DNA转录需要解旋酶吗?
不需要,DNA转录的时候,双链解开是用的RNA聚合酶.高中是没有学的,我给你简单说一下过程.首先RNA聚合酶和DNA上面的启动子(就是一段特殊的碱基序列)结合,然后RNA聚合酶自身发生变化,从而诱导转录的发生,使DNA双链解旋.也就是说,RNA聚合酶自身有诱导DNA解旋的能力.
DNA转录时需要解旋酶吗?
需要,在真核细胞中,RNA聚合酶通常不能单独发挥转录作用,而需要与其他转录因子共同协作,有些辅助功能的转录因子就是解旋酶。以反式作用影响转录的因子可统称为转录因子。RNA聚合酶是一种反式作用于转录的蛋白因子。与RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ相应的转录因子分别称为TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ。转录是以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。扩展资料转录的过程:1、转录的启动DNA上存在着转录的起始信号,它是特殊的核苷酸序列,称为启动子。转录是由RNA聚合酶全酶结合于启动子而被启动的。2、转录的起始当聚合酶结合到启动子上后,在启动子附近将DNA局部解链,约解开17个碱基对。3、链的延伸当s因子从核心酶上脱落后,核心酶与DNA链的结合变得疏松(依靠其蛋白质的碱性与酸性核酸之间的非特异性的静电引力),可以在模板链上滑动,方向为DNA模板链的 3′→ 5′,同时将核苷酸逐个加到生长的RNA链的3"-OH端,使RNA链以 5′→ 3′方向延伸。4、转录的终止DNA分子上有终止转录的特殊信号,也是特定的核苷酸序列,称为终止子。RNA聚合酶可以识别终止子,它在一种蛋白质 —— r因子的帮助下,终止转录,放出RNA链;有时,RNA聚合酶不需要r因子的帮助即可终止转录。参考资料来源:百度百科——转录
转录过程是否需要解旋酶?
转录过程需要解旋酶,在真核细胞中,RNA聚合酶通常不能单独发挥转录作用,而需要与其他转录因子共同协作,有些辅助功能的转录因子就是解旋酶。双链DNA中的确定的一条链为模板,以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料。在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特定的DNA片断作为遗传信息模板,以依赖DNA的RNA聚合酶作为催化剂,通过碱基互补的原则合成前体mRNA。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,完成转录起始、延伸、终止等过程。扩展资料转录的过程:在转录过程中,DNA模板被转录方向是从3′端向5′端;RNA链的合成方向是从5′端向3′端。RNA的合成一般分两步。第一步合成原始转录产物(过程包括转录的启动、延伸和终止)。第二步转录产物的后加工,使无生物活性的原始转录产物转变成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始转录产物一般不需后加工就能直接作为翻译蛋白质的模板。参考资料来源:百度百科——转录
请帮我区分一下这几种酶。DNA聚合酶,RNA聚合酶,逆转录酶,DNA解旋酶
DNA连接酶:可以连接被限制酶切割开磷酸二酯键,连接的是DNA片段DNA聚合酶:DNA复制,连接磷酸二酯键,把单个脱氧核苷酸连接到与模板链互补的链上。DNA解旋酶:使DNA两链中的H键断开RNA聚合酶:在转录过程,是以一条DNA为模板,通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶, 逆转录酶:是以RNA为模板合成DNA的酶。把单个脱氧核苷酸连接到脱氧核苷酸链上,连接磷酸二酯键。
cDNA文库中的基因是逆转录来的,不含内含子,那么,虽然内含子不表达,但没有内含子的的基因还能用吗?就是
理论上可以,但是内含子也参与表达调控。实验室用的一般没有内含子。
省略构建重组质粒有何后果?会影响目的基因的复制,转录还是翻译?
省略构建重组质粒,会影响目的基因的翻译。翻译是蛋白质生物合成(基因表达中的一部分,基因表达还包括转录)过程中的第二步(转录为第一步),翻译是根据遗传密码的中心法则,将成熟的信使RNA分子(由DNA通过转录而生成)中“碱基的排列顺序”(核苷酸序列)解码,并生成对应的特定氨基酸序列的过程。但也有许多转录生成的RNA,如转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)和小核RNA(snRNA)等并不被翻译为氨基酸序列。翻译过程需要的原料:mRNA、tRNA、20种氨基酸、能量、酶、核糖体。翻译的过程大致可分作三个阶段:起始、延长、终止。翻译主要在细胞质内的核糖体中进行,氨基酸分子在氨基酰-tRNA合成酶的催化作用下与特定的转运RNA结合并被带到核糖体上。生成的多肽链(即氨基酸链)需要通过正确折叠形成蛋白质,许多蛋白质在翻译结束后还需要在内质网上进行翻译后修饰才能具有真正的生物学活性。游离的碱基以mRNA为直接模板,tRNA为氨基酸运载体,核蛋白体为装配场所,共同协调完成蛋白质生物合成的过程。在翻译过程中mRNA上的每个三联体密码子对应tRNA上的一个三联体反密码子,且这个反密码子只对应一个氨基酸,但是一个氨基酸可有多组密码子(密码子具有简并性)来表示。一个激活的tRNA进入核糖体的A位(A位用于接受氨基酸,可记忆为Accept)与mRNA相配,肽酰转移酶在邻近的氨基酸间建立一个肽键,此后在P位(peptidyl-tRNA site,即肽酰基位点,也叫做“供点”)上的氨基酸离开它的tRNA与A位上的tRNA结合,核糖体则相对于mRNA向前滑动,原来在A位上的tRNA移动到P位上,原来在P位上的空的tRNA移动到E位(释放位点,记忆为Emission)上,然后在下一个tRNA进入A位之前被释放。当核糖体沿着mRNA分子移动到A位出现终止密码子时,没有相应的氨酰tRNA与之对应,一种释放因子(Release Factor,RF)与终止密码子及核糖体A位结合,另一种释放因子随之结合,改变肽酰转移酶的特异性,催化P位肽酰tRNA水解,从而使肽链从核糖体上释放。希望我能帮助你解疑释惑。
真核生物基因转录前水平的调节主要有哪些方式如题 谢谢了
1.基因丢失:体细胞分化过程必须将某些基因永久性的关闭,最简单有效的方式就是将其丢失。2.基因扩增:发育分化、环境条件的改变,对某些产物的需要量急剧增加--增加该基因的拷贝数。3、基因重排:某些基因片段改变原来的书顺序重新排列。4、甲基化修饰,脊椎动物,DNA上特定的CpG序列的C处可发生甲基化修饰。5、染色质结构的修饰。采纳哦
原核基因转录调节与原核基因表达调控的区别
相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节2.不同点:A.原核基因的表达调控主要包括转录和翻译水平ue007真核基因的表达调控主要包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次B.原核基因表达调控主要为负调控,真核主要为正调控C.原核转录不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由sita因子决定基因表的的特异性ue007真核基因转录起始需要基础特异两类转录因子ue007依赖DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用ue007调控转录激活D.原核基因表达调控主要采用操纵子模型ue007转录出多顺反子RNAue007实现协调调节ue007真核基因转录产物为单顺反子RNAue007功能相关蛋白的协调表达机制更为复杂。真核生物基因表达调控的环节主要在转录水平ue007其次是翻译水平。原核生物基因以操纵子的形式存在。转录水平调控涉及到启动子、sita因子ue007与RNA聚合酶结合ue007、阻遏蛋白ue007负调控ue007、正调控蛋白、倒位蛋白、RNA聚合酶抑制物、衰减子等。翻译水平的调控涉及SD序列、mRNA的稳定性ue007不稳定(5"端和3"端的发夹结构可保护不被酶水解mRNA的5"端与核糖体结合ue007可明显提高稳定性)、翻译产物及小分子RNA的调控作用。真核生物基因表达的调控环节较多ue007在DNA水平上可以通过染色体丢失、基因扩增、基因重排、DNA甲基化、染色体结构改变影响基因表达。在转录水平主要通过反式作用因子调控转录因子与TATA盒的结合、RNA聚合酶与转录因子-DNA复合物的结合及转录起始复合物的形成。在转录后水平主要通过RNA修饰、剪接及mRNA运输的控制来影响基因表达。在翻译水平有影响起始翻译的阻遏蛋白、5"AUG、5"端非编码区长度、mRNA的稳定性调节及小分子RNA。真核基因调控中最重要的环节是基因转录ue007真核生物基因表达需要转录因子、启动子、沉默子和增强子。
比较转录和复制的异同点
转录和复制的相同之处:都是酶促的核苷酸聚合过程;都以DNA为模板;都需要依赖DNA的聚合酶;聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键,都从5"之3"方向延伸聚核苷酸链。区别:复制是两股链均复制,转录是模板链转录(不对称转录)原料,复制是dNTP转录是NTP。进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特定的DNA片断作为遗传信息模板,以依赖DNA的RNA聚合酶作为催化剂,通过碱基互补的原则合成前体mRNA。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,完成转录起始、延伸、终止等过程。生成的mRNA携有的密码子,进入核糖体后可以实现蛋白质的合成。转录仅以DNA的一条链作为模板。扩展资料:转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。真核生物RNA的转录与原核生物RNA的转录过程在总体上基本相同,但是,其过程要复杂得多,主要有以下几点不同:⒈ 真核生物RNA的转录是在细胞核内进行的,而蛋白质的合成则是在细胞质内进行的。所以,RNA转录后首先必须从核内运输到细胞质内,才能指导蛋白质的合成。⒉ 真核生物一个mRNA分子一般只含有一个基因,原核生物的一个mRNA分子通常含有多个基因,而除少数较低等真核生物外,一个mRNA分子一般只含有一个基因,编码一条多肽链。参考资料来源:百度百科——转录参考资料来源:百度百科——复制
什麽是转录和翻译?
