DNA

线粒体只会遗传自母亲，以哺乳类而言，一般在受精之后，卵子细胞就会将精子中的线粒体摧毁。 1999年发表的研究中显示，父系精子线粒体（含有mtDNA）带有泛素（ubiquitin）标记，因而在胚胎中会被挑选出来，进而遭到摧毁。 不过某些细胞外的人工受精技术可直接将精子注入卵子细胞内，可能会干扰摧毁精子线粒体的过程。由于母系遗传的特性，使得研究者能够藉由线粒体DNA，追溯到母系族谱（与之相对的为专门用来追溯父系族谱的Y染 但最近科学家发现的线粒体DNA重组特征对线粒体夏娃概念提出了挑战。由于mtDNA并非高度保守，而是拥有较快的突变速率，因此可用来研究种系发生学，生物学家挑选少量不同物种的基因，分析其序列的保留与变异程度，可建立出演化树。

1. 线粒体内部的氧化性很高，是呼吸作用的场所，容易产生大量的氧自由基，对DNA产生破坏。2. 线粒体内部DNA修复酶的活性没有细胞核内的活性强。

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如果你的祖先来自非洲以外的任何地方，我敢说你的一部分DNA源自尼安德特人。最初，现代人离开非洲后碰到了尼安德特人，他们的日子过得很舒适。这些令人愉快的往事从我们的DNA里就能看到。遗传分析表明，欧洲人和亚洲人从尼安德特人那里获得了1%至4%的DNA。有些祖先从来没有离开过非洲大陆的非洲人身上也带有一些尼安德特人的DNA，是因为在3000年前，欧洲和亚洲曾有人迁移到非洲，许多现代非洲人从这些人那里得到了尼安德特人的DNA。似乎所有人都是这样。被称为丹尼索瓦人的人种也曾与我们的祖先杂交，东南亚的一些人就有高达6%的丹尼索瓦人的DNA。有些科学家上溯到更久远的年代，他们认为，人类是不同人种杂交的产物，人类能够幸存下来，也多亏这一事实。你也许不喜欢这个观点，但是混种是很常见的事，记住这一点。棕熊和北极熊只要相遇就能成功地交配；加拉帕戈斯群岛上的大多数达尔文雀就像狒狒和长臂猿等灵长类动物一样，都是杂交而来的。南非开普敦大学的丽蓓佳·阿克曼说：“7%至10%的灵长类动物都是杂交的产物，这是很常见的。其他的没有杂交过只是因为彼此从来没有相遇过而已。”2016年7月，科学家发现了一种混种的珊瑚，它比其任何一个祖种都优越，能够在繁忙的航运通道里存活下来。这一点，它的祖种都做不到。2017年6月，研究人员重新分析了于2002年在罗马尼亚发现的一块4万年前的人类颌骨。他们发现，该骨骼从尼安德特人那里遗传到了6%至9%的DNA，是科学家分析过的现代人当中拥有尼安德特人DNA最多的。而且，他与自己的尼安德特祖先相隔只有三代——也就是说，这个人的高祖中有尼安德特人。这个颌骨代表的人种被命名为“欧斯人”。十分有趣的是，“欧斯人”并没有把尼安德特人的基因遗传给现代人类。确切地说，他们与现今的人类并没有关联，他们在某个时间点灭绝了。显然，还有其他人种完成了这个任务，因为尼安德特人的DNA今天仍然存在。阿克曼及其同事在《进化生物学》杂志撰文称，混种与其他进化进程一道“促成了人口的多样化”。阿克曼说，混种也能够带来新的组合特质，“这是一种相当具有创造性的进化力量，而这一点是人们原来没有想到的，杂交可以带来全新的结果”。阿克曼研究了杂交鼠，发现它们的牙齿常有变异，大小也变化很大。如果这些新特质有用，就会遗传给它们的后代。当然，偶然的突变也能产生有益特质；可是，如果等待这种情况发生，那要等到猴年马月。美国加利福尼亚大学伯克利分校的进化遗传学家拉斯莫斯·尼尔森说，混种能够加速这些变化。现代人的非洲祖先到达新的大陆后，与其他物种的结合能够更加迅速地适应新环境。DNA证据显示，我们从尼安德特人那里遗传了战胜某些疾病的能力。我们的祖先刚到欧洲时，免疫系统不得不竭力对付当地那些陌生的疾病；可是与尼安德特人混种后，却适应得很好。欧洲人殖民美洲时发生了同样的事，他们把灾难性的疾病带给了当地的土著人。尼尔森说：“幸存下来的是欧洲人和北美人交配产生的后代。尼安德特人和人类祖先之间也发生了类似的情况，但是规模可能更大一些。”不过，我们目前还不清楚，人类的祖先在离开非洲之前是否出现过人种杂交的情况，因为在我们分析过的DNA里还没有那么古老的DNA，我们没法找到当时人种杂交的证据。也许有些现代人是混种，有些人不是。而且，现今已知的混种情况发生得都比较晚，当时，人类已经基本进化为今天这个样子了。有些研究人员相信，混种在远古时期就已经发生过。2011年的一项研究发现，有些非洲人携带着“脱离现代人祖先的古老生物种群”的遗传物质。尼尔森没有参与这项研究，但是他说，这些结果除了混种之外难以解释。阿克曼同意这种看法。早期的类人生物有很多，常常彼此相伴，其中的一支最终发展为今天的我们。他们与早已灭绝的其他种群偶尔发生关系似乎也在情理之中。如果尼尔森和阿克曼是正确的，那就意味着我们在一定程度上都是混种。阿克曼更进一步，认为我们的进化之所以成功，也多亏了这些久远的混合。在所有那些人种里，只有我们存活到今天。我们复杂的文化显然在我们与其他物种的竞争中起到了举足轻重的作用。我们的祖先遇到其他物种时，除共享了基因外，也共享了知识。从其他物种那里学习新的习惯和技巧或许促进了我们的发展。阿克曼说：“我们拥有的创造性可能是不同种群之间互动的结果。”英国牛津布鲁克斯大学的西蒙·昂德当说：“我们进化的结果显然是擅长于复制、了解和创新，这些特质让我们成为今天的文化人。”也有人不相信混种在人类进化中起到了关键作用。法国波尔多大学的弗朗西斯科·戴里科说，在过去的10000年里，我们有许多重大的发明，而在这整个时期，只有我们这一个人类物种。这就意味着人类历史上出现创新的原因不是混种，而是其他什么。美国佐治亚州亚特兰大市艾默里大学的艾伦·史图兹说：“在人类的文化互动及其体系如何进化方面，我们基本上还没有得出什么理论。”因此，要想得出有关混种的作用的稳固结论，是很难做到的。答案也许在遗传学里。也许用不了几年，我们就能够从更古老的人类种群获得DNA序列，只有那时才能清楚地看到混种在我们的形成中起到了多大的作用。

南昌力高滨江国际天郡B座二十六楼那个腾大基因可以做，需要你怀孕5周以上，可以男方一起去或者你带男方的带毛囊头发、血痕、口腔黏膜、精液、指甲等样本去，但是要提前预约哦，问清楚情况。应该是可以直接导航过去的，这些现在技术很成熟的了，大概3-5天出结果。消除疑虑是很有必要的，望采纳。

dna复合物的粒径在多少之间能够被细胞摄取其是难以转染的原代细胞。转染效率高，推荐QIAGEN的superfect转染试剂。 磷酸钙共沉淀转染。带正电的阳离子脂质体则不同、沉淀反应时间，经过内吞被导入细胞、细胞孵育时间乃至各组分加入顺序和混合的方式都可能对结果产生影响。 采用电转，但需要昂贵的电转仪。理论上说电穿孔法可用于各种细胞：需要电转仪器、活体细胞，借助内吞作用进入细胞质。此法每次转染需要更多的细胞和DNA，因为过高的场强和过长的电脉冲时间会不可逆地伤害细胞膜而裂解细胞：最早在1973年开始采用，形成DNA-阳离子脂质体复合物，状态很不好，对原代细胞还可以，对不同的细胞可能会干扰细胞的代谢，DNA并没有预先包埋在脂质体中、DNA浓度，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内，使得DNA复合物结合在带负电的细胞表面，此法的出现使得转染效率，缓冲液非常有讲究，可重复性好。

