DNA

DNA连接酶作用于DNA连接，酯键的形成，这是消耗能量的。NAD+是作为连接酶的辅酶，帮助其利用ATP分解供能。

DNA连接酶是连接两段脱氧核苷酸片段。主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合。DNA聚合酶是连接一个脱氧核苷酸的单位。主要用于DNA复制RNA聚合酶是以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。用于转录时解旋酶是DNA复制时，解开DNA双链的酶，解开的是氢键作用位置 DNA聚合酶氢键DNA的复制与转录DNA解旋酶 氢键 DNA的复制与转录 DNA连接酶磷酸二脂建 用于基因工程望采纳

DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。

1、作用不同DNA聚合酶以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA。DNA 连接酶分为两大类：一类是利用ATP 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP 的DNA 连接酶，另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD* 的DNA 连接酶。2、连接片段不同DNA连接酶：主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用，在基因工程中起作用。DNA聚合酶：主要是连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起做用。3、模板不同DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。参考资料来源：百度百科-DNA聚合酶参考资料来源：百度百科-DNA连接酶

DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的，最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。特点肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75Ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60Ku，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。来自噬菌体的T4DNA连接酶 一般特点：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。

DNA连接酶的作用是恢复被限制酶切开的两个核苷酸间的磷酸二酯键。DNA连接酶包括E•coli DNA连接酶和T4DNA连接酶；其中E•coliDNA连接酶来自大肠杆菌，只“缝合”黏性末端，T4 DNA连接酶来自T4噬菌体，可“缝合”黏性末端和平末端。

DNA黏合酶（EC6.5.1.1），也称DNA连接酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，透过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiesterbond）来黏合DNA。但是DNA聚合酶的黏合过程却只是聚合反应一个附带的功能而已，真正在细胞内扮演DNA黏合反应的工作还是以DNA黏合酶为主。如果我的回答对你有帮助~请点击【我回答下】的【选为满意回答】按钮！不懂可追问~~~如果有其他问题请鼠标放在我账号上点击【求助知友】按钮【水酉不悦】，向我提问~〓来自知道团队【数理化梦之队】〓祝学习进步。

dna连接酶连接的是磷酸二酯键。DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用，DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用。dna连接酶的性质DNA连接酶连接的是被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而磷酸二酯键是连接单链DNA分子中相连脱氧核苷酸之间的化学键，DNA聚合酶和DNA连接酶都是形成磷酸二酯键，但两者不同之处是DNA聚合酶催化单个脱氧核酸聚合。且需要有模板而DNA连接酶是将两个DNA片段之间连接，通过DNA连接酶连接两种不同DNA分子片段之间的磷酸二酯键，其位置是磷酸与脱氧核糖之间，DNA连接酶DNALigase也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色。

现在医学和科研所用的DNA连接酶主要是从病毒（T4噬菌体）中分离得到的， 当然也有很多从原核生物（大肠杆菌）分离得到的。 但病毒，大肠杆菌和动植物细胞中都有DNA连接酶。能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。 该酶催化DNA相邻的5′磷酸基和3′羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA单链缺口封合起来。

Dna复制时需要dna连接酶DNA的复制事实上是半不连续复制 即只有一条链的合成是连续的 这听起来很神奇 但确实是这样 连续合成的链叫做前导链 另一条链称为后随链 它的合成是不连续的 以它为模板的合成 需要一段一段地进行 所合成的片段叫做冈崎片段产生这一现象的原因在于 DNA合成酶只能沿5"-3"的方向合成DNA 而DNA本身的两条链又是反向分布的 所以就造成了只有一条链合成可以连续地进行下去（以它为模板的子链生成方向正好是DNA聚合酶可以直接提供的） 而后随链要盘绕成回环 反扭过来 才能合成再合成起始的时候 DNA聚合酶是需要一段RNA引物的 在原核生物中这一引物是由dnaQ(一种酶)在已解旋的单链5"端合成，真核生物中也有对应的酶 由于后随链的合成不连续 所以每个片段都要有引物 在DNA合成结束的时候 这些引物要被切除 因而留下缺口 这时又要特定的酶去填补缺口（比如 大肠杆菌中的DNA聚合酶I）可是填补序列和周围序列间会有缺刻 也就是说他们交界处的3"-5"磷酸二脂键是断开的 这时需要DNA连接酶发挥作用 将其连好所以 后随链上的缺刻多 还真够DNA连接酶忙一阵的 前导链上只有一开始有RNA引物 因此 最后也基本只有这个地方会用到连接酶

作用特点：①不能连接两条单链DNA或环化DNA，只能连接双链DNA分子的单链缺口。②只能连接失去一个磷酸二酯键形成的单链断裂，不能连接缺失一个或多个氨基酸缺口③只作用于3端羟基和5端磷酸的链④连接反应需要ATPNAD+和Mg2+利用价值：可对缺口DNA，平末端DNA，黏性末端DNA进行连接。

DNA复制时半保留复制，复制时两条链同时进行复制，但是每一条新合成的DNA都是从5‘-3"进行，所以有一条链是不连续的，是由形成冈崎片段形成小片段，另一条则是连续合成，所以在合成结束后要将冈崎片段用DNA连接酶连接起来形成完整的DNA双链。所以DNA连接酶是必需的，是连接冈崎片段用的。

DNA聚合酶（DNApolymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶,以DNA为复制模板，从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。真核细胞有5种DNA聚合酶，分别为DNA聚合酶α（定位于胞核，参与复制引发具5－3外切酶活性），β（定位于核内，参与修复，具5－3外切酶活性），γ（定位于线粒体，参与线粒体复制具5－3和3－5外切活性），δ（定位核，参与复制，具有3－5和5－3外切活性），ε（定位于核，参与损伤修复，具有3－5和5－3外切活性）。原核细胞有3种DNA聚合酶，都与DNA链的延长有关。DNA聚合酶I是单链多肽，可催化单链或双链DNA的延长；DNA聚合酶II则与低分子脱氧核苷酸链的延长有关；DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多，是促进DNA链延长的主要酶。DNA连接酶连接酶旧称“合成酶”DNAligaseDNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的，最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。一般性质：大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75KD的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。

DNA连接酶的作用是（）。 A.复制时切断、理顺DNA链B.RNA引物去除后连接DNAC.解开DNA双螺旋D.连接相邻DNA链3"-OH和5"-P正确答案：连接相邻DNA链3"-OH和5"-P

DNA连接酶没有特异性,限制性内切酶有特异性.DNA连接酶连接的是磷酸二酯键.不是碱基之间的氢键.所以DNA连接酶没有特异性.(碱基之间的氢键不需要什么酶去连接,是自动连接的）。DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。

人体内是存在DNA连接酶的。因为人的DNA在复制时，由于半保留复制，DNA两个链不是一样合成的，一个前导链，一个滞后链，前导链一口气从头合成到头，滞后链要先合成冈崎片段，然后就要用到DNA连接酶把冈崎片段连接起来，才能成为一条完整的链。希望可以帮到你~~

DNA黏合酶（EC 6.5.1.1），也称DNA连接酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，透过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiester bond）来黏合DNA。但是DNA聚合酶的黏合过程却只是聚合反应一个附带的功能而已，真正在细胞内扮演DNA黏合反应的工作还是以DNA黏合酶为主。如果我的回答对你有帮助~ 请点击【我回答下】的【选为满意回答】按钮！不懂可追问~~~ 如果有其他问题请鼠标放在我账号上点击【求助知友】按钮【水酉不悦】 ，向我提问~ 〓来自知道团队【数理化梦之队】〓 祝学习进步

