 08:27:021

DNA重组技术怎样操作的?

DNA重组技术步骤如下:一、质粒DNA提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA1. 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一无菌1.5mL 离心管中,加pUC18-CAT 质粒20mL,加入3mL酶切反应液,lmL BamHI和HindIII酶的混合液,无菌双蒸水补到30mL,37℃反应过夜。3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:在10mL DNA样品中,加T4 DNA连接酶缓冲液1mL,T4 DNA连接酶1mL,14℃(室温)过夜,然后做大肠杆菌的转化。三、转化感受态细胞1. 制备的感受态细胞(-20℃保存的)。2. 在100mL的融化后处于冰浴的感受态细胞中,加入10mL连接产物,混匀,冰上放置30分钟,以后的操作参照实验一进行。同时做未加CAT片段的空白pQE-31载体质粒连接处理后的感受态细胞转化的对照。实验结果过夜培养后,实验组和对照组的两个培养皿上都可能会出现一些菌落。如果实验组的菌落数明显多于对照组的菌落,则是好征兆,但实验组中出现的菌落是否含有所需的DNA重组子还须进一步鉴定。
2023-06-28 08:27:091

什么是基因重组,如何才能基因重组

基因重组是一项十分精细的技术。只有掌握了这一高技术,才能在改造生物和创造生物中有所作为。因为这是在分子水平上的操作,其难度也就可想而知了。但是,再难也难不倒我们的科学家。一般来说,基因重组分为4个步骤。首先,是获得具有目的基因的片段,即DNA片段。这个片段的取得既可用工具酶,也可以用机械方法剪取DNA片段。用化学合成人工基因片段,是另一种比较简便的有效的方法。第二,是把含有目的基因的片段与载体(质粒或病毒)DNA分子重组在一起。第三,是把重组好的DNA分子导入宿主细胞。第四,让这些重组的DNA分子在细胞内与宿主的DNA组合在一起,让它表达出来,选育出含有所需要的重组DNA宿主细胞。对宿主细胞进行培育,如果是植物,它就会长成一棵新植物;如果是大肠杆菌,它就会变成能合成目的基因控制的化学有机物;是动物细胞,就会形成具有新性状的动物。这在理论上是可以成立的,而且实践也证明,基因重组技术的确可以用来改造生物和创造生物。基因工程问世之后,发展之快令人目不暇接。不论是微生物还是植物、动物,用基因重组技术都得到了许多新品种。基因工程已成了改造和创造生物种的最有力的手段。
2023-06-28 08:27:281

重组dna技术包括哪些主要步骤

重组DNA技术主要包括四个步骤:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合的过程实际上是不同来源的DNA重新组合的过程,是基因工程的核心。3、将目的基因导入受体细胞用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。4、目的基因的检测和表达目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。扩展资料重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。重组DNA技术使用的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶。常用的载体有质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。参考资料来源:百度百科-重组DNA技术
2023-06-28 08:27:385

基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术.______

是的。基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞或基因工程生物体的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。扩展资料:基因拼接的一些方法:1、粘性末端法,又称限制性内切酶酶切法。要求两种DNA分子具备同一个限制性内切酶切点,能产生互补的粘性末端。主要缺点是较难选择重组质粒,而且当外源DNA片段的长度超过载体DNA较多时,形成的重组质粒的转化率较低。2、多聚dA-dT或dG-dC接尾法,是用末端转移酶将两种线性DNA分子的3′端分别加上dA或dT (dG或dC)多聚体,通过多聚体互补而结合在一起,用DNA连接酶处理,形成共价闭合的重组DNA分子。1972年用这种方法将病毒DNA与噬菌体DNA重组在一起。3、平末端法,有些核酸内切酶切出的DNA分子是平末端,对DNA分子的单链末端亦可用核酸酶S1或DNA聚合酶Ⅰ来修平或补齐,然后用T4 DNA连接酶将不同片段连接起来。该法形成重组DNA分子的效率低,只及粘性末端法的1%。参考资料来源:百度百科-基因拼接方法参考资料来源:百度百科-基因工程
2023-06-28 08:28:101

基因重组有哪几种类型?

