反硝化细菌

硝化细菌：在曝气池中保持pH6.8~8.5，溶解氧2~3mg/L，污泥龄9d以上，进水含氨氮就可以了。反硝化细菌：缺氧池溶解氧0.2~0.6，BOD5比硝酸盐氮3~5倍以上，适宜的搅拌，曝气吹脱产生的氮气。

一般的话12-24

你需要知道硝化细菌的作用是什么，一般情况下我们知道，硝化细菌使用在鱼缸里的，净化和处理水里面的氮气，而氮气却是植物不能缺少的物质，在硝化细菌吸收了氮气产生的亚硝酸盐对土壤也不好。

反硝化细菌生长快。1、反硝化菌是一个大类，包括很多种菌，能将硝酸盐转化成氮气的都是，世代周期会比较短，繁殖较快。2、硝化细菌对光线厌恶，亚硝酸菌对近紫外线的可见光非常敏感，紫外线更使硝化细菌死亡，且生长速度慢。

它们在氙气条件下，利用硝酸中的氧，氧化有机物质而获得自身生命活动所需的能量。反硝化细菌广泛分布于土壤、厩肥和污水中。可以将硝态氮转化为氮气而不是氨态氮，与硝化细菌作用不完全相反。主要应用于污水处理,如景观水治理,城市内河治理,水产养殖处理等,其中水产养殖污水处理应用最为广泛。

需要。反硝化细菌扩容的营养物质为容器内配置COD2000mg/L，硝酸盐氮200mg/L，总磷20mg/L。其中COD可以用葡萄糖配置，总磷可以用磷酸二氢钾配置，硝酸盐可以用硝酸钠或硝酸钾配置。

硝化是NH3-N转变为NO3-氮，反硝化是指NO3-态氮转化为N2，硝化用硝酸或硝酸盐处理,与硝酸或硝酸盐结合;尤指将〖有机化合物〗转化成硝基化合物或硝酸酯(如用硝酸和硫酸的混合物处理)。反硝化细菌生存需求：反硝化细菌如同腐生菌那样，从含碳化合物的广泛范围里氧化并建造自己的体内物质。在土壤中根的分泌物、死亡的植物根的残体及其分解的地上部，对这些微生物来说都是有机质的来源。但是它们也能够利用包含在土壤有机质富里酸组分中的易分解化合物。在自然条件下淹水时，反硝化作用引起土壤氮素的损失，是由有机质含量低的土壤向有机质含量高的土壤增长。反硝化细菌在养殖水体中的作用：1、降低水体中的亚硝酸盐，减轻亚硝酸盐对水生生物的毒害。众所周知，由于当前我国水产养殖业集约化程度的提高，养殖水体出现亚硝酸盐升高的现象，直接威胁养殖生物的生命,使养殖物的代谢器官功能下降，抗病力降低，严重时会造成大批死亡。严重影响养殖户的利益。而反硝化细菌可以利用亚硝酸盐为底物，通过反硝化作用转化为氮气排出水体，降低亚硝酸盐的浓度，减缓或避免了亚硝酸盐对水产生物的毒害作用。2、减少水体的富营养化，净化水体。天然水体中由于过量营养物质（主要是指氮、磷等）的排入，引起各种水生生物植物异常繁殖和生长，这种现象称作水体富营养化。水体富营养化导致藻类在水体中的过量生长，占据了鱼类活动的空间；耗尽了水中的溶解氧，严重影响鱼类的生存；藻类种类由以硅藻和绿藻为主转为以蓝藻为主，毒害水生生物。

目前市面上还没有发现液态的反硝化细菌，只有固态的反硝化细菌。

采用优良反硝化菌株经特殊工艺发酵而成。菌株反硝化能力强，能够以亚硝态氮和硝态氮作氮源，活化简单，繁殖迅速，作用效果显著，24小时可见效。针对养殖水体亚硝酸盐偏高的情况有特效；针对藻类过度繁殖的水体能够大量消耗氮素营养，切断藻类氮素营养，维护良好水色；菌株在溶氧充足及厌氧条件下均可生存并进行反硝化反应，优化底质的物理、化学环境。

因为反硝化细菌体内有特定的酶。硝酸盐还原菌是反硝化细菌的一种，一般属于兼氧，电子供体为碳源，有氧时可以以氧气作为电子受体，无氧时可以以硝酸盐做电子受体。反硝化细菌，是指一类能将硝态氮还原为气态氮（N2）的细菌群，已知的有10科、50个属以上的种类具有反硝化作用。自然界中最普遍的反硝化细菌是假单胞菌属，其次是产碱杆菌属。在土壤氧气不足时，将硝酸盐还原成亚硝酸盐，并进一步把亚硝酸盐还原为氨及游离氮的细菌。能将硝酸盐还原，并产生分子态氮气。细菌分布范围较广，大量存在于污水、土壤及厩肥中，在缺氧的条件下能够将硝酸盐变成氨和氮。

反硝化细菌多为异养、兼性厌氧细菌!其进行新陈代谢的过程中，进行无氧呼吸，以硝酸根作为电子受体，氧化有机物，还原硝酸根为氮气！中间并没有经过亚硝酸根的阶段！只是在硝化的过程中，先由亚硝化细菌将NH3变为亚硝酸跟，再由硝化细菌将亚硝酸跟变为硝酸根！反硝化是直接由硝酸根到氮气！

反硝化细菌主要在厌氧条件下，利用分解有机物的能量，将亚硝酸盐还原为氮气。常用于污水处理，在水产养殖中作用如下：1、还原水体中的亚硝酸盐，使之生成无害的氮气，解除亚硝酸盐的危害。2、消耗氮素营养，抑制藻类过度繁殖，净化水体。3、抑制致病菌。4、改良底质。

1、还原水体中的亚硝酸盐，使之生成无害的氮气，解除亚硝酸盐的危害。2、消耗氮素营养，抑制藻类过度繁殖，净化水体。3、抑制致病菌。4、改良底质。

异养型生物 ：不能通过自身将无机物合成有机物，只能通过摄取有机物维持新陈代谢。反硝化细菌需要从土壤中吸收有机物，维持生命活动，只是在氧气充足与否的情况下进行以不同的方式获得氧气，反硝化作用只是附带的，并非其维持生命活动的能量来源。

反硝化细菌多为异养、兼性厌氧细菌!其进行新陈代谢的过程中，进行无氧呼吸，以硝酸根作为电子受体，氧化有机物，还原硝酸根为氮气！需要指出的是无氧呼吸并不是我们通常意义上理解的发酵！其过程基本和有氧呼吸类似，只不过最终电子受体不是氧气而是硝酸根！

反硝化细菌既不能进行光合作用也不能进行化能合成作用，当然是异养啦。这是说它的同化类型，异化类型则是厌氧型。所以新陈代谢类型是异氧厌氧型。

二者同时使用适宜温度在30度左右。反硝化细菌最适宜的生长温度：反硝化验NO3-的去除在温度＜8℃时也能持续进行,当温度从14℃增加到19℃时,对每天N的去除量影响很小。相反,温度从19℃上升到24℃时导致反硝化速度增加了60%,更高的温度继续加速反硝化作用,在30℃时反硝化速度比在14℃时的速度快2倍。 温度对反硝化速率的影响很大，反硝化细菌的最适宜温度在30℃左右，低于5℃或高于40℃，反硝化的作用几乎停止。枯草芽孢杆菌在10-40℃范围内能够正常生长繁殖，在10-24℃生长繁殖较缓慢，并随着温度增高而繁殖加快，25-37℃最适宜生长繁殖，在碳源充足（也就是有机质丰富）时约20—30分钟繁殖一代，超过48℃后生长繁殖受到抑制，但也能繁殖，在60℃条件下可长期存活。

