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dna合成的原料到底是什么?

2023-06-30 22:39:25
TAG: DNA
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volcanoVol

一分子磷酸,一分子脱氧核糖(五碳糖),一分子碱基合成一分子脱氧核糖核苷酸,然后很多个脱氧核糖核苷酸合成DNA。

1、物理性质:DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。

2、分子结构:DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3",5"-磷酸二酯键相连构成的长链。大多数DNA含有两条这样的长链,也有的DNA为单链,如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13等。DNA有环形DNA和链状DNA之分。在某些类型的DNA中,5-甲基胞嘧啶可在一定限度内取代胞嘧啶,其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。40年代后期,查加夫(E.Chargaff)发现不同物种DNA的碱基组成比例不同,但其中的腺嘌呤数等于其胸腺嘧啶数(A=T),鸟嘌呤数等于胞嘧啶数(G=C),因而嘌呤数之和等于嘧啶数之和,一般用几个层次描绘DNA的结构。

3、分布功能:原核细胞的染色体是一个长DNA分子,但是原核细胞没有真正的细胞核。真核细胞核中有不止一条染色体,每条染色体只含一个DNA分子。不过它们一般都比原核细胞中的DNA分子大而且和蛋白质结合在一起。DNA分子的功能是贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息;策划生物有次序地合成细胞和组织组分的时间和空间;确定生物生命周期自始至终的活性和确定生物的个性。除染色体DNA外,有极少量结构不同的DNA存在于真核细胞的线粒体和叶绿体中。DNA病毒的遗传物质也是DNA。

阳光下的日耳曼尼亚

DNA合成原料dNTP中的d代表脱氧的意思,所以DNA是由脱氧核糖核苷酸(dNTP)组成的。 DNA在体内合成的引物是一段RNA,因此引物的原料是NTP,如果是人工合成,会加一段DNA单链引物,这个引物的原料则是dNTP。 LZ如果你不特指的话,应该是指在体内,...

瑞瑞爱吃桃

简单来说,在体内依靠酶系统合成dna用的原料是dntp,需要为酶提供能量,体外机器合成原料就是dnmp。

阿里阿涅德

不对,原料不是amp,就是atp,虽然结构里是amp,但是用atp合成,会释放焦磷酸ppi

CarieVinne

DNA聚合酶 脱氧核糖核苷酸 能量

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dntp是什么意思呢?

dNTP是脱氧核苷三磷酸百(含脱氧核糖);NTP是核苷三磷酸(含核糖)。它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的,N的意思是碱基,比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三度磷酸。在DNA复制过程中,dNTP的一个焦磷酸尾巴掉下来了,变成了所谓的dNMP,同时和度上一个碱基连起来了。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为DNA聚合酶继续知工作提供了能量。储存液dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP 必须等浓度配合以减少错配误差。使用浓度在PCR反应中,使用低dNTP浓度, 可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl 的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或 10pmol/L 的400bp序列。
2023-06-30 21:12:431

dntp是什么

dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,dUTP等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-timePCR)中起原料作用。
2023-06-30 21:12:581

dntp是什么?

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reverse transcription PCR)、Real-time PCR)中起原料作用。相关信息:G和C碱基之间存在三个氢键,但A和T碱基之间仅有两个氢键。A和T之间只有两个形式,因为腺嘌呤碱基的碳2比其附着的氢具有更少的电负性,因此不会在其上产生δ负电荷,这意味着胸腺嘧啶的碳2上的氧不能与其形成氢键。氢。因此,这意味着需要更多的热能来使DNA变性,这比富含AT的DNA更富含GC。
2023-06-30 21:13:051

分子生物学中dNDP是什么

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,dUTP等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-time PCR)中起原料作用。
2023-06-30 21:13:203

dntp是什么分子生物?

dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reversetranscriptionPCR)、Real-timePCR)中起原料作用。dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中最初的贮存液可稀释到10mol/L分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20200μmol/L之间。4种dNTP必须等浓度配合以减少错配误差。
2023-06-30 21:13:271

dNTP与NTP

dNTP是脱氧核苷三磷酸(含脱氧核糖);NTP是核苷三磷酸(含核糖)。它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的,N的意思是碱基,比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三磷酸。扩展资料:使用储存液dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP 必须等浓度配合以减少错配误差。使用浓度在PCR反应中,使用低dNTP浓度, 可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl 的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或 10pmol/L 的400bp序列。
2023-06-30 21:13:361

生化中的NTP和dNTP是什么意思

DNA在复制的时候原料是dNTP的原因是:在DNA复制过程中,dNTP的一个焦磷酸尾巴掉下来了,变成了所谓的dNMP,同时和上一个碱基连起来了。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为DNA聚合酶继续工作提供了能量。dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reversetranscriptionPCR)、Real-timePCR)中起原料作用。
2023-06-30 21:13:481

PCR技术中,dntp作用原理是什么?为什么不用脱氧核苷酸呢?

dNTPS作用是能在Taq酶的作用下与模版DNA进行复制,如果直接用脱氧核苷算的话是没有多余的两个磷酸基团的,都知道ATP含有高能磷酸键,dNTPs也含有高能磷酸键,这样就可以在PCR体系中提供能量。
2023-06-30 21:13:561

"rNTP,dNTP"有什么区别

dNTP,脱氧核糖核苷三磷酸,在生物DNA合成中起原料作用. rNTP,核糖核苷三磷酸,在生物RNA合成中起原料作用. 区别五碳糖不一样,
2023-06-30 21:14:021

什么是dNTPs,它和dNTP和什么区别

三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGTP三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸dATP三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸dTTP三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸dCTPdNTP指三磷酸碱基脱氧核苷酸,指上面任意一种。dNTP"s是它们的复数形式
2023-06-30 21:14:201

请问dNTP在PCR中发挥作用的过程是什么?