RNA提取后有没有必要用DNA酶处理主要和你的用途有关。如果仅仅是扩某个基因，那就无所谓。如果是定量RT-PCR，则最好DNA酶处理一下，或者引物需跨exon. 比如用QIAGEN的RNase-free的DNase处理的，不是加了DNase就结束了，为了去除DNase（蛋白）和buffer等可能影响到后期操作的因素，所以酶解了DNA后必须纯化RNA（QIAGEN的纯化柱），这样得到的RNA才用于定量实验。即使这样，在做real-time PCR时都要加一管仅加RNA的作为阴性对照（排除DNA的污染）。

血液基组dna提取试剂盒操作步骤：、体积全血操作步骤：<400ul全血300ul血液处理量例1、向300ul抗凝剂血液加入2.5倍体积solutiona颠倒混匀12000rpm离1钟弃掉清2、再重复步骤1弃掉清3、按照第3页附表配制solutionb与solutionc混合液（solutionb与solutionc使用量见附表）4、加入150ul混合液用移液器吹打均匀60℃水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组dna12000prm离1钟弃掉清6、加入800ul75%酒精颠倒数；12000prm离1钟用移液器吸掉清室温干燥10~15钟7、加入150ulelutionbuffer60℃孵育10~15钟或夜溶解dna用移液器吹打均匀-20℃保存基组dna二、量全血操作步骤：1~10ml血量3ml血液处理量例1、向3ml抗凝剂血液加入2.5倍体积solutiona颠倒混匀3000rpm离5钟弃掉清2、再重复步骤1弃掉清3、按照第3页附表配制solutionb与solutionc混合液（solutionb与solutionc使用量见附表）4、加入1.5ml混合液用1ml移液器或者性塑料吸管吹打均匀60℃水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组dna6、用移液器絮状物移加800ul75%酒精1.5mlep管颠倒数12000prm离3钟弃掉清室温干燥10~15钟7、加入500ulelutionbuffer60℃孵育10~15钟或夜溶解dna用移液器吹打均匀-20℃保存基组dna三、量全血操作步骤：10~20ml血量10ml血液处理量例1、向10ml抗凝剂血液加入2.5倍体积solutiona颠倒混匀8000rpm离5钟弃掉清；2、再重复步骤1弃掉清3、按照第3页附表配制solutionb与solutionc混合液（solutionb与solutionc使用量见附表）；4、加入5ml混合液用性塑料吸管吹打均匀60°c水浴或孵箱孵育10钟孵育期间颠倒混匀溶液由红色变黄绿色或棕色5、加入等体积异丙醇充颠倒混匀至现丝状或絮状基组dna；6、用移液器絮状物移加800ul75%酒精1.5mlep管颠倒数12000prm离1钟弃掉清室温干燥10~15钟；7、加入1000ulelutionbuffer60℃孵育10~15钟或夜溶解dna用移液器或性塑料吸管吹打均匀-20℃保存基组dna

血浆核酸提取实验常见问题解析很多人在做血液来源样本DNA提取时会对样本类型概念不清楚，所以在做核酸提取、核酸检测类的实验时，对提取试剂的选择比较随意，其实验结果也往往不尽如人意，那么不同血液来源的样本有什么区别，对核酸提取、核酸检测有什么影响呢？一、什么是外周血，什么是全血，什么是血清，什么是血浆？新鲜的血液（也叫全血，医学上称为外周血）加入抗凝剂（如柠檬酸钠，EDTA等，一般医院采血都是用抗凝管采集），静置一段时间，会出现分层的现象。上面淡黄色的半透明液体是血浆，约占55%，下面暗红色不透明的是红细胞，约占45%。中间薄薄的一层白色物质是白细胞和血小板，不到1%。红细胞、白细胞、血小板共同组成了血细胞。特别提示：不加抗凝剂的血液很快就会凝成血块，在凝血块周围出现的淡黄色的透明液体是血清，血清中不含纤维蛋白原。简单来说，全血包括血浆和血细胞（红细胞、白细胞、血小板），血浆包括血清和纤维蛋白原。在选择核酸提取试剂盒时，首先要考虑的是样本类型以及提取的核酸种类，选择针对性强，提取效率高的提取试剂盒。如果要提取血细胞中的核酸，需要选择血细胞核酸提取试剂或全血核酸提取试剂；如果要从血清或血浆中提取游离核酸或游离肿瘤核酸则要选择血浆或血清核酸提取试剂；如果需要检测外周血中有无病毒或细菌感染，一般也是选择血浆或血清核酸提取试剂。如果要提取DNA，需要选择DNA提取试剂，要提取RNA，则要选择RNA提取试剂。如果目标基因丰度较低，需要较多的血浆或血清进行富集提取，则需要选择专门的血浆、血清核酸富集提取试剂。还有，如果核酸检测的结果要面向临床出具检验报告，选择的提取试剂盒要通过药监局审查，应有药监局备案号，这一点非常重要。在进行核酸提取实验时，切不可选错了试剂盒，否则会影响实验效果和实验进度。目前，国内应用较多的血液系列核酸提取试剂主要有Qiagen、Biog等，其血液系列核酸提取试剂均比较全面，包括血细胞、血清、血浆、DNA、RNA、小量提取、中量富集提取等，研究者可根据实验需要进行选择。二、血清血浆游离DNA提取需要多少样本量？得率多少正常？图1 Qiagen关于cfDNA得率的数据图图2 Biog血浆DNA提取试剂盒做血浆样本DNA提取，Q-bit测浓度无读数，PCR检测结果靶基因（CT 25左右）以及内参（CT 21左右）扩增曲线血清、血浆样本中游离核酸含量较低，根据Qiagen公司数据，1ml血浆样本DNA提取得率只有7.35ng左右（图1）。这么低的核酸浓度，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。有些研究者提取血浆核酸后习惯于先用紫外检测浓度，发现紫外检测不出来或浓度很低时便认为提取失败，放弃后面进一步的实验，其实并不可取。我们可以把紫外读数作为参考，但是不能作为判断得率的唯一标准，最好还是要做个PCR或荧光定量。根据Qiagen公司的实验，血清血浆的量与提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量最好在1ml以上。如果1ml或更大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提取试剂盒。目前国内常用的Qiagen、Biog血浆核酸提取试剂盒核酸提取的得率都很不错，基本上能够满足绝大多数实验的要求。三、不同检测目标的实验选择什么类型的样本？从核酸检测的角度讲，人的基因组更多的存在于白细胞中，而只有少量游离核酸存在于血清、血浆中，如果白细胞大量凋亡，血清血浆中的游离核酸量会有所增加。如果机体患有恶性肿瘤，肿瘤组织坏死，坏死的肿瘤细胞释放出核酸片段或肿瘤细胞发生血液转移，血浆血清中的核酸量也会增加。因而，如果是检测部分目标基因，如筛查地中海贫血症，筛查色盲基因等，应该以全血作为实验样本，因为血清和血浆中所含有的人的核酸数量远远少于全血，检测灵敏度会降低很多。如果要检测肿瘤相关基因，则要选择血浆或血清样本。如果以病原体核酸为检验目标，如检测乙肝感染情况，检测感冒病毒，检测有无败血症等，则以血清或血浆为实验样本，这会天然地剔除血细胞这种杂质，明显降低核酸提取过程中的难度，有利于提高核酸纯度，增加检测反应灵敏性和稳定性。血清和血浆相比，一方面血清中含有更少的纤维蛋白原，另一方面血清中的DNA是循环DNA，主要来源于病变组织，所以使用血清作为实验样本，可以更进一步提高样本纯净度，减少蛋白杂质，提高游离核酸的浓度，获得更为灵敏的检测结果。

