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高中生物PCR技术中出现的dTNP是什么意思?请帮我具体解释一下。

2023-06-30 22:39:43
TAG: 生物
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一自萧关起战尘

dNTP

d代表五碳糖是脱氧核糖

N代表A,G,C,T

T代表3个

PCR合成中的原料是dATP,dGTP,dCTP,dTTP,相应的称呼就是脱氧三磷酸____苷

苏萦

dNTP

d代表五碳糖是脱氧核糖

N代表A,G,C,T

T代表3个

PCR合成中的原料是dATP,dGTP,dCTP,dTTP,相应的称呼就是脱氧三磷酸?苷,为什么加这些直接不加脱氧核糖核苷酸,因为合成过程需要能量,加以上原料既提供了脱氧核苷酸,又提供了能量(不知有没有发现,其中一个是dATP,很像ATP,里面同样有高能磷酸键可供能)

北有云溪

dNTP吧。。。 就是ATCG 合成DNA链的原料

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dntp是什么意思呢?

dNTP是脱氧核苷三磷酸百(含脱氧核糖);NTP是核苷三磷酸(含核糖)。它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的,N的意思是碱基,比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三度磷酸。在DNA复制过程中,dNTP的一个焦磷酸尾巴掉下来了,变成了所谓的dNMP,同时和度上一个碱基连起来了。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为DNA聚合酶继续知工作提供了能量。储存液dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP 必须等浓度配合以减少错配误差。使用浓度在PCR反应中,使用低dNTP浓度, 可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl 的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或 10pmol/L 的400bp序列。
2023-06-30 21:12:431

dntp是什么

dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,dUTP等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-timePCR)中起原料作用。
2023-06-30 21:12:581

dntp是什么?

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reverse transcription PCR)、Real-time PCR)中起原料作用。相关信息:G和C碱基之间存在三个氢键,但A和T碱基之间仅有两个氢键。A和T之间只有两个形式,因为腺嘌呤碱基的碳2比其附着的氢具有更少的电负性,因此不会在其上产生δ负电荷,这意味着胸腺嘧啶的碳2上的氧不能与其形成氢键。氢。因此,这意味着需要更多的热能来使DNA变性,这比富含AT的DNA更富含GC。
2023-06-30 21:13:051

分子生物学中dNDP是什么

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP, dGTP, dTTP, dCTP,dUTP等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA、RNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR、Real-time PCR)中起原料作用。
2023-06-30 21:13:203

dntp是什么分子生物?

dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reversetranscriptionPCR)、Real-timePCR)中起原料作用。dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中最初的贮存液可稀释到10mol/L分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20200μmol/L之间。4种dNTP必须等浓度配合以减少错配误差。
2023-06-30 21:13:271

dNTP与NTP

dNTP是脱氧核苷三磷酸(含脱氧核糖);NTP是核苷三磷酸(含核糖)。它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的,N的意思是碱基,比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三磷酸。扩展资料:使用储存液dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP 必须等浓度配合以减少错配误差。使用浓度在PCR反应中,使用低dNTP浓度, 可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl 的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或 10pmol/L 的400bp序列。
2023-06-30 21:13:361

生化中的NTP和dNTP是什么意思

DNA在复制的时候原料是dNTP的原因是:在DNA复制过程中,dNTP的一个焦磷酸尾巴掉下来了,变成了所谓的dNMP,同时和上一个碱基连起来了。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为DNA聚合酶继续工作提供了能量。dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称,N是指含氮碱基,代表变量指代A、T、G、C、U等中的一种。在生物DNA合成中,以及各种PCR(RT-PCR(reversetranscriptionPCR)、Real-timePCR)中起原料作用。
2023-06-30 21:13:481

PCR技术中,dntp作用原理是什么?为什么不用脱氧核苷酸呢?

dNTPS作用是能在Taq酶的作用下与模版DNA进行复制,如果直接用脱氧核苷算的话是没有多余的两个磷酸基团的,都知道ATP含有高能磷酸键,dNTPs也含有高能磷酸键,这样就可以在PCR体系中提供能量。
2023-06-30 21:13:561

"rNTP,dNTP"有什么区别

dNTP,脱氧核糖核苷三磷酸,在生物DNA合成中起原料作用. rNTP,核糖核苷三磷酸,在生物RNA合成中起原料作用. 区别五碳糖不一样,
2023-06-30 21:14:021

什么是dNTPs,它和dNTP和什么区别

三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGTP三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸dATP三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸dTTP三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸dCTPdNTP指三磷酸碱基脱氧核苷酸,指上面任意一种。dNTP"s是它们的复数形式
2023-06-30 21:14:201

请问dNTP在PCR中发挥作用的过程是什么?

DNTP 是四种核苷酸,A、U、G、C。的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的。
2023-06-30 21:14:284

生化中的NTP和dNTP是什么意思?

N代表A U G C,核苷三磷酸。dNTP N代表A T G C 脱氧核苷三磷酸
2023-06-30 21:14:361

在DNA复制中,dNTP与dNMP分别代表什么啊?

dNTP代表三磷酸脱氧核苷酸dNMP代表磷酸脱氧核苷酸N可以是A、G嘌呤和C、T嘧啶如dGTP三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸dGMP磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸
2023-06-30 21:14:451

DNA在复制的时候原料为什么是dNTP,不是dNMP?

因为在 DNA 复制过程中,dNTP 的焦磷酸掉下来了,变成了 dNMP,同时和上一个碱基连起来了,发生了复制。掉下来的这个焦磷酸分子水解,为 DNA 聚合酶继续工作提供了能量。拓展资料:DNA复制从起始序列开始单向或双向进行。合成DNA双螺旋的两条链是反向平行排列的,其中一条链的起始端与另一条链的末尾端平行排列在一起,每一个复制叉只有一条链是按照从尾到头的正确方向指导新链从头到尾方向合成。根据这条指导链,DNA复制持续向前合成复制叉。参考资料:百度百科,DNA复制
2023-06-30 21:14:525

荧光特异标记的四种dntp分别是哪四种颜色?