DNTP 是四种核苷酸,A、U、G、C。的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的。
2023-06-30 21:14:284

生化中的NTP和dNTP是什么意思?

N代表A U G C,核苷三磷酸。dNTP N代表A T G C 脱氧核苷三磷酸
2023-06-30 21:14:361

在DNA复制中,dNTP与dNMP分别代表什么啊?

dNTP代表三磷酸脱氧核苷酸dNMP代表磷酸脱氧核苷酸N可以是A、G嘌呤和C、T嘧啶如dGTP三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGMP磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸
2023-06-30 21:14:451

DNA在复制的时候原料为什么是dNTP,不是dNMP?

因为在 DNA 复制过程中,dNTP 的焦磷酸掉下来了,变成了 dNMP,同时和上一个碱基连起来了,发生了复制。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为 DNA 聚合酶继续工作提供了能量。拓展资料:DNA复制从起始序列开始单向或双向进行。合成DNA双螺旋的两条链是反向平行排列的,其中一条链的起始端与另一条链的末尾端平行排列在一起,每一个复制叉只有一条链是按照从尾到头的正确方向指导新链从头到尾方向合成。根据这条指导链,DNA复制持续向前合成复制叉。参考资料:百度百科,DNA复制
2023-06-30 21:14:525

荧光特异标记的四种dntp分别是哪四种颜色?

荧光特异标记的四种dNTP分别使用以下四种颜色的荧光染料进行标记:dATP(腺嘌呤)- 蓝色荧光dCTP(胞嘧啶)- 绿色荧光dGTP(鸟嘌呤)- 黄色荧光dTTP(胸腺嘧啶)- 红色荧光这种标记方式常用于各种DNA检测、测序和分析技术中,比如PCR、荧光原位杂交(FISH)等。
2023-06-30 21:15:171

请问dNTP与NTP分别指什么,两者之间的关系?

dNTP是脱氧核苷三磷酸(含脱氧核糖) NTP是核苷三磷酸(含核糖) 它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的 N的意思是碱基 比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三磷酸
2023-06-30 21:15:251

请问dNTP在PCR中发挥作用的过程是什么?

DNTP 是四种核苷酸,A、U、G、C.的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的.
2023-06-30 21:15:341

dntp有几种四种还是五种?

dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称是四种
2023-06-30 21:15:401

为什么pcr用的是dNTP,而不用dNMP呢?体内合成dna明明用的是dNMP呀?

高能磷酸键一定是有能量的,dNMP没有这两个高能磷酸键,又要消耗更多的外源能量……别的不说,能量守恒总没错吧……dNTP一定比dNMP能量高,能量高的分子不稳定,容易反应.
2023-06-30 21:15:471

dNTP中的d指的是什么?

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(三磷酸脱氧核糖核苷酸)的缩写.是dATP,dGTP,dTTP,dCTP的统称,N代表变量指代A、T、G、C、U中的一种. d:deoxy ,“脱氧”的意思.
2023-06-30 21:16:041

"rNTP,dNTP"有什么区别

dNTP,脱氧核糖核苷三磷酸,在生物DNA合成中起原料作用. rNTP,核糖核苷三磷酸,在生物RNA合成中起原料作用. 区别五碳糖不一样,
2023-06-30 21:16:111

PRC技术中dNTP中 d,T,P是什么意思?

你知道ATP么?A就是腺嘌呤,T就是英文的three,P是指phosphate 即磷酸。ATP,GTP,CTP,TTP 可以统称为 NTPd指的是deoxy 即脱氧。dNTP的全称即 三磷酸脱氧核苷酸
2023-06-30 21:16:183

为什么pcr用的是dNTP,而不用dNMP呢?体内合成dna明明用的是dNMP呀?

高能磷酸键一定是有能量的,dNMP没有这两个高能磷酸键,又要消耗更多的外源能量……别的不说,能量守恒总没错吧……dNTP一定比dNMP能量高,能量高的分子不稳定,容易反应.
2023-06-30 21:16:251

pcr反应中为什么使用dntp而不是脱氧核苷酸

dNTP既是复制的原料,又为链延长的过程提供能量。
2023-06-30 21:16:332

PCR中Mg离子和dNTP需要注意哪些问题

mg在体系中的浓度一般是1-5mMol/L,dNTPs一般200uMol/L,四种dNTP浓度要相等镁离子是taq酶的辅因子,但浓度太高会产生非特异性扩增dNTPs太多会结合镁离子,所以二者都要适量dNTPs要4度保存
2023-06-30 21:16:421

DNA合成仪合成DNA片段时的原料为什么是dNTP,而不是dNMP,合成的时候,那两个磷酸基团怎么去掉?

这个问题问得好有模板的DNA和镁离子存在时,在DNA聚合酶的催化下,由游离的3-OH对dNTP的α磷酸发动亲核攻击形成磷酸二酯键,生成DNA,同时释放焦磷酸PPi,焦磷酸水解放能,推动反应向右进行
2023-06-30 21:16:512

dNTP中含DNA特有碱基的该种物质是什么?

dTTP(脱氧胸苷三磷酸)。因为胸腺嘧啶是DNA特有的碱基,所以dNTP中的N应该就是T。dTTP是DNA复制的直接前体,在细胞中一般不在其他地方用作供能物质。在人工合成中,一般用来作PCR、DNA测序、DNA标记等。
2023-06-30 21:17:011

什么是同源重组, PCR扩增的原理是什么?