如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法？从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了，提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析，可供选择的方法非常多，乱花渐欲迷人眼，如何选择最适合的方法，成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面，层层剥茧，分析最佳的实验方法。1、 全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝剂的采血管进行采血，抗凝剂一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不会影响下游的反应，如果没有采血管，也可以自己添加抗凝剂EDTA，提前准备0.04M的EDTA溶液，每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液，颠倒混匀即可。保存于-20℃至-80℃，一般2-3年内均可以提取，保存时间越短，提取的质量越高，最好在2个月内提取。II. DNA提取方法的选择：全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种（比如Qiagen、Promega、Bioteke；摒弃酚氯仿手提的方法，时间长毒性大），原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号，让人不知如何去选择，但从原理和操作步骤看，基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说，离心柱（DP1801）的提取纯度高一些，但是处理量小（0.1-1ml）、得率略低；溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大（1-10ml）得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上，一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候，很多人以为进口一定比国产的好，我们觉得没有最好，只有更好！在不断的进行试验优化之后，全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术，不需要蛋白酶K消化，进口的都是要借助蛋白酶K的啊！DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间，而且提取量和稳定性更好。III. 非抗凝血（凝固血）能否提取？答案是肯定的，而且一点都不麻烦，提取效果和抗凝血没有差别！在你找遍了进口的所有品牌都找不到后，回过头来您才发现原来他就在身边，百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。2、 全血RNA如何提取I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素？全血中RNA酶是非常丰富的，RNA在没有保护的状态下很容易降解！哪些是状态RNA不受保护呢，比如红细胞裂解液裂解红细胞的过程，红细胞裂解液是低浓度的平衡盐溶液，没有抑制RNase的成份，这时候RNA不受保护；DNA酶消化的时候RNA也不受保护，这个时候也没有抑制RNase的成份。II. 什么样的提取方法更好？我们在选择方法的时候要倾向于对RNA全程有保护的方法！一般的方法都是先用红细胞裂解液裂解红细胞，然后从白细胞提取核酸，还要经过DNA酶的消化去除DNA，这种并不是最好的方法，过程中有很多RNA降解的因素。所以直接裂解法是最好的方法，将采集的血液迅速加入3倍体积的裂解液RLS——RP4001血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)的裂解液，迅速颠倒混匀。裂解液RLS含有强烈的蛋白变性剂，能迅速变性蛋白，是RNase变性，不能对RNA降解。裂解后的混合液还可以用来运输，以避免RNA降解，这个方法成为博奥生物制作表达谱芯片RNA运输和提取

RNA提取没必要用DNA酶处理主要用途关仅仅扩某基所谓定量RT-PCR则DNA酶处理或者引物需跨exon. 比用QIAGENRNase-freeDNase处理加DNase结束除DNase（蛋白）buffer等能影响期操作素所酶解DNA必须纯化RNA（QIAGEN纯化柱）RNA才用于定量实验即使做real-time PCR都要加管仅加RNA作阴性照（排除DNA污染）

有好几年没做实验了，不过我对1楼的回答有些疑问，现在有能做23000bp这么长的PCR？似乎我印象中PCR要这么长的长度本身就很难能全长扩增吧。那么如果我的理解没错的话，楼主是不是直接从土壤的细菌里头直接提取DNA。（呵呵，我也忘了细菌DNA大概多长），跑了一次电泳，然后把目的片断割下来，再纯化，再跑电泳，发现纯化之后的片断比目的片断小了。检测回收率，你可以在DNA溶解液过柱之后，柱子洗脱之前在柱子上加试剂盒溶解液，吹打几次吸取一些溶液A，同时吸取一些离心下来的溶液B，再将过柱后的洗脱液C，以及未过柱前的溶液D（如果浓度太低，可相应浓缩）肆个溶液再上一次凝胶电泳，一切都将看得明明白白，究竟你在过柱的这个过程中，DNA到底留在了什么地方。我相信有这个电泳图的话，应该可以很容易理解问题所在了。当然问题有可能象1楼所说的那样，天根的产品不过关（或者是你自己没有选对），那就换柱子！

冻干的样本，会影响DNA和RNA的提取质量从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了，提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析，可供选择的方法非常多，乱花渐欲迷人眼，如何选择最适合的方法，成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面，层层剥茧，分析最佳的实验方法。 1、 全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝剂的采血管进行采血，抗凝剂一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不会影响下游的反应，如果没有采血管，也可以自己添加抗凝剂EDTA，提前准备0.04M的EDTA溶液，每5ml的血液中加入0.4ml配好的EDTA溶液，颠倒混匀即可。保存于-20℃至-80℃，一般2-3年内均可以提取，保存时间越短，提取的质量越高，最好在2个月内提取。II. DNA提取方法的选择：全血提取试剂盒一般有离心柱和溶液型两种（比如Qiagen、Promega、Bioteke；摒弃酚氯仿手提的方法，时间长毒性大），原理及步骤基本相同。虽然各公司推出了N多型号，让人不知如何去选择，但从原理和操作步骤看，基本就是离心柱和溶液型两种。一般来说，离心柱（DP1801）的提取纯度高一些，但是处理量小（0.1-1ml）、得率略低；溶液型(DP2101或DP2201)的提取量大（1-10ml）得率也高于离心柱。医院的血液标本一般在2ml以上，一般选择溶液型的方法提取.在说到国产和进口差别的时候，很多人以为进口一定比国产的好，我们觉得没有最好，只有更好！在不断的进行试验优化之后，全血基因组DNA提取试剂盒DP2101或DP2201开创了第三代技术，不需要蛋白酶K消化，进口的都是要借助蛋白酶K的啊！DP2101或DP2201减少了蛋白酶K现配现用的麻烦和消化的时间，而且提取量和稳定性更好。III. 非抗凝血（凝固血）能否提取？答案是肯定的，而且一点都不麻烦，提取效果和抗凝血没有差别！在你找遍了进口的所有品牌都找不到后，回过头来您才发现原来他就在身边，百泰克的凝固血基因组DNA提取试剂盒已经有很多忠实的用户。2、 全血RNA如何提取I. 全血RNA提取过程哪些是RNA降解的因素？全血中RNA酶是非常丰富的，RNA在没有保护的状态下很容易降解！哪些是状态RNA不受保护呢，比如红细胞裂解液裂解红细胞的过程，红细胞裂解液是低浓度的平衡盐溶液，没有抑制RNase的成份，这时候RNA不受保护；DNA酶消化的时候RNA也不受保护，这个时候也没有抑制RNase的成份。II. 什么样的提取方法更好？我们在选择方法的时候要倾向于对RNA全程有保护的方法！一般的方法都是先用红细胞裂解液裂解红细胞，然后从白细胞提取核酸，还要经过DNA酶的消化去除DNA，这种并不是最好的方法，过程中有很多RNA降解的因素。所以直接裂解法是最好的方法，将采集的血液迅速加入3倍体积的裂解液RLS——RP4001血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)的裂解液，迅速颠倒混匀。裂解液RLS含有强烈的蛋白变性剂，能迅速变性蛋白，是RNase变性，不能对RNA降解。

.dna提取的几种方法(1).浓盐法利用rnp和dnp在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1m氯纳提取化钠抽提,得到的dnp粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而dna位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将dna钠盐沉淀出来.也可用0.15mnacl液反复洗涤细胞破碎液除去rnp,再以1mnacl提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.以稀盐酸溶液提取dna时,加入适量去污剂,如sds可有助于蛋白质与dna的分离。在提取过程中为抑制组织中的dnase对dna的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15mnacl,0.015m柠檬钠,并称ssc溶液,提取dna.（2）.阴离子去污剂法:用sds或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取dna.由于细胞中dna与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取dna.（3）.苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了dnase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与dna联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而dna溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含dna的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀dna。此时dna是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的dna保持天然状态.（4）.水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去rna，然后将沉淀溶于水中，使dna充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6m.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%u066080%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得dna样品.此法提取的dna中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入sds.