DNA的复制需要RNA引物，这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的。DNA聚合酶不能从头合成DNA（需要引物DNAorRNA），因为DNA聚合酶具有高保真系统，这个系统要求，在新链的延伸过程中，只有新添加的碱基与模板链形成双螺旋才能继续链的延伸，否则延伸终止，启动切除修复机制，直至添加正确的碱基，也即是在DNA聚合酶的上游位置一定要互补形成双链（可以是RNA-DNA）才能继续下游DNA的合成，这是它的忠实性和高保真系统决定的。而RNA聚合酶可以从头合成RNA，合成的RNA游离在模板外，不需要与模板形成互补配对的双螺旋结构就能继续下游的合成。两种酶的不同机制决定了DNA复制时用的只能是RNA引物。PCR反应中所用到的DNA引物，是用化学法人工合成的，与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸；而在体内，由于DNA聚合酶的忠实性，不能从头合成DNA，因此只能采用RNA引物来延伸了。

DNA的复制需要RNA引物，这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的。DNA聚合酶不能从头合成DNA（需要引物DNA or RNA），因为DNA聚合酶具有高保真系统，这个系统要求，在新链的延伸过程中，只有新添加的碱基与模板链形成双螺旋才能继续链的延伸，否则延伸终止，启动切除修复机制，直至添加正确的碱基，也即是在DNA聚合酶的上游位置一定要互补形成双链（可以是RNA-DNA）才能继续下游DNA的合成，这是它的忠实性和高保真系统决定的。而RNA聚合酶可以从头合成RNA，合成的RNA游离在模板外，不需要与模板形成互补配对的双螺旋结构就能继续下游的合成。两种酶的不同机制决定了DNA复制时用的只能是RNA引物。 PCR反应中所用到的DNA引物，是用化学法人工合成的，与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸；而在体内，由于DNA聚合酶的忠实性，不能从头合成DNA，因此只能采用RNA引物来延伸了。

这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

是为了尽量减少DNA复制起始处的突变。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。引发体可以在单链DNA上移动，在dnaB亚基的作用下识别DNA复制起点位置。首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物，然后，引发体在滞后链上沿5"→3"方向不停的移动（这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动），在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用，。但是，这些成份必须协同工作才能使引发体在滞后链上移动，识别合适的引物合成位置，并将核苷酸在引发位置上聚合成RNA引物。由于引发体在滞后链模板上的移动方向与其合成引物的方向相反，所以在滞后链上所合成的RNA引物非常短，一般只有3-5个核苷酸长。而且，在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似的序列，表明引物酶要在DNA滞后链模板上比较特定的位置（序列）上才能合成RNA引物。扩展资料DNA的复制是一个边解旋边复制的过程。复制开始时，DNA分子首先利用细胞提供的能量，在解旋酶的作用下，把两条螺旋的双链解开，这个过程叫解旋。然后，以解开的每一段母链为模板，以周围环境中的四种脱氧核苷酸为原料，按照碱基配对互补配对原则，在DNA聚合酶的作用下，各自合成与母链互补的一段子链。随着解旋过程的进行，新合成的子链也不断地延伸，同时，每条子链与其母链盘绕成双螺旋结构，从而各形成一个新的DNA分子。这样，复制结束后，一个DNA分子，通过细胞分裂分配到两个子细胞中去。注：复制时遵循碱基互补配对原则，复制发生在细胞分裂的间期。DNA遗传信息的载体，故亲代DNA必须以自身分子为模板准确的复制成两个拷贝，并分配到两个子细胞中去，完成其遗传信息载体的使命。而DNA的双链结构对于维持这类遗传物质的稳定性和复制的准确性都是极为重要的。参考资料来源：搜狗百科-DNA复制

PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2.由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5"端到3"端进行复制,也就是只能识别3"的尾端,而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷酸链上,所以引物1和2分别于双链DNA的两条链的尾部（就是末尾是3"端的那一边）结合,为那些脱氧核苷酸提供3"的末端,就相当于开了个头.然后在DNA聚合酶的作用下合成两条新链.而那段引物就成了新链的一部分.

DNA复制起始阶段DNA聚合酶需要借助RNA引物后的3‘-OH来将 dNTP连接到先导链上，然后激活复制。而PCR只是一种单纯的扩增技术，DNA和RNA均满足条件。

这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。

它的作用似乎只是分开两条DNA链，暴露出某些特定序列以便引发体与之结合，在前导链模板DNA上开始合成RNA引物，这个过程称为转录激活(transcriptional activation)，在前导链的复制引发过程中还需要其他一些蛋白质，如大肠杆菌的dnaA蛋白。这两种蛋白质可以和复制起点处DNA上高度保守的4个9bp长的序列结合，其具体功能尚不清楚。可能是这些蛋白质与DNA复制起点结合后能促进DNA聚合酶Ⅲ复合体的七种蛋白质在复制起点处装配成有功能的全酶。DNA复制开始时，DNA螺旋酶首先在复制起点处将双链DNA解开，通过转录激活合成的RNA分子也起分离两条DNA链的作用，然后单链DNA结合蛋白质结合在被解开的链上。由复制因子X(n蛋白)，复制因子Y(n"蛋白)，n"蛋白，i蛋白，dnaB蛋白和dnaC蛋白等6种蛋白质组成的引发前体(preprimosome)，在单链DNA结合蛋白的作用下与单链DNA结合生成中间物，这是一种前引发过程。引发前体进一步与引物酶(primase)组装成引发体(primosome)。引发体可以在单链DNA上移动，在dnaB亚基的作用下识别DNA复制起点位置。首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物，然后，引发体在滞后链上沿5"→3"方向不停的移动(这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动，见后)，在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用，引发体中许多蛋白因子的功能尚不清楚。但是，这些成份必须协同工作才能使引发体在滞后链上移动，识别合适的引物合成位置，并将核苷酸在引发位置上聚合成RNA引物。由于引发体在滞后链模板上的移动方向与其合成引物的方向相反，所以在滞后链上所合成的RNA引物非常短，一般只有3-5个核苷酸长。而且，在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似的序列，表明引物酶要在DNA滞后链模板上比较特定的位置(序列)上才能合成RNA引物。　　为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

在DNA复制中，RNA引物的作用是： A.引导DNA聚合酶与DNA模板结合 B.提供5ˊ—P末端 C.为延伸子代DNA提供3ˊ-OH末端 D.诱导RNA合成 E.提供四种NTP附着的部位 正确答案：

一个,运用反转录,以一条DNA单链为模板,以一个引物为转录的开始,通过DNA聚合酶进行链接（反转录的最终长度是不确定的,可能无限长）

RNA有3‘OH是一个原因,最主要的是 RNA 是单链,而且容易被降解.机体选择RNA 做引物是为了避免错配,因为即使引物RNA的碱基序列出现差错,可以很容易被降解,然后通过DNA的修复功能即可复制出正确的序列,是一种保护机制.如果是DNA 做引物则不容易被降解.我们体外对DNA进行扩增时则是使用的DNA引物,因为DNA引物不容易被降解.这和DNA聚合酶的性质有关。DNA聚合酶是由DNA5"端点开始复制到3"端的酶。也就是说，DNA复制时，必须在已有的核苷酸的5"端的基础上，接着往下合成，而不能从无到有，凭空先复制出第一个核苷酸，再往下合成。引物就是起到这样的作用，使得DNA聚合酶可以利用引物的5"端，继续往下合成。

DNA聚合酶工作时必须要有一个引物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3"-羟基上,RNA引物就提供这个羟基.

