基因

2个目的基因如何导入一个载体.基因操作过程中使用运载体有两个目的：一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）.携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后,停留在细胞中进行（自我复制）或整合到细菌拟核DNA中,随着拟核DNA的复制而复制.载体除了质粒以外,还有噬菌体载体、病毒载体等.

不是的.目的基因导入只是进入细胞内,而转化是指：目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定并表达的过程.

在基因工程中，将外源基因导入植物细胞的方法有，农杆菌转化法，基因枪法，花粉管通道法。

利用第三介质！一般动物受体细胞利用显微注射法，植物细胞一般是用农杆菌转化法！利用农杆菌侵入受体细胞，农杆菌再在受体细胞会自动将目的基因整合到受体细胞染色体上！但还不一定会表达！是否表达还要用选择培养基进行筛选！希望你能采纳！

这个涉及到一个基因工程的问题。首先用限制性核酸内切酶获取目的基因，然后理由运载体与目的基因重组DNA分子，导入受体细胞，借助活细胞的代谢功能是目的基因表达(受体细胞可以是微生物，植物，动物细胞)，接着就要筛选了，但是成功率很低很低。手打的，不是复制黏贴

基因突变：基因数目没有发生变化！ 目的基因导入受体细胞，基因数目增加，是基因重组！

基因重组技术目前主要的受体为大肠杆菌等微生物，他们的质粒（核外遗传物质）非常容易在细胞分裂遗传中丢失，但是当质粒重组到核区Dna上的时候就可以正常的分裂遗传。你要判断导入的目的基因是否可遗传，比较直观的方法就是培养重组细胞，根据目的基因特性筛选，如果目的基因表达的活性难以删选，也可以根据重组质粒所带的基因用抗生素抗性筛选或者蓝白筛选。

目的基因自己导入受体细胞中是无法表达的，必须要先和表达载体连接构建重组质粒后，将重组质粒导入受体细胞内才可以进行表达。表达条件因表达载体而异，大肠杆菌表达载体常使用IPTG进行诱导表达。重组质粒在受体细胞内是可以进行复制的，在抗生素的筛选压力下可以遗传给下一代。望采纳。

一般不会，新物种产生的标志是与原有物种产生生殖隔离，和基因导入没有必然联系

检测目的基因是否导入受体细胞的方法是：导入时用的运载体上如果有抗性基因（标记基因）,就可以通过检测抗性基因的表达来检测,比如运载体PBR322 就带有抗四环素基因和抗氨卞青霉素基因 要么就等目的基因在受体细胞中表达以后,然后根据特定的性状来区分. 还有DNA、mRNA、蛋白质杂交法. 合成所最终需要的蛋白质,即最终所需要的产品.

基因重组一般是导入质粒，并不重组到染色体上，因而不算变异。 有性生殖过程一定发生了基因重组，但基因重组不一定只发生在有性生殖过程。基因重组顾名思义就是基因的重新组合，把外源基因导入宿主菌就是一种重组。

基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。其中，对于细菌或植物细胞，常用质粒作为载体将目的基因导入细胞内；动物细胞则用显微注射的方法将目的基因导入动物受精卵的雄性原核中。

　　将目的基因导入植物细胞的方法包括：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。其中，农杆菌转化法是用的最多的方法，主要是针对双子叶植物和裸子植物。 　　基因工程的原料就是目的基因。所谓目的基因，就是指已被或欲被分离、改造、扩增和表达的特定基因或DNA片段，一般能编码某一产物或控制某一性状。

（1）构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到限制酶、DNA连接酶两种工具酶．如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起．标记基因具有鉴定目的基因是否导入受体细胞并将含有目的基因的细胞筛选出来． （2）为了获得足够数量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供体雌性鼠超数排卵．雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出． （3）通常采用显微注射技术将目的基因导入受精卵． （4）早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质．当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植． （5）在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行发情处理．移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查． （6）经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用发射性同位素标记目的基因制作探针，进行DNA分子杂交检测． 故答案为： （1）限制酶、DNA连接酶 乳腺蛋白基因 鉴定目的基因是否导入受体细胞并将含有目的基因的细胞筛选出来ue003 （2）促性腺激素 （3）显微注射 （4）动物血清ue003 （5）同期发情ue003 （6）放射性同位素等标记目的基因

将外源基因导入哺乳动物细胞只能导入受精卵，因为一般的培养目标是形成转基因动物个体。常用的方法就是显微注射法。这是目前最为有效的一种方法。

植物常用的是：农杆菌转化法，基因枪法和花粉管通道法动物就是利用显微注射，或者灭活的病毒转导。细菌可以转化、转导。转化是利用细菌的某些特别菌株；转导是利用噬菌体。

（1）提取目的基因：获取目的基因是实施基因工程的第一步。如植物的抗病（抗病毒 抗细菌）基因，种子的贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因干扰素基因等，都是目的基因。 要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，是十分不易的。科学家们经过不懈地探索，想出了许多办法，其中主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因。 直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞提供的DNA（即外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫抗病毒的基因都可以用上述方法获得。 用鸟枪法获得目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，一般使用人工合成的方法。 目前人工合成基因的方法主要有两条。一条途径是以目的基因转录成的信使RNA为模版，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的基因。另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对的原则，推测出它的基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。如人的血红蛋白基因胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得。 （2）目的基因与运载体结合：基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。 将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就会因碱基互补配对而结合，形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合，形成重组DNA分子（也叫重组质粒）的。 （3）将目的基因导入受体细胞：将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后，下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。 基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。 用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如，如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。 （4）目的基因的检测和表达：目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。 以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。因此，必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。检测的方法有很多种，例如，大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。