无明显同源性。 引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是: 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。 ①变性温度与时间:变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下,93℃~94℃lmin足以使模板DNA变性,若低于93℃则 需延长时间,但温度不能过高,因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性,就会导致PCR失败。 ②退火(复性)温度与时间:退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃~60℃,可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度: Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T) 复性温度=Tm值-(5~10℃) 在Tm值允许范围内, 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合,提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60sec,足以使引物与模板之间完全结合。 ③延伸温度与时间:Taq DNA聚合酶的生物学活性: 70~80℃ 150核苷酸/S/酶分子 70℃ 60核苷酸/S/酶分子 55℃ 24核苷酸/S/酶分子 高于90℃时, DNA合成几乎不能进行。 PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够 的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。 循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。 PCR反应特点 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析 PCR产物是否为特异性扩增 ,其结果是否准确可靠,必须对其进行严格的分析与鉴定,才能得出正确的结论。PCR产物的分析,可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。 凝胶电泳分析:PCR产物电泳,EB溴乙锭染色紫外仪下观察,初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致,特别是多重PCR,应用多对引物,其产物片断都应符合预讦的大小,这是起码条件。 琼脂糖凝胶电泳: 通常应用1~2%的琼脂糖凝胶,供检测用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳:6~10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中,可用于科研及检测分析。 酶切分析:根据PCR产物中限制性内切酶的位点,用相应的酶切、电泳分离后,获得符合理论的片段,此法既能进行产物的鉴定,又能对靶基因分型,还能进行变异性研究。 分子杂交:分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据,也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。 Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。 斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。 核酸序列分析:是检测PCR产物特异性的最可
2023-06-30 21:17:411

DNA复制过程,引物合成酶的底物是dNTP 还是 NTP??

楼上说的对,复制过程的起始需要引物合成酶先合成一小段RNA作为引物,底物是NTP。
2023-06-30 21:17:482

dntp在室温下放置约16小时,影响大吗

不要紧,dnTP这种东西,就是脱氧核苷酸嘛,性状还是比较稳定的。
2023-06-30 21:17:551

酶、模版DNA、引物、dNTP都存放在-20吗?什么是避免反复冻融呀,

酶最好一直放在-20,现用现取,用完再放回-20.引物分贮液和使用液.贮液放-20 ;其他如果常用放在4就行.不常用可小量分装,每份大概就是你常用的一次的量,用时拿出一管就ok,如果一管量大,一次用不完,剩余又冻回-20,反复进行不就是反复冻融了吗.
2023-06-30 21:18:011

酶、模版DNA、引物、dNTP都存放在-20吗?什么是避免反复冻融呀,谢谢!

一般都需要放在—20.反复融冻就是 拿出来融化了 又放回去,很多次这样,酶会失活、DNA会降解。但我们又要做实验用,就需要常用的酶或引物分装成小管 十几次或者20几次用完。其他放到-80保存。
2023-06-30 21:18:123

书上说:Sanger法测序,其中的底物dNTP每个测序体系只要标记一种。 这是不是讲,每个测序体里面除了某一

sanger测序是在测序反应中加入四种正常dNTP底物,同时加入四种带有荧光标记的ddNTP。
2023-06-30 21:18:202

dNTP聚合后在什么酶的作用下催化成脱氧核苷酸长链

DNA连接酶
2023-06-30 21:18:271

解释个概念

聚合酶链式反应(PCR):扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。在该反应中,使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物,进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性,引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现 ,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现,但由于此酶不耐高温,高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应。现今所使用的酶(简称 Taq polymerase), 则是于1976年从温泉中的细菌(Thermus aquaticus)分离出来的。它的特性就在于能耐高温,是一个很理想的酶,但它被广泛运用则于80年代之后。PCR最初的原始雏形概念是类似基因修复复制,它是于1971年由 Dr. Kjell Kleppe 提出。他发表了第一个单纯且短暂性基因复制(类似PCR前两个周期反应)的实验。而现今所发展出来的PCR则于1983由 Dr. Kary B. Mullis发展出的,Dr. Mullis当年服务于PE公司,因此PE公司在PCR界有着特殊的地位。Dr. Mullis 并于1985年与 Saiki 等人正式表了第一篇相关的论文。此后,PCR的运用一日千里,相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术。Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。 〔PCR原理〕DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。〔PCR步骤〕标准的PCR过程分为三步:1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下, 氢键断裂,形成单链DNA2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍。现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度。〔PCR检测〕PCR反应扩增出了高的拷贝数,下一步检测就成了关键。荧光素(溴乙锭)染色凝胶电泳是最最常用的检测手段。电泳法检测特异性是不太高的,因此引物两聚体等非特异性的杂交体很容易引起误判。但因为其简捷易行,成为了主流检测方法。近年来以荧光探针为代表的检测方法,有逐渐取代电泳法的趋势。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction ,PCR)三步:1 变性:模板DNA加热变性2 退火 引物与它的靶序列发生退火,引物DNA量多,使引物和模板在局部形成杂交链3 延伸 4种dNTP 与 Mg2+ 存在的条件下,DNA合成酶催化以引物为起始点,按5"-3"方向进行延伸。上面三步为一个循环,可使拷贝数到达2*E-6-2*E-7PCR 产物一段双链DNA,是由它的末端引物的5"端决定的。PS:1.首轮扩增,其产物是大小不均一的DNA分子。长度应大于两引物之间的长度。在第二个循环中,如图3,由于5"固定,其产物长度就由等于两引物之间的长度。所以几十个循环后就会产生大量的两引物之间序列。引物设计:1,长度15~30个核苷酸,最多到50个核苷酸左右。(50?为什么?反正太长也没有必要)2, 尽量避免嘌呤和嘧啶堆积的现象。(其实有时很难避免,不是很重要)。3,引物内部不应该形成二级结构,如果引物中有酶切位点时,就会出现引物二聚体。(一般不是很重要)PCR的反应条件1,dNTP浓度过高会加快反映速度,但同时还可以增加碱基的错误掺入率。2, 引物浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增。3,TaqDNA聚合酶浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增,低则合成产物量减少。TaqDNA聚合酶无校正功能,掺入错误率达2*E-4个核苷酸,一个30个循环的扩增反应0.1%-0.25%总错误率。4, 在90~95度下可使整个基因组的DNA变性为单链。一般94~95度30~60s。时间过长使TaqDNA聚合酶失活和dNTP破坏增多。5,DNA很快冷却到40~60度使引物和模板结合。引物长度在15~25时退火温度Tm=4(G+c)+(A+T),一般在45~55度,温度低容易退火但特异性低;温度高,不容易退火但特异性高。退火时间30秒。6,延伸温度一般在70~75度这是TaqDNA聚合酶活性最高(150个/S),当引物在16个碱基以下时可采用缓慢升高温度到70~75度的方法,使在低温下就开始合成。一般<1KB时间1分钟即可。当〈1KB时在较后的循环中延长扩增时间。7循环次数25~30次。无产物时:1,取10ul扩增混合液作模板在进行PCR扩增。2,增加TaqDNA聚合酶浓度3,增加循环次数4,降低退火温度5,加靶DNA量
2023-06-30 21:18:557