荧光特异标记的四种dNTP分别使用以下四种颜色的荧光染料进行标记:dATP(腺嘌呤)- 蓝色荧光dCTP(胞嘧啶)- 绿色荧光dGTP(鸟嘌呤)- 黄色荧光dTTP(胸腺嘧啶)- 红色荧光这种标记方式常用于各种DNA检测、测序和分析技术中,比如PCR、荧光原位杂交(FISH)等。
2023-06-30 21:15:171

请问dNTP与NTP分别指什么,两者之间的关系?

dNTP是脱氧核苷三磷酸(含脱氧核糖) NTP是核苷三磷酸(含核糖) 它们是由三个磷酸分子和一个(脱氧)核苷酸组成的 N的意思是碱基 比如说dATP就是腺嘌呤脱氧核苷三磷酸
2023-06-30 21:15:251

请问dNTP在PCR中发挥作用的过程是什么?

DNTP 是四种核苷酸,A、U、G、C.的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的.
2023-06-30 21:15:341

dntp有几种四种还是五种?

dNTP,deoxy-ribonucleosidetriphosphate(脱氧核糖核苷三磷酸)的缩写。是包括dATP,dGTP,dTTP,dCTP,等在内的统称是四种
2023-06-30 21:15:401

为什么pcr用的是dNTP,而不用dNMP呢?体内合成dna明明用的是dNMP呀?

高能磷酸键一定是有能量的,dNMP没有这两个高能磷酸键,又要消耗更多的外源能量……别的不说,能量守恒总没错吧……dNTP一定比dNMP能量高,能量高的分子不稳定,容易反应.
2023-06-30 21:15:471

dNTP中的d指的是什么?

dNTP,deoxy-ribonucleoside triphosphate(三磷酸脱氧核糖核苷酸)的缩写.是dATP,dGTP,dTTP,dCTP的统称,N代表变量指代A、T、G、C、U中的一种. d:deoxy ,“脱氧”的意思.
2023-06-30 21:16:041

"rNTP,dNTP"有什么区别

dNTP,脱氧核糖核苷三磷酸,在生物DNA合成中起原料作用. rNTP,核糖核苷三磷酸,在生物RNA合成中起原料作用. 区别五碳糖不一样,
2023-06-30 21:16:111

PRC技术中dNTP中 d,T,P是什么意思?

你知道ATP么?A就是腺嘌呤,T就是英文的three,P是指phosphate 即磷酸。ATP,GTP,CTP,TTP 可以统称为 NTPd指的是deoxy 即脱氧。dNTP的全称即 三磷酸脱氧核苷酸
2023-06-30 21:16:183

为什么pcr用的是dNTP,而不用dNMP呢?体内合成dna明明用的是dNMP呀?

高能磷酸键一定是有能量的,dNMP没有这两个高能磷酸键,又要消耗更多的外源能量……别的不说,能量守恒总没错吧……dNTP一定比dNMP能量高,能量高的分子不稳定,容易反应.
2023-06-30 21:16:251

pcr反应中为什么使用dntp而不是脱氧核苷酸

dNTP既是复制的原料,又为链延长的过程提供能量。
2023-06-30 21:16:332

PCR中Mg离子和dNTP需要注意哪些问题

mg在体系中的浓度一般是1-5mMol/L,dNTPs一般200uMol/L,四种dNTP浓度要相等镁离子是taq酶的辅因子,但浓度太高会产生非特异性扩增dNTPs太多会结合镁离子,所以二者都要适量dNTPs要4度保存
2023-06-30 21:16:421

DNA合成仪合成DNA片段时的原料为什么是dNTP,而不是dNMP,合成的时候,那两个磷酸基团怎么去掉?

这个问题问得好有模板的DNA和镁离子存在时,在DNA聚合酶的催化下,由游离的3-OH对dNTP的α磷酸发动亲核攻击形成磷酸二酯键,生成DNA,同时释放焦磷酸PPi,焦磷酸水解放能,推动反应向右进行
2023-06-30 21:16:512

dNTP中含DNA特有碱基的该种物质是什么?

dTTP(脱氧胸苷三磷酸)。因为胸腺嘧啶是DNA特有的碱基,所以dNTP中的N应该就是T。dTTP是DNA复制的直接前体,在细胞中一般不在其他地方用作供能物质。在人工合成中,一般用来作PCR、DNA测序、DNA标记等。
2023-06-30 21:17:011

什么是同源重组, PCR扩增的原理是什么?