DNA的复制需要RNA引物，这是由DNA聚合酶和RNA聚合酶的特性决定的。DNA聚合酶不能从头合成DNA（需要引物DNA or RNA），因为DNA聚合酶具有高保真系统，这个系统要求，在新链的延伸过程中，只有新添加的碱基与模板链形成双螺旋才能继续链的延伸，否则延伸终止，启动切除修复机制，直至添加正确的碱基，也即是在DNA聚合酶的上游位置一定要互补形成双链（可以是RNA-DNA）才能继续下游DNA的合成，这是它的忠实性和高保真系统决定的。而RNA聚合酶可以从头合成RNA，合成的RNA游离在模板外，不需要与模板形成互补配对的双螺旋结构就能继续下游的合成。两种酶的不同机制决定了DNA复制时用的只能是RNA引物。PCR反应中所用到的DNA引物，是用化学法人工合成的，与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸；而在体内，由于DNA聚合酶的忠实性，不能从头合成DNA，因此只能采用RNA引物来延伸了。

为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关.DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错,因此,用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA复制的准确性.RNA引物形成后,由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段.

注意，引物部分最终会被切除，所以对合成的DNA没有影响。RNA引物是为了尽量减少DNA复制起始处的突变。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。引发体可以在单链DNA上移动，在dnaB亚基的作用下识别DNA复制起点位置。首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物，然后，引发体在滞后链上沿5"3"方向不停的移动（这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动），在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用，。但是，这些成份必须协同工作才能使引发体在滞后链上移动，识别合适的引物合成位置，并将核苷酸在引发位置上聚合成RNA引物。由于引发体在滞后链模板上的移动方向与其合成引物的方向相反，所以在滞后链上所合成的RNA引物非常短，一般只有3-5个核苷酸长。而且，在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似的序列，表明引物酶要在DNA滞后链模板上比较特定的位置（序列）上才能合成RNA引物。

dnapcr为什么设计rna的引物PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2.由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5"端到3"端进行复制,也就是只能识别3"的尾端,而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷酸链上,所以引物1和2分别于双链DNA的两条链的尾部（就是末尾是3"端的那一边）结合,为那些脱氧核苷酸提供3"的末端,就相当于开了个头.然后在DNA聚合酶的作用下合成两条新链.而那段引物就成了新链的一部分.

PCR使用的引物是单链DNA。体内DNA复制时，引物是RNA。

DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。以RNA作为引物是因为RNA为单链，更容易降解，是一种保护机制；DNA双链不易降解。

因为DNA聚合酶不能从头合成DNA才需要的引物同时因为RNA聚合酶可以从头合成RNA所以才有以RNA作为引物如果DNA聚合酶可以从头合成的话，也不需要DNA引物了

为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

原核生物中DNA聚合酶1切除引物；真核生物中由Rnase H1 和 MF-1核酸酶水解

复制完成之后，那段RNA引物会被降解掉的。然后会有专门的一种酶把对应于RNA引物的那段DNA补上。

相同点： 都是半保留复制，都会经历DNA双链的解开（变性），寡聚核酸与单链DNA的结合（退火），以及DNA聚合酶开始合成DNA（延伸）的三个过程。不同点： 1、连续性不同体内DNA复制半不连续复制，体外PCR连续复制，不会产生冈崎片断。2、酶不同PCR技术形成DNA时用耐热DNA聚合酶，而DNA复制用的是生物体自身的DNA聚合酶，普通的DNA聚合酶是不耐热的。3、温度不同：体内DNA复制温度是37度，体外PCR有变性、退火、延伸三种温度。4、引物不同DNA复制需要的引物是RNA，不是DNA。之后按照引物就能够复制出DNA来，重复放大50次后就可以制成10亿个基因。体外PCR通常是DNA引物。在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍，便于分析、检测。参考资料来源：百度百科-DNA复制参考资料来源：百度百科-PCR扩增

为了复制时的精确性,毕竟DNA复制的可是蛋白质表达的密码子,错一点都有可能出现各种基因病. 这个问题的延伸可以这样问：为什么DNA复制时要以RNA作为引物,而不是DNA? 答：1.DNA复制起始处的几个核苷酸最容易出现差错,RNA引物即使出现差错最后也要被 DNA聚合酶Ⅰ切除,提高复制的准确性.用DNA的话,就显得浪费了.2.RNA为单链,更易降解,节省能量.DNA双链不易降解,

在DNA复制中，RNA引物的作用是（） A.提供5"P末端B.提供3"P末端C.提供5"OH末端D.提供3"OH末端正确答案：D

dna连接酶连接的是磷酸二酯键。DNA聚合酶主要连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起作用，DNA连接酶主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键，起连接作用。dna连接酶的性质DNA连接酶连接的是被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而磷酸二酯键是连接单链DNA分子中相连脱氧核苷酸之间的化学键，DNA聚合酶和DNA连接酶都是形成磷酸二酯键，但两者不同之处是DNA聚合酶催化单个脱氧核酸聚合。且需要有模板而DNA连接酶是将两个DNA片段之间连接，通过DNA连接酶连接两种不同DNA分子片段之间的磷酸二酯键，其位置是磷酸与脱氧核糖之间，DNA连接酶DNALigase也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色。

可能很多同学混淆了“专一性”和“特异性”专一性是所有酶的特点，只要是酶就一定具有专一性，DNA连接酶属于酶，所以也具有专一性，具体体现在“只能连接脱氧核苷酸而不能连接核糖核苷酸”等方面。特异性。在DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶三者里，限制酶“可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对在每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割”，具有特异性；DNA连接酶“催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键”，不具有特异性，唯一的区别是，大肠杆菌连接酶只连接黏性末端，而T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端；DNA聚合酶将哪一种脱氧核苷酸聚合，是由模板链的碱基决定的，遵循碱基互补配对原则，不具有特异性。参考：百度百科“DNA连接酶”、《人教版高中生物选修3》

DNA复制过程中需要DNA连接酶的原因：DNA连接酶可以连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。DNA连接酶也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸酯键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，通过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiester bond）来黏合DNA(DNA连接酶将DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸双脂键)。

DNA复制过程中需要DNA连接酶的原因：DNA连接酶可以连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5"-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。DNA连接酶也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条DNA黏合成一条。无论是双股或是单股DNA的黏合，DNA黏合酶都可以借由形成磷酸酯键将DNA在3"端的尾端与5"端的前端连在一起。虽然在细胞内也有其他的蛋白质，例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA为模版的情况下，将另一边的DNA单股断裂端，通过聚合反应的过程形成磷酸双脂键（phosphodiester bond）来黏合DNA(DNA连接酶将DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸双脂键)。

作用特点：①不能连接两条单链dna或环化dna，只能连接双链dna分子的单链缺口。②只能连接失去一个磷酸二酯键形成的单链断裂，不能连接缺失一个或多个氨基酸缺口③只作用于3端羟基和5端磷酸的链④连接反应需要atpnad+和mg2+利用价值：可对缺口dna，平末端dna，黏性末端dna进行连接。

能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。该酶催化DNA相邻的5′磷酸基和3′羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA单链缺口封合起来。大肠杆菌和动植物细胞中都有DNA连接酶。为将限制性酶切片段共价地连接起来，可使用T4DNA连接酶，或大肠杆菌连接酶。T4DNA连接酶是分子量58kD的多肽，是T4噬体感染大肠杆菌而产生的。在连接反应中以ATP为辅助因子，是应用最广的连接酶，有商品供应。它的用途是：①连接带匹配粘端的DNA分子，②使平端的双链DNA分子互相连接或合成的接头相连接。大肠杆菌DNA连接酶能使互相匹配的5′突出端和3′突出端的双链DNA连接，反应中以NAD+作为辅助因子，基因工程不常用。

1. （1）E·coli DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端； （2）T4DNA连接酶：来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低. （3）热稳定的DNA连接酶（thermostableDNAligase）,是从嗜热高温放线菌（Thermoactinomycesthermophilus）菌株中分离纯化的,一种能够在高温下催化两条寡核苷酸探针发生连接作用的一种核酸酶. 2. DNA连接酶：连接DNA单链与DNA单链之间的磷酸二酯键 限制性核酸内切酶：剪切双链DNA内的磷酸二酯键 3. 作为运载体必须具有三个条件： ①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制； ②有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入； ③有一定的标记基因,便于进行筛选.如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因.一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建.现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的.

