CP的无菌检查法？

不是。微生物限度检查仪和集菌仪主要都是用作微生物、细菌之类的吸附、检查。只不过微生物是做有菌检测，集菌仪是做无菌检测的，二者并不一样。

细菌总数检测目前国标规定的方法为平板计数法，其检验方法是：在玻璃平皿内，接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中，冷却凝固后在37°C培养24小时，培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。有的国家把培养温度定为35°C或其他温度，也有把培养时间定为48小时的。这种方法精度高，但耗时长，难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间，国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究，提出了阻抗检测法、Simplate TM全平器计数法、微菌落技术、纸片法等检测方法，取得了一定的成果，但检测时间仍在4 h以上。本研究在分析了已有研究成果的基础上，提出了在滤膜上染色后，直接计数的细菌总数检测方法，具体步骤为：用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明，该方法与传统的平板培养法无显著性差异，检测时间约1 h，是一种快速的细菌总数检测方法。水中通常存在的细菌大致可分为三类：1、天然水中存在的细菌。普通的是荧光假单孢杆菌、绿脓杆菌，一般认为这类细菌对健康人体是非致病的。2、土壤细菌。当洪水时期或大雨后地表水中较多。它们在水中生存的时间不长，在水处理过程中容易被去除。腐蚀水管的铁细菌和硫细菌也属此类。3、肠道细菌。它们生存在温血动物的肠道中，故粪便中大量存在。水体中发现这类细菌，可以认为已受到粪便的污染。致病性肠道细菌有沙门氏杆菌（伤寒和副伤寒菌）、B型炭疽菌、痢疾志贺氏菌和霍乱弧菌等。

都是薄膜过滤法，集菌仪做无菌结果要求无菌，微生物限度的话是可以有菌的，集菌仪上面放反复使用培养器的话是可以做纯化水微生物限度的。微生物限度检测仪比较贵，集菌仪相对便宜，一万多就可以买到了。集菌仪的作用是检验供试品是否含菌的仪器，配套集菌培养器使用。主要用于注射用无菌制剂的无菌检测，包括抗生素类及含有抑菌成份的药品、大输液、水针剂、灭菌医疗器具、无菌注射用水等。集菌仪是集菌培养器的配套使用仪器，通过集菌仪的定向蠕动加压作用，供试品被过滤并在滤器内进行培养，以检验供试品是否含菌。微生物限度检测仪操作步骤1.泵头灭菌2.放置滤膜3.安装过滤杯4.过滤供试品5.取下过滤杯6.转移滤膜

需要用到的。智能集菌仪是一次性使用全封闭集菌培养器的配套使用设施全封闭智能集菌仪是临床体液细菌检测，药品、生物制品等领域无菌检测和微生物限度检测的专用仪器。长沙巴跃仪器主要生产集菌仪，厂家批发

1)取出培育器先检查包装是否完好无损，在无菌室内翻开塑料包装袋。(2)将培育器逐一插放在不锈钢座上。(3)将集菌培育器的弹性软管装入智能集菌仪泵头，要求定位准确，软管走势顺利。(4)翻开待检样品的瓶盖插针孔并消毒之，(若检测安瓿样品，先将安瓿颈部消毒，然后翻开并将安瓿)样品瓶定位。(5)拔去进样双芯针管之护套，插入样品瓶中，敞开集菌仪，施行过滤集菌(应防止双芯针管进气，滤膜被药液浸湿，影响进气)。(6)完结集菌后，若样品含抑菌物质，按药典 规范要求适当用冲洗液清洗，清洗方法与集菌过程相同。(7)消毒培育基瓶插针孔处。(8)摘下顶部空气滤器开口的胶塞，套在培育器底口上，用软管夹子，顺次开闭软管，敞开集菌仪，将培育基泵入指定的培育器内。(9)用夹片夹闭与培育器衔接部的软管，留下5～6cm软管，剪除其余部分，并将开口端插在空气过滤器开口上。(10)别离按规则进行培育。(11)调查培育状况，若需取样别离培育，可将软管消毒，用无菌注。

　　细菌荧光显微镜计数必须用黑色滤膜。　　实验方法　　1 准备工作 卸下集菌仪的滤，统计滤网上小孔总数，为计算菌液浓度做准备。另外，还需对集菌仪中的集菌器进行高压灭菌，以防止过滤过程中引入外源细菌。　　2 细菌收集 取一定浓度的霉菌菌液300～500 ml，装在集菌仪上，集菌仪采用蠕动加压方式对菌液施加一定的压力，使菌液流过孔径为0.45 um的聚碳酸脂膜。采用过滤方法是因为它可以使细菌相对均匀地分布在滤膜上，而选用聚碳酸脂膜是因为这种膜具有良好的透光性，便于用显微镜观察。　　3 染色 集菌后取下滤膜，切下一部分放在载玻片上，进行染色、固定。染色的目的是增大细菌与背景的对比度，便于观察。　　4 显微镜计数与计算 菌液经集菌仪过滤后，细菌在滤膜上的分布见图2、图3，由图可以看出细菌分布具有以下两个特点：一是细菌集中在一个个的圆形区域内，这些圆形区域和挡板的小孔相对应；二是各个圆形区域之间细菌很少。根据膜上细菌分布的这种特点，提出以圆形区域为单位进行计数，统计出圆形区域内细菌的平均个数，从而计算出菌液中细菌总数。具体步骤如下：随机选择10个圆形区域，在油镜下，调节焦距以获得较清晰的图像，统计每个圆形区域内的细菌个数，然后按公式计算出菌液的浓度。

计量器具范围很广，这个仪器算，但是这个仪器也需要检测

根据2015版中国药典1101：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、生孢梭菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉

全封闭无菌试验过滤培养器怎么用目的 建立健全注射用青霉素钠无菌检查方法，保证检验结果的准确性和可靠性。方法 按中国药典2010年版二部(附录XI H)无菌检查法中的薄膜过滤法进行。1 试验环境与材料1．1 试验环境在环境洁净度万级、局部洁净度百级的单向流空气的菌无室中进行。1．2 仪器智能集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司)、PY330一次性全封闭集菌培养器(杭州泰林生物技术设备有限公司)、生化培养箱(苏州威尔实验用品有限公司)、霉菌培养箱(苏州威尔实验用品有限公司)、生物安全柜(苏州安泰空气技术公司)1．3 试药注射用青霉素钠1．4 试验用菌株金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003l、大肠埃希菌[CMCC(B)44 102]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、生孢梭茵[CMCC(B)64 941]、白色念珠菌[CMCC(F)98 001]、黑曲霉[CMCC(V)98 003]。1．5 培养基、稀释液及缓冲液1．5．1 干粉培养基 硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、营养琼脂培养基、琼脂粉。1．5．2 细菌稀释液0．9％ 灭菌氯化钠溶液。1．5．3 冲洗用缓冲液pH7．0氯化钠-蛋白胨缓冲液。2 方法与结果2．1 菌液制备按中国药典2010年版附录ⅪH无菌检查法菌液制备法制备 。2．2 菌落计数取金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液各1 m1分别接种于营养琼脂培养基中，生孢梭菌接种至含1．5％琼脂的硫乙醇酸盐流体培养基中，30~C～35"E生化培养箱培养24～48 h，取白色念珠菌菌液、黑曲霉菌液各1 m1分别接种至改良马丁琼脂培养基中，经23℃ 一28~C霉菌培养箱培养48～72 h，计数。(上述各菌液分别接种两个平板，取平均值，同时设阴性对照)2．2 方法学验证2．3．1 试验组(样品+阳性) 取一次性全封闭集菌培养器(三联装)一套，先用少量pH7．0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液润湿滤膜，取样品15瓶溶解于250 ml缓冲液中，按薄膜过滤法过滤，样品过滤完毕后，再用pH7．0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每次每管注人冲洗液100 ml，充分振摇，完全排空后循环操作5次，总冲洗量达到500 ml每管。冲洗完毕后在2管中分别注人改良马丁培养基100 ml，另1管中注入硫乙醇酸盐流体培养基100 ml。另取一套集菌培养器(三联装)取本品依上述方法过滤并冲洗后，均注入硫乙醇酸盐流体培养基100 ml，将上述6管集菌培养器移至阳性对照室，于含硫乙醇酸盐流体培养基的集菌培养器中，分别接种金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌茵液、枯草芽孢杆菌菌液、生孢梭菌菌液各1 ml，于含改良马丁培养基的集茵培养器中，分别接种白色念珠菌菌液和黑曲霉菌液各1 ml，按前述规定温度培养3～5 d，观察结果。2．3．2 阳性对照组取一次性全封闭集菌培养器(三联装)二套，4管中分别注入硫乙醇酸盐流体培养基各100 ml、2管中分别注入改良马丁培养基各100 ml，在阳性对照室内将6种菌液分别接种至相应管内，作为阳性对照，按前述规定温度培养3～5 d，观察结果。2．3．3 阴性对照组取一次性全封闭集菌培养器(二联装)一套，滤过适量缓冲液后分别注入硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基各100 ml，作为阴性对照，按前述规定温度培养14 d，观察结果。2．3．4 样品的无菌检查 取样品15支依上述方法同法操作，以500 ml／管的冲洗量冲洗，加入培养基后，按规定温度培养14 d，逐日观察，若培养14 d均澄清；由此判定供试品符合规定。结果判断 与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检查方法和检查条件进行供试品的无菌检查。 如含供试品的任一容器中的试验菌生长微弱、缓慢或不生长，则说明供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用，可采用增加冲洗量、增加培养基的用量、使用中和剂或灭活剂、更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑菌作用，并重新进行方法验证试验。讨论 目前，抗生素类药物的应用非常广泛，针对每种抗生素类药物建立严格的质量标准，提高抗生素的质量就显得尤为关键。所以对一个新品种建立无菌检查法时，对其方法进行验证就显得尤为必要。薄膜过滤法作为无菌检查中的一种方法，具有准确、方便、快捷的优点，是无菌检查时所采用的一种重要方法。试验表明上述方法操作方便快捷、结果准确。所以，该无菌检查方法验证对保证结果的可信度和准确性具有重要意义。