无明显同源性。 引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 酶及其浓度 目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。 模板(靶基因)核酸 模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。 SDS的主要功能是: 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀 核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接 用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。 Mg2+浓度 Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速升温至70~75℃,在Taq DNA 聚合酶的作用下,使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100~300bp时)可采用二温度点法, 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一,一般采用94℃变性,65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。 ①变性温度与时间:变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下,93℃~94℃lmin足以使模板DNA变性,若低于93℃则 需延长时间,但温度不能过高,因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性,就会导致PCR失败。 ②退火(复性)温度与时间:退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃~60℃,可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长 度。对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度: Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T) 复性温度=Tm值-(5~10℃) 在Tm值允许范围内, 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合,提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30~60sec,足以使引物与模板之间完全结合。 ③延伸温度与时间:Taq DNA聚合酶的生物学活性: 70~80℃ 150核苷酸/S/酶分子 70℃ 60核苷酸/S/酶分子 55℃ 24核苷酸/S/酶分子 高于90℃时, DNA合成几乎不能进行。 PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间,可根据待扩增片段的长度而定,一般1Kb以内的DNA片段,延伸时间1min是足够 的。3~4kb的靶序列需3~4min;扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增,延伸时间要稍长些。 循环次数 循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。 PCR反应特点 特异性强 PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。 PCR扩增产物分析 PCR产物是否为特异性扩增 ,其结果是否准确可靠,必须对其进行严格的分析与鉴定,才能得出正确的结论。PCR产物的分析,可依据研究对象和目的不同而采用不同的分析方法。 凝胶电泳分析:PCR产物电泳,EB溴乙锭染色紫外仪下观察,初步判断产物的特异性。PCR产物片段的大小应与预计的一致,特别是多重PCR,应用多对引物,其产物片断都应符合预讦的大小,这是起码条件。 琼脂糖凝胶电泳: 通常应用1~2%的琼脂糖凝胶,供检测用。 聚丙烯酰胺凝胶电泳:6~10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中,可用于科研及检测分析。 酶切分析:根据PCR产物中限制性内切酶的位点,用相应的酶切、电泳分离后,获得符合理论的片段,此法既能进行产物的鉴定,又能对靶基因分型,还能进行变异性研究。 分子杂交:分子杂交是检测PCR产物特异性的有力证据,也是检测PCR 产物碱基突变的有效方法。 Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。 斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异性鉴定及变异分析。 核酸序列分析:是检测PCR产物特异性的最可
2023-06-30 21:17:411

DNA复制过程,引物合成酶的底物是dNTP 还是 NTP??

楼上说的对,复制过程的起始需要引物合成酶先合成一小段RNA作为引物,底物是NTP。
2023-06-30 21:17:482

dntp在室温下放置约16小时,影响大吗

不要紧,dnTP这种东西,就是脱氧核苷酸嘛,性状还是比较稳定的。
2023-06-30 21:17:551

酶、模版DNA、引物、dNTP都存放在-20吗?什么是避免反复冻融呀,

酶最好一直放在-20,现用现取,用完再放回-20.引物分贮液和使用液.贮液放-20 ;其他如果常用放在4就行.不常用可小量分装,每份大概就是你常用的一次的量,用时拿出一管就ok,如果一管量大,一次用不完,剩余又冻回-20,反复进行不就是反复冻融了吗.
2023-06-30 21:18:011

酶、模版DNA、引物、dNTP都存放在-20吗?什么是避免反复冻融呀,谢谢!

一般都需要放在—20.反复融冻就是 拿出来融化了 又放回去,很多次这样,酶会失活、DNA会降解。但我们又要做实验用,就需要常用的酶或引物分装成小管 十几次或者20几次用完。其他放到-80保存。
2023-06-30 21:18:123

书上说:Sanger法测序,其中的底物dNTP每个测序体系只要标记一种。 这是不是讲,每个测序体里面除了某一

sanger测序是在测序反应中加入四种正常dNTP底物,同时加入四种带有荧光标记的ddNTP。
2023-06-30 21:18:202

dNTP聚合后在什么酶的作用下催化成脱氧核苷酸长链

DNA连接酶
2023-06-30 21:18:271

dna合成的原料到底是什么?

一分子磷酸,一分子脱氧核糖(五碳糖),一分子碱基合成一分子脱氧核糖核苷酸,然后很多个脱氧核糖核苷酸合成DNA。1、物理性质:DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿色。DNA对紫外线(260nm)有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增色效应;当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。2、分子结构:DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3",5"-磷酸二酯键相连构成的长链。大多数DNA含有两条这样的长链,也有的DNA为单链,如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13等。DNA有环形DNA和链状DNA之分。在某些类型的DNA中,5-甲基胞嘧啶可在一定限度内取代胞嘧啶,其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。40年代后期,查加夫(E.Chargaff)发现不同物种DNA的碱基组成比例不同,但其中的腺嘌呤数等于其胸腺嘧啶数(A=T),鸟嘌呤数等于胞嘧啶数(G=C),因而嘌呤数之和等于嘧啶数之和,一般用几个层次描绘DNA的结构。3、分布功能:原核细胞的染色体是一个长DNA分子,但是原核细胞没有真正的细胞核。真核细胞核中有不止一条染色体,每条染色体只含一个DNA分子。不过它们一般都比原核细胞中的DNA分子大而且和蛋白质结合在一起。DNA分子的功能是贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息;策划生物有次序地合成细胞和组织组分的时间和空间;确定生物生命周期自始至终的活性和确定生物的个性。除染色体DNA外,有极少量结构不同的DNA存在于真核细胞的线粒体和叶绿体中。DNA病毒的遗传物质也是DNA。
2023-06-30 21:18:375