基因工程是生物工程的一个重要分支，它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。 所谓基因工程（genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达，从而获得新物种的一种崭新技术。基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于本世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学。一般来说，基因工程是指在基因水平上的遗传工程，它是用人为方法将所需要的某一供体生物的遗传物质--DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中，以让外源遗传物质在其中"安家落户"，进行正常复制和表达，从而获得新物种的一种崭新的育种技术。 这个定义表明，基因工程具有以下几个重要特征：首先，外源核酸分子在不同的寄主生物中进行繁殖，能够跨越天然物种屏障，把来自任何一种生物的基因放置到新的生物中，而这种生物可以与原来生物毫无亲缘关系，这种能力是基因工程的第一个重要特征。第二个特征是，一种确定的DNA小片段在新的寄主细胞中进行扩增，这样实现很少量DNA样品"拷贝"出大量的DNA，而且是大量没有污染任何其它DNA序列的、绝对纯净的DNA分子群体。科学家将改变人类生殖细胞ＤＮＡ的技术称为“基因系治疗”（ｇｅｒｍｌｉｎｅｔｈｅｒａｐｙ），通常所说的“基因工程”则是针对改变动植物生殖细胞的。无论称谓如何，改变个体生殖细胞的ＤＮＡ都将可能使其后代发生同样的改变。　　迄今为止，基因工程还没有用于人体，但已在从细菌到家畜的几乎所有非人生命物体上做了实验，并取得了成功。事实上，所有用于治疗糖尿病的胰岛素都来自一种细菌，其ＤＮＡ中被插入人类可产生胰岛素的基因，细菌便可自行复制胰岛素。基因工程技术使得许多植物具有了抗病虫害和抗除草剂的能力；在美国，大约有一半的大豆和四分之一的玉米都是转基因的。目前，是否该在农业中采用转基因动植物已成为人们争论的焦点：支持者认为，转基因的农产品更容易生长，也含有更多的营养（甚至药物），有助于减缓世界范围内的饥荒和疾病；而反对者则认为，在农产品中引入新的基因会产生副作用，尤其是会破坏环境。　　诚然，仍有许多基因的功能及其协同工作的方式不为人类所知，但想到利用基因工程可使番茄具有抗癌作用、使鲑鱼长得比自然界中的大几倍、使宠物不再会引起过敏，许多人便希望也可以对人类基因做类似的修改。毕竟，胚胎遗传病筛查、基因修复和基因工程等技术不仅可用于治疗疾病，也为改变诸如眼睛的颜色、智力等其他人类特性提供了可能。目前我们还远不能设计定做我们的后代，但已有借助胚胎遗传病筛查技术培育人们需求的身体特性的例子。比如，运用此技术，可使患儿的父母生一个和患儿骨髓匹配的孩子，然后再通过骨髓移植来治愈患儿。随着DNA的内部结构和遗传机制的秘密一点一点呈现在人们眼前，特别是当人们了解到遗传密码是由 RNA转录表达的以后，生物学家不再仅仅满足于探索、提示生物遗传的秘密，而是开始跃跃欲试，设想在分子的水平上去干预生物的遗传特性。 如果将一种生物的 DNA中的某个遗传密码片断连接到另外一种生物的DNA链上去，将DNA重新组织一下，就可以按照人类的愿望，设计出新的遗传物质并创造出新的生物类型，这与过去培育生物繁殖后代的传统做法完全不同。 这种做法就像技术科学的工程设计，按照人类的需要把这种生物的这个“基因”与那种生物的那个“基因”重新“施工”，“组装”成新的基因组合，创造出新的生物。这种完全按照人的意愿，由重新组装基因到新生物产生的生物科学技术，就称为“基因工程”，或者说是“遗传工程”。 【基因工程的基本操作步骤】1.获取目的基因是实施基因工程的第一步。2.基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。3.将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。4.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。基因工程的前景科学界预言，21世纪是一个基因工程世纪。基因工程是在分子水平对生物遗传作人为干预，要认识它，我们先从生物工程谈起：生物工程又称生物技术，是一门应用现代生命科学原理和信息及化工等技术，利用活细胞或其产生的酶来对廉价原材料进行不同程度的加工，提供大量有用产品的综合性工程技术。

关于这个问题，是否是询问外源基因是否导入宿主细胞和外源基因是否插入（整合）到宿主基因组中的检测方法？检测是否导入，简单的方法可通过PCR方法检测，针对该基因设计特异性引物进行PCR扩增，检测样本若有目的条带则一般认为该基因已经导入宿主细胞。检测基因是否已插入，则需要提取基因组进行测序，以测序结果进行比对，判断基因是否插入到了宿主基因组中。希望能帮到你

将目的基因导入微生物的方法是：Ca2+处理法（感受态细胞法或CaCl2法）。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大，使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性，这种孔洞会被细胞自身所修复。例子：大肠杆菌的转化实验

还是在于表达的稳定性。对于一段完整的DNA序列，通过转染的方式，基本可以很好的完成表达。但mRNA就存在以下问题。首先，合成mRNA很复杂，体外转录获得的RNA通常没有5‘帽3"尾等必要结构，再加上自身的二级结构等原因，往往造成翻译过程不通常或者失败，人工合成的RNA同样存在以上问题。另外，转入RNA会引起一系列不可预期的变化，远不及转入基因可控。最后，转入mRNA需求量大，mRNA的存在周期很短，基本只能有几个小时，而转基因的话基本上能持续几天，还有就是大量转入mRNA对细胞的毒性也很大，实验容易不顺利

考点： 基因工程的原理及技术 专题： 分析： 基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等． 基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心．故选：B． 点评： 本题知识点简单，考查基因工程的相关知识，只要考生识记基因工程的操作步骤，明确基因表达载体的构建是其核心步骤即可正确答题，属于考纲识记层次的考查．

属于基因重组,基因工程是将不同的基因进行重新组合,是基因重组.突变是一个碱基对的变化,重组是一段碱基对的变化.

正确的问题应该是：检测载体是否转入和外源基因是否插入分别用什么方法？检测载体是否转入一般利用载体上的标记进行检测：大多数是抗性基因,如：1、氨苄抗性；2、四环素抗性；3、氯霉素抗性；4、新霉素抗性等。检测外源基因是否插入一般利用载体上被插入位点的另外一个基因是否正常表达来检测，正常表达，说明没有插入，未正常表达说明插入了，破坏了原来的基因：如：1、B-半乳糖苷酶的a互补蓝白斑筛选；2、抗性基因筛选。还可以利用质粒的提取电泳检测：质粒有无检测载体是否转入，质粒是否比空载质粒大检测外源基因是否插入。

用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如，如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。

游离的DNA片段进入受体细胞，一般会直接被分解，就算可以进行转录并翻译成蛋白质，游离的DNA片段也无法随着细胞分裂而进行复制，导致子代细胞中不再含有目的基因。若将目的基因插入载体，由于载体可以在细胞内复制，随着细胞分裂，载体会带着目的基因存在于每个子代细胞中。

导入植物细胞：农杆菌转化法（转基因抗虫棉用的是花粉管通道法）；导入动物细胞：显微注射技术（注射入受精卵中）；导入原核生物：一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。

1.先加到载体上：质粒、动植物病毒等再导入受体细胞：显微注射、病毒侵染等方法2.目的基因导入受体，需要运输工具即运载体，如大肠杆菌的质粒。用一种限制性内切酶切断目的基因和质粒使它们产生相同的粘性末端，在切口加入dna连结酶后，质粒的粘性末端就会与目的基因的粘性末端碱基互补配对结合，行成重组dna分子，把它导入受体细胞如细菌、酵母菌，目的基因就能随受体细胞的繁殖而复制

将外源基因导入哺乳动物细胞只能导入受精卵，因为一般的培养目标是形成转基因动物个体。常用的方法就是显微注射法。这是目前最为有效的一种方法。

检测目的基因是否导入受体细胞的方法有以下两种：1、农杆菌转化法（植物常用）农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位（受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物，从而使农杆菌移向这些细胞），并诱导产生冠瘿瘤或发状根。2、利用显微注射，或者灭活的病毒转导（动物常用）转导由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。细菌可以转化、转导。转化是利用细菌的某些特别菌株；转导是利用噬菌体。扩展资料：转导的类别：（1）低频转导（LFT）诱导溶源性细菌而产生的细胞裂解产物中，除含有正常的噬菌体外，还有极少数（约为10^(-6)）部分缺陷噬菌体。用诱导溶源性菌株得来的噬菌体进行转导时的转导频率不过10^(-6) ，称为低频转导。（2）高频转导（HFT）双重溶原菌在紫外辐射等因子的诱导下,原噬菌体容易被切割下来，产生等量的缺陷噬菌体和正常噬菌体，该裂解物称为高频率转导裂解物，用这样的裂解物去感染细菌，将比低频率转导裂解物产生多得多的转导子。参考资料来源：百度百科-农杆菌转化法参考资料来源：百度百科-显微注射

显微注射将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞培育成“超级鼠”，高中人教版选修教材里有

导入植物细胞：农杆菌转化法（转基因抗虫棉用的是花粉管通道法）；导入动物细胞：显微注射技术（注射入受精卵中）；导入原核生物：一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。