反硝化细菌的有哪些生长特征1、视水体恶化程度，用量可酌加。2、不得与消毒杀菌类药物同时使用，须间隔3天以上。3、原则上本品不能与肥料同时使用，施肥后两天内也不宜使用本品，可根据具体情况灵活使用。4、使用本品后水体透明度增加是正常现象，适量施肥即可。硝化作用是指氨在微生物作用下氧化为硝酸的过程。硝化细菌将氨氧化为硝酸的过程。通常发生在通气良好的土壤、厩肥、堆肥和活性污泥中。反硝化作用：反硝化细菌在缺氧条件下，还原硝酸盐，释放出分子态氮（N2）或一氧化二氮（N2O）的过程。

硝化菌泥龄应该在5~8天左右反硝化细菌泥龄应该在15天左右

反硝化细菌既不能进行光合作用也不能进行化能合成作用，当然是异养啦。这是说它的同化类型，异化类型则是厌氧型。所以新陈代谢类型是异氧厌氧型。

反硝化细菌多为异养、兼性厌氧细菌。【简介】反硝化细菌是一种能引起反硝化作用的细菌。多为异养、兼性厌氧细菌，如反硝化杆菌、斯氏杆菌、萤气极毛杆菌等。【特点】菌株反硝化能力强，能够以亚硝态氮和硝态氮作氮源，活化简单，繁殖迅速，作用效果显著，24小时可见效。针对养殖水体亚硝酸盐偏高的情况有特效；针对藻类过度繁殖的水体能够大量消耗氮素营养，切断藻类氮素营养，维护良好水色；菌株在溶氧充足及厌氧条件下均可生存并进行反硝化反应，优化底质的物理、化学环境。【分布用途】它们在氙气条件下，利用硝酸中的氧，氧化有机物质而获得自身生命活动所需的能量。反硝化细菌广泛分布于土壤、厩肥和污水中。可以将硝态氮转化为氮气而不是氨态氮，与硝化细菌作用不完全相反。主要应用于污水处理,如景观水治理,城市内河治理,水产养殖处理等,其中水产养殖污水处理应用最为广泛。【主要作用】1、还原水体中的亚硝酸盐，使之生成无害的氮气，解除亚硝酸盐的危害。2、消耗氮素营养，抑制藻类过度繁殖，净化水体。3、抑制致病菌。4、改良底质。

甘度_反硝化细菌多为异养，兼性厌氧细菌，【特点】菌株反硝化能力强，能够以亚硝态氮和硝态氮作氮源，活化简单，繁殖迅速，作用效果显著。针对养殖水体亚硝酸盐偏高的情况有特效；针对藻类过度繁殖的水体能够大量消耗氮素营养，切断藻类氮素营养，维护良好水色；菌株在溶氧充足及厌氧条件下均可生存并进行反硝化反应，优化底质的物理、化学环境。【分布用途】它们在氙气条件下，利用硝酸中的氧，氧化有机物质而获得自身生命活动所需的能量。反硝化细菌广泛分布于土壤、厩肥和污水中。可以将硝态氮转化为氮气而不是氨态氮，与硝化细菌作用不完全相反。主要应用于污水处理,如景观水治理,城市内河治理,水产养殖处理等,其中水产养殖污水处理应用最为广泛。【主要作用】1、还原水体中的亚硝酸盐，使之生成无害的氮气，解除亚硝酸盐的危害。2、消耗氮素营养，抑制藻类过度繁殖，净化水体。3、抑制致病菌。4、改良底质。

反硝化细菌是一类能利用亚硝酸盐，氨氮等做氟源，有机质为碳源，且能进行自身繁殖的微生物，活菌的生长繁殖需要一定的条件，因池塘的水质环境是决定活菌制剂效果的重要条件，芽孢杆菌是一类对有机质分解很强的微生物，降解有机质，减少亚硝酸盐的产生，但是不能有效的利用亚硝酸盐。反硝化细菌可以直接的降解和分解亚硝酸盐。目前主要反硝化细菌应用于污水处理,如景观水治理,城市内河治理,水产养殖处理等,其中水产养殖污水处理应用最为广泛。北海群林生物工程有限公司是国内生产反硝化细菌为数不多的厂家之一，生产的反硝化细菌具有菌种纯，活性强，效果好等特点