杭州泰林生物技术设备有限公司是集科研、开发、生产、销售、服务于一体的省级高新技术企业。并被授予“守合同重信用单位” 、“浙江省科技创新优秀单位” 、“浙江省工商企业信用AAA级”等称号。公司坐落于杭州钱塘江畔的“天堂硅谷”－－－－杭州国家高新技术产业开发区。公司投资兴建的花园式“泰林科技园”,建筑面积12000余平方米。公司已通过ISO9001质量管理体系认证/ISO14001环境管理体系认证，严格按照体系运行管理，实现产品技术标准与品质国际化。公司主营产品有集菌培养器系列、集菌仪系列、无菌隔离系统、负压隔离器、水中总有机碳（TOC）分析仪、药物溶出仪、汽化过氧化氢（VHP）灭菌器、可见异物检测仪、微孔滤膜孔径测定仪、无菌检查专用振荡仪、微生物限度检验仪等一系列高新技术产品。公司注重科技创新，已获国家专利50余项。产品广泛应用于药品、生物制品的制造与检测、疾病预防与控制、环境保护、食品化妆品检测等多个领域。HTY无菌隔离系统、HTY全封闭无菌检测系统、制药用水中总有机碳分析仪等产品技术与方法，已被收载于《中国药典》2005年版，产品已覆盖全国各级食品药品检验所、各大制药企业、药物研究机构等企事业单位，并远销欧洲、非洲、澳洲及东南亚地区。未来，公司继续以技术研发和市场开拓为重心，不断提高企业经营管理水平，强化哑铃型发展运行模式。公司推行“开拓、创新、务实、高效”的企业精神。坚持 “以客户为中心，以创新能力和产品质量构建企业核心竞争力，成为客户第一选择”的质量方针。以危机责任观为第一价值观，不断完善企业文化，不断凝聚精英人才，逐步实现公司专业化、规模化、国际化的战略目标。

肯定是微生物方面，超净工作台，烘箱，培养箱，灭菌锅，水浴锅，集菌仪，电子天平 培养皿 容量瓶 三角烧瓶 烧杯 量筒 移液管 试管等

是否环境影响？你的其它试验是否也常报告出霉菌？如果是，就要考虑环境被霉菌污染了。霉菌很麻烦，一旦环境污染了，如果消毒不彻底，很容易长起来。还是建议先消除实验室影响，把整个微生物室用甲醛或乳酸熏蒸，酒精喷洒擦拭，然后紫外照射。器具和使用的集菌仪也注意彻底灭菌消毒一次。如果消毒几次都还是不行，就只有更换高效过滤器了。

华卫药业座落于太原市高新技术开发园区，地理位置优越、交通便利。目前在职员工206人，其中技术人员51人，占到职工总数的24%。拥有中药提取、小容量注射剂、口服液、软胶囊、冻干粉针五个符合国家GMP标准的生产车间，配备有多效蒸馏水机、纯蒸汽发生器、中药提取系统、精制系统、远红外烘干机、超声波洗瓶机、灭菌烘干机、灌装封口机、高压湿热灭菌器、灯检机、制丸压丸机、冻干机等多台套先进的生产设施设备，以及高效液相色谱仪、薄层色谱扫描仪、紫外-可见分光光度计、尘埃粒子计数器、智能热原测定仪、集菌仪等高精尖检验仪器设备。生产车间的设计生产能力为：中药提取线年处理中药材300吨，小容量注射剂年产9000万支，口服液年产3000万支，软胶囊年产2亿粒，冻干粉针年产500万支。公司目前共有15个注册产品，常年生产的品种有：红花注射液（5ml、10ml、20ml）、红花口服液、复方黄芪益气口服液、参蓝口服液等品种。其中“10ml红花注射液”和“红花口服液”、“复方黄芪益气口服液”、“参蓝口服液”均为全国独家品种。2008年公司实现生产总值3280万元，销售收入3150万元，上缴利税320万元。华卫药业始终贯彻“质量是企业的生命与尊严，质量是生存和发展的基础”的质量方针，严格按照GMP的要求组织生产，把努力实现产品零缺陷和零投诉作为坚持不懈的目标，持续不断地为顾客创造价值，为人类的健康事业做出贡献。

5.7.7 薄膜过滤法：5.7.7.1 本法适用于有抗菌作用或大容量的供试品。5.7.7.2 按集菌使用规程安装好集菌仪。5.7.7.3 取供试品擦拭消毒后，除去塑料盖，插好导管，进行抽滤，滤液从排液管排出。5.7.7.4 同法操作将培养基抽到全封闭式集菌培养器中。5.7.7.5 取需气菌、厌气菌培养基和真菌培养基各1管，同法操作加入相应的溶剂作阴性对照。5.7.7.6 阳性对照管应根据供试品特性在接种橱内加入相应对照菌液1ml。（抗细菌药物以金黄色葡萄球菌为对照菌，抗厌氧菌药物以生孢梭菌为对照菌，抗真菌药物以白色念珠菌为对照菌）。5.7.7.7 需气菌、厌气菌培养基管置30-35℃培养箱中，真菌培养基管置20-25℃培养箱中各培养7日；阳性对照管细菌应在培养24-48小时，真菌应在培养24-72小时有菌生长。

不一样用万用表测试电阻器、电容器、二极管、三极管好坏的方法电阻（R）电阻的故障是实际阻值与标称阻值不符，因此，用万用表欧姆即可测出电阻的好坏。通常电阻的故障是开路（万用表测量电阻值无穷大），电阻短路的故障极为少见。 2、电容（C）电容器的常见故障一般可归为两类，一类是击穿（电容器两极板因某种原因造成短路和漏电（电容器的绝缘电阻小于正常值），另一类是开路（电容器内部引线与极板断开，这时电容器已没有容量）和失效（电容器的容量小于正常值）。电容器漏电和击穿的测量：将万用表拨置×10K档（测量电解电容器时用×1K档），测量时万用表指针首先向R为零的方向摆地去，然后又向R为无穷大的方向退回，待表针稳定以后指示的电阻值就是电容器的绝缘电阻（对于电解电容器这时万用表的黑表笔必须接电解电容器的正极。 实验证明电解电容器的绝缘电阻一般应在几百千欧姆以上，其它电容器的绝缘电阻在几十兆欧姆以上，若绝缘电阻值此小于上述数值，即表明电容器的漏电不宜使用。绝缘电阻越小，漏电越严重，绝缘电阻为零，说明电容器已被击穿。二极管（D）二极管的主要特征：单向导电特性，用万用表×1K档量二极管正向应有一定阻值，而反向为无穷大，如果反向测有阻值，证明二极管已被损环。三极管（Q）三极管由两个PN结组成，根据PN结的单向导电性，可以很容易地将基极判别出来，将万用表拨置×1K欧姆档，然后任置假设三极管的一只脚为基极，将万用表的黑表笔搭上，用红表笔分别接另外两个管脚，如果两次测量的电阻值都较小（正向电阻），且将红笔接在假定为基极的管脚上，黑表笔分别接另外两个管脚，阻值都很大（反向电阻），则假定正确，该脚即为基极。三极管的损坏主要是开路或短路，按此方法可简单地判别三极管是否损坏。平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。万用表在汽车上的电流检测方在汽车上，检测电流的方式有多种，我们在此介绍3种较为常见的检测方法。方法1：利用普通万用表电流挡，串联进入电路，进行测量。　　方法2：用小试灯串联进入电瓶线与电瓶极柱之间，进行检测。　　方法3：利用钳形直流万用表进行检测。这种方法就是不用断开原车线路，将直流祖形万用表的感应夹夹在被测量导线上，进行感应式的检测。方法1的具体操作如下。用普通数字万用表检测电瓶漏电电流时，要把电瓶正极或极卡子拆下，然后将万用表红表笔插到20A插孔中，黑表笔接公共端(COM),再将万用表挡位开关拔到20A电流挡，然后串联进拆开的电瓶极柱和电瓶卡子之间，如图所示是用普通万用表检测电流的示意图。是用试灯检测漏电电流的操作用普通万用表检测电流试灯检测漏电电检测全车用电设备是否存在漏电，最简易的方法是用小试灯串联进电瓶线中进行检测。这种方法在早期没有像数字万用表那样经常使用。使用小试灯串联电瓶极柱与导线中间，根据灯泡的亮度来判断是否存在漏电，这种方法比较建议、但不能明确显示具体的漏电电流是多大，现在已经不再使用。因为万用表的价格已经十分便宜，现在已经改用方法1或方法3来进行检测了。　　第3种方法就是利用直流钳形万用表，进行感应式的检测，如图所示。　　这种方式检测起来较方便，最主要的是断开电路进行检测可能会有以下问题发生。如果是电瓶线被断开，原车的很多参数需要重新设置，增加了检测的工作量。再就是现在的汽车釆用网络化的设计，每一次网络断开后，要想让全车进入休眠状态，需要花几分钟甚至半小时的时间才能完成，是一种很浪费时间的方法。　　2、由于有些插头是多根导线合用一个插头，当我们拔开插头后，会造成相关的电路断路，所以也不方便检测电流。比如散热风扇的插头，一般风扇电机的正负极和调速电阻集中到一个插头上，我们想测量风扇工作电流时，断开了风扇插头，正负极同时断开，无法形成回路，也没有电流流过风扇，无法测量。　　综合以上几种不利因素，一般在现代新型汽车电气维修中，不建议采用传统的断开电路串联进行电流表的方法测量电流，而尽量采用钳形万用表感应式的测量方法。万用表对场效应管的识别和判定场效应晶体管简称场效应管。一般的晶体管是由两种极性的载流子,即多数载流子和反极性的少数载流子参与导电,因此称为双极型晶体管,而FET仅是由多数载流子参与导电,它与双极型相反,也称为单极型晶体管。它属于电压控制型半导体器件，具有输入电阻高(108～109Ω)、噪声小、功耗低、动态范围大、易于集成、没有二次击穿现象、安全工作区域宽等优点，现已成为双极型晶体管和功率晶体管的强大竞争者。　　场效应管的测试　结型场效应管的管脚识别：　　场效应管的栅极相当于晶体管的基极，源极和漏极分别对应于晶体管的发射极和集电极。将置于R×1k档，用两表笔分别测量每两个管脚间的正、反向电阻。当某两个管脚间的正、反向电阻相等，均为数KΩ时，则这两个管脚为漏极D和源极S(可互换)，余下的一个管脚即为栅极G。对于有4个管脚的结型场效应管，另外一极是屏蔽极(使用中接地)。　判定栅极　　用万用表黑表笔碰触管子的一个电极，红表笔分别碰触另外两个电极。若两次测出的阻值都很小，说明均是正向电阻，该管属于N沟道场效应管，黑表笔接的也是栅极。　　制造工艺决定了场效应管的源极和漏极是对称的，可以互换使用，并不影响电路的正常工作，所以不必加以区分。源极与漏极间的电阻约为几千欧。　　注意不能用此法判定绝缘栅型场效应管的栅极。因为这种管子的输入电阻极高，栅源间的极间电容又很小，测量时只要有少量的电荷，就可在极间电容上形成很高的电压，容易将管子损坏。