不一定。要看该目的基因的载体是否能插入动物细胞的基因组，如果不能，就不能遗传。（一般来说，植物和动物的重组载体是不通用的，所以你那句话在一定程度上，是对的。）

首先要明白什么是抗除草剂基因，抗除草剂基因导入的意义。除草剂的种类非常多，因此抗除草剂基因也不是一种，bar基因是迄今为止用得最多的一个抗除草剂基因，已成功地用于小麦、水稻、玉米、大麦、油菜等作物的转基因上。导入抗除草剂基因的意义在于，喷施除草剂之后，既能高效的消除田间杂草，又能确保农作物安然无恙。尽管由于作物与杂草的一些生理生态的差异以及某些栽培方式的辅助，除草剂致毒时对作物和杂草有所选择，但作物的生长发育仍然或多或少地要受到一些影响。因此，如果作物本身具备了抗除草剂的特性，就如水稻对敌稗、玉米和高粱对阿特拉津具有不同的生化选择性而最终表现出抗性一样，除草剂的使用自然会更加方便有效。但遗憾的是自然界中能够抗除草剂的作物类型很少，能同时抗多种除草剂的作物就更是少见，对某种高效除草剂的抗性也往往仅限于少数几种作物。因此，就要运用基因工程技术解决上述问题，创造出更多抗除草剂的作物新品种，从而在使用除草剂的时候确保农作物安全。理解了抗除草剂基因的作用之后，就会明白抗除草剂基因的导入目的并不是为了减少农药使用，也不会减少农药使用，而是为了保证作物在使用除草剂的时候仍然安全。

基因重组技术目前主要的受体为大肠杆菌等微生物，他们的质粒（核外遗传物质）非常容易在细胞分裂遗传中丢失，但是当质粒重组到核区Dna上的时候就可以正常的分裂遗传。你要判断导入的目的基因是否可遗传，比较直观的方法就是培养重组细胞，根据目的基因特性筛选，如果目的基因表达的活性难以删选，也可以根据重组质粒所带的基因用抗生素抗性筛选或者蓝白筛选。

基因导入是基因重组的一种就是把异体基因导入到另一个细胞中没有产生新的基因 还是属于基因重组

而用探针的话 先要将DNA加热至93℃ 然后在于被标记的目的基因于受体内的基因进行降温处理 根据碱基互补配对原则 会有一部分标记基因代替原先未标记的目的基因的位置 这样就证明和原基因中含有目的基因 不过都快100度了 细胞肯定挂了但是确实能检测出是否存在，这样的话受体细胞不在了 这个过程就没有意义了 这句话重点是受体细胞 而不能考虑成该细胞分裂而成的其他细胞所以这就错在没有意义上 而不是不能检测

转基因动物指用人工方法将外源基因导入动物受精卵或早期胚胎细胞，使外源基因与动物本身的基因组整合，并随细胞的分裂而增殖，从而将外源基因稳定的遗传给下一代的工程化动物。最早的典型例子就是1982年由美国华盛顿大学Palmiter等报告的“超级小鼠”。他们将大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵，所生7只子代小鼠中有6只生长加快，体重明显增加，这就是所谓的“超级小鼠”诞生了。

动物卵受精后，在两生殖核发生融合之前，可将卵分为含雌原核的卵块和含雄原核的卵块两部分，通常来自精子的雄性原核较大，能容纳更多的外源DNA，且含雄原核的卵块的发育能力要比含雌原核卵块的发育能力强，因此一般都是向雄性原核注入DNA溶液。

　　检测目的基因是否导入受体细胞,用到的是DNA的分子杂交技术.标记基因是用于筛选的.比如是导入的重组质粒中有青霉素抗性基因,那个没有导入重组质粒的细菌不能再含有青霉素的培养基上存活,这样剩下的都是导入重组质粒的细菌.

你的意思是外源基因在被导入个体的后代的表达对吧？现在一般是将外源基因导入动物胚胎中。导入体细胞（你的意思是不可能分化为生殖细胞的体细胞吧？）的话，不能在后代中表达。即使是被导入个体的表达也很复杂，要考虑DNA的构型、进入宿主细胞的方式、DNA的浓度等的影响。植物细胞理论上是可以的，但是具体操作不知道。一个建议：这种专业性的东西还是自己找几篇论文综述来看看比较好，在百度问不具有权威性，对你不是很好。

转基因植物是基因组中含有外源基因的植物。通过原生质体融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程技术获得，改变植物的某些遗传特性。人工转基因动物就是基因组中含有外源基因的动物。它是按照预先的设计，融合重组细胞、遗传物质转移、染色体工程和基因工程技术将外源基因导入精子、卵细胞或受精卵，再以生殖工程技术，有可能育成转基因动物。遗传转化的方法按其是否需要通过组织培养、再生植株通常可分成两大类，第一类需要通过组织培养再生植株，常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法；另一类方法不需要通过组织培养，比较成熟的主要有花粉管通道法，花粉管通道法是中国科学家提出的。农杆菌介导转化农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，自从技术瓶颈被打破之后，农杆菌介导转化在单子叶植物中也得到了广泛应用，其中水稻已经被当作模式植物进行研究。花粉管通道法在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由中国学者周光宇提出，中国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，不需要装备精良的实验室，常规育种工作者易于掌握。核显微注射法核显微注射法是动物转基因技术中最常用的方法。它是在显微镜下将外源基因注射到受精卵细胞的原核内，注射的外源基因与胚胎基因组融合，然后进行体外培养，最后移植到受体母畜子宫内发育，这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段。-这种方法的缺点是效率低、位置效应(外源基因插入位点随机性)造成的表达结果的不确定性、动物利用率低等，在反刍动物还存在着繁殖周期长，有较强的时间限制、需要大量的供体和受体动物等特点。详细步骤：在显微镜下，用一根极细的玻璃针（直径1-2微米）直接将DNA注射到胚胎的细胞核内，再把注射过DNA的胚胎移植到动物体内，使之发育成正常的幼仔。用这种方法生产的动物约有十分之一是整合外源基因的转基因动物。基因枪法利用火药爆炸或高压气体加速（这一加速设备被称为基因枪），将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是转基因研究中应用较为广泛的一种方法。精子介导法精子介导的基因转移是把精子作适当处理后，使其具有携带外源基因的能力。然后，用携带有外源基因的精子给发情母畜授精。在母畜所生的后代中，就有一定比例的动物是整合外源基因的转基因动物。同显微注射方法相比，精子介导的基因转移有两个优点：首先是它的成本很低，只有显微注射法成本的1/10。其次，由于它不涉及对动物进行处理，因此，可以用生产牛群或羊群进行实验，以保证每次实验都能够获得成功。核移植转基因法体细胞核移植是一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养，使外源基因整合到供体细胞上，然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞，构成重建胚，再把其移植到假孕母体，待其妊娠、分娩，便可得到转基因的克隆动物。体细胞核移植法先在体外培养的体细胞中进行基因导入，筛选获得带转基因的细胞。然后，将带转基因体细胞核移植到去掉细胞核的卵细胞中，生产重构胚胎。重构胚胎经移植到母体中，产生的仔畜百分之百是转基因动物。