DNA聚合酶作用部位是什么

DNA聚合酶作用部位是磷酸二酯键。1、聚合作用:在引物RNA-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令,即A与T,C与G的配对原则,逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端,逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;2、3"→5""外切酶活性(校对作用):这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用。当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸,可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性;3、5"→3"外切酶活性(切除修复作用):该活性是从5"→3"方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用),主要产生5"—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。扩展资料: 1、DNA聚合酶可以在每一个新掺入的核苷酸与模板链之间进行仔细地监测。只有在配对正确的情况下,它才会催化核苷酸之间聚合形成磷酸二酯键。2、即使当DNA聚合酶的监测偶然失误,掺入了错误的核苷酸,它还能通过校读的功能纠正错误。参考资料来源:百度百科-DNA聚合酶
2023-06-30 21:19:103

普通菌液pcr的20 微升体系怎么配。需要dNTP吗?

100uL体系:水 85uL ,10*buffer 10uL ,F引物 1uL ,R引物 1uL ,dNTP 1uL ,模板 1uL ,rTaq酶 1uL。按这个100uL体系配成20uL体系就行。
2023-06-30 21:19:311

PCR技术过程中能量除来自热能以外,在DNA的延伸过程所需能量来自dNTP中的能量,是这样的吗?

能量也是由底物dNTP供给的,底物dNTP在延伸是会断裂一个高能磷酸键,
2023-06-30 21:19:392

dntp一般多少浓度

PCR产物浓度主要取决于模版的量和引物的量.如果模版属于稀有基因,那么产物浓度就不会高.而且你不要回收后才测浓度,PCR结束后就可以跑电泳或者测OD值都很快的. 另外,计算PCR的产物不要光看浓度,因为你回收后可以用100ulTE去溶解产物,也可以用50.
2023-06-30 21:19:541

高中生物PCR技术中出现的dTNP是什么意思?请帮我具体解释一下。

dNTPd代表五碳糖是脱氧核糖N代表A,G,C,TT代表3个PCR合成中的原料是dATP,dGTP,dCTP,dTTP,相应的称呼就是脱氧三磷酸____苷
2023-06-30 21:20:023

PCR中各个试剂的保存方法

酶一定要放在-20℃保存保存,这是常识,没有任何争议了。Buffer可以反复冻融,推荐-20℃保存,但是4℃保存也没有任何问题。dNTP的保存一定要注意,千万不要听楼上的山寨回答。首先,它需要严格-20℃保存(其通常stock solution是10mM),但是,当dNTP反复冻融约100次以上时,它会逐渐失去活性,无法与模板结合。所以,我建议在使用dNTA前,将其进行分装,从而达到更好的活性效果。
2023-06-30 21:20:114

核苷酸为什么用NTP表示 生物化学上用NTP 表示核苷酸 dNTP为脱氧核苷酸 为什么是T? 而不是M?

虽然核酸单体是含有一个磷酸,但是合成时原料是含有三个磷酸的,原因是它们是富于能量的化合物,参与合成过程同时能提供大量能量
2023-06-30 21:20:193

PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1mL.

"反应总体积20微升,加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM"。这不有了吗?不用计算那么精确。加0.5-1都行
2023-06-30 21:20:262

引物与模板浓度的关系

PCR (聚合酶链式反应)反应包括三个基本步骤,即:模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分,依次为:引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。1、引物引物是PCR 特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板 DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸 的成串排列。④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3"端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。⑤引物3"端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR 失败。⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子 克隆很有好处。⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。  引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。2、酶目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。3、dNTPdNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。dNTP储存液:dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP必须等浓度配合以减少错配误差。dNTP使用浓度:在PCR反应中,使用低dNTP浓度,可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或10pmol/L的400bp序列。使用低dNTP浓度(每种dNTP浓度为2μmol/L),能够高度灵敏地(1/107)扩增ras基因点突变的等位基因。4、模板模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。SDS的主要功能是:溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。5、Mg2+浓度Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。引物是PCR特异性反应的关键,不好的引物严重影响实验的质量,好的引物可以事倍功半;酶的选择一般是看实验的目的,例如克隆长片段,可能就需要高保真的聚合酶;dNTP浓度和Mg2+浓度高了会影响PCR反应特异性。DNA模板中还有蛋白质也会严总影响PCR质量,因此上述5个基本成分质量和浓度必须合理。
2023-06-30 21:20:331

DNA聚合酶具备几种活性?用途是什么?