1、复制(duplication)是在分子进化过程中产生新的遗传物质的主要机制。它可以定义为遗传物质的任何复制行为。复制的常见来源包括异位重组、逆转录、异倍性、多倍性和滑链错配等。2、转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。3、翻译是蛋白质生物合成(基因表达中的一部分,基因表达还包括转录)过程中的第二步(转录为第一步),翻译是根据遗传密码的中心法则,将成熟的信使RNA分子(由DNA通过转录而生成)中“碱基的排列顺序”(核苷酸序列)解码,并生成对应的特定氨基酸序列的过程。但也有许多转录生成的RNA,如转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)和小核RNA(snRNA)等并不被翻译为氨基酸序列。转录特点转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。被选为模板的单链叫模板链,又称无义链;另一条单链叫非模板链,又称编码链、有义链、信息链。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。RNA聚合酶合成RNA时不需引物,但无校正功能。
复制和转录的异同点
转录和复制的相同之处:都是酶促的核苷酸聚合过程;都以DNA为模板;都需要依赖DNA的聚合酶;聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键,都从5"之3"方向延伸聚核苷酸链。区别:复制是两股链均复制,转录是模板链转录(不对称转录)原料,复制是dNTP转录是NTP。进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特定的DNA片断作为遗传信息模板,以依赖DNA的RNA聚合酶作为催化剂,通过碱基互补的原则合成前体mRNA。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,完成转录起始、延伸、终止等过程。生成的mRNA携有的密码子,进入核糖体后可以实现蛋白质的合成。转录仅以DNA的一条链作为模板。扩展资料:转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。真核生物RNA的转录与原核生物RNA的转录过程在总体上基本相同,但是,其过程要复杂得多,主要有以下几点不同:⒈ 真核生物RNA的转录是在细胞核内进行的,而蛋白质的合成则是在细胞质内进行的。所以,RNA转录后首先必须从核内运输到细胞质内,才能指导蛋白质的合成。⒉ 真核生物一个mRNA分子一般只含有一个基因,原核生物的一个mRNA分子通常含有多个基因,而除少数较低等真核生物外,一个mRNA分子一般只含有一个基因,编码一条多肽链。参考资料来源:百度百科——转录参考资料来源:百度百科——复制
以大肠杆菌为例,详细阐述原核生物的转录过程
乳糖(lac)操纵子由调节基因,启动基因、操纵基因和三个结构基因lacZ、lacY、lacA组成。 调节基因lacI组成型表达,编码阻遏蛋白,既有与操纵基因lacO结合的位点,也有与诱导物结合的位点。当诱导物与阻遏蛋白结合时,可改变阻遏蛋白的构象,使其无法与lacO结合。阻遏蛋白具有阻止转录和识别小分子诱导物的双重性,因此它的活性状态直接决定启动基因是开启或关闭。 当缺乏乳糖时,阻遏蛋白以活性状态结合在lacO上,这就影响了RNA聚合酶与lacP的结合,并阻碍RNA聚合酶通过lacO,这样结构基因就无法转录;当乳糖存在时,因作为诱导物的乳糖与阻遏蛋白结合,改变了它的构象,成为失活构象而脱离lacO,于是RNA聚合酶就可以与启动基因结合并开始转录。
真核生物转录前的基因调节主要有哪些方式
1.借助甲基化修饰DNA,可关闭基因活性。2,核心组蛋白乙酰化对核小体结构的影响,组蛋白被修饰后相信核 小体的聚合受阴,3,染色质的异染色质化可关闭基因的活性。
DNA复制与RNA转录各有何特点
一、DNA复制的特点1、需要引物:DNA聚合酶必须以一段具有3"端自由羟基(3"-OH)的RNA作为引物,才能开始聚合子代DNA链。RNA引物的大小,在原核生物中通常为50~100个核苷酸,而在真核生物中约为10个核苷酸。2、半保留复制:是以最开始的双链分子中的一条作为模板进行DNA复制,产生两个完全一致的DNA分子。3、DNA复制不能沿滞后链进行:从头到尾的DNA链,直到已经复制了足够长度的DNA分子,否则DNA复制不会继续沿着模本链进行复制,DNA复制于是从新合成复制叉处分开。4、双向复制:DNA复制时,以复制起始点为中心,向两个方向进行复制。但在低等生物中,也可进行单向复制。5、有一定的复制起始点:DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段,即复制起始点(复制子)。在原核生物中,复制起始点通常为一个,而在真核生物中则为多个。二、DNA转录的特点1、以特定的DNA片段作为模板:转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。2、转录产生引物:在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。3、转录仅以DNA的一条链作为模板:被选为模板的单链叫模板链,又称无义链;另一条单链叫非模板链,又称编码链、有义链、信息链。扩展资料DNA复制与转录的区别:1、过程不同复制的过程:DNA解旋,以两条链为模板,按碱基互补配对原则,合成两条子链,子链与对应母链螺旋化。转录的过程:DNA解旋,以其一条链为模板,按碱基互补配对原则,形成mRNA单链,进入细胞质与核糖体结合。2、发生的过程不同对具有细胞结构的生物而言,DNA复制发生于细胞分裂过程中,转录则发生于细胞分裂、分化等过程。3、形式不同DNA复制是边解旋边复制,半保留复制。转录是边解旋边转录,DNA双链全保留。转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程,并不是一个DNA分子通过转录可生成一个RNA分子,实际上,转录是以基因的一条链为模板合成RNA的过程。参考资料来源:百度百科-DNA复制参考资料来源:百度百科-转录
为什么原核细胞转录和翻译可同时进行,而真核细胞不可以
因为原核生物转录的产所是在细胞质基质,核糖体也存在于细胞质基质,所以可以同时进行,而真核生物转录的产所是在细胞核,而翻译的场所是在细胞质基质,因此必须先转录得到mRNA后,mRNA通过核孔到达细胞质基质之后再进行翻译。转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。翻译是蛋白质生物合成(基因表达中的一部分,基因表达还包括转录)过程中的第二步(转录为第一步),翻译是根据遗传密码的中心法则,将成熟的信使RNA分子(由DNA通过转录而生成)中“碱基的排列顺序”(核苷酸序列)解码,并生成对应的特定氨基酸序列的过程。扩展资料:转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。被选为模板的单链叫模板链,又称信息链、无义链;另一条单链叫非模板链,又称编码链,有义链。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。参考资料:百度百科——转录参考资料:百度百科——翻译
转录和复制有何相同和区别?