解旋酶作用的部位是双链DNA分子的氢键。DNA聚合酶，DNA连接酶作用部位都是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。解旋酶是一类解开氢键的酶，而不是一种酶，由水解ATP供给能量来解开DNA的酶。它们常常依赖于单链的存在，并能识别复制叉的单链结构。一般在DNA或RNA复制过程中起到催化双链DNA或RNA解旋的作用。DNA连接酶分为两大类:一类是利用ATP的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖ATP的DNA连接酶，另一类是利用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的能量催化两个核苷酸链之间形成磷酸二酯键的依赖NAD*的DNA连接酶。扩展资料：转录前先是TFⅡ-D与TATA盒结合;继而TFⅡ-B以其C端与TBP-DNA复合体结合，其N端则能与RNA聚合酶Ⅱ亲和结合;接着由两个亚基组成的TFⅡ-F加入装配，TFⅡ-F不仅能与RNA聚合酶形成复合体。还具有依赖于ATP供给能量的DNA解旋酶活性，能解开前方的DNA双螺旋，在转录链延伸中起作用。这样，启动子序列就与TFⅡ-D、B、F及RNA聚合酶Ⅱ结合形成一个有转录功能基础的“最低限度”转录前起始复合物(pre-initiationcomplex，PIC)，转录mRNA.。TFⅡ-H是多亚基蛋白复合体，具有依赖于ATP供给能量的DNA解旋酶活性，在转录链延伸中发挥作用;TFⅡ-E是两个亚基组成的四聚体，而可能与TFⅡ-B联系不直接与DNA结合，能提高ATP酶的活性;TFⅡ-E和TFⅡ-H的加入就形成了完整的转录复合体，能转录延伸生成长链RNA。聚合作用：在引物RNA-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令，即A与T，C与G的配对原则，逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端，逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用。3"→5""外切酶活性（校对作用）：这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸，3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用，当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除，以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。可见，3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性。大肠杆菌的DNA连接酶是一条分子量为75Ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部分活性，可以催化酶与NAD(而不是ATP)反应形成酶-AMP中间物，但不能继续将AMP转移到DNA上促进磷酸二酯键的形成。DNA连接酶在大肠杆菌细胞中约有300个分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为DNA连接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填满双链DNA上的单链间隙后封闭DNA双链上的缺口。这在DNA复制、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行DNA复制、修复和重组。参考资料来源：百度百科-解旋酶百度百科-DNA聚合酶百度百科-DNA连接酶

DNA连接酶不可以连接两条单链的DNA。DNA连接酶是一种封闭DNA链上缺口的酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5"-PO4与另一DNA链的3"-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60Ku，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。

连接酶和修复酶。1、连接酶包括DNA连接酶I，DNA连接酶II和DNA连接酶IV，它们在DNA复制和重组过程中起到连接DNA断裂末端的作用。2、修复酶包括DNA连接酶III和DNA连接酶I-like，它们主要在DNA损伤修复过程中起到连接DNA断裂末端的作用。

DNA连接酶的作用是连接DNA链之间的磷酸二酯键,使其成为一个完整的DNA分子.例如在基因工程中可将运载体与目的基因相连接,形成重组DNA分子. DNA聚合酶的作用是在DNA复制时将单个的脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸长链.

PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2.由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5"端到3"端进行复制,也就是只能识别3"的尾端,而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷酸链上,所以引物1和2分别于双链DNA的两条链的尾部（就是末尾是3"端的那一边）结合,为那些脱氧核苷酸提供3"的末端,就相当于开了个头.然后在DNA聚合酶的作用下合成两条新链.而那段引物就成了新链的一部分.其实在生物体内的DNA复制也是这样的一个过程,只是引物是人体自身合成的.我知道这些很难理解,我当初看了半天,这里只是用我自己的理解来告诉你希望我的回答能让你满意

没有区别。dna引物和rna引物都是RNA，特定的RNA有类似酶的催化和识别引导能力，不管是生物体内还是实验室，引物都是RNA的，所以两者没有区别，DNA一般指脱氧核糖核酸。脱氧核糖核酸是生物细胞内含有的四种生物大分子之一核酸的一种。DNA携带有合成RNA和蛋白质所必需的遗传信息。

为什么dna复制过程中是以rna作为引物而不rna有3‘oh是一个原因,最主要的是rna是单链,而且容易被降解.机体选择rna做引物是为了避免错配,因为即使引物rna的碱基序列出现差错,可以很容易被降解,然后通过dna的修复功能即可复制出正确的序列,是一种保护机制.如果是dna做引物则不容易被降解.我们体外对dna进行扩增时则是使用的dna引物,因为dna引物不容易被降解.

为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

因为DNA聚合酶不能将单个的脱氧核糖核苷酸聚合在一起，所以需要RNA引物提供一个3-OH，之后就可以在DNA聚合酶作用下合成DNA了。而RNA聚合酶可以将单个核糖核苷酸聚合在一起，所以转录就不需要引物。

这个是由DNA聚合酶的特性来决定的。DNA聚合酶的功能是将脱氧核苷酸不断的添加到DNA链上的，但是，我们知道，DNA是有极性的，一端是含有裸露羟基的3"-OH端，另一端是含有裸露磷酸基团的5"-P端。而目前所有的DNA聚合酶只能将脱氧核苷酸添加在3"-OH端。那么，矛盾就出来了，在最开始合成DNA时，从哪儿来的3"-OH端呢？为了解决这个矛盾，所以选取了先合成一一很短的RNA链，再将脱氧核苷酸添加到RNA的3"-OH端。之所以选取RNA是因为RNA聚合酶添加核苷酸是没有3"-OH端要求的。补充：在以上我们知道，最初合成的时候是先合成一段RNA，那么，这一段RNA后面的DNA只能往后面去合成，而被RNA所占去的这一段DNA是无法完成复制的，就是说这一段DNA复制的时候会“被丢失”的，此过程是不可逆转的，一旦丢失了就没了。不过，所幸的是，在DNA的两端往往有较长的一段DNA是无意义的，称作端粒，它的作用就是“被丢失”防止有作用的DNA“被丢失”。目前一发现，少数细胞有修复端粒的相关酶，叫端粒合成酶，但是，一般的体细胞是不具备，只有囊胚期细胞、生殖细胞以及某些微生物才具备。谢谢！

之所以需要引物是因为DNA聚合酶仅仅可以把新的核苷酸加到已有的DNA链上，不能仅以核苷酸底物从头合成 DNA。即DNA聚合酶需要一个附着点，然后从这个起点的末端开始聚合 DNA。自然中，生物的DNA复制同样需要引物（RNA引物）。聚合酶链式反应(PCR)中人工合成的引物通常为DNA引物。

提供3一OH末端作为合成新DNA链的起点。根据查询公开信息显示，RNA引物在DNA复制中可以提供3一OH末端，在DNA聚合酶催化下逐一加入dNTP，而延长DNA子链。DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程。

因为pcr是人工合成的引物，rna在体外不稳定，而且容易被rna酶污染，容易降解。所以用dna做pcr的引物。而在体内的话，是因为dna聚合酶只能从一段核苷酸序列后的3`端上加上dntp，使dna链不断延伸，而不能从头开始合成dna链；而rna聚合酶则可以从头开始合成rna链，所以就出现了在体内用rna做引物，来合成dna链的情况。

DNA聚合酶工作时必须要有一个引物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3"-羟基上,RNA引物就提供这个羟基.