　　基因工程是生物选修三课本的内容，也是高中生要掌握的重要知识点。下面我为大家整理高中生物选修三基因工程知识点，希望对大家有所帮助! 　　高中生物选修三基因工程知识点 　　一、基因工程的概念 　　基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 　　二、基因工程的原理及技术原理：基因重组技术 　　基因工程的基本工具 　　1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) 　　(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 　　(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 　　(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端. 　　2.“分子缝合针”——DNA连接酶 　　(1)两种DNA连接酶(Eu2022coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较： 　　①.相同点：都缝合磷酸二酯键。 　　②.区别：Eu2022coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 　　(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 　　3.“分子运输车”——载体 　　(1)载体具备的条件： 　　①能在受体细胞中复制并稳定保存。 　　②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 　　③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 　　(2)最常用的载体是质粒： 　　它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 　　(3) 其它 载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 　　基因工程的基本操作程序 　　第一步：目的基因的获取 　　1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 　　2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用 方法 有反转录法和化学合成法。 　　3.PCR技术扩增目的基因 　　(1)原理：DNA双链复制 　　(2)过程：①加热至90～95℃DNA解链; 　　②冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链; 　　③加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成 　　第二步：基因表达载体的构建 　　1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 　　2.组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因 　　(1)启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 　　(2)终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。 　　(3)标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 　　第三步：将目的基因导入受体细胞 　　1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 　　2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。 　　3.将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞： 　　4.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是 　　标记基因是否表达. 　　第四步：目的基因的检测和表达 　　1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术. 　　2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用 用标记的目的基因作探针与mRNA 　　杂交。 　　3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 　　蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。 　　4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 　　基因工程的应用: 　　1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 　　2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。 　　3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。 　　蛋白质工程的概念： 　　蛋白质工程： 　　是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质) 　　(1)蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质 　　(2)蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。 　　(3)基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特有的途径;以下按照基因工程的一般步骤进行。(注意：目的基因只能用人工合成的方法) 　　(4)设计中的困难：如何推测非编码区以及内含子的脱氧核苷酸序列 　　高中生物选修三知识要点 　　1.基因工程的诞生 　　(1)基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 　　(2)基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA 合成和测序仪技术的发明等。 　　2.基因工程的原理及技术 　　基因工程操作中用到了限制酶、DNA 连接酶、运载体 　　3. 基因工程的应用 　　(1)在农业生产上：主要用于提高农作物的抗逆能力(如：抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)，以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 　　(2)基因治疗不是对患病基因的修复，基因检测所用的 DNA 分子只有处理为单链才能与被检测的样品，按碱基 配对 原则进行杂交。 　　4. 蛋白质工程 　　蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，对先有蛋白质进行改造或制造新的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质 　　高中生物选修三知识点 　　1. 植物的组织培养 　　(1)细胞工程：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或者细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术。在细胞器水平上改变细胞的遗传物质，属于细胞工程。 　　(2)细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 　　考点细化： 　　① 都具有该生物全部遗传信息，因此从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 　　② 细胞在生物体内没有表现出全能性的原因是基因选择性表达。 　　③ 植物细胞的全能性得以实现的条件是离体，合适的营养和激素，无菌操作。 　　④ 在生物的所有的细胞中，受精卵细胞的全能性最高。 　　(3)植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 　　考点细化： 　　① 已分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化。 　　② 再分化是愈伤组织继续进行培养，重新分化出根或芽等器官。 　　③ 愈伤组织细胞排列疏松而无规则，高度液泡化的呈不定型状态的薄壁细胞。 　　④ 植物组织培养时培养基的成分有矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物，与动物细胞培养相比需要蔗糖、植物激素，不需要动物血清。 　　⑤ 在植物组织培养脱分化过程中，需要植物激素 　　⑥ 植物组织培养全过程中都需要无菌，愈伤组织之前不需要光照 　　(4)植物组织培养技术的用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 　　考点细化： 　　① 用植物体的茎尖、根尖来获得无病毒植物 　　②人工种子中人工胚乳相当于大豆种子的子叶，人工种子与正常种子相比发芽率高。 　　③ 转基因植物的培育需要植物组织培养 　　(5)将不同 种植 物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体叫做植物体细胞杂交。 　　考点细化： 　　① 用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体 　　② 物理方法：电刺激、振荡、离心;化学方法：聚乙二醇 　　③ 植物体细胞杂交完成的标志是新细胞壁的形成 　　④ 融合后的杂种细胞通过植物组织培养才能发育成完整的植物体 　　(6)植物体细胞杂交这一育种方法的最大优点是克服远缘杂交不亲和障碍 　　2.动物的细胞培养与体细胞克隆 　　(7)动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、胚胎移植等 　　(8)动物细胞培养经过原代培养和传代培养 　　考点细化： 　　① 动物细胞培养液的成分有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等 　　② 动物细胞培养基液体，植物细胞培养基固体，培养的动物细胞通常取自胚胎、幼龄动物的组织器官 　　② 动物细胞培养时的气体环境是95%的空气+5%二氧化碳的混合气体，CO2 起到调节 PH值作用 　　③ 使用胰蛋白酶处理使动物组织分散成单个细胞 　　④ 动物组织处理使细胞分散后的初次培养称为原代培养 　　⑤ 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。 　　3.细胞融合与单克隆抗体 　　(9)动物细胞融合与植物原生质体融合的区别：操作步骤不同：植物原生质体融合需要先去除细胞壁，动物细胞无细胞壁;诱导方法不同：动物细胞融合可以用物理、化学和生物三种方法，植物原生质体融合只能用物理、化学方法;最终目的不同：植物原生质体融合最终是为了获得杂种植株，动物细胞融合最主要目的是获得单克隆抗体。 　　(10)单克隆抗体与血清抗体相比特异性强、灵敏度高并可大量制备 　　(11)熟悉单克隆抗体制备过程。 　　考点细化 　　① 生产杂交瘤细胞要用B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合 　　② 注射相应抗原后，从小鼠脾脏中提取出B 淋巴细胞 　　③ 杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生专一抗体。 　　④ 制备单克隆抗体过程中需要两次筛选

意大利科学家斯巴达佛拉把洗涤过的老鼠精液注入含有异体DNA的液体中，大量的异体DNA在15～30分钟内被吸附在老鼠精子的颈部，随后与精子中的DNA紧密地结合在一起。他把这些精子跟试管中的雌鼠卵结合后得到的受精卵植入雌鼠子宫，结果，生下的新一代鼠具有异体的遗传特性。这项动物试验结果，不仅使科学界震惊，而且给动物新品种培育带来无限希望。美国《纽约时报》把这个发现称做生物学上的重要里程碑。其实，这一结果也仅仅是中国学者周光宇教授的“分子片段杂交”理论在动物上的具体体现而已，真正的里程碑奠基人应是周光宇。

游离的DNA进入细胞体，一般会直接被分解，就算可以进行转录——翻译成蛋白，游离DNA也无法跟着细胞分裂进行复制，导致子代细胞中不再含有目的基因，也就是说，你费力将基因导入受体细胞，结果只有一个细胞被改变了，整个群体细胞菌落不会有可观察的任何变化。而将基因接入载体，由于载体可以在细胞内复制，随着细胞分裂，载体会带着目的基因存在于每个子代细胞中，最终整个菌落发生可以观察到的变化，基因工程才有意义。基因工程是一个宏观提取——微观改造——宏观检验的过程，这个过程，就是依靠各种载体实现的

基因导入技术就是将外源基因注入性细胞或胚胎，以改进家畜基因组型，培育具有新的性状的仔畜。1982年，美国4个实验室把大鼠的生长激素基因，注射到小鼠的受精卵内，培育出转基因，结果小鼠生长加快，体重相当于原种小鼠的两倍，被叫做“超级小鼠”。它所具有的新性状，还可以遗传给后代。1983年，英国剑桥大学的科研人员首先将山羊和绵羊杂交成功，这种山绵羊，头上长有山羊角，身体长得又如绵羊，但这种山绵羊和骡子一样，不能繁衍后代。各国的科学家们寄希望用这项技术培育出“超级家畜”或某些“微型动物”，以适应人们各种不同的需要。

1.先加到运载体上：质粒、动植物病毒等 再导入受体细胞：显微注射、病毒侵染等方法 2.目的基因导入受体细胞，需要运输工具即运载体，如大肠杆菌的质粒。用一种限制性内切酶切断目的基因和质粒使它们产生相同的粘性末端，在切口加入dna连结酶后，质粒的粘性末端就会与目的基因的粘性末端碱基互补配对结合，行成重组dna分子，把它导入受体细胞如细菌、酵母菌，目的基因就能随受体细胞的繁殖而复制