摘要　　本发明公开了一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用，申请人通过富集从湿地中筛选出一种好氧反硝化细菌，施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M2013488。该细菌可用于处理高NO3-的废水，最高去除率可达99.6%，且无亚硝态氮的累积，并可同时去除有机废水中的COD，去除率可达60%-80%。相比其他报道的用于污水处理的好氧反硝化细菌，本发明菌株对污水处理高效，24h后对硝态氮的去除率可达99.6%，脱氮速率可达22.6mg?L-1?h-1，其除氮效率是已报道菌株的1.51～4.57倍，可以单独使用或者固定化后应用于废水处理中，应用广泛。　　权利要求书　　1.一种好氧反硝化细菌，其特征在于：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M 2013488。　　2.权利要求1所述的好氧反硝化细菌在污水处理中的应用。　　3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用海藻酸钠进行固定。　　4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用聚乙烯醇进行固定。　　5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用海藻酸钠和聚乙烯醇进行固定。　　说明书　　一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用　　技术领域　　本发明属于环境微生物领域，具体涉及一种好氧反硝化细菌，还涉及该细菌在污水处理 中的应用。　　背景技术　　近年来，工业废水的大量排放以及农业大量施用化肥，导致氮素污染引起的水环境问题 日益突出，而其中硝酸盐污染问题尤为严重。硝酸盐及其衍生物因具有致病、致癌作用而影 响人类健康。因此，加大对污水中氮素污染的治理，尤其是提高硝酸盐氮的处理效率是目前 污水处理技术中亟待解决的问题。　　生物反硝化脱氮是利用微生物的作用，在厌氧或缺氧条件下，以硝酸盐替代氧作电子受 体将硝酸盐逐步还原为气态产物脱除，是一种经济有效的脱氮方式。但往往由于受到厌氧和 缺氧条件的限制，生物脱氮过程进行的并不彻底。好氧反硝化菌的出现使得反硝化过程更容 易控制，其是利用好氧反硝化酶的作用，在有氧条件下进行反硝化作用的一类反硝化细菌。 自20世纪80年代，Robertson等(Robertson et al.Archives of Microbiology,1984,139,351-354) 在除硫和反硝化处理系统中首次分离出好氧反硝化菌以来，人们对于好氧反硝化菌的脱氮性 能已经进行了一定程度上的研究。然而已筛得的好氧反硝化菌大部分脱氮效率不高，一般在 溶解氧浓度较低时才会具有反硝化活性，因此，筛选分离出高效的好氧反硝化细菌菌株，并 将其应用于实际污水处理中，以节约脱氮成本，提高经济效益具有十分重要的意义。　　发明内容　　本发明的目的在于提供一株好氧反硝化细菌，该细菌已于2013年10月23日送往中国 典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保 藏编号：CCTCC NO：M2013488。该菌株具有高效脱除水体中硝酸盐氮的能力。　　本发明的另一个目的在于提供了一株好氧反硝化细菌在污水处理中的应用，单独使用该 菌，或者将该菌进行固定化后投放到水体中，均可以有效地去除水体中的硝酸盐氮，且无亚 硝态氮的累积，并且除氮速度快。　　为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：　　一种好氧反硝化细菌，其筛选过程是：　　(1)富集　　于2013年5月从增氧型复合垂直流人工湿地小试系统两套系统中采集土壤样品，采样 深度为表层10cm。无菌条件下称量10g土壤接入500mL的液体培养基中进行富集，利用间 歇曝气法进行富集，间歇时间为12h，每次曝气3h，于30℃温箱培养，每五天转接一次， 富集时间1个月。测得硝态氮的去除率为99.9%，基本上没有亚硝氮的累积。　　所述液体培养基为KNO32g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.2g，柠檬酸 钠5g，微量盐溶液2mL;蒸馏水1000mL。　　(2)初筛　　采用涂布法将富集得到的菌悬液均匀涂布于BTB选择性培养基，30℃温箱培养3d后， 选取变蓝的菌落或晕圈作为初筛菌。　　(3)复筛　　将初筛的菌株接种于液体培养基，30℃，120r·min-1摇床培养5d，进行复筛。每24小 时利用格氏试剂、二苯胺试剂显色来检测硝酸盐的降解情况，选取去除效果好的菌株。　　所述BTB培养基为：琼脂20g，KNO31g，KH2PO41g，FeCl2·6H2O0.5g，CaCl2·7H2O 0.2g，MgSO4·7H2O1g，琥珀酸钠8.5g，BTB(1%溶于酒精)1mL;蒸馏水1000mL，用 1mol·L-1NaOH调节pH至7.0～7.3。　　通过综合比较硝态氮的去除率，亚硝态氮的累积量以及硝态氮的去除速率等指标，最终 从28株初筛菌中筛选出一株好氧反硝化细菌JH-1，其16SrRNA为SEQ ID NO.1所示。该 细菌已于2013年10月23日送往中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：施氏假单 胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保藏编号：CCTCC NO：M2013488，地址：中国武汉 武汉大学。　　JH-1为革兰氏阴性菌，为短杆菌，长为1.0um—1.5um,宽为0.2um—0,4um,无芽孢和鞭 毛，在固体培养基上形成不透明的白色菌落，菌落表面光滑，边缘整齐。　　JH-1生理生化特性–酶活、碳源同化　　+：阳性，-：阴性，　　JH-1生理生化特性--酶活　　+：阳性反应;-：阴性反应;W：弱阳性反应　　一种好氧反硝化细菌在污水处理中的应用，其步骤是：　　(1)将活化后的菌液接种于待处理的含氮废水中，投加量为受处理废水体积的5%，pH 范围为7.0-7.3，在摇床(30℃，120r/min)条件下，定时取样检测水样中硝态氮、COD的 去除率及亚硝态氮的累积量。　　(2)用三种不同的基质包埋细菌获得固定化好氧反硝化细菌，并用于废水脱氮处理中　　A、海藻酸钠固定法：称取4g海藻酸钠溶解到60mL的0.9%的生理盐水中，高温高压 (121℃，105-110kPa)灭菌冷却至室温(20-25℃)，与80mL好氧反硝化细菌悬浮液充分混 合，滴入4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴，边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形 成的小球放置于4℃冰箱中交联固化12-24h后，用生理盐水洗涤2-3次备用。　　B、聚乙烯醇固定法：配制60mL10%w/v的聚乙烯醇溶液，高温高压(121℃，105-110kPa) 灭菌冷却到室温(20-25℃)，与80mL好氧反硝化菌悬液充分混合，滴入饱和硼酸溶液中， 冰浴，边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形成的小球放置于4℃冰箱中交联固 化12-24h后，用生理盐水洗涤2-3次备用。　　C、海藻酸钠和聚乙烯醇固定法：5%w/v聚乙烯醇和5%w/v的海藻酸钠的混合溶液60mL， 加热使其完全混合，高温高压灭菌(121℃，105-110kPa)，冷却至室温(20-25℃)，与80mL 好氧反硝化菌悬液充分混合;将此混合液用注射器挤入到4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴， 边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形成的小球放置于4℃冰箱中交联固化11-13h， 用无菌水清洗小球，再放入饱和硼酸溶液中，于4℃冰箱中交联固化11-13h，用生理盐水洗 涤2-3次备用。　　将A、B、C三步制得的好氧反硝化细菌小球从冰箱中取出，用双蒸水或者0.9%w/v的 生理盐水洗涤3-4次，然后浸泡在0.9%的生理盐水中，曝气约11-13h左右以活化固定化小 球，将一定量活化后的固定化小球填充到人工湿地模拟柱中，进行废水脱氮处理研究。　　(3)于天然湖水中加入适量外加碳源柠檬酸钠，将经24h活化的施氏假单胞菌JH-1 按5%的接种量接入湖水中，摇床(30℃，120rpm)培养48h测定水体中硝态氮以及亚硝 态氮的量。　　与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果　　本发明菌株可利用的碳源和氮源范围广泛，易于培养。　　本发明菌株可用于处理高NO3-的废水，最高去除率可达99.6%，且无亚硝态氮的累积。　　本发明菌株可同时去除有机废水中的COD，去除率可达60%-80%。　　本发明菌株可以单独使用或者固定化后应用于废水处理中，应用广泛。　　相比其他已发现的好氧反硝化细菌，菌株JH-1是一株非常高效的好氧反硝化细菌，24h 后对硝态氮的去除率可达99.6%，脱氮速率可达22.6mg·L-1·h-1，已报道分离出的好氧反硝化 菌其脱氮速率大多数在4.50～13.7mg·L-1·h-1。JH-1脱氮速率是这些菌的1.51～4.57倍。

1、用30倍重量水浸泡本品200-500克/亩·米水深3小时后，全池泼洒。适用范围：①各种海、淡水养殖水体亚硝态氮含量超标。②藻类过度繁殖，水体透明度太低，水色太浓。③底质恶化，长泥皮、青苔。④老化塘。2、养殖期间定期（7-15天200-500克/亩·米水深）使用能够有效预防和控制亚硝酸盐危害。3、针对养殖水体亚硝酸盐比较高时，用500克红糖配合1包反硝化细菌加水浸泡12小时以上，每包可用1.5亩，上午10点泼洒（在泼洒上述产品前半小时，全池泼洒酒精，1.5千克/亩·米水深,处理亚硝酸盐效果更佳），夜间再投放粒状增氧剂或大包装过氧化钙，降低亚硝酸盐效果显著，情况特别严重按上述方法隔三天再使用一次，亚硝酸盐基本上达到安全标准。