[1]聚合作用:在引物RNA"-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3"-OH与5"-PO4结合生成磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点,则不能与模板配对,无法改变酶的构象而被3"-5"外切酶活性位点所识别并切除之。   [2]3"→5"外切酶活性──校对作用:这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3"→5"外切酶活性所降解。如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明温度升高使DNA生长链3"末端与模板发生分离的机会更多,因而降解作用加强。当向反应体系加入dNTP,而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制,并继续进行DNA的合成。由此推论,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。   [3]5"→3"外切酶活性──切除修复作用:5"→3"外切酶活性就是从5"→3"方向水解DNA生长链前方的DNA链,主要产生5"-脱氧核苷酸。这种酶活性只对DNA上配对部分(双链)磷酸二酯键有切割活力作用,方向是5"→3"。每次能切除10个核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5"→3"外切酶活力达10倍以上。因此,这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。对冈崎片段5"末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性。   [4]焦磷酸解作用:DNApolⅠ的这种活性可以催化3"末端焦磷酸解DNA分子。这种作用就是无机焦磷酸分解DNA生长链,可以认为是DNA聚合作用的逆反应,而且这种水解DNA链作用需要有模板DNA的存在。(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA   [5]焦磷酸交换作用:催化dNTP末端的PPi同无机焦磷酸的交换反应。反应式为32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA
2023-06-30 21:20:432

乙烯雌酚的说明书

【别名】 雌性素;人造雌性素;人造女性素;人造求偶素;乙底酚;乙酚;乙烯雌酚 ,乙菧酚【外文名】Diethylstilbestrol 【药理作用】 为人工合成的非甾体雌激素物质,能产生与天然雌二醇相同的所有药理与治疗作用。 主要用于雌激素低下症及激素平衡失调引起的功能性出血、闭经,还可用于死胎引产前,以提高子宫肌层对催产素的敏感性,以及前列腺癌的故息疗法。 【适应症】 用于卵巢功能不全或垂体功能异常引起的各种疾病、闭经、子宫发育不全、功能性子宫出血、绝经期综合征、老年性阴道炎及退乳等。 【用量用法】 1.闭经:口服小剂量可刺激垂体前叶分泌促性腺激素,1日不超过0.25mg。 2.用于人工月经周期:每日服0.25mg,连服20日,待月经后再用同法治疗,共3周期。 3.用于月经周期延长及子宫发育不全,每日服0.1~0.2mg,持续6月,经期停服。 4.治疗功能性子宫出血:每晚服0.5~1mg,连服20日。 5.用于绝经期综合征:每日服0.25mg,症状控制后改为每日0.1mg(如同时每日舌下含服甲基睾丸素5~10mg,效果好)。 6.退乳:每次服5mg,1日2~3次,连服3日;或肌注每日1次4mg,连用3~5日,同时紧束双乳,少进液体。 7.老年性阴道炎:阴道噻药,每晚塞入1~2片(每片0.2mg),共用7日。 8.配合手术用于前列腺癌:每日6~10mg,3次分服,连用2~3个月。 9.用于因子宫发育不良及子宫颈分泌物粘稠所致不育症:以小剂量促使宫颈粘液稀薄,精子易透入,于月经后每日服0.1mg,共15日,1疗程为3~6个月。 10.用于稽留流产(怀孕7个月以内死胎,经2个月或2个月以上仍未娩出):每次服5mg,1日3次,5~7日为1疗程,停药5日,如无效可重复1疗程。 【注意事项】 1.可有恶心、呕吐、厌食、头痛等不良反应。长期应用可使子宫内膜增生过度而导致子宫出血与子宫肥大。 2.应按指定方法服药,中途停药可导致子宫出血。 3.肝、肾疾病病人及孕妇禁用。 4.癌症病人(除前列腺癌病人)忌用。 5.少数病人有心窝部疼痛。还有性欲增强。 6.乳腺病、子宫内膜炎、出血倾向及更年期滤泡过多期禁用。 7.长期大量应用可诱发生殖系统恶性肿瘤;孕期用药有致胎儿先天缺陷危险,女婴成年后发生阴道腺病或宫颈癌(DES综合征)的危险增加。 【规格】 片剂:每片0.1mg、0.25mg、0.5mg、1mg。 针剂:每支1mg(1ml)、2mg( 1ml).
2023-06-30 21:18:403

全国公立三本大学有哪些?