解释个概念

聚合酶链式反应(PCR):扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。在该反应中,使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物,进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性,引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。DNA聚合酶(DNA polymerase I)最早于1955年发现 ,而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现,但由于此酶不耐高温,高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应。现今所使用的酶(简称 Taq polymerase), 则是于1976年从温泉中的细菌(Thermus aquaticus)分离出来的。它的特性就在于能耐高温,是一个很理想的酶,但它被广泛运用则于80年代之后。PCR最初的原始雏形概念是类似基因修复复制,它是于1971年由 Dr. Kjell Kleppe 提出。他发表了第一个单纯且短暂性基因复制(类似PCR前两个周期反应)的实验。而现今所发展出来的PCR则于1983由 Dr. Kary B. Mullis发展出的,Dr. Mullis当年服务于PE公司,因此PE公司在PCR界有着特殊的地位。Dr. Mullis 并于1985年与 Saiki 等人正式表了第一篇相关的论文。此后,PCR的运用一日千里,相关的论文发表质量可以说是令众多其它研究方法难望其项背。随后PCR技术在生物科研和临床应用中得以广泛应用,成为分子生物学研究的最重要技术。Mullis也因此获得了1993年诺贝尔化学奖。 〔PCR原理〕DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。但是,DNA聚合酶在高温时会失活,因此,每次循环都得加入新的DNA聚合酶,不仅操作烦琐,而且价格昂贵,制约了PCR技术的应用和发展。发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。〔PCR步骤〕标准的PCR过程分为三步:1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下, 氢键断裂,形成单链DNA2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量既增加一倍。现在有些PCR因为扩增区很短,即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的时间内复制完成,因此可以改为两步法,即退火和延伸同时在60℃-65℃间进行,以减少一次升降温过程,提高了反应速度。〔PCR检测〕PCR反应扩增出了高的拷贝数,下一步检测就成了关键。荧光素(溴乙锭)染色凝胶电泳是最最常用的检测手段。电泳法检测特异性是不太高的,因此引物两聚体等非特异性的杂交体很容易引起误判。但因为其简捷易行,成为了主流检测方法。近年来以荧光探针为代表的检测方法,有逐渐取代电泳法的趋势。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction ,PCR)三步:1 变性:模板DNA加热变性2 退火 引物与它的靶序列发生退火,引物DNA量多,使引物和模板在局部形成杂交链3 延伸 4种dNTP 与 Mg2+ 存在的条件下,DNA合成酶催化以引物为起始点,按5"-3"方向进行延伸。上面三步为一个循环,可使拷贝数到达2*E-6-2*E-7PCR 产物一段双链DNA,是由它的末端引物的5"端决定的。PS:1.首轮扩增,其产物是大小不均一的DNA分子。长度应大于两引物之间的长度。在第二个循环中,如图3,由于5"固定,其产物长度就由等于两引物之间的长度。所以几十个循环后就会产生大量的两引物之间序列。引物设计:1,长度15~30个核苷酸,最多到50个核苷酸左右。(50?为什么?反正太长也没有必要)2, 尽量避免嘌呤和嘧啶堆积的现象。(其实有时很难避免,不是很重要)。3,引物内部不应该形成二级结构,如果引物中有酶切位点时,就会出现引物二聚体。(一般不是很重要)PCR的反应条件1,dNTP浓度过高会加快反映速度,但同时还可以增加碱基的错误掺入率。2, 引物浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增。3,TaqDNA聚合酶浓度过高会引起错配和非特异性产物扩增,低则合成产物量减少。TaqDNA聚合酶无校正功能,掺入错误率达2*E-4个核苷酸,一个30个循环的扩增反应0.1%-0.25%总错误率。4, 在90~95度下可使整个基因组的DNA变性为单链。一般94~95度30~60s。时间过长使TaqDNA聚合酶失活和dNTP破坏增多。5,DNA很快冷却到40~60度使引物和模板结合。引物长度在15~25时退火温度Tm=4(G+c)+(A+T),一般在45~55度,温度低容易退火但特异性低;温度高,不容易退火但特异性高。退火时间30秒。6,延伸温度一般在70~75度这是TaqDNA聚合酶活性最高(150个/S),当引物在16个碱基以下时可采用缓慢升高温度到70~75度的方法,使在低温下就开始合成。一般<1KB时间1分钟即可。当〈1KB时在较后的循环中延长扩增时间。7循环次数25~30次。无产物时:1,取10ul扩增混合液作模板在进行PCR扩增。2,增加TaqDNA聚合酶浓度3,增加循环次数4,降低退火温度5,加靶DNA量
2023-06-30 21:18:557

DNA聚合酶作用部位是什么

DNA聚合酶作用部位是磷酸二酯键。1、聚合作用:在引物RNA-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令,即A与T,C与G的配对原则,逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3"-OH末端,逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用;2、3"→5""外切酶活性(校对作用):这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用。当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸,可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性;3、5"→3"外切酶活性(切除修复作用):该活性是从5"→3"方向水解DNA延长链前方的DNA链(即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用),主要产生5"—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。扩展资料: 1、DNA聚合酶可以在每一个新掺入的核苷酸与模板链之间进行仔细地监测。只有在配对正确的情况下,它才会催化核苷酸之间聚合形成磷酸二酯键。2、即使当DNA聚合酶的监测偶然失误,掺入了错误的核苷酸,它还能通过校读的功能纠正错误。参考资料来源:百度百科-DNA聚合酶
2023-06-30 21:19:103

普通菌液pcr的20 微升体系怎么配。需要dNTP吗?

100uL体系:水 85uL ,10*buffer 10uL ,F引物 1uL ,R引物 1uL ,dNTP 1uL ,模板 1uL ,rTaq酶 1uL。按这个100uL体系配成20uL体系就行。
2023-06-30 21:19:311

PCR技术过程中能量除来自热能以外,在DNA的延伸过程所需能量来自dNTP中的能量,是这样的吗?

能量也是由底物dNTP供给的,底物dNTP在延伸是会断裂一个高能磷酸键,
2023-06-30 21:19:392

dntp一般多少浓度

PCR产物浓度主要取决于模版的量和引物的量.如果模版属于稀有基因,那么产物浓度就不会高.而且你不要回收后才测浓度,PCR结束后就可以跑电泳或者测OD值都很快的. 另外,计算PCR的产物不要光看浓度,因为你回收后可以用100ulTE去溶解产物,也可以用50.
2023-06-30 21:19:541

PCR中各个试剂的保存方法

酶一定要放在-20℃保存保存,这是常识,没有任何争议了。Buffer可以反复冻融,推荐-20℃保存,但是4℃保存也没有任何问题。dNTP的保存一定要注意,千万不要听楼上的山寨回答。首先,它需要严格-20℃保存(其通常stock solution是10mM),但是,当dNTP反复冻融约100次以上时,它会逐渐失去活性,无法与模板结合。所以,我建议在使用dNTA前,将其进行分装,从而达到更好的活性效果。
2023-06-30 21:20:114

核苷酸为什么用NTP表示 生物化学上用NTP 表示核苷酸 dNTP为脱氧核苷酸 为什么是T? 而不是M?