因为复制刚开始的时候，引物配对没有经过校正，所以很易发生突变（就如我们体外利用PCR定点突变一样）。为了保证复制的高保真性，生物体用RNA做引物，这样生物体就能很好的区分引物RNA和新合成的DNA，从而在合成后将RNA切除。

引物是DNA,对于RNA作遗传物的可以用RNA,但可以忽略!

我们生物课刚学的:DNA复制:先由DNA解旋酶解旋,一部分双螺旋结构变成两条不接触的链(A与T的双键和G与C的三键都打开),然后由新物质依照碱基互补配对原则形成新链,最后母子链分别再高度螺旋。在此期间,只用到了DNA解旋酶、聚合酶和连接酶。RNA只有在转录和翻译时才用到:转录:从DNA到mRNA(信使RNA)翻译:从mRNA到蛋白质,需要tRNA(转移RNA)与rRNA

复制的引发(Priming)阶段包括DNA复制起点双链解开,通过转录激活步骤合成RNA分子,RNA引物的合成,DNA聚合酶将第一个脱氧核苷酸加到引物RNA的3"-OH末端复制引发的关键步骤就是前导链DNA的合成,一旦前导链DNA的聚合作用开始,滞后链上的DNA合成也随着开始,

DNA复制起始阶段DNA聚合酶需要借助RNA引物后的3‘-OH来将 dNTP连接到先导链上，然后激活复制。而PCR只是一种单纯的扩增技术，DNA和RNA均满足条件。