如果正确激活电子爆破机扫描器，如果这个扫描器正确的，就应该按他里面的要求和里面的需用吧，我们还是先了解

我用的是微生物限度检查以MT01L。是比你说的集菌仪方又便宜。。。 高得泰林啊。和你一样的

浙江泰林生物技术股份有限公司是2002-01-08在浙江省杭州市注册成立的股份有限公司(非上市、自然人投资或控股)，注册地址位于浙江省杭州市滨江区南环路2930号。浙江泰林生物技术股份有限公司的统一社会信用代码/注册号是91330100735254191Q，企业法人叶大林，目前企业处于开业状态。浙江泰林生物技术股份有限公司的经营范围是：生产：孔径测定仪，集菌培养器，隔离系统，集菌仪（除医疗用），微生物限度检验仪，均质器，桶装水取样仪，内镜微生物检测仪，拉曼光谱仪，消毒器械（气态过氧化氢、干雾过氧化氢），总有机碳分析仪，滤膜完整性测试仪，手套完整性测试仪、微生物培养基、菌种等试剂耗材，分析仪器，第二类医疗器械；服务：食品、药品生产检测设备、净化设备、分析仪器、过滤设备、实验检测用品的技术开发、技术咨询、技术服务、成果转让，展览展示服务，成年人的非证书劳动职业技能培训（涉及前置审批的项目除外），物业管理，室内环境净化工程、水处理工程的设计、安装；批发、零售：五金，电器，净化设备，分析仪器，检测设备，过滤设备，塑料制品，化工产品（除危险化学品及易制毒化学品），第二类医疗器械，货物进出口（法律、行政法规禁止的项目除外，法律行政法规限制的项目取得许可后方可经营）；其他无需报经审批的一切合法项目。（依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动）。在浙江省，相近经营范围的公司总注册资本为1019531万元，主要资本集中在100-1000万和1000-5000万规模的企业中，共2715家。本省范围内，当前企业的注册资本属于优秀。浙江泰林生物技术股份有限公司对外投资1家公司，具有0处分支机构。通过百度企业信用查看浙江泰林生物技术股份有限公司更多信息和资讯。

　　现代生物技术制药研究及展望　　生物技术药物(biotech drugs)或称生物药物(biopharmaceutics)是集生物学、医学、药学的先进技术为一体，以组合化学、药学基因（功能抗原学、生物信息学等高技术为依托，以分子遗传学、分子生物、生物物理等基础学科的突破为后盾形成的产业。现在，世界生物制药技术的产业化已进入投资收获期，生物技术药品已应用和渗透到医药、保健食品和日化产品等各个领域，尤其在新药研究、开发、生产和改造传统制药工业中得到日益广泛的应用，生物制药产业已成为最活跃、进展最快的产业之一。　　有些学者认为，20世纪的科学技术是以物理学和化学的成就占主导地位，而21世纪的科学技术是以生物学的成就占主导地位。无论这种说法是否得到普遍的认同，生物技术是当今高技术中发展最快的领域似乎是不争的事实。 科学家预测，生命科学到2015年会取得革命性进展。这些进展可以帮助人类解决很多目前无法医治的疾病的治疗问题，彻底消除营养不良，改善食品的生产方式，消除各种污染，延长人类寿命，提高生命质量，为社会安全和刑侦提供新的手段。有些成果还可以帮助人类加速植物和动物的人工进化以及改善生态环境对人类的影响等。产生新的有机生命的研究也会取得进展。　　1.生物制药现状　　目前生物制药主要集中在以下几个方向：　　1 肿瘤 在全世界肿瘤死亡率居首位，美国每年诊断为肿瘤的患者为100万，死于肿瘤者达54.7万。用于肿瘤的治疗费用1020亿美元。肿瘤是多机制的复杂疾病，目前仍用早期诊断、放疗、化疗等综合手段治疗。今后10年抗肿瘤生物药物会急剧增加。如应用基因工程抗体抑制肿瘤，应用导向IL-2受体的融合毒素治疗CTCL肿瘤，应用基因治疗法治疗肿瘤(如应用γ-干扰素基因治疗骨髓瘤)。基质金属蛋白酶抑制剂(TNMPs)可抑制肿瘤血管生长，阻止肿瘤生长与转移。这类抑制剂有可能成为广谱抗肿瘤治疗剂，已有3种化合物进入临床试验。　　2 神经退化性疾病 老年痴呆症、帕金森氏病、脑中风及脊椎外伤的生物技术药物治疗，胰岛素生长因子rhIGF-1已进入Ⅲ期临床。神经生长因子(NGF)和BDNF(脑源神经营养因子)用于治疗末稍神经炎，肌萎缩硬化症，均已进入Ⅲ期临床。　　美国每年有中风患者60万，死于中风的人数达15万。中风症的有效防治药物不多，尤其是可治疗不可逆脑损伤的药物更少，Cerestal已证明对中风患者的脑力能有明显改善和稳定作用，现已进入Ⅲ期临床。Genentech的溶栓活性酶(Activase重组tPA)用于中风患者治疗，可以消除症状30%。　　3 自身免疫性疾病 许多炎症由自身免疫缺陷引起，如哮喘、风湿性关节炎、多发性硬化症、红斑狼疮等。风湿性关节炎患者多于4000万，每年医疗费达上千亿美元，一些制药公司正在积极攻克这类疾病。如 Genentech公司研究一种人源化单克隆抗体免疫球蛋白E用于治疗哮喘，已进入Ⅱ期临床;Cetor′s公司研制一种TNF-α抗体用于治疗风湿性关节炎，有效率达80%。Chiron公司的β-干扰素用于治疗多发性硬化病。还有的公司在应用基因疗法治疗糖尿病，如将胰岛素基因导入患者的皮肤细胞，再将细胞注入人体，使工程细胞产生全程胰岛素供应。　　4 冠心病 美国有100万人死于冠心病，每年治疗费用高于1 170亿美元。今后10年，防治冠心病的药物将是制药工业的重要增长点。Centocor′s Reopro公司应用单克隆抗体治疗冠心病的心绞痛和恢复心脏功能取得成功，这标志着一种新型冠心病治疗药物的延生。　　基因组科学的建立与基因操作技术的日益成熟，使基因治疗与基因测序技术的商业化成为可能，正在达到未来治疗学的新高度。转基因技术用于构造转基因植物和转基因动物，已逐渐进入产业阶段，用转基因绵羊生产蛋白酶抑制剂ATT，用于治疗肺气肿和囊性纤维变性，已进入Ⅱ，Ⅲ期临床。大量的研究成果表明转基因动、植物将成为未来制药工业的另一个重要发展领域。　　2.生物制药展望　　今后10年生物技术将对当代重大疾病治疗剂创造更多的有效药物，并在所有前沿性的医学领域形成新领域。目前热门的药物生物技术如下：　　表1 热门药物生物技术　　疫苗 62 组织纤溶酶原激活剂 4　　基因治疗 28 凝血因子 3　　白介素 11 集落细胞刺激因子 3　　干扰素 10 促红细胞生成素 2　　生长因子 10 SOD 1　　重组可溶性受体 6 其他 56　　反义药物 6 总数 284　　生物学的革命不仅依赖于生物科学和生物技术的自身发展，而且依赖于很多相关领域的技术走向，例如微机电系统、材料科学、图像处理、传感器和信息技术等。尽管生物技术的高速发展使人们难以作出准确的预测，但是基因组图谱、克隆技术、遗传修改技术、生物医学工程、疾病疗法和药物开发方面的进展正在加快。　　除了遗传学之外，生物技术还可以继续改进预防和治疗疾病的疗法。这些新疗法可以封锁病原体进入人体并进行传播的能力，使病原体变得更加脆弱并且使人的免疫功能对新的病原体作出反应。这些方法可以克服病原体对抗生素的耐受性越来越强的不良趋势，对感染形成新的攻势。　　除了解决传统的细菌和病毒问题之外，人们正在开发解决化学不平衡和化学成分积累的新疗法。例如，正在开发之中的抗体可以攻击体内的可卡因，将来可以用于治疗成瘾问题。这种方法不仅有助于改善瘾君子的状况，而且对于解决全球性非法毒品贸易问题具有重大影响。　　各种新技术的出现有助于新药物的开发。计算机模拟和分子图像处理技术(例如原子力显微镜、质量分光仪和扫描探测显微镜)相结合可以继续提高设计具有特定功能特性的分子的能力，成为药物研究和药物设计的得力工具。药物与使用该药物的生物系统相互作用的模拟在理解药效和药物安全方面会成为越来越有用的工具。例如，美国食品药物管理局(FDA)在药物审批的过程中利用Dennis Noble的虚拟心脏模拟系统了解心脏药物的机理和临床试验观测结果的意义。这种方法到2015年可能会成为心脏等系统临床药物试验的主流方法，而复杂系统(例如大脑)的药物临床试验需要对这些系统的功能和生物学进行更为深入的研究。　　到下世纪初生物技术药物的种类数目尚不会超过一般药物的总数，但生物技术制药公司总数将超过前10年的6倍。目前主要生物技术公司多分布在美国，如Amgen,Genetics institute,Genzyme,Genentech和Chiron，还有Biogen也发展较快。1987年尚没有一种重组DNA药物进入世界药品销售额排名前列表，但到1996年已有多种生物工程药物榜上有名。经上市的生物技术药物主要含3大类，即重组治疗蛋白质、重组疫苗和诊断或治疗用的单克隆抗体。　　药物的研究开发成本目前已经高到难以为继的程度，每种药物投放市场前的平均成本大约为6亿美元。这样高的成本会迫使医药工业对技术的进步进行巨大的投资，以增强医药工业的长期生存能力。综合利用遗传图谱、基于表现型的定制药物开发、化学模拟程序和工程程序以及药物试验模拟等技术已经使药物开发从尝试型方法转变为定制型开发，即根据服药群体对药物反应的深入了解会设计、试验和使用新的药物。这种方法还可以挽救过去在临床试验中被少数患者排斥但有可能被多数患者接受的药物。这种方法可以改善成功率、降低试验成本、为适用范围较窄的药物开辟新的市场、使药物更加适合适用对症群体的需要。如果这种技术趋于成熟，可以对制药工业和健康保险业产生重大影响。　　值得注意的是，制药工业的知识产权保护在世界各地是不平衡的。某些地区(例如亚洲)会继续以生产专利过期药物为主，有些地区(如美国和欧洲)除了继续生产低利润的药物外会不断开发新的药物。　　总之，综合多学科的努力，通过新技术的创立可以大大拓宽发明新药的空间，增加发明新药的机遇与速度。因为这些手段可以寻找快速鉴定药物作用的靶，更有效地发现更多新的先导物化学实体，从而为发明新药提供更加广阔的前景。　　仅供参考，请自借鉴　　希望对您有帮助