转录和复制的相同之处:都是酶促的核苷酸聚合过程;都以DNA为模板;都需要依赖DNA的聚合酶;聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键,都从5"之3"方向延伸聚核苷酸链。区别:复制是两股链均复制,转录是模板链转录(不对称转录)原料,复制是dNTP转录是NTP。进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特定的DNA片断作为遗传信息模板,以依赖DNA的RNA聚合酶作为催化剂,通过碱基互补的原则合成前体mRNA。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,完成转录起始、延伸、终止等过程。生成的mRNA携有的密码子,进入核糖体后可以实现蛋白质的合成。转录仅以DNA的一条链作为模板。扩展资料:转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。真核生物RNA的转录与原核生物RNA的转录过程在总体上基本相同,但是,其过程要复杂得多,主要有以下几点不同:⒈ 真核生物RNA的转录是在细胞核内进行的,而蛋白质的合成则是在细胞质内进行的。所以,RNA转录后首先必须从核内运输到细胞质内,才能指导蛋白质的合成。⒉ 真核生物一个mRNA分子一般只含有一个基因,原核生物的一个mRNA分子通常含有多个基因,而除少数较低等真核生物外,一个mRNA分子一般只含有一个基因,编码一条多肽链。参考资料来源:百度百科——转录参考资料来源:百度百科——复制
转录过程所需要的原料是什么
转录过程所需要的原料是:腺嘌呤核苷三磷酸、胞苷三磷酸、鸟苷三磷酸、尿苷三磷酸四种核苷三磷酸。转录也称为RNA的生物合成,是以DNA的一条链为模板,在DNA依赖的RNA聚合酶催化下,以4种核苷三磷酸为原料,按碱基配对的方式合成一条RNA分子的过程。对于有些RNA病毒,RNA也可以指导合成RNA。转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。
真核生物基因转录前水平的调节主要有哪些方式如题
真核生物基因表达调控与原核生物有很大的差异。原核生物同一群体的每个细胞都和外界环境直接接触,它们主要通过转录调控,以开启或关闭某些基因的表达来适应环境条件(主要是营养水平的变化),故环境因子往往是调控的诱导物。而大多数真核生物,基因表达调控最明显的特征时能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因,从而实现“预定”的,有序的,不可逆的分化和发育过程,并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常的生理功能。真核生物基因表达调控据其性质可分为两大类:第一类是瞬时调控或叫可逆调控,相当于原核生物对环境条件变化所做出的反应。瞬时调控包括某种代谢底物浓度或激素水平升降时及细胞周期在不同阶段中酶活性和浓度调节。第二类是发育调节或称不可逆调控,这是真核生物基因表达调控的精髓,因为它决定了真核生物细胞分化,生长,和发育的全过程。据基因调控在同一时间中发生的先后次序,又可将其分为转录水平调控,转录后的水平调控,翻译水平调控及蛋白质加工水平的调控,研究基因调控应回答下面三个主要问题:①什么是诱发基因转录的信号?②基因调控主要是在那个环节(模板DNA转录,mRNA的成熟或蛋白质合成)实现的?③不同水平基因调控的分子机制是什么? 回答上述这三个问题是相当困难的,这是因为真核细胞基因组DNA含量比原核细胞多,而且在染色体上除DNA外还含有蛋白质,RNA等,在真核细胞中,转录和翻译两个过程分别是在两个彼此分开的区域:细胞核和细胞质中进行。一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链;真核细胞DNA与组蛋白及大量非组蛋白相结合,只有小部分DNA是裸露的;而且高等真核细胞内DNA中很大部分是不转录的;真核生物能够有序的根据生长发育阶段的需要进行DNA片段重排,并能根据需要增加细胞内某些基因的拷贝数等。尽管难度很大,科学家们还是建立起多个调控模型。 转录水平的调控 Britten和Davidson于1969年提出的真核生物单拷贝基因转录调控的模型——Britten—Davidson模型。该模型认为在整合基因的5"端连接着一段具有高度专一性的DNA序列,称之为传感基因。在传感基因上有该基因编码的传感蛋白。外来信号分子和传感蛋白结合相互作用形成复合物。该复合物作用于和它相邻的综合基因组,亦称受体基因,而转录产生mRNA,后者翻译成激活蛋白。这些激活蛋白能识别位于结构基因(SG)前面的受体序列并作用于受体序列,从而使结构基因转录翻译。 若许多结构基因的临近位置上同时具有相同的受体基因,那么这些基因就会受某种激活因子的控制而表达,这些基因即属于一个组(set),如果有几个不同的受体基因与一个结构基因相邻接,他们能被不同的因子所激活,那么该结构基因就会在不同的情况下表达,若一个传感基因可以控制几个整合基因,那么一种信号分子即可通过一个相应的传感基因激活几组的基因。故可把一个传感基因所控制的全部基因归属为一套。如果一种整合基因重复出现在不同的套中,那么同一组基因也可以属于不同套。 染色质结构对转录调控的影响 真核细胞中染色质分为两部分,一部分为固缩状态,如间期细胞着丝粒区、端粒、次溢痕,染色体臂的某些节段部分的重复序列和巴氏小体均不能表达,通常把该部分称为异染色质。与异染色质相反的是活化的常染色质。真核基因的活跃转录是在常染色质进行的。转录发生之前,常染色质往往在特定区域被解旋或松弛,形成自由DNA,这种变化可能包括核小体结构的消除或改变,DNA本身局部结构的变化,如双螺旋的局部去超螺旋或松弛、DNA从右旋变为左旋,这些变化可导致结构基因暴露,RNA聚合酶能够发生作用,促进了这些转录因子与启动区DNA的结合,导致基因转录,实验证明,这些活跃的DNA首先释放出两种非组蛋白,(这两种非组蛋白与染色质结合较松弛),非组蛋白是造成活跃表达基因对核算酶高度敏感的因素之一。 的科学家已经认识到,转录水平调控是大多数功能蛋白编码基因表达调控的主要步骤。关于这一调控机制,现有两种假说。一种假说认为,真核基因与原核基因相同,均拥有直接作用在RNA聚合酶上或聚合酶竞争DNA结合区的转录因子,第二种假说认为,转录调控是通过各种转录因子及反式作用蛋白对特定DNA位点的结合与脱离引起染色质构象的变化来实现的。真核生物DNA严密的染色质结构及其在核小体上的超螺旋结构,决定了真核基因表达与DNA高级结构变化之间的必然联系。DNA链的松弛和解旋是真核基因起始mRNA合成的先决条件。 转录后水平的调控 真核生物基因转录在细胞核内进行,而翻译则在细胞质中进行。在转录过程中真核基因有插入序列,结构基因被分割成不同的片段,因此转录后的基因调控是真核生物基因表达调控的一个重要方面,首要的是RNA的加工、成熟。各种基因转录产物RNA,无论rRNA、tRNA还是mRNA,必须经过转录后的加工才能成为有活性的分子。 翻译水平上的调控 蛋白质合成翻译阶段的基因调控有三个方面:①蛋白质合成起始速率的调控;②MRNA的识别;③激素等外界因素的影响。蛋白质合成起始反应中要涉及到核糖体、mRNA蛋白质合成起始因子可溶性蛋白及tRNA,这些结构和谐统一才能完成蛋白质的生物合成。mRNA则起着重要的调控功能。 真核生物mRNA的“扫描模式”与蛋白质合成的起始。真核生物蛋白合成起始时,40S核糖体亚基及有关合成起始因子首先与mRNA模板近5"端处结合,然后向3"方向移行,发现AUG起始密码时,与60S亚基形成80S起始复合物,即真核生物蛋白质合成的“扫描模式”。 mRNA5"末端的帽子与蛋白质合成的关系。真核生物5"末端可以有3种不同帽子:0型、I型和II型。不同生物的mRAN可有不同的帽子,其差异在于帽子的碱基甲基化程度不同。帽子的结构与mRNA的蛋白质合成速率之间关系密切:①帽子结构是mRNA前体在细胞核内的稳定因素,也是mRNA在细胞质内的稳定因素,没有帽子的转录产物会很快被核酸酶降解;②帽子可以促进蛋白质生物合成过程中起始复合物的形成,因此提高了翻译强度;③没有甲基化(m7G)的帽子(如GPPPN-)以及用化学或酶学方法脱去帽子的mRNA,其翻译活性明显下降。 mRNA的先导序列可能是翻译起始调控中的识别机制。可溶性蛋白因子的修饰对翻译也起着重要的调控作用。
生物的转录和逆转录是什么意思啊
转录是蛋白质生物合成的第一步,也是tRNA和rRNA的合成步骤。转录 (transcription)是以DNA中的一条单链为模板,游离碱基为原料,在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。与DNA的复制相比,有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取被复制为mRNA,就是说一特定的DNA片断作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂的合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物。在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。RNA聚合酶合成RNA时不需引物,但无校正功能。逆转录reverse transcription:也称反转录以RNA为模板合成DNA的过程,是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。其过程先以经剪切作用除去内含子的成熟mRNA为模板,合成RNA/DNA杂化双链,然后水解RNA链,再以剩下的DNA单链为模板合成DNA双链。多次复制后形成多个DNA双链,然后以这些DNA双链中的每双链的其中的单条(该条与原始病毒RNA链互补)为模板,复制出RNA(该RNA与原始病毒RNA相同,不考虑遗传变异) 艾滋病病毒(HIV)就是一种逆转录病毒.
为什么说基因表达调控中,转录水平的调控是关键环节
因为基因的表达最终形式是形成蛋白质,然后蛋白质行使各种各样的功能,但在形成蛋白质的过程中需要转录形成mRNA,然后以mRNA为模板形成蛋白质,也是形成最终蛋白质的中介,所以非常关键。转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂,合成前体mRNA。扩展资料在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。被选为模板的单链叫模板链,又称无义链;另一条单链叫非模板链,又称编码链、有义链、信息链。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。原核生物的RNA聚合酶分子量很大,通常由5个亚基组成;两个α亚基,β,β′和σ,可写作α2ββ′σ。含有5个亚基的酶叫全酶,失去σ亚基的叫核心酶(α2ββ′)。后来发现,核心酶还有一个亚基ω,因此,核心酶的亚基组成可表示为α2ββ′ω,全酶的亚基组成可以表示为α2ββ′ωσ。核心酶也能催化RNA的合成,但没有固定的起始点,也不能区分双链DNA的信息链与非信息链。σ亚基能识别模板上的信息链和启动子,因而保证转录能从固定的正确位置开始。
复制和转录的异同点
转录和复制的相同之处:都是酶促的核苷酸聚合过程;都以DNA为模板;都需要依赖DNA的聚合酶;聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键,都从5"之3"方向延伸聚核苷酸链。区别:复制是两股链均复制,转录是模板链转录(不对称转录)原料,复制是dNTP转录是NTP。进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特定的DNA片断作为遗传信息模板,以依赖DNA的RNA聚合酶作为催化剂,通过碱基互补的原则合成前体mRNA。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,完成转录起始、延伸、终止等过程。生成的mRNA携有的密码子,进入核糖体后可以实现蛋白质的合成。转录仅以DNA的一条链作为模板。扩展资料:转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。真核生物RNA的转录与原核生物RNA的转录过程在总体上基本相同,但是,其过程要复杂得多,主要有以下几点不同:⒈ 真核生物RNA的转录是在细胞核内进行的,而蛋白质的合成则是在细胞质内进行的。所以,RNA转录后首先必须从核内运输到细胞质内,才能指导蛋白质的合成。⒉ 真核生物一个mRNA分子一般只含有一个基因,原核生物的一个mRNA分子通常含有多个基因,而除少数较低等真核生物外,一个mRNA分子一般只含有一个基因,编码一条多肽链。参考资料来源:百度百科——转录参考资料来源:百度百科——复制
转录和DNA复制有什么相同点和不同点?