基因导入 把已知基因转移到真核细胞,并且整合到基因组中得到稳定表达的技术,称为基因导入。它是改变物种遗传性状的最根本途径。要把基因导入细胞,首先要把细胞克隆化。目前已经得到了若干真核细胞克隆化基因,如β-珠蛋白基因,TK基因等。利用显微镜操作把这些基因注入到小鼠受精卵的原核中,再把受精卵植入到生殖管道中,发育成的个体不仅能表达注入基因决定的性状,而且能把该基因传到第二代。这方面最成功的例子是“超级小鼠的诞生。这些小鼠生长快,74 d时的体重就接近同窝正常小鼠的两倍。这一成果的意义不仅为遗传工程和遗传疾病(如巨人症)的研究提供了模型,而且也为加速经济动物的生长提供了新的技术途径。

级别：二年级将目的基因导入受体细胞（转化）是基因工程的第三步。根据受体细胞种类不同，可分三种情况：1.受体细胞是植物细胞，有三种方法：农杆菌转化法，基因枪法（或微弹轰击法），花粉管通道法；2.受体细胞是动物细胞，方法是：显微注射技术；3.受体细胞是微生物细胞，方法是：Ca2+处理法。

将目的基因导入生物细胞这个技术我们可以称为转基因技术，其主要目的是改变生物的原有性状，获得更有价值的基因产物。 转基因这个名词相信大家都很熟悉，通俗的讲，就是将大家期待的基因，通过生物技术人工分离后，导入并整合到选中的生物体基因组中。这样做可以赋予生物新的优良性状，例如抗虫棉，就是将细菌(Bt)中的杀虫蛋白基因转移到了棉花中，从而减少棉铃虫危害，实现稳产增产。现在，转基因技术因其独特的优势被广泛应用于农业，医疗领域中。 转基因技术在农业领域的应用 转基因技术应用于农业生产上，使作物育种从传统的杂交育种走向了基因育种，打破了物种界限，使基因转移更为精准，高效和可控。例如：将抗病，抗虫，抗逆性基因转入作物中，使作物具有抵抗病虫害或抗寒旱碱等不利环境的影响，大大减少了农药的使用量，在环境保护方面具有一定的贡献，还达到了增产的主要目的。同时，通过转基因改变植物中的氨基酸，蛋白质含量等品质特征，可以达到提高口感和营养的目的，满足人们对食品品质越来越高的要求。 转基因技术在医疗领域的应用 动物转基因技术可以创造用于诊疗人类疾病的动物模型，生产蛋白质多肽类药物如:世界首例商业化应用的转基因产品人的胰岛素，重组疫苗、抗生素、干扰素等。还可以利用动植物生产疫苗，相对于减毒疫苗而言，转基因疫苗安全性更有保障。利用转基因技术制造的药物，因其靶向性很强，已广泛应用于治疗肿瘤，心脑血管病，免疫系统疾病等。 总结:转基因技术实现了目的基因的跨种转移，取得了巨大商业价值的同时也面临着很多挑战，如食品安全性的保障，对生态环境，生物多样性方面的影响。我们不能说转基因全是优点，也不能一棒子打死。技术本身是中性的，看人类如何利用吧。 改造细胞功能，使其可以表达转进的基因，或者抑制一些基因的表达

基因导入技术就是将外源基因注入性细胞或胚胎，以改进家畜基因组型，培育具有新的性状的仔畜。1982年，美国4个实验室把大鼠的生长激素基因，注射到小鼠的受精卵内，培育出转基因，结果小鼠生长加快，体重相当于原种小鼠的两倍，被叫做“超级小鼠”。它所具有的新性状，还可以遗传给后代。1983年，英国剑桥大学的科研人员首先将山羊和绵羊杂交成功，这种山绵羊，头上长有山羊角，身体长得又如绵羊，但这种山绵羊和骡子一样，不能繁衍后代。各国的科学家们寄希望用这项技术培育出“超级家畜”或某些“微型动物”，以适应人们各种不同的需要。

基因导入技术就是将外源基因注入性细胞或胚胎，以改进家畜基因组型，培育具有新的性状的仔畜。1982年，美国4个实验室把大鼠的生长激素基因，注射到小鼠的受精卵内，培育出转基因，结果小鼠生长加快，体重相当于原种小鼠的两倍，被叫做“超级小鼠”。它所具有的新性状，还可以遗传给后代。1983年，英国剑桥大学的科研人员首先将山羊和绵羊杂交成功，这种山绵羊，头上长有山羊角，身体长得又如绵羊，但这种山绵羊和骡子一样，不能繁衍后代。各国的科学家们寄希望用这项技术培育出“超级家畜”或某些“微型动物”，以适应人们各种不同的需要。

基因导入技术就是将外源基因注入性细胞或胚胎，以改进家畜基因组型，培育具有新的性状的仔畜。1982年，美国4个实验室把大鼠的生长激素基因，注射到小鼠的受精卵内，培育出转基因，结果小鼠生长加快，体重相当于原种小鼠的两倍，被叫做“超级小鼠”。它所具有的新性状，还可以遗传给后代。1983年，英国剑桥大学的科研人员首先将山羊和绵羊杂交成功，这种山绵羊，头上长有山羊角，身体长得又如绵羊，但这种山绵羊和骡子一样，不能繁衍后代。各国的科学家们寄希望用这项技术培育出“超级家畜”或某些“微型动物”，以适应人们各种不同的需要。

基因导入技术就是将外源基因注入性细胞或胚胎，以改进家畜基因组型，培育具有新的性状的仔畜。1982年，美国4个实验室把大鼠的生长激素基因，注射到小鼠的受精卵内，培育出转基因，结果小鼠生长加快，体重相当于原种小鼠的两倍，被叫做“超级小鼠”。它所具有的新性状，还可以遗传给后代。1983年，英国剑桥大学的科研人员首先将山羊和绵羊杂交成功，这种山绵羊，头上长有山羊角，身体长得又如绵羊，但这种山绵羊和骡子一样，不能繁衍后代。各国的科学家们寄希望用这项技术培育出“超级家畜”或某些“微型动物”，以适应人们各种不同的需要。

常用方法：基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。其中，对于细菌或植物细胞，常用质粒作为载体将目的基因导入细胞内；动物细胞则用显微注射的方法将目的基因导入动物受精卵的雄性原核中。过程：用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如，如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。

目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法。导入的介质可以是质粒，也可以是动物病毒侵染。显微注射法是利用管尖极细（0．1至0．5μm）的玻璃微量注射针，将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中，然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组、缺失、复制或易位等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。扩展资料显微注射法转基因的方式直接把重组过的DNA注入受精卵的原核中，也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上，然后利用固定吸量管固定住，之后注射针则依序穿过zonapellucida，ocytemembrane及malepronuleusmembrane后，将DNA注入，注入时可以见到原核膨大。以小鼠受精卵雄原核的显微注射为例，显微注射所使用的受精卵固定吸管（holdingpipette）及注射针制备很困难，除影响操作时间外，也是影响转基因效率及基因注入后之胚胎存活及转基因成功与否极其重要的因子。参考资料来源：百度百科-显微注射法

先将载体和外源性目的基因合在一起，再导入生物体内。

能够直接导入，但是直接导入之后就不会起到应有的作用。原因是：游离的DNA进入细胞体，一般会直接被分解，就算可以进行转录——翻译成蛋白，游离DNA也无法跟着细胞分裂进行复制，导致子代细胞中不再含有目的基因，也就是说，你费力将基因导入受体细胞，结果只有一个细胞被改变了，整个群体细胞菌落不会有可观察的任何变化。而将基因接入载体，由于载体可以在细胞内复制，随着细胞分裂，载体会带着目的基因存在于每个子代细胞中，最终整个菌落发生可以观察到的变化，基因工程才有意义。基因工程是一个宏观提取——微观改造——宏观检验的过程，这个过程，就是依靠各种载体实现的