硝化作用是指异养微生物进行氨化作用产生的氨，被硝化细菌、亚硝化细菌氧化成亚硝酸，再氧化成硝酸的过程。 反硝化作用即硝酸还原作用。土壤中存在许多化能异养型反硝化细菌，在通气不良，缺少氧气的条件下，可利用硝酸中的氧，使葡萄糖氧化成二氧化碳和水并释放能量。构成氮循环的主要环节是：生物体内有机氮的合成、氨化作用、硝化作用、反硝化作用和固氮作用。 植物吸收土壤中的铵盐和硝酸盐，进而将这些无机氮同化成植物体内的蛋白质等有机氮。动物直接或间接以植物为食物，将植物体内的有机氮同化成动物体内的有机氮。这一过程叫做生物体内有机氮的合成。动植物的遗体、排出物和残落物中的有机氮被微生物分解后形成氨，这一过程叫做氨化作用。在有氧的条件下，土壤中的氨或铵盐在硝化细菌的作用下最终氧化成硝酸盐，这一过程叫做硝化作用。氨化作用和硝化作用产生的无机氮，都能被植物吸收利用。在氧气不足的条件下，土壤中的硝酸盐被反硝化细菌等多种微生物还原成亚硝酸盐，并且进一步还原成分子态氮，分子态氮则返回到大气中，这一过程叫做反硝化作用。 大气中的分子态氮被还原成氨，这一过程叫做固氮作用。没有固氮作用，大气中的分子态氮就不能被植物吸收利用。地球上固氮作用的途径有三种：生物固氮、工业固氮(用高温、高压和化学催化的方法，将氮转化成氨)和高能固氮(如闪电等高空瞬间放电所产生的高能，可以使空气中的氮与水中的氢结合，形成氨和硝酸，氨和硝酸则由雨水带到地面)。据科学家估算，每年生物固氮的总量占地球上固氮总量的90%左右，可见，生物固氮在地球的氮循环中具有十分重要的作用。 根瘤菌为什么是消费者 圆褐固氮菌为什么是分解者? 硝化细菌为什么是生产者,反硝化细菌为什么是分解者? 根瘤菌从豆科植物中获得有机物，当然应该属于消费者，因为是从活体中获得有机物。 而圆褐固氮菌则是从土壤中获得有机物，是为分解者。 硝化细菌能够把无机物合成有机物，属于生产者。 反硝化细菌也需要从土壤中吸收有机物，维持生命活动。所以应该是分解者。

异养型生物：不能通过自身将无机物合成有机物，只能通过摄取有机物维持新陈代谢。反硝化细菌需要从土壤中吸收有机物，维持生命活动，只是在氧气充足与否的情况下进行以不同的方式获得氧气，反硝化作用只是附带的，并非其维持生命活动的能量来源。

反硝化细菌是一种能引起反硝化作用的细菌，将硝态氮（NO3-）转化为氮气（N2）。反硝化作用：反硝化细菌在厌氧条件下，把硝酸盐及亚硝酸盐作为电子受体而生成氮气的过程。

反硝化细菌是一种能引起反硝化作用的细菌。多为异养、兼性厌氧细菌，如反硝化杆菌、斯氏杆菌、萤气极毛杆菌等。

不可以反硝化细菌和乳酸菌不可以一起扩培

反硝化作用:通过微生物的活动，将硝酸盐或亚硝酸盐还原为气态分子氮或气态氮氧化物的过程反硝化细菌多是异养兼性厌氧细菌，它们依赖于有机物质而生存。其所需的营养物由水中扩散到生物活性层，是由溶解有机物连同亚硝酸盐、硝酸盐、氢化物组成。由此提供的营养物使细菌可以生长、繁殖。代谢产物包括:氮气，二氧化碳、碳酸氢盐和水。由此可见，其代谢产物，使土壤的PH趋于酸性主要是指二氧化碳、碳酸氢盐等。

反硝化细菌是分解者。固氮的蓝藻是生产者,圆褐固氮菌是分解者,固氮的根瘤菌是消费者。 所以固氮的微生物在生态系统中可属于生产者、消费者或分解者。

脱氮，污水中的含氮物质有硝化细菌，生成硝态氮，由反硝化细菌，生成氮气，达到降低污水中氮含量的目的！！具体反应式查一下专业书吧！！

1、视水体恶化程度，用量可酌加。2、不得与消毒杀菌类药物同时使用，须间隔3天以上。3、原则上本品不能与肥料同时使用，施肥后两天内也不宜使用本品，可根据具体情况灵活使用。4、使用本品后水体透明度增加是正常现象，适量施肥即可。

反硝化作用反应式：NO3— +CH3OH ————— N2 + CO2+H2O+ OH—

反硝化细菌多为异养、兼性厌氧细菌!其进行新陈代谢的过程中，进行无氧呼吸，以硝酸根作为电子受体，氧化有机物，还原硝酸根为氮气！需要指出的是无氧呼吸并不是我们通常意义上理解的发酵！其过程基本和有氧呼吸类似，只不过最终电子受体不是氧气而是硝酸根！北海群林反硝化细菌、选用菌株强盛、处理效果明显、保存时间长。

硝化细菌是自养 硝化细菌通过化能合成作用将土壤中的无机物（亚硝酸等）转化为能供给自身能量的有机物维持自己的生活 不依靠外界，自给自足，不需要生产者的生物为自养硝化细菌本身就是生产者 但反硝化细菌是异氧型反硝化细菌需要从土壤中吸收有机物，维持生命活动，只是在氧气充足与否的情况下进行以不同的方式获得氧气，反硝化作用只是附带的，并非其维持生命活动的能量来源。