一、DNA复制与转录的不同:1、过程不同DNA 复制的过程为解旋、配对、合成:DNA解旋,以两条链为模板,按碱基互补配对原则,合成两条子链,子链与对应母链螺旋化。而转录的过程是解旋、配对、形成单链,DNA解旋,以其一条链为模板,按碱基互补配对原则,形成mRNA单链,进入细胞质与核糖体结合。2、发生的过程不同对具有细胞结构的生物而言,DNA复制发生于细胞分裂过程中,转录则发生于细胞分裂、分化等过程。3、形式和特点不同DNA复制是边解旋边复制,半保留复制。转录是边解旋边转录,DNA双链全保留。转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程,并不是一个DNA分子通过转录可生成一个RNA分子,实际上,转录是以基因的一条链为模板合成RNA的过程。二、相同点1、进行的过程都需要模板;2、除了模板之外,都需要原料、特定的酶的催化和能量;3、DNA复制和转录均在细胞内进行,都是生物遗传物质传递的重要组成部分。参考资料来源:百度百科-DNA复制参考资料来源:百度百科-转录
分子生物学的转录调控中,什么是cis element 什么是trans element
cis-elements (顺式作用元件)指对基因调节起作用的DNA上的序列.由于一般都处于其所调控基因的上游,因此称为cis-.比如你说的enhancer,还有attenuator、operator等,都被称为cis-elements.而trans-elements(反式作用因子)则是对基因起调节作用的蛋白质.由于这些蛋白质由其他基因转录产生,不位于其所调节基因的上下游,并且其作用的时候要和cis-elements结合才能发挥作用,因此称为trans-.各种转录因子都属于trans-elements.
转录和复制有什么区别?
转录和复制的相同之处:都是酶促的核苷酸聚合过程;都以DNA为模板;都需要依赖DNA的聚合酶;聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键,都从5"之3"方向延伸聚核苷酸链。区别:复制是两股链均复制,转录是模板链转录(不对称转录)原料,复制是dNTP转录是NTP。进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特定的DNA片断作为遗传信息模板,以依赖DNA的RNA聚合酶作为催化剂,通过碱基互补的原则合成前体mRNA。RNA聚合酶通过与一系列组分构成动态复合体,完成转录起始、延伸、终止等过程。生成的mRNA携有的密码子,进入核糖体后可以实现蛋白质的合成。转录仅以DNA的一条链作为模板。扩展资料:转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。真核生物RNA的转录与原核生物RNA的转录过程在总体上基本相同,但是,其过程要复杂得多,主要有以下几点不同:⒈ 真核生物RNA的转录是在细胞核内进行的,而蛋白质的合成则是在细胞质内进行的。所以,RNA转录后首先必须从核内运输到细胞质内,才能指导蛋白质的合成。⒉ 真核生物一个mRNA分子一般只含有一个基因,原核生物的一个mRNA分子通常含有多个基因,而除少数较低等真核生物外,一个mRNA分子一般只含有一个基因,编码一条多肽链。参考资料来源:百度百科——转录参考资料来源:百度百科——复制
能被称作转录形成的RNA只是信使RNA吗
还有rRNA和tRNA都是通过转录合成的,还有病毒RNA的合成转录(Transcription)是蛋白质生物合成的第一步,也是tRNA和rRNA的合成步骤。转录 (transcription)是以DNA中的一条单链为模板,游离碱基为原料,在DNA依赖的RNA聚合酶催化下合成RNA链的过程。与DNA的复制相比,有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取被复制为mRNA,就是说一特定的DNA片断作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂的合成前体mRNA。在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物。在反转录病毒感染中也起到重要作用。转录仅以DNA的一条链作为模板。DNA上的转录区域称为转录单位(transcription unit)。RNA聚合酶合成RNA时不需引物,但无校正功能。
转录因子是基因调控的蛋白吗
不是~~~转录因子是在基因转录时所必需的一类分子,它们相互结合形成复合体,起始、延伸和终止转录。转录调控蛋白起调节基因转录作用,提高和降低基因表达的水平,以适用机体的需要。
基因水平的调节,基因转录水平的调节,酶代谢水平的调节有什么含义
你是大学生么?问题有点深度啊3种调节最终目的都是为了调节机体的生命活动,或者是形状。基因水平的调节,简单理解就是控制基因的表达与否。也就是基因的选择性表达。基因转录水平调节,是控制形成的mRNA的数量。因为他的数量会影响到单位时间内合成的蛋 白质的量,通过控制他,就可以控制生命所需要的蛋白质酶代谢水平的调节,主要是调节酶的合成量和是否合成。生命活动中有些酶是一直存在的,有 些酶确是需要特定的时间和空间才会合成的,还有即便是一直存在的酶也 是会有含量的差异。3种调节并不是独立的,就看选择的出发点是什么。分析的角度是什么。例如,转录水平调节如果是控制酶合成的,那么肯定也影响到了酶的数量。
原核基因转录调节与原核基因表达调控的区别
相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节2.不同点:A.原核基因的表达调控主要包括转录和翻译水平ue007真核基因的表达调控主要包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次B.原核基因表达调控主要为负调控,真核主要为正调控C.原核转录不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由sita因子决定基因表的的特异性ue007真核基因转录起始需要基础特异两类转录因子ue007依赖DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用ue007调控转录激活D.原核基因表达调控主要采用操纵子模型ue007转录出多顺反子RNAue007实现协调调节ue007真核基因转录产物为单顺反子RNAue007功能相关蛋白的协调表达机制更为复杂。 真核生物基因表达调控的环节主要在转录水平ue007其次是翻译水平。原核生物基因以操纵子的形式存在。转录水平调控涉及到启动子、sita因子ue007与RNA聚合酶结合ue007、阻遏蛋白ue007负调控ue007、正调控蛋白、倒位蛋白、RNA聚合酶抑制物、衰减子等。翻译水平的调控涉及SD序列、mRNA的稳定性ue007不稳定(5"端和3"端的发夹结构可保护不被酶水解mRNA的5"端与核糖体结合ue007可明显提高稳定性)、翻译产物及小分子RNA的调控作用。 真核生物基因表达的调控环节较多ue007在DNA水平上可以通过染色体丢失、基因扩增、基因重排、DNA甲基化、染色体结构改变影响基因表达。在转录水平主要通过反式作用因子调控转录因子与TATA盒的结合、RNA聚合酶与转录因子-DNA复合物的结合及转录起始复合物的形成。在转录后水平主要通过RNA修饰、剪接及mRNA运输的控制来影响基因表达。在翻译水平有影响起始翻译的阻遏蛋白、5"AUG、5"端非编码区长度、mRNA的稳定性调节及小分子RNA。真核基因调控中最重要的环节是基因转录ue007真核生物基因表达需要转录因子、启动子、沉默子和增强子。
ATG是+1位,还是转录起始位点是+1位
通常情况下,文献中所说的+1位,是转录起始位点,即TSS;个别情况中,有的文献中会将ATG规定为+1位置,具体要看文献中的说明。如果没有特别说明,那么TSS位置为+1位。望采纳。
mRNA上所有的密码子均来自编码区的转录么?有可能来自非编码区的转录么?
是的,均来自编码区的转录。不可能来自非编码区。————————基因分为:编码区,非编码区。编码区是指能够转录信使RNA的部分,它能够合成相应的蛋白质;而非编码区是不能够转录信使RNA的DNA结构,但是它能够调控遗传信息的表达。 真核生物的基因组成是编码区和非编码区,其中编码区是由外显子和内含子组成的,但是其中内含子又是非编码序列,所以说真核细胞基因结构中,非编码区和内含子是非编码序列 。 内含子属于编码区。含有内含子的基因能转录出前体RNA,再由内含子转录出来的部分进行自我切割,才得到成熟的mRNA,没有内含子也就没有自我切割。原核细胞只有编码区和非编码区!没有内含子和外显子之分。真核生物才有内含子和外显子。
基因中的编码区和非编码区都能够转录成RNA吗
非编码区不转录,主要起调控的作用。编码区都转录,转录之后剪切掉内含子序列。
如何寻找一个基因的转录起始位点
已知基因的结构包括编码区和非编码区,编码区分上游和下游,真核生物基因的编码区还分外显子和内含子.即基因的结构是非编码区上游、编码区、非编码区的下游.在编码区的上游有启动子,其上含有转录起始位点(TSS)、在编码区先有起始密码子编码序列(ATG),最后有终止密码子编码序列(TGA)、在非编码区的下游有终止子,其上含有转录终止位点(TTS),所以在一个典型的基因内部,以上四种序列的排列顺序是TSS-ATG-TGA-TTS.故选:B.
转录单元与编码区的区别?
转录单元转录单元(transcriptionunit)是一段以启动子开始至终止子结束的DNA序列。编码区编码区是细胞DNA的一部分,我们知道,基因分为:编码区,非编码区。编码区是指能够转录信使RNA的部分,它能够合成相应的蛋白质,而非编码区是不能够转录信使RNA的DNA结构。但是它能够调控遗传信息的表达。
编码区也就是转录区吗?
其实非编码区也可以转录,转录时RNA是不成熟的,需要经过切割去掉非编码区的密码子,成为成熟的RNA,所以,在基因工程中,RNA逆转录成的DNA是不含有内含子(即非编码区)所以,整个DNA都是转录区
编码区全部转录?