我是按高中知识的要求来回答的:首先,基因重组的概念:控制不同形状的基因重新组合第二,发生时间:减数分裂过程中第三,也就是您问到的“类型”:共分为两种:(注意发生的两个时期)1、简单来说就是减数分裂形成四分体时,同源染色体上的非姐妹染色单体之间的交叉互换(发生在前期);2、即减数第一次分裂后期非同源染色体的自由组合导致的非等位基因的自由组合第四,其意义:基因重组为生物的变异提供了极其丰富的来源,是生物变异的主要来源,为生物进化提供原材料以上应该可以解决您的疑问,如果对我的表述还有什么问题可以给我发百度消息。
2023-06-28 08:28:381

DNA重组技术是怎样的原理 ,高中生物

最基本的原理是核酸内切酶的特异切割活性(高中一般只提粘性末端)和连接酶的链接活性,以及碱基互补配对。通过使用特定的核酸内切酶,将目的片段和经改造后的特定载体(质粒、病毒核酸链,其上有特异的切割位点,转录启动、终止序列,以及用于筛选表达的序列)切割,形成能够互补的粘性末端,再通过连接酶进行聚合形成重组子。将重组质粒(以质粒为例)导入感受态细胞,培养,筛选,最后进行表达
2023-06-28 08:28:522

基因工程与DNA重组的区别?

基因工程是一个大概念.是利用分子生物学手段对生物体基因进行改造而具有人类所期望的性状. 基因重组是一个操作过程.是将外源的DNA插入到另一物种的基因组中去.基因重组是基因工程的重要手段之一.,1,基因工程中包含DNA重组这一步骤,0,
2023-06-28 08:28:591

基因工程与DNA重组的区别

基因工程是一个大概念。是利用分子生物学手段对生物体基因进行改造而具有人类所期望的性状。基因重组是一个操作过程。是将外源的DNA插入到另一物种的基因组中去。基因重组是基因工程的重要手段之一。
2023-06-28 08:29:102

基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术.______

是的。基因工程(genetic engineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用,包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建(即重组DNA技术);而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞或基因工程生物体的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。扩展资料:基因拼接的一些方法:1、粘性末端法,又称限制性内切酶酶切法。要求两种DNA分子具备同一个限制性内切酶切点,能产生互补的粘性末端。主要缺点是较难选择重组质粒,而且当外源DNA片段的长度超过载体DNA较多时,形成的重组质粒的转化率较低。2、多聚dA-dT或dG-dC接尾法,是用末端转移酶将两种线性DNA分子的3′端分别加上dA或dT (dG或dC)多聚体,通过多聚体互补而结合在一起,用DNA连接酶处理,形成共价闭合的重组DNA分子。1972年用这种方法将病毒DNA与噬菌体DNA重组在一起。3、平末端法,有些核酸内切酶切出的DNA分子是平末端,对DNA分子的单链末端亦可用核酸酶S1或DNA聚合酶Ⅰ来修平或补齐,然后用T4 DNA连接酶将不同片段连接起来。该法形成重组DNA分子的效率低,只及粘性末端法的1%。参考资料来源:百度百科-基因拼接方法参考资料来源:百度百科-基因工程
2023-06-28 08:29:192