摘要　　本发明公开了一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用，申请人通过富集从湿地中筛选出一种好氧反硝化细菌，施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M2013488。该细菌可用于处理高NO3-的废水，最高去除率可达99.6%，且无亚硝态氮的累积，并可同时去除有机废水中的COD，去除率可达60%-80%。相比其他报道的用于污水处理的好氧反硝化细菌，本发明菌株对污水处理高效，24h后对硝态氮的去除率可达99.6%，脱氮速率可达22.6mg?L-1?h-1，其除氮效率是已报道菌株的1.51～4.57倍，可以单独使用或者固定化后应用于废水处理中，应用广泛。　　权利要求书　　1.一种好氧反硝化细菌，其特征在于：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，CCTCC NO：M 2013488。　　2.权利要求1所述的好氧反硝化细菌在污水处理中的应用。　　3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用海藻酸钠进行固定。　　4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用聚乙烯醇进行固定。　　5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，该好氧反硝化细菌用海藻酸钠和聚乙烯醇进行固定。　　说明书　　一种好氧反硝化细菌及其在污水处理中的应用　　技术领域　　本发明属于环境微生物领域，具体涉及一种好氧反硝化细菌，还涉及该细菌在污水处理 中的应用。　　背景技术　　近年来，工业废水的大量排放以及农业大量施用化肥，导致氮素污染引起的水环境问题 日益突出，而其中硝酸盐污染问题尤为严重。硝酸盐及其衍生物因具有致病、致癌作用而影 响人类健康。因此，加大对污水中氮素污染的治理，尤其是提高硝酸盐氮的处理效率是目前 污水处理技术中亟待解决的问题。　　生物反硝化脱氮是利用微生物的作用，在厌氧或缺氧条件下，以硝酸盐替代氧作电子受 体将硝酸盐逐步还原为气态产物脱除，是一种经济有效的脱氮方式。但往往由于受到厌氧和 缺氧条件的限制，生物脱氮过程进行的并不彻底。好氧反硝化菌的出现使得反硝化过程更容 易控制，其是利用好氧反硝化酶的作用，在有氧条件下进行反硝化作用的一类反硝化细菌。 自20世纪80年代，Robertson等(Robertson et al.Archives of Microbiology,1984,139,351-354) 在除硫和反硝化处理系统中首次分离出好氧反硝化菌以来，人们对于好氧反硝化菌的脱氮性 能已经进行了一定程度上的研究。然而已筛得的好氧反硝化菌大部分脱氮效率不高，一般在 溶解氧浓度较低时才会具有反硝化活性，因此，筛选分离出高效的好氧反硝化细菌菌株，并 将其应用于实际污水处理中，以节约脱氮成本，提高经济效益具有十分重要的意义。　　发明内容　　本发明的目的在于提供一株好氧反硝化细菌，该细菌已于2013年10月23日送往中国 典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保 藏编号：CCTCC NO：M2013488。该菌株具有高效脱除水体中硝酸盐氮的能力。　　本发明的另一个目的在于提供了一株好氧反硝化细菌在污水处理中的应用，单独使用该 菌，或者将该菌进行固定化后投放到水体中，均可以有效地去除水体中的硝酸盐氮，且无亚 硝态氮的累积，并且除氮速度快。　　为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：　　一种好氧反硝化细菌，其筛选过程是：　　(1)富集　　于2013年5月从增氧型复合垂直流人工湿地小试系统两套系统中采集土壤样品，采样 深度为表层10cm。无菌条件下称量10g土壤接入500mL的液体培养基中进行富集，利用间 歇曝气法进行富集，间歇时间为12h，每次曝气3h，于30℃温箱培养，每五天转接一次， 富集时间1个月。测得硝态氮的去除率为99.9%，基本上没有亚硝氮的累积。　　所述液体培养基为KNO32g，K2HPO41g，KH2PO41g，MgSO40.2g，柠檬酸 钠5g，微量盐溶液2mL;蒸馏水1000mL。　　(2)初筛　　采用涂布法将富集得到的菌悬液均匀涂布于BTB选择性培养基，30℃温箱培养3d后， 选取变蓝的菌落或晕圈作为初筛菌。　　(3)复筛　　将初筛的菌株接种于液体培养基，30℃，120r·min-1摇床培养5d，进行复筛。每24小 时利用格氏试剂、二苯胺试剂显色来检测硝酸盐的降解情况，选取去除效果好的菌株。　　所述BTB培养基为：琼脂20g，KNO31g，KH2PO41g，FeCl2·6H2O0.5g，CaCl2·7H2O 0.2g，MgSO4·7H2O1g，琥珀酸钠8.5g，BTB(1%溶于酒精)1mL;蒸馏水1000mL，用 1mol·L-1NaOH调节pH至7.0～7.3。　　通过综合比较硝态氮的去除率，亚硝态氮的累积量以及硝态氮的去除速率等指标，最终 从28株初筛菌中筛选出一株好氧反硝化细菌JH-1，其16SrRNA为SEQ ID NO.1所示。该 细菌已于2013年10月23日送往中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：施氏假单 胞菌(Pseudomonas stutzeri)JH-1，保藏编号：CCTCC NO：M2013488，地址：中国武汉 武汉大学。　　JH-1为革兰氏阴性菌，为短杆菌，长为1.0um—1.5um,宽为0.2um—0,4um,无芽孢和鞭 毛，在固体培养基上形成不透明的白色菌落，菌落表面光滑，边缘整齐。　　JH-1生理生化特性–酶活、碳源同化　　+：阳性，-：阴性，　　JH-1生理生化特性--酶活　　+：阳性反应;-：阴性反应;W：弱阳性反应　　一种好氧反硝化细菌在污水处理中的应用，其步骤是：　　(1)将活化后的菌液接种于待处理的含氮废水中，投加量为受处理废水体积的5%，pH 范围为7.0-7.3，在摇床(30℃，120r/min)条件下，定时取样检测水样中硝态氮、COD的 去除率及亚硝态氮的累积量。　　(2)用三种不同的基质包埋细菌获得固定化好氧反硝化细菌，并用于废水脱氮处理中　　A、海藻酸钠固定法：称取4g海藻酸钠溶解到60mL的0.9%的生理盐水中，高温高压 (121℃，105-110kPa)灭菌冷却至室温(20-25℃)，与80mL好氧反硝化细菌悬浮液充分混 合，滴入4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴，边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形 成的小球放置于4℃冰箱中交联固化12-24h后，用生理盐水洗涤2-3次备用。　　B、聚乙烯醇固定法：配制60mL10%w/v的聚乙烯醇溶液，高温高压(121℃，105-110kPa) 灭菌冷却到室温(20-25℃)，与80mL好氧反硝化菌悬液充分混合，滴入饱和硼酸溶液中， 冰浴，边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形成的小球放置于4℃冰箱中交联固 化12-24h后，用生理盐水洗涤2-3次备用。　　C、海藻酸钠和聚乙烯醇固定法：5%w/v聚乙烯醇和5%w/v的海藻酸钠的混合溶液60mL， 加热使其完全混合，高温高压灭菌(121℃，105-110kPa)，冷却至室温(20-25℃)，与80mL 好氧反硝化菌悬液充分混合;将此混合液用注射器挤入到4%w/v的CaCl2溶液中，冰浴， 边滴边搅拌，使其形成直径为2mm的小球;将形成的小球放置于4℃冰箱中交联固化11-13h， 用无菌水清洗小球，再放入饱和硼酸溶液中，于4℃冰箱中交联固化11-13h，用生理盐水洗 涤2-3次备用。　　将A、B、C三步制得的好氧反硝化细菌小球从冰箱中取出，用双蒸水或者0.9%w/v的 生理盐水洗涤3-4次，然后浸泡在0.9%的生理盐水中，曝气约11-13h左右以活化固定化小 球，将一定量活化后的固定化小球填充到人工湿地模拟柱中，进行废水脱氮处理研究。　　(3)于天然湖水中加入适量外加碳源柠檬酸钠，将经24h活化的施氏假单胞菌JH-1 按5%的接种量接入湖水中，摇床(30℃，120rpm)培养48h测定水体中硝态氮以及亚硝 态氮的量。　　与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果　　本发明菌株可利用的碳源和氮源范围广泛，易于培养。　　本发明菌株可用于处理高NO3-的废水，最高去除率可达99.6%，且无亚硝态氮的累积。　　本发明菌株可同时去除有机废水中的COD，去除率可达60%-80%。　　本发明菌株可以单独使用或者固定化后应用于废水处理中，应用广泛。　　相比其他已发现的好氧反硝化细菌，菌株JH-1是一株非常高效的好氧反硝化细菌，24h 后对硝态氮的去除率可达99.6%，脱氮速率可达22.6mg·L-1·h-1，已报道分离出的好氧反硝化 菌其脱氮速率大多数在4.50～13.7mg·L-1·h-1。JH-1脱氮速率是这些菌的1.51～4.57倍。

竞争关系。根据查询相关信息显示，反硝化细菌需要丰富的营养才能繁殖，芽孢杆菌会把营养消耗掉，同时与反硝化细菌继续竞争养分而抑制了反硝化细菌的生长。反硝化细菌，是指一类能将硝态氮还原为气态氮的细菌群，已知的有10科、50个属以上的种类具有反硝化作用。

反硝化细菌是一种能引起反硝化作用的细菌。大多数为异养、兼性厌氧细菌。通过反硝化细菌的作用可以讲亚硝酸盐转化为氮气。其生长速度快；讲解速度快而稳定。详细内容可见易净水网——硝化反硝化系统详解http://www.ep360.cn/news/201702/6944.html