公办三本也就说我们常说的独立学院,以下是独立学院的名单(截止2014年4月9日):北京市  1.首都师范大学科德学院  2.北京工商大学嘉华学院  3.北京邮电大学世纪学院  4.北京工业大学耿丹学院  5.北京第二外国语学院中瑞酒店管理学院天津市  1.南开大学滨海学院  2.天津外国语大学滨海外事学院  3.天津体育学院运动与文化艺术学院  4.天津商业大学宝德学院  5.天津医科大学临床医学院  6.北京科技大学天津学院  7.天津师范大学津沽学院  8.天津理工大学中环信息学院  9.天津大学仁爱学院  10.天津财经大学珠江学院河北省  1.河北联合大学轻工学院  2.河北工程大学科信学院  3.华北电力大学科技学院  4.河北科技大学理工学院  5.河北大学工商学院  6.河北师范大学汇华学院  7.河北医科大学临床学院  8.河北经贸大学经济管理学院  9.河北工业大学城市学院  10.燕山大学里仁学院  11.石家庄铁道大学四方学院  12.石家庄经济学院华信学院  13.河北农业大学现代科技学院  14.河北联合大学冀唐学院  15.中国地质大学长城学院  16.北京中医药大学东方学院  17.北京交通大学海滨学院山西省  1.山西大学商务学院  2.太原理工大学现代科技学院  3.山西农业大学信息学院  4.山西师范大学现代文理学院  5.中北大学信息商务学院  6.太原科技大学华科学院  7.山西医科大学晋祠学院  8.山西财经大学华商学院内蒙古自治区  1.内蒙古大学创业学院  2.内蒙古师范大学鸿德学院辽宁省  1.大连理工大学城市学院  2.沈阳航空航天大学北方科技学院  3. 渤海大学文理学院  4. 大连工业大学艺术与信息工程学院  5. 辽宁科技大学信息技术学院  6. 中国医科大学临床医药学院  7. 辽宁石油化工大学顺华能源学院  8. 辽宁师范大学海华学院  9. 辽宁中医药大学杏林学院  10. 辽宁医学院医疗学院  11. 大连医科大学中山学院  12. 沈阳工业大学工程学院  13. 沈阳化工大学科亚学院 吉林省  1.吉林建筑大学城建学院  2.长春工业大学人文信息学院  3. 长春理工大学光电信息学院  4. 吉林财经大学信息经济学院  5. 东北师范大学人文学院  6. 吉林师范大学博达学院  7. 长春大学旅游学院黑龙江省  1. 东北农业大学成栋学院  2. 黑龙江工程学院昆仑旅游学院上海市  1.上海外国语大学贤达经济人文学院  2.上海师范大学天华学院江苏省  1.东南大学成贤学院  2.中国矿业大学徐海学院  3.南京大学金陵学院  4.南京理工大学紫金学院  5.南京航空航天大学金城学院  6.中国传媒大学南广学院  7.南京理工大学泰州科技学院  8.南京师范大学泰州学院  9.南京工业大学浦江学院  10.南京师范大学中北学院  11.南京医科大学康达学院  12.南京中医药大学翰林学院  13.南京信息工程大学滨江学院  14.苏州大学文正学院  15.苏州大学应用技术学院  16.苏州科技学院天平学院  17.江苏大学京江学院  18.扬州大学广陵学院  19.江苏师范大学科文学院  20.南京邮电大学通达学院  21.南京财经大学红山学院  22.江苏科技大学南徐学院  23.常州大学怀德学院  24.南通大学杏林学院  25.南京审计学院金审学院浙江省  1.浙江大学城市学院  2.浙江大学宁波理工学院  3.浙江工业大学之江学院  4.浙江师范大学行知学院  5.宁波大学科学技术学院  6.杭州电子科技大学信息工程学院  7.浙江理工大学科技与艺术学院  8.浙江海洋学院东海科学技术学院  9.浙江农林大学天目学院  10.温州医科大学仁济学院  11.浙江中医药大学滨江学院  12.杭州师范大学钱江学院  13.湖州师范学院求真学院  14.绍兴文理学院元培学院  15.温州大学瓯江学院  16.浙江工商大学杭州商学院  17.中国计量学院现代科技学院  18.浙江财经大学东方学院  19.嘉兴学院南湖学院  20.温州大学城市学院  21.同济大学浙江学院  22.上海财经大学浙江学院安徽省  1.安徽大学江淮学院  2.安徽师范大学皖江学院  3.安徽农业大学经济技术学院  4.安徽医科大学临床医学院  5.安徽工业大学工商学院  6.安徽财经大学商学院  7.淮北师范大学信息学院  8.安徽建筑大学城市建设学院  9.安徽工程大学机电学院  10.阜阳师范学院信息工程学院  11.河海大学文天学院福建省  1.厦门大学嘉庚学院  2.福州大学阳光学院  3.福建师范大学协和学院  4.福建农林大学东方学院  5.福建师范大学闽南科技学院  6.华侨大学厦门工学院  7.集美大学诚毅学院  8.福州大学至诚学院  9.福建农林大学金山学院江西省  1.南昌大学科学技术学院  2.江西农业大学南昌商学院  3.江西师范大学科学技术学院  4.华东交通大学理工学院  5.江西理工大学应用科学学院  6.东华理工大学长江学院  7.南昌航空大学科技学院  8.江西中医药大学科技学院  9.江西财经大学现代经济管理学院  10.赣南师范学院科技学院  11.景德镇陶瓷学院科技艺术学院  12.江西科技师范大学理工学院  13.南昌大学共青学院山东省  1.中国石油大学胜利学院  2.烟台大学文经学院  3.青岛理工大学琴岛学院  4.山东科技大学泰山科技学院  5.山东财经大学燕山学院  6.青岛农业大学海都学院  7.曲阜师范大学杏坛学院  8.山东财经大学东方学院  9.山东师范大学历山学院  10.聊城大学东昌学院  11.济南大学泉城学院  12.北京电影学院现代创意媒体学院河南省  1.河南理工大学万方科技学院  2.河南大学民生学院  3.中原工学院信息商务学院  4.安阳师范学院人文管理学院  5.河南师范大学新联学院  6.新乡医学院三全学院  7.河南科技学院新科学院  8.信阳师范学院华锐学院湖北省  1.华中科技大学武昌分校  2.华中科技大学文华学院  3.中南财经政法大学武汉学院  4.武汉理工大学华夏学院  5.湖北大学知行学院  6.三峡大学科技学院  7.武汉科技大学城市学院  8.湖北工业大学工程技术学院  9.湖北工业大学商贸学院  10..武汉工程大学邮电与信息工程学院  11.武汉纺织大学外经贸学院  12.江汉大学文理学院  13.湖北汽车工业学院科技学院  14.湖北经济学院法商学院  15.武汉体育学院体育科技学院  16.湖北师范学院文理学院  17.湖北工程学院新技术学院  18.湖北民族学院科技学院  19.湖北医药学院药护学院  20.湖北文理学院理工学院  21.中国地质大学江城学院  22.长江大学文理学院  23.长江大学工程技术学院  24.华中师范大学武汉传媒学院  25.华中农业大学楚天学院  26.武汉大学珞珈学院湖南省  1.湖南师范大学树达学院  2.湖南商学院北津学院  3.中南林业科技大学涉外学院  4.湖南农业大学东方科技学院  5.长沙理工大学城南学院  6.湖南科技大学潇湘学院  7.湖南工业大学科技学院  8.湘潭大学兴湘学院  9.南华大学船山学院  10.湖南文理学院芙蓉学院  11.湖南理工学院南湖学院  12.吉首大学张家界学院  13.湖南工程学院应用技术学院  14.湖南中医药大学湘杏学院  15.衡阳师范学院南岳学院广东省  1.北京师范大学珠海分校  2.电子科技大学中山学院  3.华南师范大学增城学院  4.广东工业大学华立学院  5.广州大学松田学院  6.北京理工大学珠海学院  7.吉林大学珠海学院  8.东莞理工学院城市学院  9.中山大学新华学院  10.华南农业大学珠江学院  11.广州大学华软软件学院  12.广东技术师范学院天河学院  13.中山大学南方学院  14.华南理工大学广州学院  15.广东财经大学华商学院  16.广东海洋大学寸金学院  17.广东外语外贸大学南国商学院广西壮族自治区  1.广西师范大学漓江学院  2.桂林电子科技大学信息科技学院  3.桂林理工大学博文管理学院  4.广西科技大学鹿山学院  5.广西师范学院师园学院  6.广西民族大学相思湖学院  7.广西大学行健文理学院  8.广西中医药大学赛恩斯新医药学院  9.北京航空航天大学北海学院重庆市  1.四川外国语大学重庆南方翻译学院  2.重庆师范大学涉外商贸学院  3.重庆工商大学融智学院  4.重庆工商大学派斯学院  5.重庆邮电大学移通学院  6.重庆大学城市科技学院四川省  1.成都理工大学工程技术学院  2.成都信息工程学院银杏酒店管理学院  3.四川师范大学文理学院  4.四川师范大学成都学院  5.四川外国语大学成都学院  6.电子科技大学成都学院  7.四川大学锦城学院  8.西南科技大学城市学院  9.四川音乐学院绵阳艺术学院  10.四川大学锦江学院  11.西南财经大学天府学院  12.西南交通大学希望学院贵州省  1.贵州大学科技学院  2.贵州大学明德学院  3.贵州师范大学求是学院  4.遵义医学院医学与科技学院  5.贵阳中医学院时珍学院  6.贵州财经大学商务学院  7.贵州民族大学人文科技学院  8.贵阳医学院神奇民族医药学院云南省  1.云南大学滇池学院  2.云南师范大学商学院  3.云南大学旅游文化学院  4.昆明医科大学海源学院  5.云南艺术学院文华学院  6.云南师范大学文理学院  7.昆明理工大学津桥学院陕西省  1.西安交通大学城市学院  2.西北大学现代学院  3.西安建筑科技大学华清学院  4.西安财经学院行知学院  5.陕西科技大学镐京学院  6.西安工业大学北方信息工程学院  7.延安大学西安创新学院  8.西安电子科技大学长安学院  9.西北工业大学明德学院  10.西安科技大学高新学院  11.长安大学兴华学院  12.西安理工大学高科学院甘肃省  1.西北师范大学知行学院  2.兰州商学院陇桥学院  3.兰州交通大学博文学院  4.兰州商学院长青学院  5.兰州理工大学技术工程学院宁夏回族自治区  1.宁夏大学新华学院  2.中国矿业大学银川学院青海省  1.青海大学昆仑学院新疆维吾尔自治区  1.新疆大学科学技术学院  2.新疆农业大学科学技术学院  3.新疆财经大学商务学院  4.新疆医科大学厚博学院  5.石河子大学科技学院
2023-06-30 21:18:4311