虽然核酸单体是含有一个磷酸,但是合成时原料是含有三个磷酸的,原因是它们是富于能量的化合物,参与合成过程同时能提供大量能量
2023-06-30 21:20:193

PCR反应体系中dNTP的浓度怎么算?我的反应总体积20微升,其中加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM,1mL.

"反应总体积20微升,加1.0微升dNTP,装有dNTP管上写的10mM"。这不有了吗?不用计算那么精确。加0.5-1都行
2023-06-30 21:20:262

引物与模板浓度的关系

PCR (聚合酶链式反应)反应包括三个基本步骤,即:模板DNA的变性、模板DNA与引物的退火复性、引物的延伸。PCR反应体系包括5种基本成分,依次为:引物、DNA聚合酶、dNTP、模板DNA、Mg2+。1、引物引物是PCR 特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板 DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸 的成串排列。④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3"端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。⑤引物3"端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR 失败。⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子 克隆很有好处。⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。  引物量: 每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。2、酶目前有两种Taq DNA聚合酶供应, 一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化一典型的PCR反应约需酶量2.5U(指总反应体积为100ul时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。3、dNTPdNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0~7.5,小量分装, -20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中,dNTP应为50~200umol/L,尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制),如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低),就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。dNTP能与Mg2+结合,使游离的Mg2+浓度降低。dNTP储存液:dNTP溶于pH为7.0的NaOH贮存液中,最初的贮存液可稀释到10mol/L,分装后存放在-20℃冰箱中。dNTP使用浓度在20~200 μmol/L之间。4种dNTP必须等浓度配合以减少错配误差。dNTP使用浓度:在PCR反应中,使用低dNTP浓度,可减少非靶位置启动和延伸时的核苷酸错误掺入。一般可根据靶序列的长度和组成来决定最低dNTP浓度。例如在100μl的反应体系中,4种dNTP的浓度为20μmol/L,可基本满足合成2.6μg DNA或10pmol/L的400bp序列。使用低dNTP浓度(每种dNTP浓度为2μmol/L),能够高度灵敏地(1/107)扩增ras基因点突变的等位基因。4、模板模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA纯化方法通常采用SDS和蛋白酶K来消化处理标本。SDS的主要功能是:溶解细胞膜上的脂类与蛋白质,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜,并解离细胞中的核蛋白,SDS 还能与蛋白质结合而沉淀;蛋白酶K能水解消化蛋白质,特别是与DNA结合的组蛋白,再用有机溶剂酚与氯仿抽提掉蛋白质和其它细胞组份,用乙醇或异丙醇沉淀核酸。提取的核酸即可作为模板用于PCR反应。一般临床检测标本,可采用快速简便的方法溶解细胞,裂解病原体,消化除去染色体的蛋白质使靶基因游离,直接用于PCR扩增。RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法,要防止RNase降解RNA。5、Mg2+浓度Mg2+对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非特异扩增,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。引物是PCR特异性反应的关键,不好的引物严重影响实验的质量,好的引物可以事倍功半;酶的选择一般是看实验的目的,例如克隆长片段,可能就需要高保真的聚合酶;dNTP浓度和Mg2+浓度高了会影响PCR反应特异性。DNA模板中还有蛋白质也会严总影响PCR质量,因此上述5个基本成分质量和浓度必须合理。
2023-06-30 21:20:331

DNA聚合酶具备几种活性?用途是什么?

[1]聚合作用:在引物RNA"-OH末端,以dNTP为底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐个将核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的专一性主要表现为新进入的脱氧核苷酸必须与模板DNA配对时才有催化作用。dNTP进入结合位点后,可能使酶的构象发生变化,促进3"-OH与5"-PO4结合生成磷酸二酯键。若是错误的核苷酸进入结合位点,则不能与模板配对,无法改变酶的构象而被3"-5"外切酶活性位点所识别并切除之。   [2]3"→5"外切酶活性──校对作用:这种酶活性的主要功能是从3"→5"方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3"→5"外切酶活性所降解。如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明温度升高使DNA生长链3"末端与模板发生分离的机会更多,因而降解作用加强。当向反应体系加入dNTP,而且只加放与模板互补的上述核苷酸才会使这种外切酶活性受到抑制,并继续进行DNA的合成。由此推论,3"→5"外切酶活性的主要功能是校对作用,当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3"→5"外切酶切除,以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸。在某些T4噬菌体突变株中DNA复制的真实性降低,而易发生突变,从此突变株分离得到的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性很低。相反,另外一些具有抗突变能力的T4突变株中的T4DNA聚合酶的3"→5"外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA复制真实性好,变异率低。可见,3"→5"外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。   [3]5"→3"外切酶活性──切除修复作用:5"→3"外切酶活性就是从5"→3"方向水解DNA生长链前方的DNA链,主要产生5"-脱氧核苷酸。这种酶活性只对DNA上配对部分(双链)磷酸二酯键有切割活力作用,方向是5"→3"。每次能切除10个核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5"→3"外切酶活力达10倍以上。因此,这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。对冈崎片段5"末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性。   [4]焦磷酸解作用:DNApolⅠ的这种活性可以催化3"末端焦磷酸解DNA分子。这种作用就是无机焦磷酸分解DNA生长链,可以认为是DNA聚合作用的逆反应,而且这种水解DNA链作用需要有模板DNA的存在。(dNMP)n+XPPi←(dNMP)n-x+X(dNPPP)→DNA   [5]焦磷酸交换作用:催化dNTP末端的PPi同无机焦磷酸的交换反应。反应式为32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA
2023-06-30 21:20:432

喀纳斯湖水怪到底是什么?难道真的是哲罗鲑?