一般提取的就是口腔脱落的细胞，需要注意的是提取前要最少半个小时不能喝水，吃东西，不然会影响提取的效果，提取检测的话，是有专门的试剂盒的，我有用过BIOG，QIAGEN的，效果都还不错。

55℃水浴保温15分钟~30分钟

应该是TE，TE较适合保存DNA，且对PCR扩增的影响并不是很大。

高中生物里边用的方法原理：1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。准备工作：制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500 mL烧怀中，注入新鲜的鸡血（约180 mL），用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。（也可以用离心机离心2 min（转速1000转/分）。用吸管吸去上清液。方法步骤：1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min2．溶解DNA：3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4．过滤：取黏稠物5．再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。3 min6．过滤：取滤液。7．提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5 min8．DNA的鉴定：沸水浴5min要是其他用途你就在看看七他人的回答好了。

动物细胞mRNA的制备植物细胞mRNA的制备 1、mRNA在无细胞翻译体系指导合成高分子量蛋白质的能力。无细胞翻译系统(Cell-free translation system)，又叫体外转录-翻译的偶联系统,因为该系统需要制备无细胞提取物,还有人称之为溶胞粗制品翻译系统。无细胞提取物的制备：用机械的,超声波的,渗透压或用适当的去污剂等方法,将细胞溶破,再高速离心出去其质膜与细胞核等.该提取液中含有RNA聚合酶,核糖体,tRNA和能量发生系统.常见的体外无细胞翻译系统:兔网织红细胞系统。网织红细胞无细胞核,其合成的蛋白质90%以上为珠蛋白.缺 点:已含有珠蛋白mRNA.可以在该体系中加入微球菌核酸酶和Ca2+,可很快分解,除去体系中的珠蛋白mRNA 。麦胚系统用组织捣碎机将麦子捣碎,分离出麦胚.然后将粗制的麦胚加10倍体积的缓冲液与砂子共研磨.23000g离心所得的上清夜称为S23 ;将S23分装,保存于-20°C冰箱中.利用麦胚系统进行蛋白质翻译合成研究时,需加的物质与网织红细胞系统相似.由于该体系无mRNA,所以必须加入mRNA。优 点：适于研究mRNA,活力强,价格低廉等.缺 点：不同制品的活性差别较大,且合成分子量较大(71X105 Dal)的蛋白质时往往提前终止.哺乳动物mRNA在红细胞裂解液中翻译*SDS-PAGEanalysis of proteins translated by cell-free translation system. Lane 1: protein marker; Lane 2,without mRNA; Lane 3 to 7: translation products of total mRNA from mammalian cells2、mRNA在无细胞体系中指导合成目的多肽的能力3、mRNA分子的大小哺乳动物mRNA长度为500-8000bp,大部分mRNA位于1.5-2.0kb之间.4、总mRNA指导合成cDNA第一链长分子的能力利用哺乳动物细胞提取的poly(A)+RNA合成cDNA*Lane 1: -HindIII-EcoRI; Lane 2: the first chain of cDNA;Lane 3: the second chain of cDNA; Lane 4: -HindIII 1)高丰度mRNA目的mRNA在细胞中的含量占细胞质总mRNA量的50-90%, 该类mRNA在合成和克隆cDNA之前不需进一步纯化特定mRNA .2) 低丰度mRNA目的mRNA在细胞中的含量占细胞质总mRNA量的0.5%以下.5,mRNA的富集方法典型的哺乳动物细胞含有10,000-30,000种不同的mRNA分子,某些mRNA分子在细胞内的拷贝数很低甚至只有一个拷贝.mRNA的丰度与文库克隆子数的关系ln(1-P)N= ln(1-1/n)N: 所需克隆数; P: 要求的概率; n:一种mRNA在总mRNA中的相对比例1) 按大小对mRNA进行分级分离* 通过琼脂糖凝胶电泳分离大小不同的mRNA分子,该方法的分离效果最好,但从凝胶中回收的得率较低.* 蔗糖梯度离心:加入破坏RNA二级结构的变性剂如氢氧化甲基汞等,再进行蔗糖梯度离心以分离不同分子量的mRNA.2) cDNA的分级分离* mRNA通过反转录形成cDNA,在插入到克隆载体前,通过琼脂糖凝胶电泳,将不同大小的cDNA分子分离开来.* 优 点:a)避免了分离过程中mRNA被污染的RNA酶降解b)增加了获得全长cDNA克隆的概率c)获得更准确的分级分离效果(分子量)3)多聚核糖体免疫学纯化法* 使用抗体来纯化合成目的多肽的多聚核糖体.将正在合成的新生多肽链的多聚核糖体结合到免疫亲和柱(A蛋白-Sepharose柱)上,随后用EDTA将多聚核糖体解离下来,并通过Oligo(dT)层析分离mRNA, 利用该方法可将目的mRNA纯化数千倍. 目的mRNA在细胞中的含量可为数十拷贝. 1.Oligotex mRNA Kits (QIAGEN）法准备工作：1.将Oligotex Suspension 置于37℃水浴中，旋转混匀，溶解Oligotex.,然后置于室温。2.将OBB Buffer置于37℃水浴中，旋转混匀，重溶沉淀物，然后置于室温。3.将OEB Buffer 置于70℃水浴中，待用。试验步骤：表3：加入试剂量据此表 Total RNA RNase-free Water to: Buffer OBB(ul) OligotexSuspension (ul) Prep size <=0.25mg 250ul 250ul 15 Mini 0.25-0.5mg 500ul 500ul 30 Midi 0.5-0.75mg 500ul 500ul 45 Midi 0.75-1.00mg 500ul 500ul 55 Midi 1. Total RNA 量不要多于1mg，用移液器取出所需RNA量到1.5ml离心管中，加RNase-free water 补足到500ul2. 根据表3加入适当体积的OBB Buffer和Oligotex Suspension， 轻弹1.5ml离心管彻底混匀3. 置于70℃水浴中3min4. 取出置于室温（20℃－30℃）10min5. 13000rpm室温离心 2min，用移液器吸出上清到一个新的1.5ml离心管中，保留上清直到polyA被结合上。6. 用移液器取400ul OW2 Buffer混匀沉淀物，将混合物转移到 Spin Column中，RT ，13000rpm，离心1min7. 将Spin Column 转移到一个新的1.5ml离心管中，加400ul OW2，RT， 13000rpm，离心1min9. 取出25ul OER Buffer(70℃)到Column中，用移液器吹打3－4次树脂，室温 13000rpm，离心1min。10. 测OD,并电泳定量。2.磁珠法分离mRN1. 在RNase-free的Eppendorf 管中加入0.1~1.0mg的总RNA和RNase-free水至终体积为500ul.2. 65&ordm;C加热10分钟。3. 加入3ul生物素标记的Oligo(dT)和13ul20×SSC于RNA中，轻轻混合，室温放置逐渐冷去至室温，一般需10 分钟左右。4. 同时配0.5×SSC 1.2ml和0.1×SSC 1.4ml.5. 将磁珠（SA-PMPs）轻晃散开，放入磁性分离架上，使SA-PMPs集中于管的一侧（约30sec），小心去上清，切不可离心。用0.3ml 0.5×ssc漂洗SA-PMPs,用磁性分离架集中磁珠，去除上清，重复3次。6. 将漂洗后的SA-PMPs重新悬浮于0.1ml 0.5Xssc,注意漂洗后的SA-PMPs应在30分钟内使用。7. 将（3）中的oligo(dT)/mRNA退火反应物全部加入含漂洗好的SA—PMPs管中，轻轻摇匀，室温下放10 分钟。8. 用磁性分离架捕获SA-PMPs,小心去上清，但不要弃去。9. 用0.1×SSC,每次0.3ml洗3次，每次都晃至SA-PMPs悬浮，最后一次漂洗后尽可能多的吸取水相，而不损坏SA-PMPs.10.将SA-PMPs重新悬浮在0.1ml RNase-free水中，反复颠倒，使SA-PMPs散开，洗脱mRNA。11.用磁性分离架捕获SA-PMPs,将洗脱的mRNA吸入另一个新的Eppendorf管中。12.将SA-PMPs再悬浮于0.15ml RNase-free的水中，洗脱，与（11）步洗脱液合并。13.将得到的mRNA溶液取几微升跑电泳，若mRNA浓度不足以进行下一步的反转录，则需将得到的mRNA溶液浓缩（浓缩步骤见14-18）。14.加0.1体积的3mol/l NaAc和1.0体积的异丙醇于洗脱液中，-20&ordm;C沉淀过夜。15.4&ordm;C，13000g离心60 分钟。去上清，加入500ul 70%乙醇混匀。16.4&ordm;C，7500g离心10 分钟。17.去上清，真空或空气中自然风干，但不要太干，加适量RNase-free水溶解。18.重复步骤5-12，将步骤8保留下的样品重新上柱注意事项：1．所有操作均需要严格戴手套，戴口罩进行2．如果total RNA质量高，杂质少，就选择Oligotex的方法分离mRNA，相反则可以用磁珠法。3．mRNA的电泳图是smear。