1 物理方法DNA直接注射法、颗粒轰击技术。2 化学方法脂质体载体、受体介导法。3 生物学方法主要通过构建病毒载体来完成。如逆转录病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、腺相关病毒、痘苗病毒、杆状病毒。

可通过转染的方法将目的基因导入受体细胞；包括化学转染法：1.deae-葡聚糖法，2.磷酸钙法，3.人工脂质体和物理方法：①显微注射②电穿孔③基因枪等；此外还可通过辅助载体（如病毒）将目的基因导入到宿主细胞。

1，植物细胞；常用农杆菌转化法（其中能将目的基因整合到Ti质粒上的T-DNA上）常用于双子叶和裸子植物。基因枪法；单子叶植物。花粉管通道法；剪掉柱头2，动物细胞；显微注射技术（注射到受精卵中）3，微生物；感受态细胞法或钙离子处理法（用含有钙离子溶液处理使其成为感受态细胞）

1.先用限制酶提取目的基因2.再用该限制酶切割运载体（一般是质粒，也有动植物病毒）3.用DNA连接酶连接目的基因和运载体（E.CLIDNA连接酶可以连接粘性末端，T4DNA连接酶可以连接粘性末端和平末端但连接平末端时效率很第）4.将运载体导入受体细胞5.目的基因检测与鉴定大体这样但是运载体有几点要注意~！~是运载体要1.能自我复制，防止重组DNA缺失2.有一个至多个切割位点，供目的基因插入。3.分子上有一个至多个遗传标记基因（供检验重组dna是否成功整合到受体细胞的DNA上）。4.必须保证该质粒对细胞无害OK我就记得这么多了呵呵我高二学了~！~！~！~(*^__^*)嘻嘻……

导入植物细胞：农杆菌转化法（转基因抗虫棉用的是花粉管通道法）；导入动物细胞：显微注射技术（注射入受精卵中）；导入原核生物：一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。

一般是导入细胞核，因为细胞质中没有与基因复制有关的酶，不能稳定保持；没有与转录有关的酶，也不能转录。若导入细胞质，只有在进入了质体或线粒体中才可能表达。

1、介导转化法 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。 农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。 2．基因枪介导转化法 利用火药*或高压气体加速（这一加速设备被称为基因枪），将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比，基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建也相对简单，因此也是目前转基因研究中应用较为广泛的一种方法。 3．花粉管通道法 在授粉后向子房注射合目的基因的DNA溶液，利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道，将外源DNA导入受精卵细胞，并进一步地被整合到受体细胞的基因组中，随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。该方法于80年代初期由我国学者周光宇提出，我国目前推广面积最大的转基因抗虫棉就是用花粉管通道法培育出来的。该法的最大优点是不依赖组织培养人工再生植株，技术简单，不需要装备精良的实验室，常规育种工作者。至于表达是个十分复杂的过程我想你是不会想了解的。。。

不是的.目的基因导入只是进入细胞内,而转化是指：目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定并表达的过程.

基因工程：DNA重组—遗传信息的组合，产生新的人们所希望的性状或遗传特性细胞工程：细胞培养—在体外模拟内环境培养立体组织或细胞，以获得人们所预期的代谢产物胚胎工程：胚胎移植—将胚胎移植到新的培养环境中，研究其组织发育这几种

胚胎移植应该属于细胞工程，也属于胚胎工程三者不是并列的。但涉及内容有交叉细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。

1、胚胎移植（1）概念：是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。（2）基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入－196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。（3）胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。（4）胚胎移植的生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。2、胚胎分割（1）概念：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。（2）材料：发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚。（桑椹胚至囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割）（3）理论基础：细胞的全能性。（4）所用仪器设备：实体显微镜和显微操作仪。（5）操作过程：选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，移人盛有操作液的培养皿中，然后用分割针或分割刀进行分割。（6） 意义：加快繁殖速度。3、胚胎干细胞（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。（3）胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；④利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；⑤随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

基因工程：核心是表达载体的构建,着重于基因的重组,表达的蛋白自然界本来就存在.细胞工程：着重于细胞的体外培养,比如植物的组织培养.蛋白质工程：重新设计蛋白质的结构与功能,生成的蛋白质是自然界没有的.胚胎工程：胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,对象是胚胎.

基因工程：又称转基因技术,基因重组细胞工程：植物：植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术.动物：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体.有单倍体育种和多倍体育种胚胎工程：体外受精、早期胚胎培养、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干细胞培养等.

没有几种方法，这些技术在获得转基因高产奶牛时几乎都要用到。下面说操作步骤，第一步（主要是转基因技术）：从供体细胞中取得目的基因（也就是可以使奶牛高产的相关基因）。第二步：结合运载体。第三步：导入受体细胞（主要是受精卵）。第四步：检测和筛选（把成功进行转基因的细胞筛选出来备用）。第五步：利用胚胎工程技术对受精卵及早期胚胎进行体外培养。第六步：胚胎移植（为了一次获得多个个体可以利用胚胎分割技术。为了便于运输，可以利用胚胎冷冻技术）。至于细胞工程在动物中的应用，主要是制备单克隆抗体。

受体基因就是编码受体蛋白质的基因。受体是指能与细胞外专一信号分子（配体）结合引起细胞反应的蛋白质。分为细胞表面受体和细胞内受体。受体与配体结合即发生分子构象变化，从而引起细胞反应，如介导细胞间信号转导、细胞间黏合、细胞胞吞等细胞过程。受体是细胞表面或亚细胞组分中的一种分子，可以识别并特异地与有生物活性的化学信号物质（配体）结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。通常受体具有两个功能：1．识别特异的信号物质--配体，识别的表现在于两者结合。配体，是指这样一些信号物质，除了与受体结合外本身并无其他功能，它不能参加代谢产生有用产物，也不直接诱导任何细胞活性，更无酶的特点，它唯一的功能就是通知细胞在环境中存在一种特殊信号或刺激因素。配体与受体的结合是一种分子识别过程，它靠氢键、离子键与范德华力的作用，随着两种分子空间结构互补程度增加，相互作用基团之间距离就会缩短，作用力就会大大增加，因此分子空间结构的互补性是特异结合的主要因素。同一配体可能有两种或两种以上的不同受体，例如乙酰胆碱有烟碱型和毒蕈型两种受体，同一配体与不同类型受体结合会产生不同的细胞反应。如Ach可以使骨骼肌兴奋，但对心肌则是抑制的。2．把识别和接受的信号准确无误的放大并传递到细胞内部，启动一系列胞内生化反应，最后导致特定的细胞反应。使得胞间信号转换为胞内信号。