传说中的喀纳斯湖水怪被认为是大型的哲罗鲑,也就是大红鱼,至于一些所谓专家推测出的7米长大红鱼或者15米长大红鱼都不太可能存在的,只有一些大型的海鱼能长那么大吧!喀纳斯湖的大红鱼也可以捕捞得到,只是捕不到那种传说中水怪级别大小的,换言之就是不存在超过认知的大红鱼。人类对于一些无法了解和解释的现象都喜欢用“怪”来形容,水怪之所以能勾引起大家的兴趣,就是因为它的云里雾里,无论有多少目击者拍摄了多少的影像资料,无一例外所有的照片也好视频也罢,全部都是模糊不清的。你们想过这个问题吗?为什么会这样?其实道理很简单,如果拍摄的非常清晰的那些画面,人们一眼就能把它看透了,那还有什么“怪”处可言?实际上UFO和水怪等都是相同的套路,当然这并不是否认它们的存在,首先要确认这些现象的确是发生了,水怪的出现也有很多影像资料。但是这里的水怪只是一个代名词,代表着的是发生的现象,至于真相如何云里雾里无法判断。到底是真的有人类未知的神秘生物?还是已知的生物变种?亦或者就是常规的生物带来的误认?甚至也可能是水面上漂浮着的树木枝干等非生物。喀纳斯湖坐落于我国新疆毗邻哈萨克斯坦和俄罗斯,关于喀纳斯湖水怪的传言开始于上个世纪,当地牧民中也流传着很多水怪的小故事,牧民在湖边的马匹经常丢失,就被认为是水怪拖进了湖中。在喀纳斯湖里生存着一种很罕见的稀有鱼类-大红鱼,或者也可以称之为哲罗鲑,这种鱼属于淡水鱼,成年后可以达到70公斤,体长超过一米。但是有学者认为通过对一些水怪视频的研究分析,至少是可以知道游动的物体长度的,这可以根据水面浪花或者波纹等分析出来。有学者说这可能是喀纳斯湖稀有鱼类哲罗鲑所致的,也就是认为喀纳斯湖水怪是大型的哲罗鲑。当然了如果说是一米多长的哲罗鲑还是可以接受认同的,但是动辄七八米十几米,这些都是不可能的。人类对于未知的世界总是有着各种各样的幻想,对于无法探测的地心,认为存在地心人史前文明,对于无法彻底探测的深海,认为存在着海底人海底文明,而对于一些比较大的湖泊,就认为存在着未知的生物水怪。在世界范围内都是如此,如果哪个大湖没有水怪之谜,那它绝对算不上出名,水怪几乎是湖泊的标配了。例如长白山天池水怪,新疆喀纳斯湖水怪等等,发现它们的时候几乎有很多共同点,那就是在湖面上快速游动亦或者掀起水花,不然就是引起波浪,有的时候是一只还有的时候是很多只一起嬉戏。所以说怎么无论是对于UFO还是各种水怪,理性去看待就好了,现象的确是发生了,至于后续被报道成什么样?描述成什么样?这些就可以人为地进行操作了,别的不用说,我就知道自从喀纳斯湖水怪一说流行起来之后,当地的旅游业是非常的火爆。文/科学黑洞,图片来源网络侵删。
2023-06-30 21:20:036

长隆暑假游玩攻略2018

暑假要到了,你还在待在家里玩手机和电脑吗?你还在无聊的发呆吗?还是你这是爱着学习。不给你一次说不的机会,你是不是厌倦了这些?那就来这里一次,广东珠海长隆欢乐世界吧!这里,给你充分的想象了,给你充分的自由和欢乐,这里可以让你足不出户,仅仅在这个乐园里面,你就可以感受到大自然的乐趣,感受到五洲的风范。所以,你还在等什么?接下来,就和小编一起看看这个长隆欢乐世界,暑期有什么好玩的吧!长隆野生动物世界空中缆车免费坐今年暑假,长隆野生动物世界推出空中看野生动物的缆车项目,游客乘坐空中缆车看动物全线免费。坐在缓缓行进的悬浮缆车中,透过脚下的玻璃地板,可以清晰地看到脚下的山林、走兽,可以隔着车厢和长颈鹿玩亲亲。可以俯瞰羚羊在旷野上漫步、斑马在草原上驰骋,可以与天鹅、鹦鹉林间同飞,和熊猫、考拉打招呼,还能全程倾听动物科普讲解,感受与兽同行、与鸟同飞的非凡体验玩转熊猫乐园当你穿越巨竹林到熊猫村看望熊猫大家族,闯入全球唯一一对大熊猫三胞胎的新家,你会发现萌萌、帅帅、酷酷正抱着大冰块消暑,休闲地吃着竹子。同时,全新的“桑巴塔”、“小秋千”等。游乐设施也将带来童话般的梦幻体验~别样玩法除此之外,你还可以跟着全新升级的茶壶列车,在真实版的动漫王国中来回穿越;在特效座椅上,体验《熊猫三胞胎月宫奇遇》4D大片;在童话剧场观赏奇妙的人偶表演;还可以加入动物科普学堂,通过看听嗅触,了解环境与动物的奇妙关系长隆欢乐世界欢乐小镇乐趣多今年,全新游乐区域“欢乐小镇”盛大开放,在这个具有中国原创马戏主题的开放性游乐小镇,你既可以体验“自由落体”和“滑翔飞翼”的奇妙,也能感受“飞天魔轮”和“霹雳转车”的刺激当然,还有最经典的垂直过山车、十环过山车、U型滑板、超级水战、超级大摆锤等N种刺激体验,也能满足你对勇士的所有想象。长隆水上乐园嗨玩水上电音节,感受视听震撼,都说夏天有三宝:西瓜、空调、凉水澡,这个暑假来长隆,“长隆水上电音派对”不仅能让你享受最嗨的凉水澡,还将用激昂的电音震撼你的神经。国内顶尖的MC和DJ在造浪池轮番登场,用充满异域风情的舞蹈表演和震撼人心的音乐,让你感受前所未有的玩水体验。珠海长隆海洋王国观赏海洋保卫战,畅快中享受清凉与海洋极地动物共处,想想都觉得清凉,在海洋王国,不但有大鲸鲨、白海豚陪你嬉戏,还有雨林升降塔新区,让你俯瞰横琴唯美风景。更有暑期特地推出的全新夜场演出——“海洋保卫战”,汇聚了无人机演出、烟花表演、激光秀、喷泉汇演、水上飞人和摩托艇特技六大元素,缔造视听冲击力十足的感官享受。这个夏天,长隆和你有一场必赴的预定,这个夏天,逃避炎炎夏日,逃避枯燥无味,来这里,是你最好的选择。
2023-06-30 21:20:071