药品生物测定的发展趋势 作者:吕会成 【关键词】 生物测定；药理；药品 ［摘要］ 生物测定是经典的药品检测专业之一，现代仪器分析的广泛应用，给其带来了极大的挑战和机遇，面对目前的基本状况，阐明了生物测定专业在中药开发、新药研制、药物安全性评价及微生物限度检查方面的应用和发展趋势。 ［关键词］ 生物测定；药理；药品 药品是特殊商品，药品质量直接关系到用药者的安全和疗效。药品检测方法和检测水平随着制药工业的发展不断改进提高。由于现代科学技术的发展，相邻学科之间的相互渗透，分析化学的发展经历了三次巨大的变革，使分析化学发展成为以仪器分析为主的现代分析化学。面对生命科学中复杂的分离分析任务，发展了色谱分析方法。结构分析、价态分析、晶体分析等方面的研究又促进了光谱分析的发展。以计算机应用为主要标志的信息时代的来临，仪器分析迅速发展，为药物检测提供各种非常灵敏、准确而快速的分析方法［1］。生物测定受到了极大的挑战，其发展前景令我们从事药品生物测定工作者所关注。 1 药品生物的特点与业务范围 1.1 药品生物测定的定义与特点 药品生物测定（简称生测）是利用药品（或药品中的有害杂质）对生物（或离体器官及组织）所引起的反应来测定药品的含量或安全性的一种方法。 生测法的优点是测定的结果与医疗要求基本一致，能直接反映药品的效果或毒副作用，这是其他物理学方法或化学方法所不能达到的。因此，目前各国药典仍大都采用这一方法。 生测法的缺点是检验周期长，微生物有生长繁殖过程，动物有生理代谢过程，观察分析时间一般在2~7天，有些试验会更长。影响因素多，有生物差异性，也有系统操作误差和环境条件等造成的影响。用品用具、动物质量、仪器设备都会对结果产生影响［2］。所以，以生测主检的品种在中国药典中逐版减少。 1.2 药品生物测定的业务范围 中国药典是法定的药品标准，它将药品质量控制项目归为四类：性状、鉴别、检查和含量。生测的业务主要涉及到中西药品的检查类和含量类。 其中作为药品安全性检查项目最多，包括：无菌、热原、细菌内毒素、异常毒性、安全试验、急性全身毒性、过敏物质、刺激性、溶血、降压物质、微生物限度等。含量（或效价）测定包括：抗生素微生物检定法，胰岛素、硫酸鱼精蛋白、缩宫素、卵泡刺激素、黄体生成素、升压素等生物检定法。 2 药品生物测定的现状 由于现代化检测仪器的广泛应用，药品生物测定的品种和范围，方法和要求，也发生了很大变化。 2.1 品种和范围的变化 抗生素的含量测定，最初大部分抗生素用微生物法测定含量。随着制药工业发展，提纯方法不断改进，有效组分更加明确，许多品种检测方法不断改为仪器测定和化学测定。例如：2000年版中国药典收载约219个抗生素品种，其中有15个原料药及其制剂从1995年版的化学法和微生物法改为高效液相色谱法（简称HPLC），使该法达到97种，微生物法仅有24个，其中9个品种是新增加的。有人预计本世纪初，HPLC法会发展成为中国药典使用频率最高的一种仪器分析法［3］。规定取消抗生素过期检验，抗生素微生物效价测定的业务工作量更是明显减少。 药品注射剂的热源检查。1942年美国首先将家兔法收入药典，相继世界各国药典均规定用该法。中国药典从1953年开始收载。自1973年以来，鲎试剂被证明是一种检测细菌内毒素（热原）存在的灵敏试剂。用鲎试剂要比家兔试验迅速、经济，所需样品量少，操作过程工作量小，每天可进行许多样品检测。1980年美国药典20版首载“细菌内毒素检查法”，1985年USP21版收载5种注射用水及40种放射性药品。1991年11月执行的USP22版第五增补版公布了185种药品删除家兔法，用细菌内毒素检查法代替。1995年USP23版注射剂的热源项几乎都被细菌内毒素检查法代替［4］。 我国从20世纪70年代开始研究制备鲎试剂，1988年卫生部颁布细菌内毒素检查法，1993年中国药典第二增补本收载该法，但未涉及任何品种，1995年中国药典二部正式收载，并规定了注射用水、氯化钠注射液和二十多种放射性药品并删除热源检查，以内毒素代替。2000年版中国药典进一步扩大到68种。预计2005年版中国药典还要继续增加品种，热源项都将被内毒素代替。动物试验改为生化试验。 2.2 实验动物 生测离不开实验动物，在实验中，为了减少生物差异，提高动物反应敏感性，以最少的动物达到最满意的结果。国家非常重视实验动物，1988年国务院颁布了《实验动物管理条件》，对实验动物的饲管、管理、使用等做出了明确规定，实行达标认证制度，严格管理。按微生物控制程度把实验动物分为四级：普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物和无菌动物［5］。一般动物实验必须达到清洁动物标准，种系清楚，不杂乱，无规定指出的疾病。动物级别越高，饲养管理条件越严，设施投资越大。实验动物是实验研究的活试剂，既要有纯度，也要有数量，背景明确，来源清楚，符合要求才能使用。（随着药品纯度的提高，凡是有准确的化学和物理方法或细胞学方法能取代动物实验，进行药品和生物制品质量检测，应尽量采用，以减少动物的使用。） 2.3 药品生物测定在方法上的改进与变化 为了缩短操作时间，减少实验误差，近年来生测方面也研制并投入使用了部分仪器设备，如：抗生素抑菌圈测定仪、微机热原测温仪、集菌仪、细菌数测定仪等，减轻了工作强度，提高了工作效率，检测结果更加准确可靠。 3 药品生物测定的发展趋势 生测作为经典方法沿用至今，表明它有其他方法不能替代的特点，在药品检验中发挥了重要作用。不少老产品改为其他方法控制质量，也会不断有新产品离不开生测法，我们应当充分发挥它的优点，尽量克服它的不足，开拓新的业务范围。 3.1 微生物限度检查工作量大 为了控制药品染菌限度，1975年美国药典19版首载微生物限度检查，1980年英国药典收载，我国在1990年由卫生部颁布了药品卫生标准及检验方法，1995年版中国药典正式收载［6］。2000年版中国药典按剂型规定了微生物限度标准，执行范围除注射剂和中药饮片外几乎包括中西药的所有制剂和原料。该项检查成为药典品种适用最多的检查项目，占当前地市级药品检验所生测室业务工作量的80%以上。在这项检查中，有大量的业务技术需要我们进一步研究，改进试验条件，使数据准确，探讨快速检测的新方法。药包材的检查，国家药监局已经发布试行标准，业务范围将更加扩大，这是我们进一步做好工作，努力探讨研究的新领域。 3.2 药品生物测定在中药开发中的作用 我国是中药王国，2000年版中国药典一部共收载920种，其中中成药398种。有含量测定的157种，仅占总数的17%，中药成分多，杂质和干扰物质很多。复方制剂，尤其大复方制剂专属性的检出处方中所含药材很困难，有大量的研究工作需要做。中成药中的杂质如重金属、残留农药等达到一定水平会产生毒副作用，影响药物安全性［7］。要让中药制剂打进国际市场，我们在检查类的控制项目和含量类的方法探讨方面有大量工作要做，生物测定可以在毒理、药理方面进行研究、探讨，逐步完善质量控制标准，提高制剂质量发挥更大的作用。 3.3 新药研制开发与安全性评价 新药研制开发是多学科合作的系统工程。在获得一个具有生物活性的化合物后，研究开发组织者要在生物医学领域进行药物评价研究，首先必须组织药理学、毒理学、病理学、兽医学、遗传学、生物化学、药代动力学方面的专家进行合作研究，按药物非临床研究管理规范GLP进行管理。组织药理、毒理（包括一般毒理和特殊毒理）、病理、药代动力学和毒代动力学、药物分析、临床化学、实验动物、生物统计、质量保证等部门有关人员进行讨论，分阶段做出评价［8］。生测在这方面可以参加开发研究或进行技术指导。 综上所述，药品生物测定是药物分析的重要组成部分，是不可缺的检测专业，现代仪器的大量使用，不仅不会影响其发展，而是如虎添翼，让药品生物测定展示出新的前景。 ［参考文献］ 1 倪坤义，田颂九，丁丽霞.21世纪药物分析学的发展趋势.中国药学杂志，2000，35（12）：798