1编码区除内显子全部要转录到mRNA上么?答:编码区都要转录。内含子也要转录。只不过,在转录之后形成的mRNA前体上,要把内含子部分剪切掉,才能形成成熟的mRNA,用于翻译蛋白质。2mRNA翻译时要全部翻译成蛋白质么 ?答:不是。起始密码子前面的部分和终止密码以及它后面的部分,不会翻译成蛋白质。一条mRNA,只翻译起始密码子和终止密码子之间的部分,包括起始密码子,不包括终止密码子。起始密码子并不是就在最前面,它前面还有一些不翻译成蛋白质的碱基序列。终止密码子也不是就在最后面,它后面也还有不翻译成蛋白质的碱基序列。 ——————————————————————————————————————————————————————编码区全部转录的话,终止密码在编码区的哪里,在最后么...........不在最后,在靠近最后的地方。但是,核糖体遇到了终止密码子,就停止移动了,不再编码终止密码子和它后面的的碱基序列了。
转录单元与编码区的区别?
转录单元转录单元(transcription unit)是一段以启动子开始至终止子结束的DNA序列。编码区编码区是细胞DNA的一部分,我们知道,基因分为:编码区,非编码区。编码区是指能够转录信使RNA的部分,它能够合成相应的蛋白质,而非编码区是不能够转录信使RNA的DNA结构。但是它能够调控遗传信息的表达。
内含子转录的意义
含有内含子的基因能转录出前体的RNA,再由内含子转录出的部分进行自我切割,得到成熟的mRNA,没有内含子就没有自我切割,没有成熟的mRNA。
内含子在转录时不参与,那么它有什么作用?
内含子的功能现在还没有完全的被探究清楚但是估计可能与基因表达的调控有关,比如在切除一些内含子之后某些基因无法表达或者错误表达 一种说法认为,内含子对基因的转录具有某种调控作用,比如增强作用;另一种说法认为,内含子可以把不同的外显子组合在一起(如:某段基因中有1、2、3、4、5这五个外显子被四个内含子分开,内含子可以把1、2、4、5或1、2、3分别组合在一起),使其形成不同功能的蛋白质。”
细菌基因转录有外显子,内含子
没有。原核生物的基因没有外显子和内含子之分。
内含子转不转录
要转录啊.在基因表达时,内含子和外显子在转录时都要转,但是这次形成的是前体mRNA,然后在细胞核内部,前体mRNA被剪开,外显子和内含子的部分被分开,然后外显子的组合起来送出细胞核,内含子的部分就被分解了,送出去的mRNA才叫成熟mRNA.你老师的意思可能就是认为成熟的mRNA没有内含子吧.
反转录的反转录酶与反转录过程
反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(cDNA)。反转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有反转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。大多数反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性。①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高。②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子。③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。除此之外,有些反转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在反转录酶的作用下,合成出互补的DNA(cDNA),由此可构建出cDNA文库(cDNA library),从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。反转录的简要过程表示如下:反转录酶的作用是以dNTP为底物,以RNA为模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3′桹H末端上,按5′→3′方向,合成一条与RNA模板互补的DNA单链,这条DNA单链叫做互补DNA(complementary DNA, cDNA),它与RNA模板形成RNADNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此,完成由RNA指导的DNA合成过程。
反转录酶合成方向
反转录酶合成方向为5"→3"mRNA。转录过程包括RNA聚合酶与模板DNA结合,起始点由σ因子识别。转录起始,通常由pppG开始:5"-3"方向延长RNA链。链的终止,有特殊的终止信号区。
hiv病毒逆转录酶怎么来
RNA 指导的 DNA 聚合酶,是以 RNA 为模板合成DNA的酶。这种酶是 1970 年美国科学家特明 (H. M. Temin) 和巴尔的摩 (D. Baltimore) 分别于动物致癌 RNA 病毒中发现,他们并因此获得 1975 年度诺贝尔生理学或医学奖。当 RNA 致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒 (Rous sarcoma virus) 进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒 RNA 互补的 DNA 单链,继而复制出双螺旋 DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体 DNA 中,此整合的 DNA 可能潜伏(不表达)数代,待遇适合的条件时被激活,利用宿主的酶系统转录成相应的 RNA,其中一部分作为病毒的遗传物质,另一部分则作为 mRNA 翻译成病毒特有的蛋白质。最后,RNA 和蛋白质被组装成新的病毒粒子。在一定的条件下,整合的 DNA 也可使细胞转化成癌细胞。 含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒,逆转录酶催化的反应叫反转录 (reverse transcription)。在这个过程中,遗传信息流动的方向是从 RNA 到 DNA,正好与转录过程相反,故称反转录。病毒逆转录酶含 Zn2+,以脱氧核苷三磷酸为底物,从 5"- 到 3"- 合成 DNA,反应需要引物。这个酶在许多方面与 DNA 聚合酶相似。目前已发现不少动物反转录病毒,近年来也发现了几种人类反转录病毒。艾滋病毒也是一种反转录病毒。有的逆转录酶已提纯,可作为合成某些特定 RNA 的互补 DNA 的工具酶,也可用于 DNA 的序列分析和克隆重组 DNA。 逆转录酶具有3种酶活力(是一种多功能酶): ①它可利用RNA为模板合成互补DNA链,形成RNA-DNA杂化分子(RNA指导的DNA聚合酶活性); ②它以新合成的DNA为模板合成另一条互补DNA链,形成DNA双链分子(DNA指导的DNA聚合酶活性); ③具有核糖核酸酶活性,专门水解RNA-DNA杂化分子中的RNA链。
RNA复制酶,逆转录酶存在于病毒中还是在宿主细胞中合成
RNA复制酶在宿主细胞中合成,逆转录酶是病毒中合成的。反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在反转录酶的作用下,合成出互补的DNA(cDNA),由此可构建出cDNA文库,从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。病毒RNA进入宿主细胞后,可进行复制,即在RNA指导的RNA聚合酶催化进行RNA合成反应。RNA复制酶催化的合成反应是以RNA为模板,由5′向3′方向进行RNA链的合成。RNA复制酶缺乏校对功能的内切酶活性,因此RNA复制的错误率较高,RNA复制酶只是特异地对病毒的RNA起作用,而宿主细胞的RNA一般并不进行复制。扩展资料:多反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。1、RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。2、RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子 。3、DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。参考资料来源:百度百科-逆转录酶参考资料来源:百度百科-RNA复制酶
人体内有没有逆转录酶?
人体是没有逆转录酶的,逆转录酶存在于RNA病毒。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA 为模板,以dNTP 为底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物,在tRNA 3"-OH 末端上,根据碱基配对的原则,按5"-3"方向合成一条与RNA 模板互补的DNA 单链,这条DNA 单链叫做互补DNA (complementary DNA,CDNA)。扩展资料:M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所抑制,该酶绝对不能用Promega的RiboprobeAMV反转录酶5X反应缓冲液,也不能用Promega的RiboclonecDNA第一条链缓冲液,因为这二种缓冲液均含有亚精胺。
逆转录酶存在于那些生物
逆转录酶存在于RNA病毒。 当RNA病毒颗粒进入宿主细胞后,在脱衣酶的作用下,壳体裂解,释放出RNA,首先以病毒RNA分子为模板,在病毒自身携带逆转录酶的催化作用下,反转录出病毒的DNA分子,这种病毒DNA能与宿主细胞染色体的DNA链整合,又以整合在细胞DNA上的病毒DNA为模板,转录新的病毒RNA与病毒mRNA,后者与核糖体结合,翻译出各种病毒蛋白,最后组装成新的子代病毒。这里面所有的原料都是利用的宿主的。
逆转录酶简介
目录 1 拼音 2 英文参考 3 注解 1 拼音 nì zhuǎn lù méi 2 英文参考 reversetranase 3 注解 逆转录酶又称RNA指导的DNA聚合酶。是以RNA为模板合成DNA的酶。这种酶是1970年美国科学家特明(H.M.Temin)和巴尔的摩(D.Baltimore)分别于动物致癌RNA病毒中发现的,他们并因此获得1975年度诺贝尔生理学或医学奖。当RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒(Rous sara virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒RNA互补的DNA单链,继而复制出双螺旋DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体DNA中,此整合的DNA可能潜伏(不表达)数代,待遇适合的条件时被激活,利用宿主的酶系统转录成相应的RNA,其中一部分作为病毒的遗传物质,另一部分则作为mRNA翻译成病毒特有的蛋白质。最后,RNA和蛋白质被组装成新的病毒粒子。在一定的条件下,整合的DNA也可使细胞转化成癌细胞。 含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒,逆转录酶催化的反应叫反转录(reversetranscription)。在这个过程中,遗传信息流动的方向是从RNA到DNA,正好与转录过程相反,故称反转录。病毒逆转录酶含Zn2 ,以脱氧核苷三磷酸为底物,从5"到3"合成DNA,反应需要引物。这个酶在许多方面与DNA聚合酶相似。目前已发现不少动物反转录病毒,近年来也发现了几种人类反转录病毒。艾滋病毒也是一种反转录病毒。有的逆转录酶已提纯,可作为合成某些特定RNA的互补DNA的工具酶,也可用于DNA的序列分析和克隆重组DNA。
转录酶的本质是蛋白质还是RNA?那逆转录酶呢?我混乱了!
转录酶和逆转录酶都是蛋白质.酶,绝大多是是由蛋白质构成的,但少数是由RNA构成的. 逆转录酶由于其执行的功能相当于转录的逆过程,所以有翻译为逆转录酶.而其催化进行的过程是转录的反方向,是从RNA到DNA,所以也有翻译为反转录酶的.