DNA浓度太高了会出现这样的现象，再有就是可能是某种多糖了，一般电泳回收可以去掉任何杂质。但是，这样的回收效率较低，且不值得，个人建议向提取液（无论试剂盒或者自己配制的）中添加一定量的PVP40k，并使用25：24：1的苯酚氯仿异戊醇反复抽提，会取得较好效果，同时也会使得各种酚类物质较充分去除。

血液游离DNA（又称血液循环DNA）是指血液中游离于细胞外的DNA，其来源主要有三：白细胞崩解释放的DNA、坏死组织特别是肿瘤组织释放入血液的DNA和感染病毒、细菌的DNA。近几年来，随着基因诊断技术的发展，游离核酸的应用价值越来越大，如优生筛查、肿瘤早期诊断、遗传病检测和病原体感染基因检测等。但血液中游离DNA含量一般较低，片段较小，不易提取，这大大影响了游离核酸的基因检测和各种研究的开展。 游离DNA提取方法一般有TRizol方法、离心柱法、磁珠法。其中，Trizol方法与离心柱相比，提取效果相当，但是因其对操作者带来的毒性，现在越来越被弃用。磁珠法比较适合机器自动化提取，如果没有核酸提取仪，只是使用磁力架配套提取，磁珠法的操作就比较麻烦且容易导致样本交叉污染。另外，根据研究，磁珠法的核酸提取得率不如离心柱法。如果要提取的游离核酸的量比较低，最好选择离心柱法。对于游离DNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室，首选的核酸提取方法应是离心柱法。 离心柱法游离DNA提取原理主要是样本裂解后，DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，再在低盐、高PH值时将DNA从硅胶膜上洗脱下来。面对各种品牌的离心柱法提取试剂盒，哪种才是最适合的呢？目前国内常用的离心柱法游离DNA提取试剂盒有国内品牌Biog、国际品牌Q、国内品牌T等。我们以下就几种游离DNA提取试剂盒进行比较。 [if !supportLists]一、[endif]有较高的提取得率。核酸提取得率的确定，常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是，血清、血浆样本中游离核酸含量较低，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率，Qiagen的研究数据是1ml正常血浆样本cfDNA得为7.35ng左右，但如果白细胞大量凋亡，血浆中的游离DNA量会有所增加，肿瘤病人血浆中的DNA会大幅增加。有些研究者提取血浆核酸后习惯于先用紫外检测浓度，发现紫外检测不出来或浓度很低时便认为提取失败，放弃后面进一步的实验，其实并不可取。我们可以把紫外读数作为参考，但是不能作为判断得率的唯一标准，最好还是要做个PCR或荧光定量。根据Qiagen公司的实验，血清血浆的量与提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量最好在1ml以上。如果1ml或更大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提取试剂盒。目前国内常用的血浆核酸提取试剂有国际品牌Q、国内品牌T、国产品牌Biog等，我们实验室使用下来，Biog的核酸提取得率较高，1ml肺癌病人血浆样本DNA得率在85ng左右，Q的得率在72ng左右，T的得率在63ng左右，基本上都能满足下游PCR实验的需求。当然，如此低的浓度直接测OD值不太容易，如果使用Nanodrop2000c，其检测下限为2ng/ul。如洗脱液为30ul，则需要1ml左右的血浆才能检测出来。显然，如果是健康人的血浆，1ml血浆的DNA浓度更低，紫外可能根本就检测不出来。因而，血浆DNA提取完成以后，最好直接做PCR，紫外检测的意义不大。 [if !supportLists]二、[endif]提取的核酸纯度高。核酸纯度一般根据OD260/OD280比值来判断。一般说来，试剂盒提取的DNA 其OD260/OD280比值应在1.6--1.8之间。如果提取的DNA溶液OD260/OD280比值小于1.6，通常说明有蛋白质或酚、多糖等的污染。如果提取的DNA溶液OD260/OD280>1.9,则表明有RNA污染。使用Q公司血浆DNA提取试剂盒提取的血浆DNA, OD260/OD280一般在1.7-1.9之间；使用Biog血浆游离DNA提取试剂盒提取的血浆DNA, OD260/OD280一般在1.6-1.9之间，使用T公司血浆DNA提取试剂盒提取的血浆DNA OD260/OD280比值也在1.6-1.9之间。Q公司提取DNA的纯度似乎优于国产试剂，但我们提取的DNA是用于PCR检测，结果并无明显影响。可能因为B公司血浆游离DNA提取试剂盒提取的血浆DNA量得率较高的原因，同样的DNA加样体积（2ul），Biog试剂盒提取的DNA 荧光定量PCR检测结果CT值要小于Q公司试剂盒提取的DNA。 [if !supportLists]三、[endif]操作简便性。操作简便性也是血浆DNA提取试剂选择的一个重要因素。操作过于复杂，不仅费时费力，还容易导致样本间的交叉污染，也容易损失样本。特别是用于临床检测或样本较多情况下的检测，操作复杂如果导致交叉污染会引起误诊，还会影响出检测报告的时间。因而，选用操作简便、流畅的提取试剂盒非常重要。就我们曾经用过的以上三种提取试剂盒来说，Q公司的血浆DNA提取试剂盒提取过程大约30min，从样本处理开始需要个10步骤；T公司血清/血浆游离DNA提取试剂盒整个提取过程需要约40min，从样本开始处理10个步骤；B公司的Biog血浆游离DNA提取试剂盒提取过程大约25min，从样本开始处理8个步骤，B公司的血浆游离DNA提取试剂盒在操作简便性上具有一定优势，更适合于较多样本的检测。据了解，该产品已通过药监局备案，也更适合临床样本的检测。 综合看来，与国外知名品牌相比，国产试剂盒在血浆DNA提取纯度上稍有不足，但在提取得率和操作简便性上基本没有区别，有些品牌还略有优势，可根据实验需求进行选择。对纯度要求较高的实验，可选择Q等国外知名品牌，如果对提取量要求较高或提取后主要进行PCR或分子杂交之类的实验，可考虑选择Biog等国产品牌。