ppt2010幻灯片怎么设置图片透明度呢?

1、新建一个PPT文档,找到需要插入图片的幻灯片,依次点击菜单栏中的插入——图片,选择需要图片,在幻灯片中插入图片2、右键选择图片,选择设置图片格式,调出对话框,此时我们会发现没有可以修改图片透明度的选项3、但是我们要是修改一下插入图片的方法,即可达到要求,首先点击菜单栏中的插入——形状,选择矩形4、右键单击矩形,选择设置形状格式,调出设置对话框5、在设置形状格式中,选择填充中的图片和纹理填充,选择文件,找到自己需要的图片,插入6、此时你就可以发现在选择文件的下方,就会有一个调节透明度的选项,调节到自己觉得合适数值,这样插入的图片就会变得透明了
2023-06-30 21:20:081

长隆水上乐园吃的介绍长隆水上乐园吃什么

:1.长隆水上乐园吃的1.可以~除了漂流和冲浪,游泳圈都有。租双人60元20押金,租3人80元20押金。2.可以穿也可以不穿。它it"太热了,脚不舒服~里面有专门放拖鞋的地方。3.40元可以租到20元的大柜子。一天可以无限次开柜。至于食品安检,不允许带太多。如果有几个人的话,最好记得分开带几份。里面消费挺高的。4.是的,它其实挺方便的,因为那些货架都挨着项目,所以它it"这更方便。有拖鞋。记得多少人放在一起~因为有些人会乱拿拖鞋。里面一双拖鞋需要20元。记得把它们收起来!玩得开心!:2.长隆水上乐园吃的价格1.杭州乐园门票价格:1。全价票:票价在80元以内。2.半价票:票价40元。以下情况可以买半价票:(1)、1.1-1.4米买半价票;(2)中小学生,凭高中、初中、小学学生证购买半价票;3.高校学生票:门票价格:65元将用全日制高校学生证购买高校学生票。4.30个以上的散客可以享受9.5折优惠;100人以上打9折。5.免费开放时间:上午10点至下午5点。2.2010长隆水上乐园门票报价表。优惠时间:2010年6月1日至2010年10月8日。优惠内容:长隆水上乐园各月门票价格,6月游泳8折优惠!店内儿童票、老年人票、合家欢票、2大1小明星票、学生票(凭有效学生证)、成人和儿童票、老年人全票价180元100元400元110元60元180元4月22日-5月31日108元60元240元-75元中学生85元6月1日-6月30日145元80元320元90元50元中学生100元大学生115元7月1日-8月31日180元400元60元中学生110元元9月1日-10月7日128元70元280元75元40元中学生85元大学生100元10月8日至闭园108元60元240元-75元中学生85元大学生3.长隆水上乐园美食攻略,为了保证园内动物的安全,除了婴儿食品和适当的饮用水,长隆野生动物世界、长隆鸟类乐园、长隆海洋王国拒绝游客带入其他食物和饮料。长隆其他主题公园(包括长隆欢乐世界、长隆水上乐园等。)和马戏场地。参观者(观众)可以携带自用的食品和饮料,但不得携带需要加热、复热、加工、冷藏或保温的食品(如方便面、具有自热功能的食品等)。)、有刺激性气味的食物(如榴莲等。),以及其他不适合带入公园的食物。4.长隆水上乐园好玩不长隆水上乐园4大特色和好玩的地方:好玩1长隆水上乐园引进国际先进的臭氧水循环处理系统,保证水质达标,使园内的水不仅无臭无味,而且对长隆水上乐园有显著的专一性,在不伤害人体皮肤的前提下,杀灭人体皮肤上的细菌,及时消除水中的细菌迹象。2it使用美国WATERSAFERYPRODACTS的国际专业水上救援设备很有趣。所有救生员都经过国际水上游乐园协会通用标准的培训和考核,近百名专业救生员分布在园区内。园区内有两个专业的医疗急救站,配有专业的救生设备和值班医生,以此为乐。3长隆水上乐园的景观设计以亚热带植物花卉为主,为游客形成一个自然放松的环境。公园里有很多遮阳设施免费供游客使用,让游客在阳光下得到最好的保护。4好玩。所有惊险刺激的游玩项目都有很好的保护措施!5.长隆水上乐园带吃的首先,广州长隆水上乐园是一个水上乐园,设施非常先进,一天的游客量可以达到上万人。长水公园有其次,去广州长隆水上乐园,我们说是水上乐园。当然要带泳衣,泳镜,泳帽。游泳必备三部曲呢?如果你还想玩手机,可以私下再买一个防水包,可以装手机,还可以带一瓶水。渴了可以喝,也可以在景区买。至于食物,你不我不必去想它。长隆一般不允许游客外带食物。当然长隆水上乐园也有商店,可以买吃的。如果你有朋友可以如果你不会游泳并且需要游泳圈,你可以在天堂里租到。自己带可能有点麻烦。6.长隆水上乐园食物价格攻略指南:长隆水上乐园禁止携带饮料和食物入园。因此,过了一天剧,公园里的餐饮很重要。龙水公园有五家各具特色的餐厅,汇聚了各种亚洲美食。1.热浪谷餐厅提供欧式和港式特色菜:鸡蛋猪排、辣鸡肉饭、葡萄牙蛋挞、红酒烩牛筋拌意大利面、日式面条等。2.郎华餐厅提供西式快餐汉堡包。7.长隆水上乐园吃的什么可以自带水,但是每个水的容量可以似乎不超过500毫升。零食是不允许随身带的,但是可以放在包里,可以避开工作人员的检查。龙水公园5、6月门票价格108元,平时看起来是170元。我上个月刚去过那里。我去了广州长隆。友情提醒:记得防晒,不然玩完会脱皮。希望我的回答能帮到你。8.长隆水上乐园吃饭攻略长隆欢乐世界是一座斥资十亿打造的新一代顶级游乐园,一期占地1000亩,是目前国内设备最先进、科技含量最高、游乐设备最多的超级游乐园。长隆欢乐世界长隆集团是世界级旅游王国中的一颗新明珠,位于中国5A级旅游景区长隆旅游度假区中心,是集游乐游乐游乐、特技剧场、巡游表演、生态休闲、特色餐厅、主题商店等多项服务于一体的具有国际先进技术和管理水平的世界顶级巨型主题公园。长隆欢乐世界由世界领先的主题公园设计主持总体规划,游乐设备均从欧洲进口,其设计和技术保持国际领先水平。
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新疆喀纳斯湖水怪之谜真相大白 疑似15米32吨的巨型哲罗鲑(视频)