都是薄膜过滤法，集菌仪做无菌结果要求无菌，微生物限度的话是可以有菌的，集菌仪上面放反复使用培养器的话是可以做纯化水微生物限度的。微生物限度检测仪比较贵，集菌仪相对便宜，一万多就可以买到了。集菌仪的作用是检验供试品是否含菌的仪器，配套集菌培养器使用。主要用于注射用无菌制剂的无菌检测，包括抗生素类及含有抑菌成份的药品、大输液、水针剂、灭菌医疗器具、无菌注射用水等。集菌仪是集菌培养器的配套使用仪器，通过集菌仪的定向蠕动加压作用，供试品被过滤并在滤器内进行培养，以检验供试品是否含菌。微生物限度检测仪操作步骤泵头灭菌 2.放置滤膜 3.安装过滤杯4.过滤供试品 5.取下过滤杯 6.转移滤膜

青霉素钠无菌检查的方法验证目的 建立健全注射用青霉素钠无菌检查方法，保证检验结果的准确性和可靠性。方法 按中国药典2010年版二部(附录XI H)无菌检查法中的薄膜过滤法进行。1 试验环境与材料1．1 试验环境在环境洁净度万级、局部洁净度百级的单向流空气的菌无室中进行。1．2 仪器智能集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司)、PY330一次性全封闭集菌培养器(杭州泰林生物技术设备有限公司)、生化培养箱(苏州威尔实验用品有限公司)、霉菌培养箱(苏州威尔实验用品有限公司)、生物安全柜(苏州安泰空气技术公司)1．3 试药注射用青霉素钠1．4 试验用菌株金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003l、大肠埃希菌[CMCC(B)44 102]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、生孢梭茵[CMCC(B)64 941]、白色念珠菌[CMCC(F)98 001]、黑曲霉[CMCC(V)98 003]。1．5 培养基、稀释液及缓冲液1．5．1 干粉培养基 硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、营养琼脂培养基、琼脂粉。1．5．2 细菌稀释液0．9％ 灭菌氯化钠溶液。1．5．3 冲洗用缓冲液pH7．0氯化钠-蛋白胨缓冲液。2 方法与结果2．1 菌液制备按中国药典2010年版附录ⅪH无菌检查法菌液制备法制备 。2．2 菌落计数取金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液各1 m1分别接种于营养琼脂培养基中，生孢梭菌接种至含1．5％琼脂的硫乙醇酸盐流体培养基中，30~C～35"E生化培养箱培养24～48 h，取白色念珠菌菌液、黑曲霉菌液各1 m1分别接种至改良马丁琼脂培养基中，经23℃ 一28~C霉菌培养箱培养48～72 h，计数。(上述各菌液分别接种两个平板，取平均值，同时设阴性对照)2．2 方法学验证2．3．1 试验组(样品+阳性) 取一次性全封闭集菌培养器(三联装)一套，先用少量pH7．0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液润湿滤膜，取样品15瓶溶解于250 ml缓冲液中，按薄膜过滤法过滤，样品过滤完毕后，再用pH7．0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，每次每管注人冲洗液100 ml，充分振摇，完全排空后循环操作5次，总冲洗量达到500 ml每管。冲洗完毕后在2管中分别注人改良马丁培养基100 ml，另1管中注入硫乙醇酸盐流体培养基100 ml。另取一套集菌培养器(三联装)取本品依上述方法过滤并冲洗后，均注入硫乙醇酸盐流体培养基100 ml，将上述6管集菌培养器移至阳性对照室，于含硫乙醇酸盐流体培养基的集菌培养器中，分别接种金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌茵液、枯草芽孢杆菌菌液、生孢梭菌菌液各1 ml，于含改良马丁培养基的集茵培养器中，分别接种白色念珠菌菌液和黑曲霉菌液各1 ml，按前述规定温度培养3～5 d，观察结果。2．3．2 阳性对照组取一次性全封闭集菌培养器(三联装)二套，4管中分别注入硫乙醇酸盐流体培养基各100 ml、2管中分别注入改良马丁培养基各100 ml，在阳性对照室内将6种菌液分别接种至相应管内，作为阳性对照，按前述规定温度培养3～5 d，观察结果。2．3．3 阴性对照组取一次性全封闭集菌培养器(二联装)一套，滤过适量缓冲液后分别注入硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基各100 ml，作为阴性对照，按前述规定温度培养14 d，观察结果。2．3．4 样品的无菌检查 取样品15支依上述方法同法操作，以500 ml／管的冲洗量冲洗，加入培养基后，按规定温度培养14 d，逐日观察，若培养14 d均澄清；由此判定供试品符合规定。结果判断 与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检查方法和检查条件进行供试品的无菌检查。 如含供试品的任一容器中的试验菌生长微弱、缓慢或不生长，则说明供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用，可采用增加冲洗量、增加培养基的用量、使用中和剂或灭活剂、更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑菌作用，并重新进行方法验证试验。讨论 目前，抗生素类药物的应用非常广泛，针对每种抗生素类药物建立严格的质量标准，提高抗生素的质量就显得尤为关键。所以对一个新品种建立无菌检查法时，对其方法进行验证就显得尤为必要。薄膜过滤法作为无菌检查中的一种方法，具有准确、方便、快捷的优点，是无菌检查时所采用的一种重要方法。试验表明上述方法操作方便快捷、结果准确。所以，该无菌检查方法验证对保证结果的可信度和准确性具有重要意义。