蒙古的金帐汗国的来历?

拔都将西北亚之地分封其长兄斡儿答,成立白帐汗国,其弟昔班,是西征一路主将,征服了匈牙利,拔都将南乌拉尔封给他,建立蓝帐汗国。1255年,拔都去世。1257年,其弟别儿哥成为金帐大汗。别尔哥曾帮助阿里不哥与忽必烈交战。忽必烈取胜后,别儿哥又长期与忽必烈的兄弟之国伊儿汗国作战。别儿哥军还出征波兰和保加利亚,皆获全胜。他和马木鲁克朝及塞尔柱帝国还有拜占庭帝国成对付西方国家和伊儿汗国的同盟。1266年,别儿哥去世,拔都的曾孙忙哥铁木尔即位。他统治至1280年,出于维护蒙古传统的原因,他和别儿哥一样,继续反对忽必烈,帮助窝阔台汗海都作战。在战斗中,1277年,金帐军曾俘获了忽必烈的儿子,后虽交还元帝国,但从此金帐汗国也就独立发展了。1280-1287年,忙哥铁木尔之弟脱脱蒙哥为金帐汗。他是个虔诚的穆斯林。蒙古老英雄。别尔哥的大将,也是他的侄孙那海,大权独揽,并屡次击败忙哥铁木尔后代的反抗,后来,忙哥铁木尔的一个儿子脱脱再次起兵反抗。1297年,在顿河战役中,脱脱被老英雄那海击败。但在1299年的第聂伯河战役中,那海被决定性地击败了,被脱脱军中的俄罗斯兵所杀。1312年,脱脱去世,其侄乌兹别克汗即金帐汗位。乌兹别克汗喜用莫斯科大公作为他的鹰犬,去收拾汗国内敢不听话的俄罗斯小国。莫斯科公国遂取得较其他俄罗斯小国为高的地位。金帐汗国-国家衰亡 1360年后,金帐汗国陷于混乱,术赤的后人们为争夺金帐汗位打得不可开交。一个金帐汗王马麦汗于1361-1380年成为汗国的实际统治者。蒙古人的内乱,使得诸俄罗斯小国开始叛乱。正在这时,白帐汗国脱脱迷失在帖木尔帝国的支持下,夺得白帐汗位。脱脱迷失是拔都和别儿哥的弟弟秃海铁木尔的后裔。1378年,脱脱迷失汗倾朝出动,出征金帐汗国。马麦汗陷于俄罗斯人和白帐汗的两面夹击之下。在黑海北岸,马麦汗被脱脱迷失击败,死于克里米亚。脱脱迷失遂出征诸罗斯诸国,将诸国再次征服,其中曾击败马麦汗的莫斯科大公国于1382年被彻底破坏。汗国境外企图入侵的立陶宛人也被脱脱迷失汗击败。金帐汗国重归统一。此后,脱脱迷失与铁木尔发生冲突,双方于1387-1398年数次展开大战。铁木尔大军两次攻入东欧,将金帐核心地区大肆破坏,第二次尤为严重,首都萨莱被焚毁。
2023-06-30 21:18:441