凯杰(QIAGEN)DNA提取试剂盒可以提取dna 至于rna我就不清楚了 你 可以查看下rna试剂盒说明书 上面针对这块应该有详细解答

真菌的细胞成分和植物是有差别的，这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA。如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒。不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取，但因为真菌菌丝体含有很多多糖，你需要参考下植物DNA提取中除去多糖的方法。一般的话就是提高CTAB抽提液盐离子含量，还有就是在CTAB抽提液中加入一定比例的PVP或者PVPP，浓度1～10%之间都可以，按照实际情况加。

有人用天根的植物RNA提取试剂盒提取过RNA提RNA一般注意：提取前材料的保存（新鲜材料,过夜处理的样品）,提取中对外源性的RNA酶的清除控制（离心管,PCR管,电泳槽,台面等的无RNA酶化处理）,提取后需要-80度保存.其次跑电泳时,注意电泳液最好用新鲜的,核酸染料等诸多因素.细菌总RNA提取试剂盒（ germs islation kit).对于外源性RNA酶的控制外源RNA酶清除剂,避免使用致癌物DEPC的危险方法就可简单操作清除耗材,台面,仪器等的外源RNA酶的降解作用.

植物DNA提取方法方法一：1.取两片幼嫩新鲜叶片，置于预冷的研钵中，倒入适量液氮，迅速研磨成粉末状，随后加入3ml预热的2%CTAB抽提缓冲液和50ul抗氧化剂2-巯基乙醇，继续研磨成略有流动性的糊状或粥状，转入1.5ml的离心管中，于65℃水浴锅中保温约60min。2.待混合物冷却至室温后加入等600ul的CI（氯仿：异戊醇=24：1）溶液混匀，轻轻颠倒离心管几次使管内混合物成乳浊液，常温下10000rpm离心10min,取上清液转入另一干净的离心管中。 3.重复步骤（2）一次。4.取步骤（3）上清液加入2.5倍体积无水乙醇，仔细混匀，-20冰箱30min以上，沉淀DNA 4℃，12000rpm离心10min。5.弃去上层有机溶剂，加500ul75%乙醇洗涤沉淀，4℃下8000rpm离心5min,弃去上清，洗涤沉淀3次。 6.倒置或者37度培养箱烘干。 7.加50ulTE缓冲液溶解DNA，于-20℃冷藏备用。方法二：1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ, 60℃水浴预热。2. 植物5-10g, 剪碎, 在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中, 剧烈摇动混匀, 60℃水浴保温30-60分钟(时间长,DNA产量高), 不时摇动。3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 颠倒混匀(需带手套, 防止损伤皮肤)，室温下静置5-10分钟, 使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。4. 室温下5000rpm离心5分钟。5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。6. 在1.5mleppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。7. 如DNA不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟, 再将沉淀移入TE管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于TE,可在60℃水浴放置15分钟以上，以帮助溶解。8. 将DNA溶液3000rpm离心5分钟,上清液倒入干净的5ml离心管。9. 加入5μlRNaseA(10μg/μl), 37℃ 10分钟, 除去RNA(RNA对DNA的操作、分析一般无影响，可省略该步骤）。10. 加入1/10体积的3mol/L NaAc及2×体积的冰乙醇,混匀,-20℃放置20分钟左右,DNA形成絮状沉淀。11. 用玻棒捞出DNA沉淀,70%乙醇漂洗,再在干净吸水纸上吸干。12. 将DNA重溶解于1ml TE, -20贮存。13. 取2μlDNA样品在0.7% Agarose胶上电泳, 检测DNA的分子大小。同时取15μl稀释20倍, 测定OD260/OD280, 检测DNA含量及质量。方法三：植物DNA的SDS提取法：试验试剂： 1、研磨缓冲液：称取59.63gNaCl，13.25g柠檬酸三钠，37.2gEDTA－Na分别溶解后合并为一，用0.2mol/L的NaOH调至pH7.0，并定容至1000ml。2、10×SSC溶液：称取87.66gNaCl和44.12g柠檬酸三钠，分别溶解，一起定容至1000ml。3、1×SSC溶液：用10×SSC溶液稀释10倍。4、0.1×SSC溶液：用1×SSC溶液稀释10倍。5、Rnase溶液：用0.14mol/LNaCl溶液配制成25mg/ml的酶液，用1mol/LHCl，pH至5.0，使用前经80℃水浴处理5min（以破坏可能存在的Dnase）。6、氯仿－异戊醇：按24ml氯仿和1ml异戊醇混合。7、5mol/L高氯酸钠溶液：称取NaClO4·H2O 70.23g，先加入少量蒸馏水溶解再容至100ml。8、SDS（十二烷基硫酸钠）化学试剂的重结晶：将SDS放入无水酒精中达到饱和为止，然后在70～80℃的水浴中溶解，趁热过滤，冷却之后即将滤液放入冰箱，待结晶出现再置室温下凉干待用。9、1mol/LHCl。10、0.2mol/LNaOH。11、二苯胺乙醛试剂：1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中，添加1.5ml浓硫酸，装入棕色瓶，贮存暗处，使用时加0.1ml乙醛液〔浓乙醛：H2O＝1：50（V／V）〕。12、1.0mol/L高酸溶液（HClO4）。13、0.05mol/LNaOH。14、DNA标准液：取标准DNA25mg溶于少量0.05mol.L-1NaOH中，再用0.05mol/LNaOH定容至25ml，后用移溶管吸取此液5ml至50ml容量瓶中，加5.0ml1mol/LHClO4，混合冷却后用0.5mol/LHClO4定容至刻度，则得100μg/ml的标准溶液。

　　一句话:咱人太多，地皮大，警察太少，资金也比较匮乏。　　尤其是DNA，做这玩意，需要一种试剂盒，这东西最先开始，只有发达国家才有，想要？拿钱来！直到公安部和科技部联合科技攻坚，制造出国产货，打破壁垒，才能较为廉价地做这工作，即便这样，每采集一个人的DNA，并且把它的数据信息做出来，都是需要人力财力的！不过，这项工作已经在开展了，现在的公安基础工作有一项就是每个单位每年要完成一定数量的采集任务，公安部已经建立起全国性DNA库，这已经非常不易，不过，这工作仍然在开展中，最先开始只是采集有前科的人员，现在才普遍采集，要达到每个人的信息入库，任重道远！　　指纹的采集能比DNA便宜很多，不过，依然是咱人口多，地皮大，忙不过来，还真不能保证每人都采！这工作的确是在开展着，也是任重道远！