不仅在外国的湖里有水怪,中国的喀纳斯湖里也有水怪出没,早在1980年当时的《光明日报》就成刊登了有关喀纳斯湖水怪的报道。随后的30多年中,水怪频频现身,多次被人目击并且拍下照片。科学家也曾多次到此处考察,然而没有任何进展。但是就在最近传出喀纳斯湖水怪抓住了的消息,并且有最新消息声称已经弄清了水怪的真相。 喀纳斯湖水怪,专吃牧民马匹 喀纳斯湖位于新疆北部,湖水最深196米,面积45.73平方公里。湖面宽度和湖水深度都都为水怪提供了生存条件。早在上世纪80年代,这里就有关于水怪的传闻。一名叫金刚的喀纳斯管理局的护林员在1980年8月1日这天正在湖边巡查,突然发现了喀纳斯湖中漂浮着一个长约15米的巨大红色物体。 这个巨大的漂浮物还在缓慢的移动着,等到他回去叫人来看时,发现水中的巨物早已消失不见,没有留下任何踪迹。这次目击事件使得世人重新想起流传已久的喀纳斯水怪的传说。当地牧民一直传说湖中有巨型“水怪”,常常将在湖边饮水的马匹拖入水中。 喀纳斯湖水怪多次被人目击,有图为证 距离金刚第一次发现水怪后的30多年间频频出现,而著名的还要属2004年和两次被大量的游客目击,并且还拍下了照片。 2004年6月9日9点30分左右,一群游客正在喀纳斯湖边旅游,突然发现水里有两个很亮的光点,一闪一闪的。有四条有东西在游,从喀纳斯一道湾方向往二道湾方向游去,游过的水面划出两道长长的水痕,头一会露出水面,一会又沉到水里。最大的至少有7米,小一点的也有5米多。不少游客都拿出相机拍下了水怪的照片。 喀纳斯湖水怪再次出现,有工作人员拍下了类似的情景,当事人当时曾说,这绝不是游艇拉出的水线。因为他跟有关单位确认过,当时并没有任何游艇在湖面航行,尽管他很有自信认为捕捉到水怪踪影,却被专家浇了一盆冷水。 同年6月21日,有游客在观鱼台拍摄到了喀纳斯神秘“湖怪”。7月29日下午16点45分,湖北游客龚海燕一行七人在新疆喀纳斯湖一道弯游冒雨游玩时,在距湖面30米处的岸边拍摄到了不明水生物。 喀纳斯湖水怪真相 随着水怪的出没越来越频频,游客拍下的照片越来越多,人们对于喀纳斯湖水怪的真相也越来越迫切的想要知道。 1985年的时候,新疆大学的学生在喀纳斯湖进行考察的时候,发现了“大红鱼”,“大红鱼”其实就是哲罗鲑,是生活在淡水中的鱼,非常凶猛,体型巨大,在一些条件下,身体是会变成红色的,所以才会被称作“大红鱼”,而这些哲罗鲑为什么会出现在高山湖泊中的,一直都没有一个好的说法。 的央视一档节目之中,放出了一段视频,视频内容则是新疆喀纳斯糊水怪掀起巨浪,再次引发了巨大的争议。根据视频这只水怪的体型在15米左右,体重可能重达32吨,十分惊人。根据专家的推测,喀纳斯湖水可能是哲罗鲑。 考察队的人们表示看到过喀纳斯湖出现过的大鱼超过了100头,而且这些鱼的长度都让人觉得非常惊讶,几乎都是10米或者10米以上,而在后面的研究中专家们想要抓住这些水怪们一探究竟,结果却什么也没有捉到。但是水怪是不是哲罗鱼还有点考证,也有专家称或许是新物种。 喀纳斯湖水怪之谜还将继续困扰着人们,而除此之外还有尼斯湖水怪、长白山天池水怪、加拿大水怪、欧肯纳根水怪、青海湖水怪、铜山湖水怪、肯伟岛水怪等世界十大水怪,而其中最为著名的尼斯湖水怪真相已经破解.
2023-06-30 21:19:551