myoD是科学家最早发现的一个控制肌细胞发育的主导基因（master control gene）.该基因的表达产物myoD是一个控制基因表达的转录因子,在胚性前体细胞中,该蛋白一旦被合成,虽然细胞的外观并没有发生任何改变,此时细胞决定就已经发生了,即胚性前体细胞变成了成肌细胞（myoblast）.在分子生物学水平上分析,myoD蛋白不仅可以控制其他肌肉发生相关基因的转录,还能反馈促进其本身的表达（这种调节又称为正反馈）.myoD蛋白具有螺旋-转角-螺旋结构域基序,它结合到受控基因的调控区后,首先启动了其他生肌肉转录因子基因的转录,这些次生的转录因子接着再调控和启动肌球蛋白和肌动蛋白等的合成.成肌细胞中的这些肌肉蛋白合成后,成肌细胞便聚合成成熟的多核肌细胞,又称为肌纤维.果蝇发育过程中母源极性基因biocoid和级联的体节基因特异表达对果蝇体轴建立和身体分节的影响.果蝇的胚胎发育过程包括：卵细胞受精后经过多核阶段和卵裂形成胚囊,经过建立体轴和身体分节产生体节分明的胚胎,再经过幼虫和蛹的阶段,发育成果蝇.在果蝇母体的卵细胞中,与卵细胞相邻的营养细胞内biciod基因（又称为卵极基因egg-polarity genesis）先转录产生bicoid蛋白,bicoid mRNA作为决定子进入卵细胞并分布于卵的前区,卵受精后,刺激其翻译产生Bicoid蛋白,该蛋白作为一种成形素,在受精卵前区建立了浓度梯度,即前体Bicoid蛋白浓度最高,沿卵的纵轴向中区浓度逐渐降低.实验表明正是由于bicoid mRNA及其蛋白产物在受精卵前区的定位和另一些其他成形激素（如oskar蛋白、hunchback蛋白等）在后区聚集等,这些基因产物扩散产生的浓度梯度控制着沿受精卵纵轴不同部位各卵裂球内核基因的选择性差异表达,从而建立起果蝇胚胎的前后轴,即确定了果蝇胚胎的头部和尾部.bicoid基因突变引起Bicoid蛋白缺陷显示,发育成的幼虫无头和胸,顶节（原头区）被一个反向的尾节所代替.如果将纯化的正常bicoid mRNA注射到处于卵裂的胚胎的尾部,结果可以获得两端各有一个顶节（头部）的双向胚胎.

靠锻炼是不可能改变基因表达的，锻炼只是因为我们施加给身体一种“压力”，使得身体不得不将吸收更多的蛋白质来增强该部分肌肉，使之能够抵抗这种外在的“压力”而你所说的，把手上的肌肉细胞变成心肌细胞...那是单靠锻炼绝对办不到了，打个比方，你能锻炼使自己多长出个心脏来么？显然不能，因为人的基因生来就决定了（后天基因变异，基因技术除外），不同的部位也是预先就确定了改如何生长，该生长怎样的细胞，无论怎样锻炼，只会增强，不可能改变的！

　　是涉及与心肌肥大相关的MR－1基因功能，动物体内实验证明了该基因的高表达，其加剧了AngⅡ对心肌肥大、炎症及纤维化的作用，证明MR－1的作用机制是通过对核因子NF－κB信号通路的调控，干扰MR－1的表达可以降低和削弱AngⅡ对NF－κB信号通路的诱导，说明降低或阻断MR－1基因的表达，有望成为治疗心肌肥大相关疾病的新靶点。　　心肌细胞肥大(cardiomyocyte hypertrophy)是高血压、心脏瓣膜病、急性心肌梗塞及先天性心脏病等临床常见疾病的一种并发症，是心肌细胞对多种病理刺激的一种适应性反应。目前虽然认为心肌肥大的发病机制与细胞外的心肌肥大因子刺激、细胞内的信号转导和核内的某些基因活化有关，但其最本质的特征是心肌细胞基因表达的异常。大量研究表明，肥大因子刺激30min即可诱发一系列即刻早期反应基因，如c-fos、c-myc、c-jun、egr-1等进行表达，其后一些心肌肥大标志基因，如MHC、ANF、BNP等被活化，最后是一些心肌收缩蛋白基因，如MLC-2、α-actin等表达上调。近年证实，无论何种刺激信号，往往都是通过激活一系列与心肌肥大发生相关的转录因子，包括Spl、Elk-1、SRF、MEF-2、GATA-4和LIM等而诱发心肌肥大的发生。LIM蛋白是一类富含半胱氨酸且分子结构中具有一个或多个锌指结构的蛋白质家族，该家族成员广泛参与多种细胞的发育与分化调节及多种基因的转录调控。hhlim是新近从胎儿心脏中分离和克隆的与心脏发生相关的基因，因其编码产物与LIM蛋白家族高度同源且氨基酸序列中含有典型的LIM结构域而得名。目前发现，hhlim在自发性高血压大鼠和心肌肥厚大鼠的心肌细胞中表达活性增强，但对其是否直接参与心肌细胞肥大的发生过程及作用机制还不清楚。本文在对hhlim基因表达调控机制进行研究的基础上，从整体、细胞和分子水平上探讨该基因在心肌肥大发生发展中的意义及其作用机制。　　1 hhlim表达调控机制的研究　　hhlim是用三元递减法从人胎心cDNA文库中筛选克隆到一个与心脏生长发育有关的新基因。为了探讨hhlim基因的表达调控机制，将该基因5"侧翼区(长约2550bp)不同长度的片段与荧光素酶报告基因重组后，转染小鼠成肌细胞C2C12，确定其表达调控区域，并在此基础上，观察内皮素-1(ET-1)和碱性成纤维细胞生成长因子(bFGF)对该基因表达的影响。实验结果如下：　　1.1 在被马血清诱导(分化型)或不诱导(未分化型)的C2C12细胞中，从hhlim基因5"上游-2537bp序列依次进行缺失的9种不同长度的DNA片段均可驱动荧光素酶表达，其中，以转录起始点至5"上游-253bp(pF8)驱动荧光素酶基因表达的活性最高，比-2537bp(pF1)高9.9倍，比-157bp(pF9)高2.95倍。除-2037bp(pF2)片段的活性与-157bp(pF9)相近外，其它片段均有较高的活性。两种表型的C2C12细胞相比，除pF2和pF8之外，其它片段驱动荧光素酶表达的活性在分化型细胞均高于未分化型细胞。　　1.2 EMSA表明，从分化型和未分化型C2C12细胞中提取的核蛋白都可与hhlim基因上游-293～+16bp片段相结合，在4％PAGE上前者出现两条滞后带，后者出现一条滞后带，由此说明，两种表型细胞的核蛋白中均含有与-293～+16bp片段特异性结合的蛋白因子，但蛋白因子的种类和/或与顺式元件的相互作用方式可能不同。　　1.3 用在分化型C2C12细胞中表达活性较高的pF5转染C2C12细胞，在用马血清诱导被转染细胞进行分化的同时，加入心肌细胞肥大刺激因子ET-1和bFGF，观察两种因素对报告基因表达的影响。结果显示，ET-1和bFGF作用于C2C12细胞24h后，荧光素酶活性在被ET-1刺激的细胞中显著升高(达未刺激细胞的1.6倍)，至48h，其活性仍高于对照细胞；bFGF虽然也能促进荧光素酶表达，但荧光素酶活性升高的幅度在24h低于被ET-1刺激的细胞，在48h，略高于被ET-1刺激的活性。　　1.4 RT-PCR结果显示，处于分化过程中的C2C12细胞被ET-1和bFGF刺激后，hhlim表达活性分别于12h和6h开始升高，24h和48h达到高峰，在该时间点，其表达活性分别比对照细胞高出4.5倍和3.38倍。　　上述结果提示，转录起始点至5"上游-253bp在该基因表达调控中起重要作用，其顺式作用元件与转录因子相互作用具有多样性和复杂性，该基因表达受ET-1和bFGF的调节。　　2 hhlim基因表达产物的亚细胞定位及其在细胞肥大中的意义　　hhlim作为与心脏生长发育有关的基因被克隆，并发现其在自发性高血压大鼠和心肌肥厚大鼠的心肌细胞中表达活性增强。然而，关于hhlim是否能直接引起心肌细胞肥大及其引起心肌细胞肥大的作用机制还不明了。本部分实验以与心肌细胞结构相似且易于转染外源基因的小鼠成肌细胞C2C12为强制性表达外源性hhlim基因的细胞，观察hhlim基因表达产物的亚细胞定位及其在细胞肥大中的作用。结果如下：　　2.1 用脂质体转染方法将真核表达载体携带的外源性hhlim基因导入处于分化过程中的C2C12细胞，证实该基因强制性表达可使C2C12细胞体积明显增大。　　2.2 Western blot分析结果显示，在未分化型C2C12细胞中检测不到α-actin的存在，未分化型C2C12细胞被外源性hhlim转染后，α-actin出现低量表达，说明hhlim强制性表达可诱导未分化型C2C12细胞表达α-actin；在被马血清诱导分化的C2C12细胞中，hhlim强制性表达使α-actin含量急剧增加，比未分化型细胞增加8.07倍，比未转染hhlim的细胞升高1.71倍。　　2.3 RT-PCR结果显示，在未分化型C2C12细胞中BNP表达活性较高，在被马血清诱导分化成熟的C2C12细胞中BNP不表达，C2C12细胞被外源性hhlim转染后再经马血清诱导时，该基因的表达又被显著诱导。　　2.4 用绿色荧光蛋白-hhlim融合蛋白表达载体转染处于分化过程的C2C12细胞，发现转染不同时间，表达产物的亚细胞定位发生动态变化，表现为先在胞核和胞质中均有分布，而后定位于胞质的变化规律。在ET-1诱导下，内源性hhlim的亚细胞定位也发生动态变化，表现为诱导24h时，hhlim蛋白在细胞质和细胞核中均有分布，但主要集中分布在胞核中，诱导48h后，细胞核中的红色荧光明显减弱，胞质荧光强度显著增强。　　2.5 以hhlim抗体和蛋白A-Sepharose对C2C12细胞裂解液进行免疫沉淀后，用抗α-actin抗体进行Western blot分析的结果表明，在分化型细胞，hhlim抗体可以使α-actin共沉淀，即沉淀物中出现明显的α-actin条带；在转染hhlim后的分化型细胞，条带明显加深；转染hhlim的未分化型细胞中α-actin条带很浅，在未分化型C2C12细胞中检测不到α-actin的存在。免疫双荧光分析结果显示，TRITC标记的hhlim蛋白与FITC标记的α-actin荧光相互重合为黄色荧光。提示，hhlim在胞质中以与α-actin相互缔合的方式存在。　　上述结果提示，在C2C12细胞从未分化型向分化型转化的早期，hhlim蛋白主要存在于核内，此时可能发挥启动心肌细胞肥大相关基因表达的作用；在分化型细胞中，hhlim蛋白主要分布于胞质中，胞质中的hhlim可能以与α-actin相互缔合的方式参与细胞骨架的构成。　　3 hhlim对心肌肥大的影响及其作用机制探讨　　第二部分研究表明，hhlim具有启动C2C12细胞肥大相关基因表达及引发细胞肥大的作用。为进一步研究其是否也能引起心肌细胞肥大，本部分用携带hhlim cDNA的真核表达载体转染心肌细胞后，观察其强制性表达对心肌肥大的影响，并通过检测心肌细胞肥大相关基因表达的变化，探讨hhlim致心肌肥大的作用机制。实验结果如下：　　3.1 在原代心肌细胞中，hhlim基因表达活性较低，ET-1作用48h后，其表达被显著诱导，表达活性达对照细胞的2.12倍。BNP mRNA在原代培养的细胞中不能被检出，ET-1作用于细胞48h或转染hhlim基因48h后，BNP表达活性显著升高。　　3.2 RT-PCR结果表明，心肌细胞被可表达hhlim反义RNA的重组质粒转染后，BNP的表达明显下调，其表达活性比相应对照细胞降低了71％。Western blot结果显示，hhlim强制性表达可使心肌细胞α-actin水平比转染空载体的细胞升高146.05％，转染反义hhlim后，α-actin含量比相应对照细胞下降61.97％。　　3.4 hhlim在原代心肌细胞中的强制性表达