提起无创18三体是负数一定是儿子，大家都知道，有人问无创dna中18三体检测值为-0.21是什么意思，另外，还有人想问无创dna是负数是女孩吗？你知道这是怎么回事？其实看图，无创DNA结果出来了，怎么检测值还有负数哦，下面就一起来看看无创dna中18三体检测值为-0.21是什么意思，希望能够帮助到大家！ 无创18三体是负数一定是儿子 1、无创18三体是负数一定是儿子:无创dna中18三体检测值为-0.21是什么意思 ，只要家族没有遗传病史就没事，宝妈不要太担心其实唐筛的准确率只有60%，准确率99%。可以再测一次，或者做无创DNA 2、无创18三体是负数一定是儿子:无创dna是负数是女孩吗？ 1，无创DNA有两个机构比较权威，一个是深圳的华大基因，一个是的贝瑞和康。无论在哪家医院抽静脉血，都是送到这些检测机构去检测。前者曾与医院合作，后者曾与协和医院合作。18号决定男女。 对于选择华大还是贝瑞和康，我把一些参考因素做了排序，准确性、速度、医便利程度、医服务、价钱。 对于准确性，两家都是一样的，这个可以忽略不计。至于检测速度，华大基因，10~14个工作日；贝瑞和康，7~10个工作日（本人在）。事实证明，结果出来的速度会比公布的日期要快。 目前，的公立医院都不再负责无创DNA的检测，无论是协和医院、妇幼，还是、空军总医院。只有与检测机构合作的私立医院可以代为抽血。 选择哪家检测机构，也就限定了选择私立医范围，目前和贝瑞和康合作的医院有俪婴妇产医院和玛丽妇产医院（大众点评对后者的评价不高）。与华大基因合作的医院比较多，如五洲妇幼医院等。 12月26日抽血，1月3日出的结果。已生女宝的无创dna单子。 2，做无创DNA检查是18三体不好，应该是以DNA检测结果为主的，可能是由于唐氏筛查的检查率只有70%的原因，一般需要进行穿刺和检测才能够明确诊断 意见建议：及时采取相应的处理措施，应该良好的心态，注意休息，清淡饮食，忌辛辣性食物，注意生理卫生已生男 无创dna。 3、无创18三体是负数一定是儿子:看图，无创DNA结果出来了，怎么检测值还有负数哦 1、负值是正常的。 2、无创DNA临床研究正常范围是-3到3之间，你的无创dna是负数在这个范围吗，（每个检测机构可能不一样），具体检测机构或者医生，安心养胎！已生男孩t18数值。 [1]无创DNA简介 无创DNA产前检测，又称为无创产前DNA检测、无创胎儿非整倍体检测等。根据权威学术美国妇产科学院会，无创产前DNA检测（Non-invasivePrenatalTesting）是应用最广泛的技术名称。无创DNA产前检测技术仅需采取孕妇静脉血，利用新一代DNA测序技术对母体外周血浆中的游离DNA片段（包含胎儿游离DNA）进行测序，并将测序结果进行生物信息分析，可以从中得到胎儿的遗传信息，从而检测胎儿是否患三大疾病。 母体血浆中含有胎儿游离DNA，为该项目提供现实依据。胎儿异常会带来母体中DNA含量微量变化，通过深度测序及生物信息可分析检测到该变化，为项目提供理论依据。 中文大学教授卢煜明在年就发现了孕妇外周血中存在游离的胎儿DNA，并发展出了一套新技术来准确分析和度量母亲血浆内的胎儿DNA，被誉为“无创DNA产前检测”的奠基人[1]。由于他所开创的无创DNA产前检测（NIPT）技术在人类重大出生缺陷防控领域的杰出贡献，卢煜明在年了首届“未来科学大奖”颁发的“生命科学奖”，以及年“引文桂冠奖”，堪称中国版“”。无创18体越小是男孩。 [2]适用人群 1.高龄（年龄≥35岁），不愿选择有创产前诊断的孕妇；无创dna18生男孩。 2.唐筛结果为高风险或者单项指标值改变，不愿选择有创产前诊断的孕妇；无创三体负数看男女。 看图，无创DNA结果出来了，怎么检测值还有负数哦 3.孕期B超胎儿NT值增高或其它解剖结构异常,不愿选择有创产前诊断的孕妇；无创18看男女已生验证。 4.不适宜进行有创产前诊断的孕妇，如携带者、前置、低置、过少、RH血型、史、先兆或珍贵儿等；无创看男孩女孩诀窍。 5.穿刺细胞培养失败不愿意再次接受或不能再进行有创产前诊断的孕妇；18三体负数是男还是女。 希望排除胎儿21三体、18三体、13三体综合征，自愿选择行无创产前检测的孕妇。 6.血清筛查阳性的孕妇以及对产前诊断有心理障碍的孕妇； 每对夫妻都有生育疾病患儿的风险。其发生具有偶然性和随机性，事前毫无征兆，没有家族史和明确的物接触史，发病率随孕妇年龄的增高而升高。现没有疾病的有效手段。 ：https://ke..com/item/%E6%97%A0%E5%88%9BDNA%E4%BA%A7%E5%89%8D%E6%A3%80%E6%B5%8B%E6%8A%80%E6%9C%AF/?fr=aladdin 以上就是与无创dna中18三体检测值为-0.21是什么意思相关内容，是关于无创dna中18三体检测值为-0.21是什么意思的分享。看完无创18三体是负数一定是儿子后，希望这对大家有所帮助！

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宝妈，看看羊穿的结果吧，不要放弃，相信宝宝，祝愿宝宝健康！

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无创DNA产前检测技术是基于DNA水平检测,结合高通量测序进行分析.技术的先进性决定了它的准确性.本身技术属于非侵入性检测,无创伤,操作上是安全的.国内就2家公司在做,一个是北京的贝瑞和康,费用是3000多.它们是国内唯一 一家能同时做包括唐氏综合症,18三体,13三体在内的三大染色体检测的,另外一家是深圳华大基因,它们价格是 2500左右.目前,只能做唐氏综合症的产前检测. 这些都是有新闻可查的.具体的你摆渡之.实在不行直接问它们去

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一个是无创DNA产前检测，一个是无创基因产前检测。无创DNA产前检测贝瑞和康是目前国内乃至世界范围内唯一一家能做三条染色体检测服务的公司.贝瑞和康是全球第一家启动无创技术临床研究的公司,克服了许多实验陷阱,有自己专门的数据处理和分析方法,其他人无法复制.技术准确,可靠.贝瑞和康专注于无创产前检测服务,致力于研发无创技术应用于产前检测领域,倾整体之力做一个内容.参考资料：贝瑞和康