这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

编辑词条rna 核糖核酸(简称RNA) RiboNucleic Acid 由至少几十个核糖核苷酸通过磷酸二酯键连接而成的一类核酸,因含核糖而得名,简称RNA。RNA普遍存在于动物、植物、微生物及某些病毒和噬菌体内。RNA和蛋白质生物合成有密切的关系。在RNA病毒和噬菌体内，RNA是遗传信息的载体。RNA一般是单链线形分子;也有双链的如呼肠孤病毒RNA；环状单链的如类病毒RNA；1983年还发现了有支链的RNA分子。 结构 1965年R.W.霍利等测定了第 1个核酸——酵母丙氨酸转移核糖核酸的一级结构即核苷酸的排列顺序。此后,RNA一级结构的测定有了迅速的发展。到1983年,不同来源和接受不同氨基酸的tRNA已经弄清楚一级结构的超过280种,5S RNA 175种,5.8S RNA也有几十种,以及许多16S rRNA、18S rRNA、23S rRNA和26S rRNA。在mRNA中，如哺乳类珠蛋白mRNA、鸡卵清蛋白mRNA和许多蛋白质激素和酶的mRNA等也弄清楚了。此外还测定了一些小分子RNA如sn RNA和病毒感染后产生的RNA的核苷酸排列顺序。类病毒RNA也有5种已知其一级结构，都是环状单链。MJS2RNA、烟草花叶病毒 RNA、小儿麻痹症病毒RNA是已知结构中比较大的RNA。 除一级结构外，RNA分子中还有以氢键联接碱基（A对U；G对C）形成的二级结构。RNA的三级结构，其中研究得最清楚的是tRNA,1974年用X射线衍射研究酵母苯丙氨酸tRNA的晶体,已确定它的立体结构呈倒L形（见转移核糖核酸）。 RNA 一级结构的测定常利用一些具有碱基专一性的工具酶，将RNA降解成寡核苷酸,然后根据两种(或更多)不同工具酶交叉分解的结果，测出重叠部分,来决定RNA的一级结构。举例如下： AGUCGGUAG 牛胰核糖核酸酶 高峰淀粉酶核糖核酸酶T1 (RNase A) (RNase T1) AGU+C+GGU+AG AG+UCG+G+UAG 牛胰核糖核酸酶是一个内切核酸酶，专一地切在嘧啶核苷酸的3′-磷酸和其相邻核苷酸的5′-羟基之间，所以用它来分解上述AGUCGGUAG9核苷酸,得到AGU、C、GGU和AG4个产物。而核糖核酸酶 T1是一个专一地切在鸟苷酸的3′-磷酸和其相邻核苷酸的5′-羟基之间的内切核酸酶，它作用于上述9核苷酸,则得到AG、UCG、G和UAG4个产物。根据产物的性质,就可以排列出9核苷酸的一级结构。 除上述两种核糖核酸酶外，还有黑粉菌核糖核酸酶(RNase U2)，专一地切在腺苷酸和鸟苷酸处，和高峰淀粉酶核糖核酸酶T1联合使用,可以测定腺苷酸在RNA中的位置。多头绒孢菌核糖核酸酶(RNase Phy)除了CpN以外的二核苷酸都能较快地水解，因此和牛胰核糖核酸酶合用可以区别Cp和Up在RNA中的位置。 生物功能和种类 20世纪40年代，人们从细胞化学和紫外光细胞光谱法观察到凡是 RNA含量丰富的组织中蛋白质的含量也较多,就推测RNA和蛋白质生物合成有关。RNA 参与蛋白质生物合成过程的有 3类：转移核糖核酸(tRNA)、信使核糖核酸(mRNA)和核糖体核糖核酸(rRNA)。 不同的RNA 有着不同的功能 其中rRNA是核糖体的组成成分，由细胞核中的核仁合成，而mRNA tRNA 在蛋白质合成的不同阶段分别执行着不同功能。 mRNA是以DNA的一条链为模板，以碱基互补配对原则，转录而形成的一条单链，主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达，是遗传信息传递过程中的桥梁 tRNA的功能是携带符合要求的氨基酸，以连接成肽链，再经过加工形成蛋白质 具体请参阅高中生物第二册，遗传部分 RNA指 ribonucleic acid 核糖核酸 核糖核苷酸聚合而成的没有分支的长链。分子量比DNA小，但在大多数细胞中比DNA丰富。RNA主要有3类，即信使RNA（mRNA），核糖体RNA（rRNA）和转移RNA（tRNA）。这3类RNA分子都是单链，但具有不同的分子量、结构和功能。 在RNA病毒中，RNA是遗传物质，植物病毒总是含RNA。近些年在植物中陆续发现一些比病毒还小得多的浸染性致病因子，叫做类病毒。类病毒是不含蛋白质的闭环单链RNA分子，此外，真核细胞中还有两类RNA，即不均一核RNA（hnRNA）和小核RNA（snRNA）。hnRNA是mRNA的前体；snRNA参与hnRNA的剪接（一种加工过程）。自1965年酵母丙氨酸tRNA的碱基序列确定以后，RNA序列测定方法不断得到改进。目前除多种tRNA、5SrRNA、5.8SrRNA等较小的RNA外，尚有一些病毒RNA、mRNA及较大RNA的一级结构测定已完成，如噬菌体MS2RNA含3569个核苷酸。 RNA的种类： 在生物体内发现主要有三种不同的RNA分子在基因的表达过程中起重要的作用。它们是信使RNA（messengerRNA，mRNA）、转移（tranfer RNA，tRNA）、核糖体RNA（ribosomal RNA，rRNA）。RNA含有四种基本碱基，即腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶。此外还有几十种稀有碱基。 RNA的一级结构主要是由AMP、GMP、CMP和UMP四种核糖核苷酸通过3"，5"磷酸二酯键相连而成的多聚核苷酸链。天然RNA的二级结构，一般并不像DNA那样都是双螺旋结构，只有在许多区段可发生自身回折，使部分A-U、G-C碱基配对，从而形成短的不规则的螺旋区。不配对的碱基区膨出形成环，被排斥在双螺旋之外。RNA中双螺旋结构的稳定因素，也主要是碱基的堆砌力，其次才是氢键。每一段双螺旋区至少需要4～6对碱基对才能保持稳定。在不同的RNA中，双螺旋区所占比例不同。【RNA的二级结构】细胞内有三类主要的核糖核酸，即：mRNA、rRNA、tRNA。它们各有特点。在大多数细胞中RNA的含量比DNA多5～8倍。【大肠杆菌RNA的性质】 mRNA 生物的遗传信息主要贮存于DNA的碱基序列中，但DNA并不直接决定蛋白质的合成。而在真核细胞中，DNA主要贮存于细胞核中的染色体上，而蛋白质的合成场所存在于细胞质中的核糖体上，因此需要有一种中介物质，才能把DNA 上控制蛋白质合成的遗传信息传递给核糖体。现已证明，这种中介物质是一种特殊的RNA。这种RNA起着传递遗传信息的作用，因而称为信使RNA(messenger RNA，mRNA)。 mRNA的功能就是把DNA上的遗传信息精确无误地转录下来，然后再由mRNA的碱基顺序决定蛋白质的氨基酸顺序，完成基因表达过程中的遗传信息传递过程。在真核生物中，转录形成的前体RNA中含有大量非编码序列，大约只有25%序列经加工成为mRNA，最后翻译为蛋白质。因为这种未经加工的前体mRNA(pre-mRNA)在分子大小上差别很大，所以通常称为不均一核RNA（heterogeneous nuclear RNA,hnRNA）。 tRNA 如果说mRNA是合成蛋白质的蓝图，则核糖体是合成蛋白质的工厂。但是，合成蛋白质的原材料——20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。因此，必须用一种特殊的RNA——转移RNA（transfer RNA，tRNA）把氨基酸搬运到核糖体上，tRNA能根据mRNA的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸连结起来形成多肽链。每种氨基酸可与1-4种tRNA相结合，现在已知的tRNA的种类在40 种以上。 tRNA是分子最小的RNA，其分子量平均约为27000（25000-30000），由70到90个核苷酸组成。而且具有稀有碱基的特点，稀有碱基除假尿嘧啶核苷与次黄嘌呤核苷外，主要是甲基化了的嘌呤和嘧啶。这类稀有碱基一般是在转录后，经过特殊的修饰而成的。 1969年以来，研究了来自各种不同生物，:如酵母、大肠杆菌、小麦、鼠等十几种tRNA的结构，证明它们的碱基序列都能折叠成三叶草形二级结构（图3-23），而且都具有如下的共性： ① 5"末端具有G（大部分）或C。 ② 3"末端都以ACC的顺序终结。 ③ 有一个富有鸟嘌呤的环。 ④ 有一个反密码子环，在这一环的顶端有三个暴露的碱基，称为反密码子（anticodon）.反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。 ⑤ 有一个胸腺嘧啶环。 rRNA 核糖体RNA(ribosomal RNA，rRNA)是组成核糖体的主要成分。核糖体是合成蛋白质的工厂。在大肠杆菌中，rRNA量占细胞总RNA量的75%-85%，而tRNA占15%，mRNA仅占3-5%。 rRNA一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体（ribosome），如果把rRNA从核糖体上除掉，核糖体的结构就会发生塌陷。原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。S为沉降系数（sedimentation coefficient），当用超速离心测定一个粒子的沉淀速度时，此速度与粒子的大小直径成比例。5S含有120个核苷酸，16S含有1540个核苷酸，而23S含有2900个核苷酸。而真核生物有4种rRNA，它们分子大小分别是5S、5.8S、18S和28S，分别具有大约120、160、1900和4700个核苷酸。 rRNA是单链，它包含不等量的A与U、G与C，但是有广泛的双链区域。在双链区，碱基因氢键相连，表现为发夹式螺旋。 rRNA在蛋白质合成中的功能尚未完全明了。但16 S的rRNA3"端有一段核苷酸序列与mRNA的前导序列是互补的，这可能有助于mRNA与核糖体的结合。 snRNA 除了上述三种主要的RNA外，细胞内还有小核RNA(small nuclearRNA，snRNA)。它是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体（spilceosome）的主要成分。现在发现有五种snRNA，其长度在哺乳动物中约为100-215个核苷酸。snRNA一直存在于细胞核中，与40种左右的核内蛋白质共同组成RNA剪接体，在RNA转录后加工中起重要作用。另外，还有端体酶RNA(telomeraseRNA)，它与染色体末端的复制有关；以及反义RNA(antisenseRNA)，它参与基因表达的调控。 上述各种RNA分子均为转录的产物，mRNA最后翻译为蛋白质，而rRNA、tRNA及snRNA等并不携带翻译为蛋白质的信息，其终产物就是RNA。 2006诺贝尔医学奖成果RNA干扰机制解读 1990年，曾有科学家给矮牵牛花插入一种催生红色素的基因，希望能够让花朵更鲜艳。但意想不到的事发生了：矮牵牛花完全褪色，花瓣变成了白色！科学界对此感到极度困惑。 类似的谜团，直到美国科学家安德鲁·法尔和克雷格·梅洛发现RNA（核糖核酸）干扰机制才得到科学的解释。两位科学家也正是因为1998年做出的这一发现而荣获今年的诺贝尔生理学或医学奖。 根据法尔和梅洛的发现，科学家在矮牵牛花实验中所观察到的奇怪现象，其实是因为生物体内某种特定基因“沉默”了。导致基因“沉默”的机制就是RNA干扰机制。 此前，RNA分子只是被当作从DNA（脱氧核糖核酸）到蛋白质的“中间人”、将遗传信息从“蓝图”传到“工人”手中的“信使”。