生物基因重组发生在什么时期

基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。其发生在二倍体生物的每一个世代中。基因是一个包含必要的信息,在可控制的方式生产功能的RNA产物的核酸段。 基因重组发生在哪个阶段 减数分裂中哪些时期发生基因重组?减数分裂前期和后期发生基因重组。 减数第一次分裂前期(也可以说是减数分裂的四分体时期):同源染色体上的非姐妹染色单体的交叉互换) 减数第一次分裂后期:同源色体分离,非同源染色体自由组合,发生基因重组。 基因重组,每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生于亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密相连,发生联会。这个结构称为二阶体,二阶体的每条染色体单元称为染色单体,染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体(非姐妹染色单体)之间。 基因重组的过程 二阶体中的两条染色单体在相应的位点发生断裂,断裂的两端成“十”字形重接,产生新的染色单体。每一条新染色单体之间的接点的一端包含来自一条染色单体的物质,另一端包含另一条染色单体的物质。 发生重组的必须条件是两条DNA链的互补性。每条染色单体包含一条长的双链DNA,发生重组的断裂位点依赖于位点附近碱基的互补配对。当双链中的一条链与另一条双链的一条链发生交叉时,将形成一条杂合DNA。每个重组包括左侧亲本双链体DNA通过一段杂合DNA与右侧的另一条亲本双链体相连。 杂合DNA的形成同时也要求两条重组双链体的序列相邻,并能在两条互补链之前配对。如果两条亲本双链DNA在重组区域没有差别,将形成完全互补配对的杂合DNA。若在该区域内,两条亲本双链DNA存在小差异,这种反应也能发生但杂合DNA存在错配点。错配点将在后续进行错配纠正。 从广义上讲,任何造成基因型变化的基因交流过程,都叫做基因重组。而狭义的基因重组仅指涉及DNA分子内断裂—复合的基因交流。真核生物在减数分裂时,通过非同源染色体的自由组合形成各种不同的配子,雌雄配子结合产生基因型各不相同的后代,这种重组过程虽然也导致基因型的变化,但是由于它不涉及DNA分子内的断裂c复合,因此,不包括在狭义的基因重组的范围之内。 根据重组的机制和对蛋白质因子的要求不同,可以将狭义的基因重组分为三种类型,即同源重组、位点特异性重组和异常重组。同源重组的发生依赖于大范围的DNA同源序列的联会,在重组过程中,两条染色体或DNA分子相互交换对等的部分。真核生物的非姊妹染色单体的交换、细菌以及某些低等真核生物的转化、细菌的转导接合、噬菌体的重组等都属于这种类型。大肠杆菌的同源重组需要RecA蛋白,类似的蛋白质也存在于其他细菌中。位点特异性重组发生在两个DNA分子的特异位点上。它的发生依赖于小范围的DNA同源序列的联会,重组也只限于这个小范围。两个DNA分子并不交换对等的部分,有时是一个DNA分子整合到另一个DNA分子中。这种重组不需要RecA蛋白的参与。异常重组发生在顺序不相同的DNA分子间,在形成重组分子时往往依赖于DNA的复制而完成重组过程。例如,在转座过程中,转座因子从染色体的一个区段转移到另一个区段,或从一条染色体转移到另一条染色体。这种类型的重组也不需要RecA蛋白的参与。 现代基因工程技术是在试管内按人为的设计实施基因重组的技术,也称为重组DNA。 目的是将一个个体细胞内的遗传基因转移到另一个不同性状的个体细胞内DNA分子,使之发生遗传变异。来自供体的目的基因被转入受体细菌后,可进行基因产物的表达,从而获得用一般方法难以获得的产品,如胰岛素、干扰素、乙型肝炎疫苗等是通过以相应基因与大肠杆菌或酵母菌的基因重组而大量生产的。即基因重组 由于基因的独立分配或连锁基因之间的交换而在后代中出现亲代所没有的基因组合。 原核生物的基因重组有转化、转导和接合等方式。受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片段,并使它整合到自己的基因组中,从而获得供体细胞部分遗传性状的现象,称为转化。通过噬菌体媒介,将供体细胞DNA片段带进受体细胞中,使后者获得前者的部分遗传性状的现象,称为转导。自然中转导现象较普遍,可能是低等生物进化过程中产生新的基因组合的一种基本方式。供体菌和受体菌的完整细胞经直接接触而传递大段DNA遗传信息的现象,称为接合。细菌和放线菌均有接合现象。高等动植物中的基因重组通常在有性生殖过程中进行,即在性细胞成熟时发生减数分裂时同源染色体的部分遗传物质可实现交换,导致基因重组。基因重组是杂交育种的生物学基础,对生物圈的繁荣昌盛起重要作用,也是基因工程中的关键性内容。 从广义上讲,任何造成基因型变化的基因交流过程,都叫做基因重组。而狭义的基因重组仅指涉及DNA分子内断裂—复合的基因交流。真核生物在减数分裂时,通过非同源染色体的自由组合形成各种不同的配子,雌雄配子结合产生基因型各不相同的后代,这种重组过程虽然也导致基因型的变化,但是由于它不涉及DNA分子内的断裂c复合,因此,不包括在狭义的基因重组的范围之内。
2023-06-28 08:29:341

重组DNA技术包括哪些步骤?

重组DNA技术主要包括四个步骤:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合的过程实际上是不同来源的DNA重新组合的过程,是基因工程的核心。3、将目的基因导入受体细胞用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。目的基因导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。4、目的基因的检测和表达目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程。扩展资料重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。重组DNA技术使用的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶。常用的载体有质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。参考资料来源:百度百科-重组DNA技术
2023-06-28 08:29:411

基因重组的概念是什么?

基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生与亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密相连,发生联会。这个结构称为二阶体,二阶体的每条染色体单元称为染色单体,染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体(非姐妹染色单体)之间。基因重组的过程二阶体中的两条染色单体在相应的位点发生断裂,断裂的两端成“十”字形重接,产生新的染色单体。每一条新染色单体之间的接点的一端包含来自一条染色单体的物质,另一端包含另一条染色单体的物质。发生重组的必须条件是两条DNA链的互补性。每条染色单体包含一条长的双链DNA,发生重组的断裂位点依赖于位点附近碱基的互补配对。当双链中的一条链与另一条双链的一条链发生交叉时,将形成一条杂合DNA。每个重组包括左侧亲本双链体DNA通过一段杂合DNA与右侧的另一条亲本双链体相连。
2023-06-28 08:30:071

dna重组技术又称

重组DNA技术又称为()A . 染色体工程B . 染色体组工程C . 细胞质工程D . 基因工程E . 细胞融合参考答案: D
2023-06-28 08:30:251