基于滤膜上细菌直接计数法的细菌总数快速检测 【摘要】 细菌总数快速检测在质量监测中具有重要的意义，目前除了经典的平板培养法以外，还有微菌落法、阻抗法等快速检测方法，这些方法或者需要较长的检测时间，或者需要较高的检测成本。本研究提出一种不需要培养而在滤膜上直接计数的细菌总数的快速检测方法，它主要分为过滤、染色、显微镜计数和计算四个步骤。计算细菌总数时，根据细菌在滤膜上的分布特点，对传统公式进行改进，提出按区域计算细菌总数的计算方法，提高了检测精度。研究结果表明，该方法与传统的平板培养法无显著性差异（t=0.847，P=0.436＞0.05），是一种低成本、快速的细菌总数检测方法。 1 引 言 细菌总数计数的研究已有很多，目前国标规定的方法为平板计数法，该方法是将样品加入琼脂营养基，在37 ℃下培养24～48 h后计数。这种方法精度高，但耗时长，难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间，国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究，提出了阻抗检测法〔1〕、Simplate TM全平器计数法〔2〕、微菌落技术〔3-5〕、纸片法〔6-7〕等检测方法，取得了一定的成果，但检测时间仍在4 h以上。 本研究在分析了已有研究成果的基础上，提出了在滤膜上染色后，直接计数的细菌总数检测方法，具体步骤为：用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明，该方法与传统的平板培养法无显著性差异，检测时间约1 h，是一种快速的细菌总数检测方法。 2 材料与方法 2.1 材料 本研究中用的试验材料有集菌仪（杭州泰林生物技术设备有限公司），染色剂，生物显微镜（宁波永新光学股份有限公司），聚碳酸脂膜（直径47 mm）。 2.2 实验方法 2.2.1 准备工作 卸下集菌仪的滤网（见图1），统计滤网上小孔总数，为计算菌液浓度做准备。另外，还需对集菌仪中的集菌器进行高压灭菌，以防止过滤过程中引入外源细菌。 2.2.2 细菌收集 取一定浓度的霉菌菌液300～500 ml，装在集菌仪上，集菌仪采用蠕动加压方式对菌液施加一定的压力，使菌液流过孔径为0.45 um的聚碳酸脂膜。采用过滤方法是因为它可以使细菌相对均匀地分布在滤膜上，而选用聚碳酸脂膜是因为这种膜具有良好的透光性，便于用显微镜观察。 2.2.3 染色 集菌后取下滤膜，切下一部分放在载玻片上，进行染色、固定。染色的目的是增大细菌与背景的对比度，便于观察。 2.2.4 显微镜计数与计算 菌液经集菌仪过滤后，细菌在滤膜上的分布见图2、图3，由图可以看出细菌分布具有以下两个特点：一是细菌集中在一个个的圆形区域内，这些圆形区域和挡板的小孔相对应；二是各个圆形区域之间细菌很少。根据膜上细菌分布的这种特点，提出以圆形区域为单位进行计数，统计出圆形区域内细菌的平均个数，从而计算出菌液中细菌总数。具体步骤如下：随机选择10个圆形区域，在油镜下，调节焦距以获得较清晰的图像（见图4），统计每个圆形区域内的细菌个数，然后按公式(1)计算出菌液的浓度。 X=A10×N/V(1)图2 膜上细菌的区域分布 Fig 2 The distributing region of bacteria on the filter(100倍) 图3 膜上细菌的区域间隔 Fig 3 The space among the distributing regions(100倍) 图4 膜上细菌染色后图像 Fig 4 Figure of bacteria after coloration(1 000倍) 式中：X表示待检菌液浓度（CFU/ml） A表示10个圆形区域内细菌总数 N表示滤网上小孔总数 V表示集菌时所用待检菌液体积（ml） 3 结果与讨论 3.1 实验结果 按上述方法计算得到的结果与平板培养法得到的结果见表1。表1 两种方法得到的细菌总数 Table 1 Total bacteria number by two different methods 样本1样本2样本3样本4样本5样本6染色镜检 (cfu/ml）185168157165171166平板培养 (cfu/ml)176155165158183152 对表1中两组数据进行配对t检验，在α=0.05时，双尾检验结果如下：t=0.847，P=0.436＞0.05，说明两种方法得到的结果无显著性差异。 3.2 讨论 3.2.1 计算公式的改进 用集菌仪对样本菌液进行过滤时，由于滤网挡板的作用，使得细菌不是均匀地分布在整个滤膜上，而是集中分布在滤网的小孔处，所以，计算细菌总数时，不能采用公式X=A40×Φ1Φ22/V（其中Φ1，Φ2分别为滤膜直径和视野直径），该公式是微菌落方法检测细菌总数中的常用计算公式。在本实验中，根据细菌分布的特点，提出以圆形区域为单位计算细菌总数的思路，使计算结果更接近真实值，从而提高了检测精度。 3.2.2 细菌大小的影响 细菌大小对本实验的影响主要体现在镜检时，如果细菌太小，显微镜计数时不能将细菌从背景中分辨出来，我们的实验结果显示，不能分辨大肠杆菌和葡萄球菌，而较大的霉菌可以清晰地分辨。 3.2.3 检测时间进一步缩短 细菌总数的经典检测方法是平板培养法，得到的结果精度高，但是它所用时间长，为了缩短检测时间，出现了微菌落法，将检测时间缩短为4 h左右〔3-5〕。本研究不对细菌进行培养，而是在膜上染色后直接用显微镜计数，最大限度地缩短了检测时间，使整个检测时间在1 h左右。 4 结论 本研究用集菌仪将菌液过滤后，取滤膜一部分进行染色、制片，然后在油镜下统计细菌个数。根据细菌在滤膜上的分布特点，提出将圆形区域作为统计单位，得到圆形区域内细菌的平均个数，从而计算出菌液浓度。实验结果表明，按照该方法得到的结果与平板培养法的结果无显著性差异。与平板培养法和微菌落法相比，该方法不需要细菌培养，检测时间只需要1 h左右，明显缩短了检测时间，是一种快速、有效的细菌总数检测方法。

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细菌总数计数的研究已有很多，目前国标规定的方法为平板计数法，其检验方法是：在玻璃平皿内，接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中，冷却凝固后在37°C培养24小时，培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。有的国家把培养温度定为35°C或其他温度，也有把培养时间定为48小时的。这种方法精度高，但耗时长，难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间，国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究，提出了阻抗检测法、Simplate TM全平器计数法、微菌落技术、纸片法等检测方法，取得了一定的成果，但检测时间仍在4 h以上。本研究在分析了已有研究成果的基础上，提出了在滤膜上染色后，直接计数的细菌总数检测方法，具体步骤为：用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明，该方法与传统的平板培养法无显著性差异，检测时间约1 h，是一种快速的细菌总数检测方法。

细菌总数检测目前国标规定的方法为平板计数法，其检验方法是：在玻璃平皿内，接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中，冷却凝固后在37°C培养24小时，培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。有的国家把培养温度定为35°C或其他温度，也有把培养时间定为48小时的。这种方法精度高，但耗时长，难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间，国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究，提出了阻抗检测法、Simplate TM全平器计数法、微菌落技术、纸片法等检测方法，取得了一定的成果，但检测时间仍在4 h以上。本研究在分析了已有研究成果的基础上，提出了在滤膜上染色后，直接计数的细菌总数检测方法，具体步骤为：用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明，该方法与传统的平板培养法无显著性差异，检测时间约1 h，是一种快速的细菌总数检测方法。扩展资料：水中通常存在的细菌大致可分为三类：1、天然水中存在的细菌。普通的是荧光假单孢杆菌、绿脓杆菌，一般认为这类细菌对健康人体是非致病的。2、土壤细菌。当洪水时期或大雨后地表水中较多。它们在水中生存的时间不长，在水处理过程中容易被去除。腐蚀水管的铁细菌和硫细菌也属此类。3、肠道细菌。它们生存在温血动物的肠道中，故粪便中大量存在。水体中发现这类细菌，可以认为已受到粪便的污染。致病性肠道细菌有沙门氏杆菌（伤寒和副伤寒菌）、B型炭疽菌、痢疾志贺氏菌和霍乱弧菌等。参考资料来源：百度百科——细菌总数

常规来说，主要设备：无菌室，超净工作台（或者隔离器），集菌仪；微生物限度室，超净工作台（或者隔离器），一般薄膜过滤系统，振摇仪（也可以手动振摇不需要配置，根据企业情况），混合器；阳性室：生物安全柜，混合器。除以上设备外，根据自己企业产品选配相应辅助设备。

取水：取水前让水流一段时间，擦净取水口，用无菌瓶灌装取的水抽虑：用集菌仪或者抽虑设备在超净工作台抽虑，滤膜要无菌的培养：培养滤膜，培养基正确配置灭菌，对照，培养温度，天数一系列做好观察记录：观察滤膜记录数据

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3个。薄膜过滤器它是由一个具有蠕动泵头的集菌仪和一套具有3个培养瓶的一次性使用的全封闭集菌培养器构成的过滤系统，非常的实用。

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常规来说，主要设备：无菌室，超净工作台（或者隔离器），集菌仪；微生物限度室，超净工作台（或者隔离器），一般薄膜过滤系统，振摇仪（也可以手动振摇不需要配置，根据情况），混合器；阳性室：生物安全柜，混合器。除以上设备外，根据自己产品选配相应辅助设备。

反射率测定仪使用方法：1、把探头与电控箱连接，同时接上电源，开机预热1520分钟。此时应把探头放在黑色标准板上为佳。2、校零：把探头放在黑色标准板上，调整主机的校正旋钮，使主机数字显示为00．0，允许变动±0．1。3、校正标准值：把探头放在白色标准板上，调整主机的校正旋钮，使主机显示的数值与白色标准板的标定值一致，允许变动±0．1。反复2-3条几次，使主机显示的数值满足校零、校正的要求。（注：标准板值为小数点后两位，校正时，请用户自行四舍五入保留一位小数。）4、测量RB值：把探头移至放有试样的黑色工作陶瓷板上，显示器所显示的数值即为RB值（或参照有关国家标准要求进行）。5、测量Rw值：把探头移至放有试样的白色工作陶瓷板上，显示器所显示的数值即为Rw值（或参照有关国家标准要求进行）。6、计算求得对比率RB/Rw值。反射率测定仪注意事项：1、为保证测量精度，仪器应经常校准，允许偏差为±0.1。2、为克服光电池的光照疲劳现象，在测试的间隙时间内应将探头放在黑色标准板上面。3、试样的制备应严格依照相关的国家标准规定进行。

西岸村是河北省石家庄市平山县下槐镇下辖的行政村，城乡分类代码为220，为村庄。区划代码为130131106209，居民身份证号码前6位为130131。邮政编码为050400，长途电话区号为0311 ，车牌号码为冀A。西岸村与东岸村、东苍蝇沟村、西沟村、前古道村、西黄泥村、赵家庄村、长桑村、蚕寨村、庞家铺村、上刘家坪村、下西峪村、下刘家坪村、水渣村、上西峪村相邻。西岸村附近有西柏坡红色旅游区、驼梁山、黑山大峡谷、天桂山、平山紫云山风景区等旅游景点，有平山绵核桃、平山白灵菇、平山姬菇、平山金针菇、平山黑木耳等特产。