反转录酶有两种,它们的来源,功能有何区别
1 一种是来源于哺乳动物(M-MLV),另一种来源于鸟类(AMV)2 哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。3 M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。 反转录酶该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所抑制,该酶绝对不能用Promega的RiboprobeAMV反转录酶5X反应缓冲液,也不能用Promega的RiboclonecDNA第一条链缓冲液,因为这二种缓冲液均含有亚精胺。
1-染色体的连续性是指什么? 2-逆转录酶是什么?
染色体的连续性问题Montsomery(1901)和瑟顿(Sutton,1902)都提供了肯定证明.他们指陈在有丝分裂和减数分裂中有些染色体是可以个别分辨的,具有同一特征的染色体在每次细胞分裂中都一再出现.此外,他们还指出在第一前期中两个相同的染色体配对(联会)但在减数分裂时彼此又分开(见下文).这样一来就得出了这样的结论,每个物种的染色体组含有成对的同源染色体,其中一个来自雌配子(卵细胞),另一个来自雄配子(精子),这已由van Beneden于1883年观察到.从受精(形成合子)开始经过无数细胞分裂直到形成新配子以前的减数分裂,这些染色体显然保持着它们本身的同一性(完全相同).瑟顿在他的文章结尾的结论是:“父本和母本染色体结合成对以及随后在减数分裂时分开……可能构成孟德尔遗传定律的物质基础”. 逆转录酶 逆转录酶(reversetranscriptase)又称RNA指导的DNA聚合酶.是以RNA为模板合成DNA的酶.这种酶是1970年美国科学家特明(H.M.Temin)和巴尔的摩(D.Baltimore)分别于动物致癌RNA病毒中发现的,他们并因此获得1975年度诺贝尔生理学或医学奖.当RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒(Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒RNA互补的DNA单链,继而复制出双螺旋DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体DNA中,此整合的DNA可能潜伏(不表达)数代,待遇适合的条件时被激活,利用宿主的酶系统转录成相应的RNA,其中一部分作为病毒的遗传物质,另一部分则作为mRNA翻译成病毒特有的蛋白质.最后,RNA和蛋白质被组装成新的病毒粒子.在一定的条件下,整合的DNA也可使细胞转化成癌细胞. 含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒,逆转录酶催化的反应叫反转录(reve-rsetranscrip-tion).在这个过程中,遗传信息流动的方向是从RNA到DNA,正好与转录过程相反,故称反转录.病毒逆转录酶含Zn2+,以脱氧核苷三磷酸为底物,从5"到3"合成DNA,反应需要引物.这个酶在许多方面与DNA聚合酶相似.目前已发现不少动物反转录病毒,近年来也发现了几种人类反转录病毒.艾滋病毒也是一种反转录病毒.有的逆转录酶已提纯,可作为合成某些特定RNA的互补DNA的工具酶,也可用于DNA的序列分析和克隆重组DNA.
反转录酶与逆转录酶是不是一种东西?
恩....反转录酶就是逆转录酶..只是翻译不一样而以.....英文名称:Reversetranscripatase由于其执行的功能相当于转录的逆过程,所以有翻译为逆转录酶.而其催化进行的过程是转录的反方向,是从RNA到DNA,所以也有翻译为反转录酶的.其实这两个名称都是指一样的东西...
逆转录酶与DNA聚合酶的区别
rna为单链,nda为双链,首先mRNA在逆转录酶的作用下复制出单链dna,这条单链再在dna聚合酶的作用下合成另外互补的单链dna。 事实上两者没有包含被包含的关系,如果非要有的话那是dna聚合酶范围大。逆转录酶是一种特殊的DNA聚合酶,是以RNA为模板的DNA聚合酶。而通常DNA聚合酶是以DNA为模板的聚合酶。
核苷类逆转录酶抑制剂有哪些
拉米夫定、替诺福韦、阿巴卡韦。核苷类反转录酶抑制剂:属于核苷或核苷酸结构衍生物,常用药有拉米夫定、替诺福韦、阿巴卡韦等。核苷是一类糖苷的总称。核苷是核酸和核苷酸的组成成分。核苷都是由D-核糖或D-Z-脱氧核糖与嘧啶碱或嘌呤碱缩合而成。
端粒酶是否具有反转录酶的活性
有,它就是基于反转录酶的活性发挥作用的。
请问逆转录酶能催化什么??
逆转录酶(reversetranscriptase)又称RNA指导的DNA聚合酶。是以RNA为模板合成DNA的酶。这种酶是1970年美国科学家特明(H.M.Temin)和巴尔的摩(D.Baltimore)分别于动物致癌RNA病毒中发现的,他们并因此获得1975年度诺贝尔生理学或医学奖。当RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒(Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒RNA互补的DNA单链,继而复制出双螺旋DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体DNA中,此整合的DNA可能潜伏(不表达)数代,待遇适合的条件时被激活,利用宿主的酶系统转录成相应的RNA,其中一部分作为病毒的遗传物质,另一部分则作为mRNA翻译成病毒特有的蛋白质。最后,RNA和蛋白质被组装成新的病毒粒子。在一定的条件下,整合的DNA也可使细胞转化成癌细胞。含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒,逆转录酶催化的反应叫反转录(reve-rsetranscrip-tion)。在这个过程中,遗传信息流动的方向是从RNA到DNA,正好与转录过程相反,故称反转录。病毒逆转录酶含Zn2+,以脱氧核苷三磷酸为底物,从5"到3"合成DNA,反应需要引物。这个酶在许多方面与DNA聚合酶相似。目前已发现不少动物反转录病毒,近年来也发现了几种人类反转录病毒。艾滋病毒也是一种反转录病毒。有的逆转录酶已提纯,可作为合成某些特定RNA的互补DNA的工具酶,也可用于DNA的序列分析和克隆重组DNA。
反转录PCR的选择
逆转录PCR是一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增;而实时PCR是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。PCR检测根据所使用的标记物不同可分为荧光探针BIOGHC Elitefast SYBR Kit和荧光染料BIOGHSC Super Probe Kit
RT -PCR的反转录酶的选择
1. Money 鼠白血病病毒(MMLV)反转录酶:有强的聚合酶活性,RNA酶H活性相对较弱。最适作用温度为37℃。2. 禽成髓细胞瘤病毒(AMV)反转录酶:有强的聚合酶活性和RNA酶H活性。最适作用温度为42℃。3.Thermus thermophilus、Thermus flavus等嗜热微生物的热稳定性反转录酶:在Mn存在下,允许高温反转录RNA,以消除RNA模板的二级结构。4.MMLV反转录酶的RNase H突变体:商品名为SuperScript 和SuperScriptⅡ。此种酶较其它酶能多将更大部分的RNA转换成cDNA,这一特性允许从含二级结构的、低温反转录很困难的mRNA模板合成较长cDNA。
反转录酶具有哪些酶活性?( )
【答案】:A、B反转录酶是一种多功能酶,具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性、依赖于DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH活性。
逆转录的逆转录酶与逆转录过程
逆转录过程由逆转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(complementary DNA, cDNA)。逆转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有逆转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有逆转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。大多数反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性。①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为赖氨酸的tRNA,在引物tRNA 3"-末端以5"→3"方向合成DNA。反转录酶中不具有3"→5"外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高。②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA 5"端水解掉RNA分子。③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。除此之外,有些逆转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。逆转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,由此可构建出cDNA文库(cDNA library),从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。 DNA杂交体-dsDNA-整合于细胞DNA-转录mRNA
逆转录需要什么酶
逆转录的过程是需要逆转录酶催化的。该逆转录酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(complementaryDNA,cDNA)。逆转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。 人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有逆转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有逆转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。 逆转录酶的作用是以dNTP为底物,以RNA为模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3"-末端上,按5"→3"方向,合成一条与RNA模板互补的cDNA单链,它与RNA模板形成RNA-cDNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此,完成由RNA指导的DNA合成过程。
RNA通过逆转录酶逆转录成DNA的过程是怎样的啊?
转录过程 包括启动、延伸和终止。 启动 RNA聚合酶正确识别DNA模板上的启动子并形成由酶、DNA和核苷三磷酸(NTP)构成的三元起始复合物,转录即自此开始。DNA模板上的启动区域常含有TATAATG顺序,称普里布诺(Pribnow)盒或P盒。复合物中的核苷三磷酸一般为GTP,少数为ATP,因而原始转录产物的5′端通常为三磷酸鸟苷(pppG)或腺苷三磷酸(pppA)。真核DNA上的转录启动区域也有类似原核DNA的启动区结构,和在-30bp(即在酶和DNA结合点的上游30核苷酸处,常以—30表示,bp为碱基对的简写)附近也含有TATA结构,称霍格内斯(Hogness)盒或TATA盒。第一个核苷三磷酸与第二个核苷三磷酸缩合生成3′-5′磷酸二酯键后,则启动阶段结束,进入延伸阶段。 延伸 σ亚基脱离酶分子,留下的核心酶与DNA的结合变松,因而较容易继续往前移动。核心酶无模板专一性,能转录模板上的任何顺序,包括在转录后加工时待切除的居间顺序。脱离核心酶的σ亚基还可与另外的核心酶结合,参与另一转录过程。随着转录不断延伸,DNA双链顺次地被打开,并接受新来的碱基配对,合成新的磷酸二酯键后,核心酶向前移去,已使用过的模板重新关闭起来,恢复原来的双链结构。一般合成的RNA链对DNA模板具有高度的忠实性。RNA合成的速度,原核为25~50个核苷酸/秒,真核为45~100个核苷酸/秒。 终止 转录的终止包括停止延伸及释放RNA聚合酶和合成的RNA。在原核生物基因或操纵子的末端通常有一段终止序列即终止子;RNA合成就在这里终止。原核细胞转录终止需要一种终止因子ρ(四个亚基构成的蛋白质)的帮助。真核生物DNA上也可能有转录终止的信号。已知真核DNA转录单元的3′端均含富有AT的序列〔如AATAA(A)或ATTAA(A)等〕,在相隔0~30bp之后又出现TTTT顺序(通常是3~5个T),这些结构可能与转录终止或者与3′端添加多聚A顺序有关。
人体内有没有逆转录酶?