朱元璋掀翻元朝之后,钦察汗国和……?

  看一看1368年朱元璋建立明朝的时候钦察汗国和伊利汗国的情况吧:  伊利汗国:  ……1335年不赛因死后,伊利汗国迅速瓦解,权臣、统将各自拥立傀儡可汗,互相攻杀。1355年,钦察汗国札尼别汗攻入桃里寺,杀操纵朝政的出班后人,伊利汗努失儿完不知所终。在纷乱中,一些地方贵族也乘机独立,形成割据局面。据有报达的蒙古贵族哈散(札剌亦儿氏)于1340年自立为汗。1358年,其子兀洼思汗兼并阿塞拜疆等省地,移都于桃里寺,史称札剌亦儿朝,14世纪末被帖木儿帝国所灭。  钦察汗国:  ……从1357年札尼别被杀起,开始了汗国的一系列内讧斗争。1357~1380年间,钦察汗更替了二十多人。六七十年代时,万夫长马买操纵傀儡汗掌握了汗国实权,控制了伏尔加河以西地区。1371年以后,斡罗思各公国乘汗国内讧停止纳贡。1380年,马买远征斡罗思,被以莫斯科为首的斡罗思各公国联军击溃于库里科沃原野。同年,白帐汗脱脱迷失击败马买,控制了钦察汗国的主要疆土,成了钦察汗,从此钦察汗全都出自白帐系。1382年,他攻占莫斯科,迫斡罗思重新纳贡。脱脱迷失是在中亚统治者帖木儿支持下得居汗位的,势力强大后即同帖木儿展开斗争。1389~1395年,经过三次大战,帖木儿击溃了脱脱迷失,占领并破坏了伏尔加地区许多城市,掠夺了克里木等地各城,使汗国的经济从此衰落。  14世纪90年代后期起,白帐汗国那颜也迪古操纵傀儡汗把钦察汗国大部分疆土统一起来。他于1399年打败立陶宛,遏止了立陶宛的扩张。1408年,进攻斡罗思,毁掉了许多城市,但没能攻下莫斯科。1410~1412年内讧时,他丧失权力逃走。由于术赤后王和贵族各有领地,各自掌握军队,加上占有经济发达地区的贵族的实力不断增长,因而,钦察汗不能建立强固的中央集权,孕育着内讧、分裂的因素。蒙古贵族对外不断进行掠夺战争,内部又互相争斗,严重阻碍了社会经济的发展,使汗国走向衰落和瓦解。  15世纪20年代初分裂出了西伯利亚汗国,中叶又分裂出了喀山汗国(1445~1552)、克里木汗国(1443~1783)、阿斯特拉罕汗国(1460~1556)等独立国,钦察汗国只剩下有限疆土,被称为大帐汗国。1480年,大帐汗阿黑麻率军进攻斡罗思,但慑于伊凡三世所率莫斯科军队的强大,从乌格拉河不战而退。1502年,大帐汗国灭亡。
2023-06-30 21:18:364

文科大学排名榜

1 北京大学2 中国人民大学3 上海交通大学4 南京大学5 武汉大学6 中山大学7 武汉大学8 厦门大学9 四川大学10 中国传媒大学11 山东大学12 东南大学13 北京理工大学14 重庆大学15 中南财经政法大学16 西南财经大学17 华中师范大学18 西南大学19 宁波大学20 华中农业大学21 武汉理工大学22 浙江工商大学23 大连理工大学盘锦校区24 福州大学25 南昌大学26 湖北大学27 云南大学28 江西财经大学29 中南民族大学30 上海立信会计学院31 青岛大学32 湘潭大学33 上海海事大学34 重庆邮电大学35 中国农业大学36 延边大学37 南方医科大学38 贵州大学39 石河子大学40 西安外国语大学41 西北政法大学42 集美大学43 湖南科技大学44 上海师范大学45 湖北经济学院46 天津商业大学47 安徽财经大学48 石家庄经济学院49 西南民族大学50 长江大学51 河北大学52 江西师范大学53 山西财经大学54 重庆理工大学55 贵州财经大学56 西南林业大学57 河北金融学院58 贵州财经大学59 湖南农业大学60 大连理工大学盘锦校区61 河北师范大学62 海南师范大学63 重庆三峡学院64 南昌航空大学65 湖北师范学院66 湖南工程学院67 闽南师范大学68 西南科技大学69 大连民族学院70 合肥学院71 长治学院72 湖北工程学院73 华北水利水电大学74 西北师范大学75 北方民族大学76 湖北科技学院77 淮北师范大学78 哈尔滨师范大学79 沈阳理工大学80 衡阳师范学院81 河西学院82 陕西理工学院83 太原工业学院84 燕山大学里仁学院85 浙江工商大学杭州商学院86 大连理工大学盘锦校区87 重庆工商大学融智学院88 湖南工程学院应用技术学…89 嘉兴学院南湖学院90 江西农业大学南昌商学院
2023-06-30 21:18:321