反硝化细菌是一类能利用亚硝酸盐、氨氮等作氟源，有机质为碳源，且能进行自身繁殖的微生物，通常氮：碳比例为1：7，即消耗1分子氮元素，就需要利用7分子的碳元素。如一亩水面(通常按1000吨水体计)亚硝酸盐含量为0．5ppm，相当于亚硝酸钠则为2．5kg，需要消耗碳源相当于葡萄糖25kg。活菌的生长繁殖需要一定的条件，因池塘的水质环境是决定活菌制剂效果的重要条件，如：光合细菌多需要光照，有机物丰富的条件，氧气多或无光时不能繁殖，因而良好的水质中光合细菌并不起作用。一定含量的有机物的存在是活苗繁殖的条件，因此彻底排污不利于微生物的繁殖，影响净水能力的提高。如相对水清池塘易发臭就是这个道理，因而适当地减少肄污，为硝化、反硝化细菌提供必需营养源，是降解亚硝酸盐和氨氮的必备条件。芽孢杆菌是一类对有机质分解很强的微生物，但是不能有效地利用亚硝酸盐，目前生产厂商答宣传芽孢杆菌具有降亚硝盐的能力，是基于降解有机质，亚硝酸盐便不会产生，而实际上亚硝酸盐一经产生后，芽孢杆菌无法降解。反硝细菌则是一类专一性利用亚硝酸盐的微生物，在利用亚硝酸盐的同时需利用有机质，但对有机质的分解能力不如芽孢杆菌。 当水质很浓时，先用反硝化细菌把亚硝酸盐降解掉，然后利用芽弛杆菌或粪链球菌净化水质，几个均优势互补，效果很理想。目前有能力生产反硝化细菌的厂家不多，在全国能生产的也就几个厂家，目前规模比较大、质量比较稳定的是广西一家叫北海群林生物工程有限公司公司生产的。你可以在网上了解厂家的相关信息。

硝化细菌和反硝化细菌一起用是不行的。硝化细菌一般是养鱼的时候培养的，它的作用是将水中的氨氮转化为硝酸盐，从而避免鱼儿受到毒害，而且硝酸盐还能成为水生植物的养分。而反硝化细菌的作用则相反，它是将硝酸盐转化为氨氮，这对养鱼来说并没有帮助。另外硝化细菌喜欢好氧环境，而反硝化细菌需要在厌氧环境下生存。 一、硝化细菌能和反硝化细菌一起用吗 硝化细菌和反硝化细菌一起用是不行的。硝化细菌一般是养鱼的时候培养的，它的作用是将水中的氨氮转化为硝酸盐，从而避免鱼儿受到毒害，而且硝酸盐还能成为水生植物的养分。而反硝化细菌的作用则相反，它是将硝酸盐转化为氨氮，这对养鱼来说并没有帮助。另外硝化细菌喜欢好氧环境，而反硝化细菌需要在厌氧环境下生存。 二、鱼缸怎么建立硝化系统 1、准备容器：建立硝化系统首先要给硝化细菌一个容身之所。而最好的容器就是细菌屋，也可以用陶瓷环，它们都能为硝化细菌提供一个住所，让细菌可以附着在上面，从而避免了在水中飘荡，更好地发挥功效。 2、倒入原料：为了加速硝化系统的建立，需要往鱼缸中倒入适量的原料，也就是硝化细菌培养液。一般在第一次培菌的时候，每周都要加一次，连续加一个月后，就可以不用加了，硝化系统基本上建立完成。 3、关灯爆氧：作为好氧性细菌，硝化细菌的生长也离不开充足的氧气，所以最好在培菌期间关灯爆氧，这样能缩短培养周期，同时也对水质的维持提供了帮助。

硝化细菌是一类好氧型细菌，属于自养型细菌，生长比较缓慢，繁殖比较缓慢，在氮循环中起着重要作用；反硝化细菌在氧气不足的情况下可以把硝酸盐和亚硝酸盐还原成氨或者是游离氮，繁殖速度较快。

硝化细菌是化能自养型微生物.自养型生物：以大气中的二氧化碳或环境中的碳酸盐为碳素营养的一种营养类型。比如，绿色植物和少数细菌为自养型，它们能将简单的无机物二氧化碳或碳酸盐合成复杂的有机物，供生命活动的需要。自养型生物可分为光能自养型和化能自养型。光能自养型生物：细胞内含有光合色素，可将日光能转变为化学能，供给生命活动需要；化能自养型生物：通过氧化某些无机物获得能量，例如硝化细菌氧化氨(nh3)；硫化细菌氧化硫(s)或硫化氢(h2s)获得能量。异养型生物：不能通过自身将无机物合成有机物，只能通过摄取有机物维持新陈代谢。自养型生物与异养型生物的根本区别是：能否通过自身将无机物合成为有机物。