人体是没有逆转录酶的,逆转录酶存在于RNA病毒。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA 为模板,以dNTP 为底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物,在tRNA 3"-OH 末端上,根据碱基配对的原则,按5"-3"方向合成一条与RNA 模板互补的DNA 单链,这条DNA 单链叫做互补DNA (complementary DNA,CDNA)。扩展资料:M-MLV反转录酶比AMV反转录酶缺乏连续性,因此要获得像AMV反转录酶反应中产生同样量的cDNA就要求使用较多单位的M-MLV反转录酶。用1微克的mRNA起始合成第一条链的cDNA,要用8单位的M-MLV反转录酶才相当于1单位的AMV反转录酶的作用。该酶很容易被亚精胺(Spermidine)所抑制,该酶绝对不能用Promega的RiboprobeAMV反转录酶5X反应缓冲液,也不能用Promega的RiboclonecDNA第一条链缓冲液,因为这二种缓冲液均含有亚精胺。
RNA逆转录到DNA需要什么酶
主要是逆转录酶,个别还需要RNA酶。逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一,需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。
逆转录名词解释是什么?
逆转录是指以RNA为模板合成DNA的过程,即将遗传信息由RNA逆向传给DNA的过程,其遗传的传递方向与转录相反。反转录酶也可写成逆转录酶又称为依赖RNA的DNA聚合酶。是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。转录的过程基因的转录是由RNA聚合酶催化进行的。基因的上游具有结合RNA聚合酶的区域,叫作启动子。启动子是一段具有特定序列的DNA,具有和RNA聚合酶特异性结合的位点,决定了基因转录的起始位点。RNA聚合酶与启动子结合后,在特定区域将DNA双螺旋两条链之间的氢键断开,使DNA解旋,形成单链区,以非编码链为模板合成RNA互补链的过程就开始了。转录的延长是以首位核苷酸的3′-OH为基础逐个加入NTP,形成磷酸二酯键,使RNA逐步从5′向3′端延伸的过程。在原核生物中,因为没有核膜的分隔,转录未完成即已开始翻译,而且在同一个DNA模板上同时进行多个转录过程。电镜下看到的羽毛状图形和羽毛上的小黑点(多聚核糖体),是转录和翻译高效率的直观表现。
逆转录原理
逆转录PCR ( RT-PCR )的原理逆转录PCR (RT-PCR )具有较高的灵敏性、操作简单等优点,常用于基因定量分析、生物学检测等,此外常用逆转录PCR克隆目的基因。 本文主要讲述了逆转录PCR的原理、重要参数以及操作注意事项。cDNA的合成是RT-PCR 的重要环节。以mRNA为模板,在逆转录酶的催化下,随机引物、oligo(dT)或基因特异性引物的引导下合成互补的DNA(complementary DNA,cDNA),再按照普通PCR的方法用两条引物以cDNA为模板,则可扩增出不含内含子的可编码完整基因的序列。逆转录PCR 重要参数不同mRNA拷贝成cDNA的效率不同;因此,适合于一种mRNA拷贝的条件可能对另一种mRNA不适合。一般来说,从事不均一mRMA群体时,所使用的条件是导致cDNA合成的终产量达到最大,下述参数十分重要。1.逆转录酶 有两种不同的逆转录酶可以催化以mRNA为模板,oligo(dT)作为引物,合成与mRNA互补的cDNA链。一种来自纯化的禽成髓细胞瘤病毒(AMV),由两条肽链组成,具有聚合酶活性和很强的RNA酶H活性,它最适温度是42℃,最适pH8.3。在高反应温度时可消除mRNA的二级结构对逆转录的阻碍,然而高水平的RNA酶H的活性既抑制cDNA产生也限制其长度。另外,禽源逆转录酶制剂可被能切割DNA的核酸内切酶污染。另一种来源于鼠白血病病毒(Mo-MLV),是单肽链的,有RNA聚合酶活性和相对较弱的RNA酶H活性,最适温度37℃,最适pH7.6,较弱的RNA酶H活性对获得2-3kb的mRNA的全长cDNA有很大好处。在第一链反应前可用氢氧化甲基汞处理,破坏mRNA的二级结构,这一步对于最适反应温度较低(37)℃的鼠源逆转录酶催化的反应可能更为重要。临合成cDNA第一链之前加入过量的巯基试剂,可以使氢氧化甲基汞从RNA上解离。2.单价阳离子 离子条件基本上影响各种模板的转录效率。用钾比用钠离子可获得较长的转录产物。对于cDNA长度的最适钾离子浓度为140-150mM。3.二价阳离子 对于反转录酶活性来说,二价阳离子是必需的。低于4mM Mg2 未能观察到活性;产生全长转录产物的最适浓度是6-10mM。4.脱氧核苷三磷酸 使用四种脱氧核苷三磷酸(dNTP)中每一种的高浓度对于有效合成cDNA是特别重要的。如果其中只有一种的浓度下降到10-50微摩尔以下,全长转录物的产量将明显下降。常用的dNTP的浓度为200-250微摩尔。材料与方法
用18s rRNA做RT-PCR的内参时,可以用oligo dT做反转录吗?
这个是不行的,需要用random primers来做反转录引物。oligo dT适合真核生物的mRNA的反转录,而这个 rRNA不同于mRNA,没有polyA尾巴,因此用oligo dT是不能反转录出rRNA的。反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(cDNA)。反转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有反转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。扩展资料实际上,用18S rRNA做内参,反转录RNA用Oligo dT,能够扩增出来时,对结果也不要表示怀疑.因为普通条件下的反转不会很纯粹,mRNA的含量在总RNA中只占5%,反转时不是仅有它被反转录,即使是rRNA也是可以部分反转成CDNA的。要不分离纯mRNA怎么要用试剂盒进行进行磁珠吸附呢。另外,没有反转的rRNA和tRNA如果没用RNA酶处理也是可以存在很长时间才会完全降解的。这样的18S rRNA做内参是不合适的,它的表达会隋时间推移降低的。
核酶和反转录酶的多功能性是否与酶的专一性矛盾
不矛盾。许多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反应也具有专一性,核酶和反转录酶的多功能性不与酶的专一性矛盾,核酶所催化的反应都是不可逆的。核酶和核酸酶属于两种不同的物质,核酶属于催化剂类活性RNA,只有较弱的核酸酶特异性。
RT-PCR中为何在逆转录结束后要让逆转录酶失活?
反转录酶在进行pcr反应前须进行高温失活,不然就会影响pcr扩增。
转录酶的本质是蛋白质还是RNA?那逆转录酶呢?我混乱了!
转录酶和逆转录酶都是蛋白质.酶,绝大多是是由蛋白质构成的,但少数是由RNA构成的. 逆转录酶由于其执行的功能相当于转录的逆过程,所以有翻译为逆转录酶.而其催化进行的过程是转录的反方向,是从RNA到DNA,所以也有翻译为反转录酶的.