但法尔和梅洛的研究让人们认识到，RNA作用不可小视，它可以使特定基因开启、关闭、更活跃或更不活跃，从而影响生物的体型和发育等。 诺贝尔奖评审委员会在评价法尔和梅洛的研究成果时说：“他们的发现能解释许多令人困惑、相互矛盾的实验观察结果，并揭示了控制遗传信息流动的自然机制。这开启了一个新的研究领域。” 科学家认为，RNA干扰技术不仅是研究基因功能的一种强大工具，不久的未来，这种技术也许能用来直接从源头上让致病基因“沉默”，以治疗癌症甚至艾滋病，在农业上也将大有可为。从这个角度来说，“沉默”真的是金。美国哈佛医学院研究人员已用动物实验表明，利用RNA干扰技术可治愈实验鼠的肝炎。 目前，尽管尚有一些难题阻碍着RNA干扰技术的发展，但科学界普遍对这一新兴的生物工程技术寄予厚望。这也是诺贝尔奖评审委员会为什么不坚持研究成果要经过数十年实践验证的“惯例”，而破格为法尔和梅洛颁奖的原因之一。 诺贝尔生理学或医学奖评审委员会主席戈兰·汉松说：“我们为一种基本机制的发现颁奖。这种机制已被全世界的科学家证明是正确的，是给它发个诺贝尔奖的时候了。” 补充 核糖核酸（缩写为RNA，即Ribonucleic Acid)，存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。 RNA由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种，即A腺嘌呤，G鸟嘌呤，C胞嘧啶，U尿嘧啶。其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成为RNA的特征碱基。 与DNA不同，RNA一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同，不过除了A-U、G-C配对外，G-U也可以配对。 在细胞中，根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA）, rRNA（核糖体RNA）, mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的DNA所转录；tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；rRNA是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。 在病毒方面，很多病毒只以RNA作为其唯一的遗传信息载体（有别于细胞生物普遍用双链DNA作载体）。 1982年以来，研究表明，不少RNA，如I、II型内含子，RNase P，HDV，核糖体大亚基RNA等等有催化生化反应过程的活性，即具有酶的活性，这类RNA被称为核酶（ribozyme）。 20世纪90年代以来，又发现了RNAi（RNA interference，RNA干扰）等等现象，证明RNA在基因表达调控中起到重要作用。 在RNA病毒中，RNA是遗传物质，植物病毒总是含RNA。近些年在植物中陆续发现一些比病毒还小得多的浸染性致病因子，叫做类病毒。类病毒是不含蛋白质的闭环单链RNA分子，此外，真核细胞中还有两类RNA，即不均一核RNA（hnRNA）和小核RNA（snRNA）。hnRNA是mRNA的前体；snRNA参与hnRNA的剪接（一种加工过程）。自1965年酵母丙氨酸tRNA的碱基序列确定以后，RNA序列测定方法不断得到改进。目前除多种tRNA、5SrRNA、5.8SrRNA等较小的RNA外，尚有一些病毒RNA、mRNA及较大RNA的一级结构测定已完成，如噬菌体MS2RNA含3569个核苷酸。 核糖核酸 Ribonucleic Acid (RNA) 本品能促进肝细胞蛋白质合成，改善氨基酸代谢，降低血清谷丙转氨酶，改善肝炎患者血清蛋白电泳，并能调节人体免疫功能，促使病变肝细胞恢复正常。临床用于急慢性肝炎，肝硬化的治疗。肌内注射，6mg/次，以生理盐水稀释，隔日1次，3个月为1疗程。编辑本段RNA干扰（RNAi） RNAi的定义 目前对RNAi (RNA interference)的定义有很多种，不同的资料对其定义的侧重点也不尽相同，如果将RNAi看作一种生物学现象，可以有以下定义：① RNAi是由dsRNA介导的由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。② RNAi是有dsRNA参与指导的，以外源和内源mRNA为降解目标的转基因沉默现象。具有核苷酸序列特异性的自我防御机制，是一种当外源基因导入或病毒入侵后，细胞中与转基因或入侵病毒RNA同源的基因发生共同基因沉默的现象。 如果将其作为一门生物技术，则定义为：① RNAi 是指通过反义RNA与正链RNA 形成双链RNA 特异性地抑制靶基因的现象,它通过人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA(有义RNA 和反义RNA) ,从而诱导内源靶基因的mRNA 降解,达到阻止基因表达的目的。② RNAi是指体外人工合成的或体内的双链RNA（dsRNA）在细胞内特异性的将与之同源的 mRNA降解成21nt～23nt 的小片段，使相应的基因沉默。③ RNAi是将与靶基因的mRNA 同源互补的双链RNA(dsRNA ) 导入细胞,能特异性地降解该mRNA ,从而产生相应的功能表型缺失, 属于转录后水平的基因沉默(post - transcriptional gene silence , PTGS)。 各种不同定义虽然说法不同，但所描述事实是大体相同的，简单地可以说，RNAi就是指由RNA介导的基因沉默现象。 最近由于RNA干扰（RNA interference，RNAi）的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的（1），是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步，已经有许多这方面的综述发表（2-4）。RNA干扰是由长的双链RNA分子发动的，该分子可以被Dicer enzyme加工成长度为21-23个核苷酸的RNA（见图）。RNaseIII蛋白被认为是作为一个二聚体发挥作用，它对双链RNA的两个链都进行切割，酶切的产物3"末端互相重叠。然后这种小的干扰RNA分子（small interfering RNAs，siRNAs）掺入RNA诱导的沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC），引导核酸酶降解靶RNA。 这种保守的生化机制可用于研究多种模式生物的基因功能，但是它在哺乳动物细胞中的应用受到阻碍，因为长的双链RNA分子会引起干扰素应答。因此Tuschi及其同事表明长度为21nt的siRNA可以特异性的抑制哺乳动物细胞基因表达是一个革命性的突破（5）。这个发现激发了大量利用RNAi技术对哺乳动物细胞的研究，因为与传统的反义技术比，RNAi的性能明显较高。 有趣的是，除了短双链RNA，短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA），比如茎环结构在细胞内经过加工后也可以变成siRNA，从而产生RNA干扰（6、7）。这使得构建表达干扰RNA的载体，从而使哺乳动物细胞内基因表达长期沉默成为可能（4、8）。shRNA可以利用RNA聚核酶III启动子转录，在正常情况下，该启动子是控制小核RNA（small nuclear RNA，snRNA）U6（6、7、9、10）或者RNaseP的组分H1 RNA（11）转录的。另外一种办法是两段短RNA分子分别用U6启动子转录出来（6、12、13）。载体介导的siRNA表达使对功能缺失（loss-of-function）表型进行长期分析成为可能。在稳定转染的细胞内，两个月后仍可观察到沉默现象（11）。 另外一种延长siRNA抑制基因表达时间的方法是对化学合成的RNA进行核苷酸修饰。尽管未经修饰的短双链RNA在细胞培养物或者体内的稳定性出乎意料的高，然而有些情况下，需要对siRNA的稳定性进行进一步提高。因此，可以在两条链的末端都引入经过修饰的核苷（14）。一个5"端为两个2"-O-甲基RNA、3"端为4个甲基化核苷的siRNA与序列相同但是未经修饰的siRNA比活性相同，但是在细胞培养物中引起的基因沉默现象的时间延长。然而，增多siRNA中的甲基化核苷，或者在核苷中引入体积较大的烯丙基将导致siRNA活性下降。 RNA干扰在哺乳动物体内的第一个研究是利用快速注射大量生理溶液的方法将一个编码shRNA的质粒注入老鼠的尾静脉（15、16）。在大多数器官中，报道基因（编码于共转染质粒或者转基因小鼠上）的表达可以被有效地抑制。另外，Fas基因被作为肝损伤治疗相关的内源靶标进行了RNA干扰实验（17）。注射siRNA之后，小鼠肝细胞中的Fas mRNA和蛋白水平下降了10天。把Fas基因沉默可以保护小鼠免遭由注射竞争性Fas特异抗体引起的爆发性肝炎，82%用siRNA处理的小鼠活过了10天观察期，而所有的对照小鼠在3天之内死亡。 上述研究中采用的高压导入技术是一种粗暴的方法，不适于治疗用。因此，标准的基因治疗所采用的方法被用于RNA干扰。一个反转录病毒载体被用于导入siRNA，以抑制人类胰腺肿瘤细胞中的癌基因K-ras等位基因（18）。负调控癌细胞中K-ras基因的表达使得它们在注入无胸腺的裸鼠皮下之后不再具有形成肿瘤的能力。这项研究还表明siRNA的高度特异性，因为只有癌基因K-ras被沉默，而与之只有1个碱基对差异的野生型等位基因并没有被沉默。另外，当在纹状区注射表达siRNA的腺病毒之后，转基因小鼠大脑中GFP基因的表达可以被抑制（19）。β－葡萄糖醛酸苷酶（b-glucoronidase）的活性可以通过在小鼠尾静脉注射重组腺病毒抑制。有趣的是，具有CMV启动子和最小的polyA尾的RNA聚合酶II表达元件被用于这个实验，为设计组织特异性或者可诱导的siRNA载体打开了大门。 总的来说，siRNA的第一个体内实验已经进行，其他有重要意义的基因有望于很快作为靶标开展研究。至今为止的研究没有观察到任何应用siRNA引起的毒性作用，但是在治疗人类疾病的临床试验开始之前仍需小心，以排除长期使用RNA干扰引起的严重副作用。因为用siRNA使基因表达沉默与传统的反义技术相似，研究者将从十多年来反义技术研究的教训中获益，比如需要使用合适的对照以证明基因表达的敲除是特异性的，以及对免疫系统可能引起的意外影响进行详细分析。 总结 经过长期盛衰沉浮，反义技术近年来得到越来越多的注意。对能够提高靶表亲和性和生物稳定性、降低毒性的修饰核苷的研究取得了重要进展。由于大多数新的DNA类似物不能激活RNaseH，对反义寡核苷酸的设计需要考虑靶mRNA是否需要保留，例如，是改变剪接方式，还是降解靶mRNA（这种情况下应该使用gapmer技术）。可以通过有系统的修饰天然核酶或者通过体外选择技术获得具有高催化活性的稳定核酶。一些反义寡核苷酸和核酶已经进入临床试验研究，一个反义药物已经在1998年获得批准。一个重要的突破是发现短的双链RNA分子可用于哺乳动物细胞中特异性沉默基因表达。这个方法与传统的反义技术比效率明显更高，并且一些体内实验的数据已经发表。因此，反义技术有望广泛应用于对未知功能基因的研究、药物靶标的确认和治疗。本词条对我有帮助65