有。熊忠贵的盏是龙窑烧的，胎和釉也都和老盏一样，具有很大的升值与收藏价值。收藏，指的是对于某一物品有了喜爱之后，对其的收集与储藏与维护。

普世（适）价值观，顾名思义，就是普遍适用的价值观。它超越民族、种族、国界和信仰，是全人类共同拥有的价值观，是衡量是非善恶的最低尺度，或者说是人类道德的共同底线。具体的说，普世价值观由三个基本要件组成：公平、正义、自由。公平不是指物质财富的绝对平均，他是指竞争机会的均衡和基本人权的对等，简单说就是不能有特权，就是在规则和法律面前人人平等。正义就是事实真相，就是人的行为和事物的最终结果，必须符合逻辑、合乎道德规范。更通俗的说，正义就是善有善报，恶有恶报。澄清事实，还原真相，惩恶扬善，就是维护正义。自由有两层含义，一是指人的基本权利和自由意志；二是指我们每个人，必须要学会约束自己的行为以及承担必要的责任，以便不妨碍他人的自由意志和固有权利，不违背公平正义的大原则。扩展资料：普世价值与法律：狭义的道德分为两部分，一部分是对人性的阐述，另一部分则给出价值判断与行为准则，对人性进行约束和引导。人类社会的道德源自于宗教信仰，说白了，道德就是人的社会伦理、行为规范、判断善恶是非的尺度。道德的现实意义，就是约束人的恶性，发扬人的善性。所谓的良知，就是道德水准在人心理活动中的具体体现。很多人认为只要实现了宪政法治，一切社会问题都将得到解决，公平正义自然就能实现。那么，法律又是怎么来的呢，法律又是依据何种原则来制定的呢，事实上法律也是道德的一部分，只是法律带有强制性，属于外在约束机制，区别于一般意义上的道德规范。法律，可以说是道德的底线之底线，一但逾越了最后的界限，就必须采取强制措施。法律的制定，不能违背人性，不能违反伦理道德和普世原则，否则就是恶法，就是黑帮的帮规；如果法律逼着人去作恶，那它就是邪教的教规。这样的法律，毫无遵守的必要。比如1994年之前，南非实行的种族隔离政策，1961年之前美国实行的种族歧视法规。一个社会，如果只讲道德，不讲法律，那就等于没有底线，没有惩恶的机制。如此，权力就会成为法律的替代品，社会的走向将取决于掌权者的个人操守；如果只讲法律，不讲道德，则是非善恶无从分辨，法律或将背离道德准则，那时任何人间惨剧都有可能发生，希特勒时期的德国就是例证。参考资料来源：百度百科-普世价值观

郭苏村是河北省石家庄市平山县岗南镇下辖的行政村，城乡分类代码为122，为镇乡结合区。区划代码为130131104203，居民身份证号码前6位为130131。邮政编码为050400，长途电话区号为0311 ，车牌号码为冀A。郭苏村与东岗南村、尚家湾村、胡家咀村、西岗南村、上奉良村、下奉良村、寺家沟村、石盆峪村、李家庄村、韩庄村、三角村、霍宾台村、霍北庄村、霍南庄村相邻。郭苏村附近有西柏坡红色旅游区、驼梁山、黑山大峡谷、天桂山、平山紫云山风景区等旅游景点，有平山绵核桃、平山白灵菇、平山姬菇、平山金针菇、平山黑木耳等特产。

建盏大师前十名为孙建兴、李达、陈大鹏、许家有、熊忠贵、李细妹、阙梅娇、杨敏、黄美金、吕竹兴。孙建兴研制出了金兔毫、油滴、国宝油滴建盏、白点鹧斑、曜变、异毫、毫变、窑变、黄天目、蓼冷汁、灰被、金彩文字天目、铁绣斑、木叶、玳瑁、柿红釉等近三十种建盏。李达先生1997年的作品《油滴建盏》选为国务院紫光阁收藏陈设品。李达先生的作品《油滴建盏》、《油滴盏》、《兔毫建盏》被故宫博物院永久收藏。建盏的外形特点：建盏多是口大底小，有的形如漏斗；且多为圈足且圈足较浅，足根往往有修刀（俗称倒角），足底面稍外斜；少数为实足（主要为小圆碗类）。造型古朴浑厚，手感普遍较沉。建盏分为敞口、撇口、敛口和束口四大类，每类分大、中、小型；小圆碗归入小型敛口碗类。敞口碗：口沿外撇，尖圆唇，腹壁斜直或微弧，腹较浅，腹下内收。浅圈足。形如漏斗状，俗称“斗笠碗”。

西柏坡村是河北省石家庄市平山县西柏坡镇下辖的行政村，城乡分类代码为122，为镇乡结合区。区划代码为130131110201，居民身份证号码前6位为130131。邮政编码为050400，长途电话区号为0311 ，车牌号码为冀A。西柏坡村与窑上村、燕尾沟村、通家口村、南庄村、北庄村、西沟村、粱家沟村、东柏坡村、陈家峪村、盖家峪村、夹峪村、柏里村、西坡村、霍家沟村相邻。西柏坡村附近有西柏坡红色旅游区、驼梁山、黑山大峡谷、天桂山、平山紫云山风景区等旅游景点，有平山绵核桃、平山白灵菇、平山姬菇、平山金针菇、平山黑木耳等特产。

1、西铁城绿水鬼手表采用了西铁城自家的光动能原装机芯而不是自动机械机芯，表盘上有数字时间刻度。这是西铁城绿水鬼和劳力士绿水鬼最大最本质的区别。2、劳力士绿水鬼采用的是劳力士自产的3135机芯，配备蓝游丝可以有效抵御温度和撞击给腕表所带来的影响，号称“自动上链王”。3、劳力士绿水鬼采用的是陶瓷圈，造价高，美观大气，西铁城绿水鬼采用的是精纲圈，造价低。

看了粉笔的数据，造假太严重了。线下两个月3500名考生参加，就有3000万的收入？粉笔线下多少钱一套课？大家可以看看，简单的乘法都对不上。两个月3500名考生，要多少老师，我想做培训的心里清楚吧，这个数字不可能。2015年80万人次5600万，2016年2。2亿，有300多万人购买了直播课？全年考生的三分之一都用粉笔，中公华图一众人等都倒闭了么？据我所知，真实的粉笔无论是教学水平还是营收能力都处于下游，张小龙吹水的能力倒是越来越强了。粉笔针对的就是经济差的那些人，坑穷人钱的都不是好人。

太保建盏大师叫熊忠贵。熊忠贵誉为建盏龙窑柴烧第一人，也是当今知名度最高的太保建盏大师。

5.1快到了。北京好玩地点一览。 北京景点 海淀 颐和园旅游区 鹫峰森林公园 紫竹院公园 圆明园旅游区 凤凰岭风景区 香山公园旅游区 阳台山风景区 玉渊潭公园 百望山森林公园 卧佛寺-樱桃沟 西山森林公园 西山大觉寺 石景山 石景山游乐园 四海水上乐园 八大处公园 丰台 万芳亭公园 鹰山森林公园 老美跑车城 青龙湖郊野休闲区 世界公园旅游区 朝阳 朝阳公园 中华民族园 日坛公园 团结湖公园 元大都城垣遗址公园 红领巾公园旅游区 宣武 北京大观园 陶然亭公园 宣武艺园 崇文 天坛公园 北京游乐园 龙潭公园 西城 景山公园 北海公园 月坛公园 人定湖公园 什刹海公园 东城 天安门广场 故宫博物馆 中山公园 劳动人民文化宫 柳荫公园 地坛公园 东单公园 青年湖公园 昌平 蟒山国家森林公园 沟崖自然风景区 天龙潭风景区 白洋沟风景区 白虎涧风景区 虎峪自然风景区 天池旅游风景区 双龙山森林公园 老北京微缩景园 十三陵 敕赐和平寺 碓臼峪风景区 银山塔林风景区 九龙游乐园 明皇蜡像宫 大兴 北普陀影视城 半壁店森林公园 房山 石花洞风景区 银狐洞风景区 韩村河旅游景村 十渡风景区 云居寺 上方山森林公园 将军坨风景区 薄洼狩猎场 仙栖洞风景区 万顷园风景区 白草衅自然风景区 碧溪垂钓园 怀柔 雁栖湖风景区 紫云山风景区 神堂峪风景区 喇叭沟门原始森林 天池峡谷风景区 濂泉响谷风景区 龙潭涧风景区 幽谷神潭 云蒙山风景区 青龙峡风景区 九谷口风景区 响水湖风景区 蓝天牧场 天华洞风景区 北京生存岛基地 百泉山风景区 乡间情趣园 湖景水上乐园 鳞龙山风景区 愉然原始部落 红螺寺景区 慕田峪新景区 京北第一漂 门头沟 灵山风景区 百花山保护区 潭柘寺 戒台寺 珍珠湖风景区 妙峰山风景区 爨(川)底下村 小龙门公园 密云 黑龙潭风景区 京都第一瀑 卧虎山旅游区 精灵谷风景区 白龙潭风景区 桃源仙谷风景区 九道湾大峡谷 云岫谷风景区 清凉谷风景区 云蒙峡风景区 雾灵山自然保护区 不老湖风景区 三峪风景区 黄峪口风景区 五座楼森林公园 仙居谷风景区 天仙瀑风景区 巴蜀文化园 九龙十八潭风景区 平谷 丫髻山森林公园 京东沟金谷 金海湖风景区 京东石林峡 京东大峡谷 飞龙谷风景区 湖洞水风景区 老象峰风景区 四座楼风景区 京东大溶洞 顺义 森鑫森林公园 焦庄户地道战遗址 通州 燃灯佛舍利塔 西海子公园 延庆 龙庆峡风景区 妫河漂流 古崖居遗址 松山森林旅游区 大古城沙漠奇景 滴水壶风景区 康西草原 仓米古道旅游区 海淀 颐和园旅游区 鹫峰森林公园 海淀区北安河乡鹫峰国家森林公园 紫竹院公园 圆明园旅游区 凤凰岭风景区 香山公园旅游区 供你参考！