原理如下以果蝇为例来说明原理myoD是科学家最早发现的一个控制肌细胞发育的主导基因（mastercontrolgene）。该基因的表达产物myoD是一个控制基因表达的转录因子，在胚性前体细胞中，该蛋白一旦被合成，虽然细胞的外观并没有发生任何改变，此时细胞决定就已经发生了，即胚性前体细胞变成了成肌细胞（myoblast）。在分子生物学水平上分析，myoD蛋白不仅可以控制其他肌肉发生相关基因的转录，还能反馈促进其本身的表达（这种调节又称为正反馈）。myoD蛋白具有螺旋-转角-螺旋结构域基序，它结合到受控基因的调控区后，首先启动了其他生肌肉转录因子基因的转录，这些次生的转录因子接着再调控和启动肌球蛋白和肌动蛋白等的合成。成肌细胞中的这些肌肉蛋白合成后，成肌细胞便聚合成成熟的多核肌细胞，又称为肌纤维。果蝇发育过程中母源极性基因biocoid和级联的体节基因特异表达对果蝇体轴建立和身体分节的影响。果蝇的胚胎发育过程包括：卵细胞受精后经过多核阶段和卵裂形成胚囊，经过建立体轴和身体分节产生体节分明的胚胎，再经过幼虫和蛹的阶段，发育成果蝇。在果蝇母体的卵细胞中，与卵细胞相邻的营养细胞内biciod基因（又称为卵极基因egg-polaritygenesis）先转录产生bicoid蛋白，bicoidmRNA作为决定子进入卵细胞并分布于卵的前区，卵受精后，刺激其翻译产生Bicoid蛋白，该蛋白作为一种成形素，在受精卵前区建立了浓度梯度，即前体Bicoid蛋白浓度最高，沿卵的纵轴向中区浓度逐渐降低。实验表明正是由于bicoidmRNA及其蛋白产物在受精卵前区的定位和另一些其他成形激素（如oskar蛋白、hunchback蛋白等）在后区聚集等，这些基因产物扩散产生的浓度梯度控制着沿受精卵纵轴不同部位各卵裂球内核基因的选择性差异表达，从而建立起果蝇胚胎的前后轴，即确定了果蝇胚胎的头部和尾部。bicoid基因突变引起Bicoid蛋白缺陷显示，发育成的幼虫无头和胸，顶节（原头区）被一个反向的尾节所代替。如果将纯化的正常bicoidmRNA注射到处于卵裂的胚胎的尾部，结果可以获得两端各有一个顶节（头部）的双向胚胎。

生殖细胞的基因是体细胞的染色体。体细胞的染色体是成对存在的，而生殖细胞只有成对基因中，因此生殖细胞的基因是体细胞的染色体。生殖细胞（germcell）是多细胞生物体内能繁殖后代的细胞的总称，包括从原始生殖细胞直到最终已分化的生殖细胞（精子和卵细胞）。

4和5是,生殖细胞经历减数分裂,基因都只有一半（同源染色体分离,着丝点也断裂）,两个生殖细胞再结合成完整的基因.

严格来讲，胚胎干细胞不具有发育全能性，但是个体由胚胎干细胞发育而来。经典的基因打靶技术以胚胎干细胞为受体细胞。发育的顺序是这样的：受精卵经过卵裂发育到囊胚，囊胚由外面的滋养层和内细胞团组成，滋养层发育为胎盘等器官，内细胞团发育成个体。内细胞团即由胚胎干细胞构成。胚胎干细胞可发育为除滋养层细胞外的一切细胞。所以我不知道高中大纲是否定义为全能性，具体可以问问你们老师。