凡转录酶和转录酶是什么,各在复制中有什么作用
反转录酶也就是逆转录酶是以RNA为模板合成DNA的酶转录酶作用于转录。基因转录是以DNA为模板,在依赖于DNA的RNA聚合酶的催化作用下,将4种核苷酸合成RNA也就是说转录酶是让DNA变作RNA逆转录酶正相反RNA复制出ACTG的话,属于逆转录(有T),逆转录酶
逆转录详细资料大全
逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一,需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。 基本介绍 中文名 :逆转录 外文名 :reverse transcription 发现于 :RNA病毒 套用 :cDNA合成;cDNA文库的建立 逆转录简介,逆转录过程,生物学意义, 逆转录简介 逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。爱滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。 图示 逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别,但是逆转录是RNA类病毒自主行为,在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程;反转录是进行基因工程过程中,人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA,并以之为模板人工合成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程,但地点不同,相对性的来说,逆转录在体内,反转录在体外。 逆转录过程 逆转录过程由逆转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA(complementary DNA, cDNA)。逆转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有逆转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有逆转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。 大多数反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性。①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为赖氨酸的tRNA,在引物tRNA 3"-末端以5"→3"方向合成DNA。反转录酶中不具有3"→5"外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高。②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA 5"端水解掉RNA分子。③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。除此之外,有些逆转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。逆转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,由此可构建出cDNA文库(cDNA library),从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。 逆转录酶 简要过程表示 逆转录酶的作用是以dNTP为底物,以RNA为模板,tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物,在tRNA3"-末端上,按5"→3"方向,合成一条与RNA模板互补的cDNA单链,它与RNA模板形成RNA-cDNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下,水解掉RNA链,再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此,完成由RNA指导的DNA合成过程。 逆转录病毒复制方式 DNA杂交体-dsDNA-整合于细胞DNA-转录mRNA 生物学意义 逆转录的发现有重要的理论意义和实践意义。 (1)对分子生物学的中心法则进行了修正和补充。经典的中心法则认为:DNA的功能兼有遗传信息的传递和表达,因此,DNA处于生命活动的中心位置。逆转录现象说明:至少在某些生物,RNA同样兼有遗传信息传递和表达功能。修正后的中心法则表示为:是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质,即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。某些病毒中的RNA自我复制(如菸草花叶病毒等)和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)。有些蛋白质病毒(即朊病毒,如疯牛病病毒)以蛋白质直接形成蛋白质(如疯牛病病毒是一种因错误摺叠而形成的结构异常的蛋白质,可促使与自身具有相同胺基酸序列的蛋白质发生同样的摺叠错误,从而导致大量结构异常的蛋白质的形成)。 (2)在致癌病毒的研究中发现了癌基因,在人类一些癌细胞如膀胱癌、小细胞肺癌等细胞中,也分离出与病毒癌基因相同的碱基序列,称为细胞癌基因或原癌基因。癌基因的发现为肿瘤发病机理的研究提供了很有前途的线索。 (3)在实际工作中有助于基因工程的实施。由于目的基因的转录产物易于制备,可将mRNA反向转录形成DNA用以获得目的基因。
dna聚合酶,rna聚合酶,反转录酶的区别
DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板,从将DNA由5"端点开始复制到3"端的酶。DNA聚合酶的共同特点是:(1)需要提供合成模板;(2)不能起始新的DNA链,必须要有引物提供3"-OH;(3)合成的方向都是5"→3"(4)除聚合DNA外还有其它功能。所有原核和真核的DNA聚合酶都具有相同的合成活性,都可以在3"-OH上加核苷酸使链延伸,其速率为1000 Nt/min。加什么核苷酸是根据和模板链上的碱基互补的原则而定的。RNA聚合酶(RNA polymerase):以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。RNA聚合酶(RNA polymerase)的作用是转录RNA。有的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。如大肠杆菌RNA聚合酶有四条多肽链,另有一个促进新RNA分子合成的σ因子,因此它的组成的是α2ββσ。这种结构称为全酶(holoenzyme),除去了σ因子的酶称为核心酶。噬菌体RNA聚合酶则没有亚基真核生物的RNA聚合酶分三类。RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中,转录rRNA顺序。RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中,转录大多数基因,需要“TATA”框。RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中,转录很少几种基因如tRNA基因如5SrRNA基因。有些重复顺序如Alu顺序可能也由这种酶转录。上面提到的“TATA”框又称Goldberg –Hogness顺序,是RNA聚合酶Ⅱ的接触点,是这种酶的转录单位所特有的。它在真核生物的转录基因的5"端一侧,在转录起点上游20至30个核苷酸之间有一段富含AT的顺序。如以转录起始点为0,则在-33到27个核苷酸与-27至21核苷酸之间,有一个“TATA”框。一般是7个核苷酸。原核生物中也类似“TATA”框的结构。RNA聚合酶作用在“TATAAT”(Pribnow)盒和“TTGA-CA”框附近。 反转录酶:RNA指导的DNA聚合酶,具有三种酶活性,即RNA指导的DNA聚合酶,RNA酶,DNA指导的DNA聚合酶。在分子生物学技术中,作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。在基因工程中起作用。
求助:反转录后必须RNase H 酶消化RNA吗
在逆转录病毒复制过程中,降解RNA-DNA杂化链中的RNA,需要有逆转录病毒中具有RNase活性或被感染细胞中独立的RNase H催化。当然,在体外培养时,可直接用碱除去杂化双链中的RNA。
核心酶是反转录酶的一部分吗
不是。核心酶(core enzyme):大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由6个亚基组成(2αββ"ωσ)(即两个α亚基、β亚基、β′亚基、ω亚基和σ亚基),还含有两个锌原子。而无σ亚基的酶(2αββ"ω)叫核心酶。亦指DNA聚合酶Ⅲ中由α、ε、θ三种亚基组成全酶的核心酶(core enzyme)。
rna聚合酶和反转录酶分别作用于什么部位?是磷酸二酯键吗还是什么,要准确的!
都作用于五碳糖与磷酸基之间,使之形成磷酸二酯键是的
逆转录需要DNA聚合酶吗
需要逆转录是把RNA->DNA 的过程第一步 单链RNA->单链DNA 需要逆转录酶第二部 单链DNA->双链DNA 需要DNA聚合酶这两个酶作用底物不同,反应条件也不一样 没什么关系
逆转录酶的化学本质是什么?
一般来说不同生物分离出的反转录酶具有不同结构,其中大部分是蛋白质或其亚结构如多肽,有一种比较重要的逆转录酶为端粒酶,是个由RNA和蛋白质组成的核糖核酸(RNA)-蛋白复合物,其RNA组分为模板,蛋白组分具有催化活性,以端粒3"末端为引物,合成端粒重复序列
什么叫做“逆转录酶病毒”?有何特点?有何用处?
逆转录病毒即RNA病毒,需在逆转录酶的作用下首先将RNA转变为cDNA,再在DNA复制、转录、翻译等蛋白酶作用下扩增的一类病毒。逆转录病毒是RNA病毒,它有三个基因:gag-编码病毒的核心蛋白;pol-编码逆转录酶;env-编码病毒的被膜糖蛋白。有的逆转录病毒还带有癌基因(vonc),即有的逆转录病毒有致癌作用。近年来,已设计构建成一些缺陷型病毒(defective virus)使逆转录病毒成为有用的基因载体,成功地把抗药性基因转入了人体造血前体细胞,并在细胞中表达。Hock等选用了缺失编码病毒外壳蛋白基因的逆转录病毒,因此不能合成自身的外壳,但它有识别外壳蛋白进行包装的信号(一段尚未鉴定的DNA顺序)。用这种缺陷的逆转录病毒去感染某种细胞株,这种细胞株包含有辅助病毒(helper virus)。辅助病毒能合成蛋白外壳,但缺失了识别蛋白外壳进行包装的信号,因此它不能包装成病毒颗粒。当用逆转录病毒感染细胞株后,逆转录病毒的RNA进入辅助病毒的外壳蛋白,成为病毒颗粒。这时把受感染的细胞同骨髓细胞一起培养,包装在辅助病毒外壳蛋白中的逆转录病毒RNA,进入骨髓细胞,病毒DNA插入宿主细胞基因组,基因的活性得到表达。这时,由于骨髓细胞里面没有辅助病毒,所以整合进宿主基因组的逆转录病毒,不再有外壳蛋白可供包装,因此也就无法增殖,而只能被“陷”在宿主基因组中,通过细胞分裂而传给下一代子细胞。 1970年科学家在致癌RNA病毒中发现一种特殊的RNA病毒聚合酶,该酶能以RNA为模板,根据碱基互补原则。这一过程与一般病毒转录方向相反,故称逆转录,催化此过程的酶称为逆转录酶,后来发现在哺乳动物的胚胎细胞和正分裂的淋巴细胞也含有。 逆转录病毒又称为携带逆转录酶的病毒,它先侵入宿主细胞以病毒RNA为模板,靠酶形成DNA环化,然后合到宿主细胞的染色体中去以原病毒形式在宿主细胞中一代代传下去。HIV(艾滋病病毒)就是典型的逆转录病毒
那些只含RNA病毒的RNA逆转录酶哪里来的?
同学,首先要理解,含有RNA病毒繁殖方式主要有以下几个:RNA病毒,一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶。然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RNA,最后病毒RNA和衣壳蛋白自我装配成成熟的病毒颗粒。这类病毒很多,如ssRNA噬菌体、脊髓灰质炎病毒、鼻病毒、TMV等。另一类ssRNA病毒,它们的复制特点是病毒颗粒中的ssRNA病毒为负链,进入寄主后不能直接作为mRNA,而是先以负链RNA为模板由转录酶转录出与负链RNA互补的RNA,再以这个互补RNA作为mRNA翻译出遗传密码所决定的蛋白质。这类病毒称之为负链非侵染型病毒,如滤泡性口腔炎病毒、流感病毒、副流感病毒、莴苣坏死黄化病毒等。最后,还有一类特殊的ssRNA病毒即反转录病毒。该类病毒通常引起人和动物的肿瘤,其中包括造成人免疫性缺陷症的艾滋病病毒、白血病病毒、肉瘤病毒等。在它们的髓核中携带反转录酶,能使RNA反向转录成DNA,丰富和发展了分子生物学的中心法则。它们的复制有其特有的特点,一是单链RNA的基因组必须反转录成双链DNA;二是随后这种DNA必须整合到细胞DNA中;三是整合状态长期持续下去并传给子代细胞,也可能转录RNA,生产子代病毒或使细胞转化;四是感染细胞不会死亡,分裂不停止。也就是说这类病毒的潜伏期很长,有时可以终身带毒而不发病。所以说,RNA病毒种类如此多,有的用不着逆转录酶,有的自带逆转录酶,有的则直接利用细胞内现成的逆转录酶。明白了吗?
以mRNA为模板合成cDNA的酶是 ( ) DNA连接酶 B. TaqDNA聚合酶 C. 末端转移酶 D. RNA酶 E. 逆转录酶
是逆转录酶。由于这一反应中的遗传信息的流动方向正好与绝大多数生物转录生成方向(即DNA模板转录生成RNA的方向)相反,所以此反应称为逆转录作用。逆转录酶具有三种酶活性:①RNA指导的DNA合成反应;②DNA指导的DNA合成的反应;③RNA的水解的反应。扩展资料:①RNA指导的DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为色氨酸的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子 。③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。