在生物体内，DNA的复制，是RNA作为引物的，在平时的实验中，直接用DNA作为引物的，因为RNA非常不稳定。

因为RNA不稳定，非常容易降解。生活实验中随处可见RNA酶，比如你皮肤上、呼一口气里面，都可能有，可以降解RNA。而且DNA聚合酶它主要是要一个3‘的磷酸基团，所以DNA和RNA都一样。而且RNA掺入到DNA链中后，还要切除，补全，比较麻烦。

引物是DNA，对于RNA作遗传物的可以用RNA，但可以忽略！

细胞内DNA复制的引物与PCR引物有何区别【相同点】：　　1. 都以DNA为模板　　2. 都以四种dNTP为底物　　3. 都要DNA聚合酶　　4．都需要Mg2+　　5. 都需要解开双链为2条单链　　6. 都沿着5‘-3"方向聚合【不同点】：　　1. PCR是DNA复制的体外扩增技术　　2. 体内DNA复制半不连续复制，体外PCR连续复制，不产生冈崎片段。　　3. 体内DNA复制是8种酶和蛋白共同参与（dnaB，引物酶，rep蛋白，SSB蛋白，DNA旋转酶，DNA聚合酶3，DNA聚合酶1，连接酶），体内DNA复制的聚合酶在高温时会变性，PCR需要耐热的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶）。　　4. 生物体内DNA复制需要生物体自身的复制，PCR需要经过高温变性，低温退火和中温延伸过程，要经历三十次循环使特定DNA片段放大数百万倍。　　5. DNA复制需要校对以保证忠实性，PCR不需要校对。　　6. 引物不同：体内DNA复制需要RNA，而且体内引物要除去，PCR需要两个人工合成的DNA引物，不需要切除。　　7. PCR对DNA模板要求不高，纯度要求不严格，用量很低，但是引物的设计十分重要，决定了PCR扩增片段的大小和特异性。

是RNA。RNA有3‘OH是一个原因,最主要的是 RNA 是单链,而且容易被降解.机体选择RNA 做引物是为了避免错配,因为即使引物RNA的碱基序列出现差错,可以很容易被降解,然后通过DNA的修复功能即可复制出正确的序列,是一种保护机制.如果是DNA 做引物则不容易被降解.我们体外对DNA进行扩增时则是使用的DNA引物,因为DNA引物不容易被降解.

都是RNA,特定的RNA有类似酶的催化和识别引导能力,而DNA暂时还没发现类似的能力, 不管是生物体内还是实验室,引物都是RNA的

是为了尽量减少DNA复制起始处的突变。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。引发体可以在单链DNA上移动，在dnaB亚基的作用下识别DNA复制起点位置。首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物，然后，引发体在滞后链上沿5"→3"方向不停的移动（这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动），在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用，。但是，这些成份必须协同工作才能使引发体在滞后链上移动，识别合适的引物合成位置，并将核苷酸在引发位置上聚合成RNA引物。由于引发体在滞后链模板上的移动方向与其合成引物的方向相反，所以在滞后链上所合成的RNA引物非常短，一般只有3-5个核苷酸长。而且，在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似的序列，表明引物酶要在DNA滞后链模板上比较特定的位置（序列）上才能合成RNA引物。扩展资料DNA的复制是一个边解旋边复制的过程。复制开始时，DNA分子首先利用细胞提供的能量，在解旋酶的作用下，把两条螺旋的双链解开，这个过程叫解旋。然后，以解开的每一段母链为模板，以周围环境中的四种脱氧核苷酸为原料，按照碱基配对互补配对原则，在DNA聚合酶的作用下，各自合成与母链互补的一段子链。随着解旋过程的进行，新合成的子链也不断地延伸，同时，每条子链与其母链盘绕成双螺旋结构，从而各形成一个新的DNA分子。这样，复制结束后，一个DNA分子，通过细胞分裂分配到两个子细胞中去。注：复制时遵循碱基互补配对原则，复制发生在细胞分裂的间期。DNA遗传信息的载体，故亲代DNA必须以自身分子为模板准确的复制成两个拷贝，并分配到两个子细胞中去，完成其遗传信息载体的使命。而DNA的双链结构对于维持这类遗传物质的稳定性和复制的准确性都是极为重要的。参考资料来源：百度百科-DNA复制

是为了尽量减少DNA复制起始处的突变。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。引发体可以在单链DNA上移动，在dnaB亚基的作用下识别DNA复制起点位置。首先在前导链上由引物酶催化合成一段RNA引物，然后，引发体在滞后链上沿5"→3"方向不停的移动（这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动），在一定距离上反复合成RNA引物供DNA聚合酶Ⅲ合成冈崎片段使用，。但是，这些成份必须协同工作才能使引发体在滞后链上移动，识别合适的引物合成位置，并将核苷酸在引发位置上聚合成RNA引物。由于引发体在滞后链模板上的移动方向与其合成引物的方向相反，所以在滞后链上所合成的RNA引物非常短，一般只有3-5个核苷酸长。而且，在同一种生物体细胞中这些引物都具有相似的序列，表明引物酶要在DNA滞后链模板上比较特定的位置（序列）上才能合成RNA引物。扩展资料DNA的复制是一个边解旋边复制的过程。复制开始时，DNA分子首先利用细胞提供的能量，在解旋酶的作用下，把两条螺旋的双链解开，这个过程叫解旋。然后，以解开的每一段母链为模板，以周围环境中的四种脱氧核苷酸为原料，按照碱基配对互补配对原则，在DNA聚合酶的作用下，各自合成与母链互补的一段子链。随着解旋过程的进行，新合成的子链也不断地延伸，同时，每条子链与其母链盘绕成双螺旋结构，从而各形成一个新的DNA分子。这样，复制结束后，一个DNA分子，通过细胞分裂分配到两个子细胞中去。注：复制时遵循碱基互补配对原则，复制发生在细胞分裂的间期。DNA遗传信息的载体，故亲代DNA必须以自身分子为模板准确的复制成两个拷贝，并分配到两个子细胞中去，完成其遗传信息载体的使命。而DNA的双链结构对于维持这类遗传物质的稳定性和复制的准确性都是极为重要的。参考资料来源：百度百科-DNA复制

分类: 教育/科学 >> 学习帮助 解析: 为什么需要有RNA引物来引发DNA复制呢?这可能尽量减少DNA复制起始处的突变有关。DNA复制开始处的几个核苷酸最容易出现差错，因此，用RNA引物即使出现差错最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除，提高了DNA复制的准确性。RNA引物形成后，由DNA聚合酶Ⅲ催化将第一个脱氧核苷酸按碱基互补原则加在RNA引物3"-OH端而进入DNA链的延伸阶段。

RNA有3‘OH是一个原因，最主要的是RNA是单链，而且容易被降解。机体选择RNA做引物是为了避免错配，因为即使引物RNA的碱基序列出现差错，可以很容易被降解，然后通过DNA的修复功能即可复制出正确的序列，是一种保护机制。如果是DNA做引物则不容易被降解。我们体外对DNA进行扩增时则是使用的DNA引物，因为DNA引物不容易被降解。