敏而好学，不耻下问。释义：不以向地位、学问比自己低的人请教为耻，形容谦虚好学。出处：先秦·孔子《论语·公冶长第一十五》子贡问曰：“孔文子何以谓之‘文"也？”子曰：“敏而好学，不耻下问，是以谓之‘文"也。”翻译：子贡问道：“孔文子为什么被谥为‘文"呢？”孔子说：“他聪明好学，向不如自己的人请教不以为耻，所以被谥为‘文"。”扩展资料《论语》反映了孔子的教育原则。孔子因材施教，对于不同的对象，考虑其不同的素质、优点和缺点、进德修业的具体情况，给予不同的教诲，表现了诲人不倦的可贵精神。《论语》中保留了一些人们对孔子师徒的批评讽刺，有的作了辩驳，有的没有回答。其驳议辩难部分对后世很有影响，如《答客难》等设为主客问答进行辩难的小赋，都从《论语》受到启发；其自我解嘲部分，表现了儒家对自我价值的肯定，对“知其不可为而为之”的积极奋进精神的赞扬。

普适（世）价值：已经存在的，以自律、平等、博爱为基础的，并不具有广泛争议的公共秩序以及风俗习惯。“普世价值”是英文“universal value”的意译，其实译为“普适价值”更为准确。普世价值包括但不限于：民主、自由、法治、人权等等。国家有义务捍卫国民与生俱来的权利，如生存的权利、免于恐惧的权利、生育的权利、知的权利、免于匮乏的权利、思想的自由、表达的自由。普世价值未必是放之四海而皆准的真理，但确实是目前人类文明的重要成果。普世价值是人类文明共有成果，不应该把普世价值等同于西方价值观。扩展资料主要内容：人类应追求长远和短期兼顾的安全、进步、快乐、自由、民主、法治、公正、人权、合法地新建和发展党派团体和宗教组织、合法适度地方自治。高效率和效果、节约、环境保护、适度博爱和互助、合作、善良、仁慈、宽容、和平、讲信用、对话讲逻辑、己所不欲勿施于人、君子爱财取之有道（道德），防止不顾他人和整体利益的极端自私行为。西方社会学者试图用普世价值观保持人类各宗教、组织、国家、地区、意识形态、政治党派之间在道德底线上的统一，以提前避免人类过度分裂、斗争。参考资料来源：百度百科-普世价值

是。建盏属于中国八大名瓷之一，是典型的黑瓷的代表作，熊忠贵出生于陶作世家，是为省非物质文化遗产传承人、省陶瓷艺术大师，作品是一证一码，没有证码的赝品的，没有收藏价值。

劳力士水鬼手表，原名“劳力士潜航者型手表”。劳力士潜航者型诞生于1953年，是世界上首款防水达100米的手表。后来又添置了专利三扣锁表冠，使表壳有更好的密封性，防水深度也增加到了300米。蚝式恒动Deepsea，劳力士蚝式恒动DEEPSEA腕表的成功得益于若干突破性技术创新，其中包括劳力士专属的全新表壳结构Ringlock System，它确保腕表在深水中从容承受巨大压力。特别为要求最严苛的专业潜水员设计。腕表的指标与钟点处涂有的Chromalight荧光物质，即使深潜至幽暗海底也能为佩戴者提供清晰时间显示。另外，其他三个超卓腕表元件也对实现这一表款的出众性能功不可没：它高性能不锈钢圆环置于蓝水晶玻璃和表壳后盖之间，保证玻璃和表壳后盖轻松承受巨大水压；其蓝水晶玻璃表面微呈拱形，比其它蚝式表款的玻璃表面更厚，另抗压能力倍增；表壳后盖采用具有极高耐抗性的钛合金制成，并配以性能卓越的 904L 精钢圆环固定。扩展资料：劳力士表最初的标志为一只伸开五指的手掌，它表示该品牌的手表完全是靠手工精雕细琢的，后来才逐渐演变为皇冠的注册商标，以示其在手表领域中的霸主地位，展现着劳力士在制表业的帝王之气。成就劳力士今天的地位的是一名来自英国的女游泳运动员，1927年，梅塞迪丝佩戴一只劳力士蚝式腕表，耗时10小时成功横渡英吉利海峡，腕表丝毫无损。自此开始，劳力士开始名声大震。这个成名的方式直到今天还在被许多品牌持续借鉴，他们把自己生产的手表送上山峰，送入海底，希望能够克服最严酷的自然条件。很多时候这和普通消费者无关，但这是树立地位和权威的最好方式。参考资料来源：百度百科——劳力士

《丁丁历险记：独角兽号的秘密》影片导演为史蒂文·斯皮尔伯格。这是一个十分有趣的影片，真正做到了将漫画和“印第安纳琼斯”式的冒险结合在一起，讲述了一个史诗般宏伟、涉足全球的追寻冒险故事，其中既有寻幽探秘、也有奸险恶棍和古老传奇，它将动作、幽默与机智融于一体，动作戏、幽默对白和悬念从头至尾充满大银幕，影片的配乐也十分激动人心，影片有两场动作镜头特别的牛，燃爆了：一处是开篇的追逐戏份，另一处是回忆的海战场面。《里约大冒险》《里约大冒险》是一部2011年3D动画片。《里约大冒险》的故事讲述一只生活在美国明尼苏达州小镇上的蓝色金刚鹦鹉，一直是世界上仅存的一只公金刚鹦鹉。直到有一天，一个鸟类研究博士图里奥来到了这里，告知鹦鹉的主人琳达要是再不给它们进行人工繁殖那么蓝色金刚鹦鹉可能就会灭绝，而他们研究所就有一只母蓝色金刚鹦鹉。于是，为了拯救蓝色金刚鹦鹉，他们从美国出发飞往巴西里约热内卢，一段充满异域风情的冒险之旅就这么开始了，影片由《冰河世纪》系列的导演卡洛斯·沙尔丹哈执导，由好莱坞演员杰西·艾森伯格、安妮·海瑟薇和杰米·福克斯配音。《寻梦环游记》这是皮克斯继《超人总动员》之后又一部以人类为主角的动画电影，该片不仅获得奥斯卡最佳动画长片，还获得最佳影片的奖项。该片的灵感源于墨西哥亡灵节，讲述了热爱音乐的小男孩米格和落魄乐手埃克托在五彩斑斓的神秘世界开启了一段奇妙冒险旅程的故事。影片中卡尔与妻子相亲相爱直至妻子老去的这一片段，不知道感动了多少人，甚至成为了影史经典。该片可以说是奠定了皮克斯动画电影的地位。看完影片不得不佩服皮克斯，竟能将如此沉重的话题演绎得如此轻松有趣又令人感动。《疯狂动物城》《疯狂动物城》由迪士尼影业出品的3D动画片，由里奇·摩尔、拜恩·霍华德及杰拉德·布什联合执导，金妮弗·古德温、杰森·贝特曼、夏奇拉、艾伦·图代克、伊德瑞斯·艾尔巴、J·K·西蒙斯等加盟配音。该片讲述了在一个所有动物和平共处的动物城市，兔子朱迪通过自己努力奋斗完成自己儿时的梦想，成为动物警察的故事。该片于2016年3月4日中国大陆同步北美上映。2016年12月，《疯狂动物城》被选为2016美国电影学会十佳电影。《哥斯拉大战金刚》由美国传奇影业公司出品，亚当·温佳德执导，亚历山大·斯卡斯加德、米莉·博比·布朗、丽贝卡·豪尔等人联合主演的动作科幻片《哥斯拉大战金刚》，该片主要讲述了帝王组织在险峻未知的地心世界执行一项危险任务时找到了巨兽起源的线索。与此同时，人类计划将所有巨兽从地球上抹去的阴谋渐渐浮出水面，而传说中哥斯拉和金刚两个王者的世纪对决也将一触即发的故事。作为“怪兽宇宙”片，金刚与哥斯拉从敌到友的“基情”实在太好磕了，尤其是两头巨兽干完架深情互望的眼神实在太迷人了。影片开场不久这两个“力量型选手”便开打，氛围紧张、场面激烈、动作燃炸，3D视效带来身临其境的震撼观感，有如置身于危机重重的怪物世界，让观众体验到前所未有的沉浸式体验。《新神榜：哪吒重生》杨天翔、张赫（配音），影片整体节奏把握得非常好，可惜的是每次需要铺陈开讲的故事直接被转场掉了，使得故事情节变得脆弱，人物形象不够立体。重要的打斗场面铺得那么开也是草草收场，东海龙王就这样被KO太掉价了，但还是非常喜欢电影的制作效果。而且这个哪吒更像是我们普通人，就是要拼命才没逼出自己哪吒那样的潜能。 另外，结尾透露出还会有别的系列。希望中国动画加油啊，创作更多名流影史力作。

熊忠贵老师是紫砂壶底款，他的底款特征是双框或者单框，用印章的形式，在壶底留下自己的名字。根据查询相关公开信息显示：宜兴紫砂壶，国家级高级工艺美术师，1966年出生于江苏宜兴丁蜀镇，1988年毕业于宜兴紫砂工艺厂造型设计专业。