一、我们先来看几个普遍的现象：① 第一个现象：反硝化细菌在铺设地膜的高位池中表现得比较好，降亚硝酸盐都是比较快的；而且是直接降下来，时间也就1～4天左右。② 第二个现象：如果用于土塘养殖中，则降亚盐的速度就非常的慢，往往需要几天的时间，底泥厚的土塘甚至需要十几天的时间；而且有一个怪现象，即亚硝酸盐，开始的几天（一般是1～3天）是上升的，然后才开始缓慢的下降；而且，往往是氨氮先降低，亚硝酸盐后降低的。③ 最后让我们做一个试验：即便是土塘的水，提一桶土塘的水上岸，放一克反硝化细菌到桶里，第二天检测，亚硝酸盐一定会降为零；而同样提一桶土塘的水上岸，不放菌剂，则亚硝酸盐不会降；以上现象至少说明了一点，是否是土塘，或有底泥的池塘，以及底泥的厚度，都会影响反硝化降亚硝酸盐的效果。可以肯定的是，反硝化细菌降亚硝酸盐的作用是缓和的，对鱼虾的健康没有影响，即使是开始的先升后降过程中，对鱼虾的影响也不大（建议同时使用乳酸菌，则更可以明显减少先升的副影响，如强微水精翠和强微改底养泥复合菌颗粒就是以反硝化细菌为主，乳酸菌为辅的产品，强微靓水素则正好相反，是以乳酸菌为主，反硝化细菌为辅的产品）二、我们先看一下反硝化细菌的作用原理① 反硝化原理和作用方程式（硝酸盐和亚硝酸盐被转化成无色无味的氮气挥发到空气中去）长期不间断地使用反硝化细菌，可以不断分解底泥中的含氮有机物质，并不断地将它们转变成氮气，挥发到空气中去；反硝化原理反应式：总的反硝化过程可以用以下方程式表示：（即将硝酸盐转化成氮气的总过程）2 NO3 + 10 e + 12 H → N2 + 6 H2O其中包括以下四个还原反应还原反应：硝酸盐（NO3）还原为亚硝酸盐（NO2）：2 NO3 + 4 H + 4 e → 2 NO2 + 2 H2O亚硝酸盐（NO2）还原为一氧化氮（NO）：2 NO2 + 4 H + 2 e → 2 NO + 2 H2O一氧化氮（NO）还原为一氧化二氮（N2O）：2 NO + 2 H + 2 e → N2O + H2O一氧化二氮（N2O）还原为氮气（N2）：N2O + 2 H + 2 e → N2 + H2O用一个总的中文反应式来说，就是：硝酸盐 → 亚硝酸盐 → 一氧化氮 → 一氧化二氮 → 氮气以上四个反应均可在无氧或缺氧条件下，将硝酸盐（NO3）作为电子传递链(ETC)的最终电子受体（TEA, terminal electron acceptor），来完成物质能量交换。可见在将硝酸盐 → 亚硝酸盐 → 一氧化氮 → 一氧化二氮 → 氮气，的过程中，亚硝酸盐是中间产物，往往这个反应的后半截比较慢一些，前面的将硝酸盐转化成亚硝酸盐的过程比较快一些，假设，正好您的这个池塘中底泥有机物非常的丰富，富营养化严重，硝酸盐含量很高，则在反硝化细菌的作用下，不断发生以上反应，如前所述，第一步反应快一些，后面反应慢一些，造成亚硝酸盐短暂被积累，而上升，慢慢随着底泥中硝酸盐的被分解完毕，亚硝酸盐才开始慢慢下降。这就解释了为什么土塘中使用反硝化细菌，特别是底泥厚的土塘中使用反硝化细菌，亚硝酸盐先升后降的原理原因了。而且底泥越厚，底泥中蕴含有硝酸盐越高，这个降亚硝酸盐的过程越长。这也解释了，为什么从土塘中打一桶水上岸来，加入反硝化细菌，一天之内，亚硝酸盐就可变成零的原因了，因为桶中是没有底泥，就不存在泥硝酸盐不断通过反硝化作用，而不断释放出亚硝酸盐上来的过程，所以，亚硝酸盐直接就下降了；这也解释了高位池的亚硝酸盐为什么更好降的原理原因，因为高位池每天都排污，底质比较干净，没有多少底泥，所以，降亚硝酸盐比较直接且快速。为了防止亚硝酸盐先升后降，在升的过程中可能造成的副作用，建议同时使用乳酸菌，例如强微水精翠和强微改底养泥复合菌颗粒中就是以反硝化细菌为主，乳酸菌为辅的产品，或者使用反硝化细菌这前，使用过强微靓水素（以乳酸菌为主，反硝化为辅助的产品），或乳酸菌发酵液（一种用强微虾偷乐或强微靓水素+强微水产苷+红糖+水培养的发酵液），前面使用过这种乳酸菌或发酵液的，则随后可以使用反硝化细菌，而不会产生危害危险。乳酸菌在这个过程中，起到增强鱼虾免疫抗病力的作用，并抑制了水体中的有害细菌如弧菌和链球菌等，从而抗病力适应性更强。② 第二个疑问来了，为什么说富营养化，或底泥厚的土塘中，底部有这么多硝酸盐呢？答：这些硝酸盐来自于鱼虾粪便的分解物，特别是粪便中的氨氮，以及未消化饵料蛋白中分解出来的氨氮NH3；这些氨氮NH3，通过水体自然生态中自然存在的氨氧化菌（将氨氮氧化成亚硝酸盐—亚硝化作用），和硝化细菌（将亚硝酸盐转化成硝酸盐---硝化作用），从而转化成硝酸盐；最后的主角，当然是反硝化细菌了，反硝化细菌把硝酸盐，最终通过四个反应，转化成氮气N2，挥发到空气中去，从而彻底的清除了水中的氨氮NH3和亚硝酸盐HNO2的危害。亚硝酸细菌（又称氨氧化菌），将氨氧化成亚硝酸。反应式：2NH3+3O2→2HNO2+2H2O。硝酸细菌（又称硝化细菌或亚硝酸氧化菌），将亚硝酸氧化成硝酸。反应式：HNO2 + 1/2 O2 = HNO3。而这就解释了，为什么氨氮NH3是最先降低降解的，因为这一系列的反应式中，源头反应是氨氮NH3被氨氧化菌转化成亚硝酸盐HNO2，亚硝酸盐HNO2再被硝化细菌转化成硝酸盐HNO3。再经过反硝化细菌的四步反应，转化所氮气N2，③ 再来一个疑问，自然水体中都存在氨氧化细菌和硝化细菌吗？要是没有的话，岂不是上面的反应链就无法成立了！答：您可以放心，自然界的自然水体中，确实就存在这两种细菌，而且数量非常丰富，这两种细菌是好氧细菌，自然的水体中到处都有，很丰富，只要条件适应，有底物（氨氮和亚硝酸盐），它们就会起作用，两个细菌配合作用的最终产物是硝酸盐，当然，最终的主角还是反硝化细菌，反硝化细菌演的是压轴曲，最终的产物是挥发到空气，离开了水体的氮气。自然界的水体中，氨氧化细菌，和硝化细菌是很丰富的，我们没有必要生产它们，自然界中就有，它们数量庞大，是自养好氧微生物，特点或缺点代繁殖时间长一些，即繁殖速度慢一些；而反硝化细菌，在自然界即是比较少的，这与它是厌氧细菌，或属于兼性厌氧菌是有关的，反硝化细菌即是自养菌，也是异养菌，这就让我们实现简单的工业化生产提供了便利和可能，我们可以在工厂里大量生产它，然后使用到水产养殖中去；但是反硝化细菌比较脆弱，很不耐贮存，也不耐热，所以，生产它并不容易，宜春强微生物科技有限公司采用固态发酵培养法生产反硝化细菌独树一职，生产的反硝化细菌不仅活力强，而且耐热耐贮存，保存性好，含量高，使用剂量小；最强烈的情况是：在酷热天气和超量2倍的使用情况下，一天之内，反硝化作用产生的氮气的冲击作用，可以将水底泥皮冲上水面上来，就象翻腾一样，甚至形成整个鱼塘表面漂浮一层泥皮，非常吓人，我们曾经有客户在不知情的情况下，超量2倍使用，造成水面漂浮一层泥皮的现象，但因为有强微乳酸菌同时泼洒，所幸鱼虾均没有出问题。国内尚无一家公司的反硝化细菌可与之相比三、使用反硝化细菌，脱除池塘中的氨氮和亚硝酸盐，是最有效，最生态的方法；反硝化除去池塘中的有机氮，是最有效的方法，因为有机氮最终是挥发到空气中去了的，不象化学络合剂处理的那样（有机氮仍然还在水中，迟早还得复发），而氮气本身就是空气中含量最高的无毒无害无味气体。通过生态细菌，特别是强微反硝化细菌除氮，是最安全，最环保，最绿色，最有效的方法，从操作简单方便，和脱氮效率上来看，几乎没有与之可替代的其他方法。长年不间断地使用反硝化细菌，可以慢慢改善底泥污染程度，最终彻底清除底泥据马来西亚和广东水产养殖中使用强微反硝化细菌的结果，坚持使用一年后的鱼塘，底泥的厚度减少50%，在马来西亚热带国家，坚持一年使用下来后，底泥厚度可以减少70%；同时，可以明显感觉到，养殖户所使用的小船底部，原来滑腻腻的，船底一层的有机滑腻物质，但坚持使用一个月后，船底的滑腻物质就消失得一干二净了；四、正确的使用反硝化细菌于对虾养殖中的方法强微的反硝化细菌上市一年多了，经过这一年多的反馈效果和实践经验，总结如下的正确使用方法：以下是针对土塘养虾的使用方法：① 针对土塘，建议第一次使用反硝化细菌的剂量为酷热的夏天30克/亩，春秋或早夏晚夏天气50克/亩；同时配合撒增氧颗粒（例如过氧化钙）300-500克/亩，效果最佳（我们的反硝化是兼氧型的，可以有协同促进作用）② 然后，在间隔3～5天后，使用第二次，第二次可以加大一点用量，如50～70克/亩；同时配合撒增氧颗粒（例如过氧化钙）300-500克/亩，效果最佳（我们的反硝化是兼氧型的，可以有协同促进作用）当然，都得用红糖水活化，活化方法是加500克红糖，加20斤水，浸泡0.5～12小时泼洒，浸泡时间长的，略为减少点用量。如果是针对高位池，以及工厂化养虾池，等没有底泥，泥比较干净的池塘，则用量更为广泛一些，可以使用更多的剂量，而不存在副作用，因为没有底泥，就没有更多的产生亚硝酸盐的源头物质（硝酸盐HNO3和氨氮NH3）4、对虾养殖户提问：我是养殖对虾的，我购买了强微的反硝化细菌，我想问怎样使用反硝化细菌的方案更好，我是土塘，第一次用了50克/亩，池水反而变浑浊了，亚硝酸盐反而升高了，第3天亚硝酸盐才开始下降，后来又用了一次70克一亩的，现在第20天，没有检测到亚硝酸，这是什么现象？为什么会先升高；您好，反硝化细菌第一次使用（指以前从来没有使用过反硝化细菌的池塘）时，用量为30克/亩，适应几天后增加到50克/亩，再适应几天后可以增加到70克/亩（是否增加到70克，看您的池塘的亚硝酸盐情况而定），为什么要这样慢慢来增加呢，是因为担心池塘是老塘，底泥太厚了，底部多年积累太多的有机物和硝酸盐，在这种情况下，第一次使用反硝化细菌，担心因为底部泥太厚，加上水中自然存在的硝化细菌的作用，造成底部沉积硝酸盐过多，反硝化作用会把硝酸盐先转化成亚硝酸盐，然后才把亚硝酸盐再通过两步转化成氮气，在这个过程中，转化成氮气的速度更慢一些，则可能造成短时间内（3-7天甚至更久）亚硝酸盐作为整个反应式的中间体而积累起来，反而先升高，要等硝酸盐消耗得差不多了，亚硝酸盐才会开始下降，但一旦开始下降了，则会下降得比较彻底，甚至下降到检测不出来。对虾养殖中使用反硝化细菌，除了上面所说的，一定要慢慢来之外，还可以采用以预防为主的使用方案，即在对虾下苗后的第20天就开始使用的反硝化细菌，坚持每7天使用一次，每次平均50克/亩左右，用50克红糖加1000毫升水，浸泡活化一小时，再全池泼洒；坚持下去的话，可以保证对虾养殖全期，没有亚硝酸盐超标的现象

反硝化作用（denitrification）也称脱氮作用。反硝化细菌在缺氧条件下，还原硝酸盐，释放出分子态氮（N2）或一氧化二氮（N2O）的过程。微生物和植物吸收利用硝酸盐有两种完全不同的用途，一是利用其中的氮作为氮源，称为同化性硝酸还原作用：NO3-→NH4+→有机态氮。许多细菌、放线菌和霉菌能利用硝酸盐做为氮素营养。另一用途是利用NO2-和NO3-为呼吸作用的最终电子受体，把硝酸还原成氮（N2），称为反硝化作用或脱氮作用：NO3-→NO2-→N2↑。能进行反硝化作用的只有少数细菌，这个生理群称为反硝化菌。大部分反硝化细菌是异养菌，例如脱氮小球菌、反硝化假单胞菌等，它们以有机物为氮源和能源，进行无氧呼吸，其生化过程可用下式表示：C6H12O6+12NO3-→6H2O+6CO2+12NO2-+能量CH3COOH+8NO3-→6H2O+10CO2+4N2+8OH-+能量少数反硝化细菌为自养菌，如脱氮硫杆菌，它们氧化硫或硝酸盐获得能量，同化二氧化碳，以硝酸盐为呼吸作用的最终电子受体。可进行以下反应：5S+6KNO3+2H2O→3N2+K2SO4+4KHSO4反硝化作用使硝酸盐还原成氮气，从而降低了土壤中氮素营养的含量，对农业生产不利。农业上常进行中耕松土，以防止反硝化作用。反硝化作用是氮素循环中不可缺少的环节，可使土壤中因淋溶而流入河流、海洋中的NO3-减少，消除因硝酸积累对生物的毒害作用。硝化：自氨氧化为亚硝酸盐的过程是由两群微生物完成：氨氧化细菌（AOB）与氨氧化古菌（AOA）[1]。氨氧化细菌可在变形菌门的β-变形菌纲与γ-变形菌纲中找到[2]目前，只分离与发现了一种氨氧化古菌——亚硝化侏儒菌属[3] [4]。研究最多的土壤中的氨氧化细菌属于亚硝化单胞菌属与亚硝化球菌属。尽管在土壤中氨氧化同时发生在细菌和古菌之中，但古菌的氨氧化作用却同时在土壤以及海洋环境中占首要地位[5][6]，这意味着泉古菌门可能是这些环境中最大的氨氧化作用贡献者。第二步（将亚硝酸盐氧化为硝酸盐的步骤）主要是由细菌中的硝化杆菌属来完成。以上步骤都会产生能量并偶联合成腺苷三磷酸。硝化有机体都是化能自养菌并且利用二氧化碳作为他们生长的碳源。一些氨氧化细菌具有一种称为脲酶的酶，这种酶催化尿素分子分解为两分子的氨以及一分子的二氧化碳。人们发现欧洲亚硝化单胞菌与土壤生的氨氧化细菌群一样，可以通过卡尔文循环同化脲酶反应生成的二氧化碳以产生生物质能，并通过将氨（脲酶的另一产物）氧化为亚硝酸盐的过程收获能量。这一特性可解释为什么在酸性环境中存在尿素的情况下会促进氨氧化细菌的生长[7]。硝化作用也在城市废水脱氮过程中起着重要作用。常规的脱氮是先施以硝化作用接着再进行反硝化作用。这一过程的消耗主要是花在了曝气（将氧气带进反应器的过程）以及为反硝化作用提供额外碳源（例如甲醇）上。硝化作用也会发生在饮用水中。在上水分配系统中，氯胺常被用于二次消毒剂，存在的自由氨可以作为氨氧化微生物的底物。这一相关的反应可以使得系统中消毒剂的残余量减少[8]。在多数环境中可以同时找到上述生物，它们产生的最终产物是硝酸盐。然而，可以设计一个只产生亚硝酸盐的系统（见沙伦工艺）。硝化作用和氨化作用一起形成了无机化过程，该过程指的是将有机物完全分解并释放可用含氮化合物的过程。这一过程将氮循环补充完整。

反硝化细菌多为异养、兼性厌氧细菌。反硝化细菌是一种能引起反硝化作用的细菌。多为异养、兼性厌氧细菌，如反硝化杆菌、斯氏杆菌、萤气极毛杆菌等。它们在氙气条件下，利用硝酸中的氧，氧化有机物质而获得自身生命活动所需的能量。反硝化细菌广泛分布于土壤、厩肥和污水中。可以将硝态氮转化为氮气而不是氨态氮，与硝化细菌作用不完全相反。主要应用于污水处理,如景观水治理,城市内河治理,水产养殖处理等,其中水产养殖污水处理应用最为广泛。

反硝化细菌，是指一类能将硝态氮（NO-3N）还原为气态氮（N2）的细菌群，已知的有10科、50个属以上的种类具有反硝化作用。自然界中最普遍的反硝化细菌是假单胞菌属；其次是产碱杆菌属。在土壤氧气不足时，将硝酸盐还原成亚硝酸盐，并进一步把亚硝酸盐还原为氨及游离氮的细菌。能将硝酸盐还原，并产生分子态氮气。细菌分布范围较广，大量存在于污水、土壤及厩肥中，在缺氧的条件下能够将硝酸盐变成氨和氮。应用采用优良反硝化菌株经特殊工艺发酵而成。菌株反硝化能力强，能够以亚硝态氮和硝态氮作氮源，活化简单，繁殖迅速，作用效果显著，24小时可见效。针对养殖水体亚硝酸盐偏高的情况有特效；针对藻类过度繁殖的水体能够大量消耗氮素营养，切断藻类氮素营养，维护良好水色；菌株在溶氧充足及厌氧条件下均可生存并进行反硝化反应，优化底质的物理、化学环境。