高通量测序技术（High-throughput sequencing）又称“下一代”测序技术（Next-generation sequencing technology），以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等，主要有以下几种：大规模平行签名测序（Massively Parallel Signature Sequencing, MPSS)、聚合酶克隆（Polony Sequencing）、454焦磷酸测序（454 pyrosequencing）、Illumina (Solexa) sequencing、ABI SOLiD sequencing、离子半导体测序（Ion semiconductor sequencing）、DNA 纳米球测序 （DNA nanoball sequencing）等。 基因分析仪(即DNA测序仪)，采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3"末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。由于分子大小不同，在毛细管电泳中的迁移率也不同，当其通过毛细管读数窗口段时，激光检测器窗口中的CCD(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测，激发的荧光经光栅分光，以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光，并在CCD摄影机上同步成像，分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列，从而达到DNA测序的目的。分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。它是一台能自动灌胶、自动进样、自动数据收集分析等全自动电脑控制的测定DNA片段的碱基顺序或大小和定量的高档精密仪器。PE公司还提供凝胶高分子聚合物，包括DNA测序胶(POP 6)和GeneScan胶(POP 4)。这些凝胶颗粒孔径均一，避免了配胶条件不一致对测序精度的影响。它主要由毛细管电泳装置、Macintosh电脑、彩色打印机和电泳等附件组成。电脑中则包括资料收集，分析和仪器运行等软件。它使用最新的CCD摄影机检测器，使DNA测序缩短至2.5h，PCR片段大小分析和定量分析为10～40min。由于该仪器具有DNA测序，PCR片段大小分析和定量分析等功能，因此可进行DNA测序、杂合子分析、单链构象多态性分析(SSCP)、微卫星序列分析、长片段PCR、RT-PCR(定量PCR)等分析，临床上可除进行常规DNA测序外，还可进行单核苷酸多态性(SNP)分析、基因突变检测、HLA配型、法医学上的亲子和个体鉴定、微生物与病毒的分型与鉴定等。一、准备工作1. BigDye测序反应试剂盒 主要试剂是BigDye Mix，内含PE专利四色荧光标记的ddNTP和普通dNTP，AmpliTaq DNA polymerase FS，反应缓冲液等。2. pGEM-3Zf (+) 双链DNA对照模板 0.2 g/L，试剂盒配套试剂。3. M13(-21)引物 TGTAAAACGACGGCCAGT，3.2 μmol/L，即3.2 pmol/μl，试剂盒配套试剂。4. DNA测序模板 可以是PCR产物、单链DNA和质粒DNA等。模板浓度应调整在PCR反应时取量1 μl为宜。本实验测定的质粒DNA，浓度为0.2 g/L，即200 ng/μl。5. 引物需根据所要测定的DNA片段设计正向或反向引物，配制成3.2 μmol/L，即3.2 pmol/μl。如重组质粒中含通用引物序列也可用通用引物，如M13(-21)引物，T7引物等。6. 灭菌去离子水或三蒸水。7. 0.2 ml或和0.5 ml的PCR管 盖体分离。8. 3 mol/L 醋酸钠(pH5.2) 称取40.8 g NaAc·3H2O溶于70 ml蒸馏水中，冰醋酸调pH至5.2，定容至100 ml，高压灭菌后分装。9. 70%乙醇和无水乙醇。10. NaAc/乙醇混合液 取37.5 ml无水乙醇和2.5 ml 3 mol/L NaAc混匀，室温可保存1年。11. POP 6测序胶 。12. 模板抑制试剂(TSR) 。13. 10×电泳缓冲液 。14. 全自动DNA测序仪。15. PCR仪。16. 台式冷冻高速离心机。17. 台式高速离心机或袖珍离心机。二、PCR测序反应1. 取0.2 ml的PCR管，用记号笔编号，将管插在颗粒冰中，按下表加试剂：所加试剂 测定模板管 标准对照管BigDye Mix 1 μl 1 μl待测的质粒DNA 1 μl －pGEM-3Zf (+) 双链DNA － 1 μl待测DNA的正向引物 1 μl －M13(-21)引物 － 1 μl灭菌去离子水 2 μl 2 μl总反应体积5 μl，不加轻矿物油或石蜡油，盖紧PCR管，用手指弹管混匀，稍离心。2. 将PCR管置于9600或2400型PCR仪上进行扩增。98℃变性2 min后进行PCR循环，PCR循环参数为96℃ 10 s，50℃ 5 s，60℃4 min，25个循环，扩增结束后设置4℃保温。三、醋酸钠/乙醇法纯化PCR产物1. 将混合物离心，将扩增产物转移到1.5 ml EP管中。2. 加入25 μl醋酸钠/乙醇混合液，充分振荡，置冰上10 min以沉淀DNA。12 000 r/min于4℃离心30 min，小心弃上清。3. 加70%(V/V)的乙醇50 μl洗涤沉淀2次。12 000 r/min于4℃离心5 min，小心弃上清和管壁的液珠，真空干燥沉淀10～15 min。四、电泳前测序PCR产物的处理1. 加入12 μl的TSR于离心管中，剧烈振荡，让其充分溶解DNA沉淀，稍离心。2. 将溶液转移至盖体分离的0.2 ml PCR管中，稍离心。3. 在PCR仪上进行热变性(95℃ 2 min)，冰中骤冷，待上机。五、上机操作 　　1. 按仪器操作说明书安装毛细管，进行毛细管位置的校正，人工手动灌胶和建立运行的测序顺序文件。　　2. 仪器将自动灌胶至毛细管，1.2 kV预电泳5 min，按编程次序自动进样，再预电泳(1.2 kV，20 min)，在7.5 kV下电泳2 h。　　3. 电泳结束后仪器会自动清洗，灌胶，进下一样品，预电泳和电泳。　　4. 每一个样品电泳总时间为2.5 h。　　5. 电泳结束后仪器会自动分析或打印出彩色测序图谱。六、序列分析 　　仪器将自动进行序列分析，并可根据用户要求进行序列比较。如测序序列已知，可通过序列比较以星号标出差异碱基处，提高工作效率。七、仪器清洗 　　测序完毕按仪器操作规程进行仪器清洗与保养。八、计算1. 测序反应精确度计算公式：100%－差异碱基数(不包括N数)/650×100%。2. 差异碱基即测定的DNA序列与已知标准DNA序列比较不同的碱基，N为仪器不能辨读的碱基。 SILVER SEQUENCETM DNA测序系统是一种无放射性的序列分析系统，它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。 银染提供了一种对于放射性或荧光法来说更加快速，廉价的替代方法。测序结果可以在同一天内得到；电泳完成后经90分钟就可读序，这是常规的放射性测序法做不到的。 此外，SILVER SEQUENCETM系统用未修饰的5"OH寡聚核苷酸作为引物，减少了特殊修饰寡聚核苷酸的花费。该系统不需要放射性方法中对同位素的谨慎操作，也不需要荧光法或化学发光技术的昂贵试剂。另外，也不需要象大多数荧光法那样用仪器来检测序列条带。Taq DNA聚合酶在95℃时极强的热稳定性。本系统利用的测序级Taq DNA聚合酶是一种Taq DNA聚合酶的修饰产品，对于双链DNA模板有非常好的效果，具有高度的准确性，能产生均一的条带，且背景低。SILVER SEQUENCETM系统包含被修饰的核苷酸混合物，如7-去氮dGTP（7-deaza dGTP，或dITP）替代dGTP可清除由GC丰富区域所引起的条带压缩现象。退火温度是热循环测序中最重要的因素。高退火温度可减少模板二级结构。提高引物结合模板配对的严谨性。链重退火和模板二级结构则限制了小片断PCR产物（<500bp）得到清楚的序列数据的能力。引物延伸起始于每个循环的退火阶段。在较低温度时，聚合酶可能会遇到坚固的二级结构区域，它可导致聚合酶解离。则在四个电泳道中均有同一相对位置的条带。因为这些原因，应该使用尽可能高的退火温度。对于有牢固二级结构的模板建议使用95℃变性、70℃退火/延伸的循环模式。一般来说，较长的引物及GC含量高的引物能得到较强的信号。实验结果表明，>24mer的GC含量约为50%的引物可得到最佳结果。由于本系统采用热循环装置, 与常规的测序方法相比具有如下几点好处：(1).本方法线性扩增模板DNA产生足够的产物使银染技术能够检测序列条带，测序反应需要0.03～2pmol模板DNA，随模板种类而定。(2). 在每一个变性循环中的高温可以取代对双链DNA（dsDNA）模板的碱变性及乙醇沉淀过程，变性循环也有助于消除由于线性dsDNA模板（如PCR反应产物）快速重退火所引起的问题。(3). 高温聚合酶反应减弱了DNA模板的二级结构，允许聚合酶穿过高度二级结构化的区域。一、试剂准备1. SILVER SEQUENCETM DNA测序试剂盒。2. 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液（38%丙烯酰胺 W/V，2%甲叉双丙烯酰胺 W/V）：95 g丙烯酰胺，5 g甲叉双丙烯酰胺溶于140 ml 双蒸水中，定容至250 ml，0.45 mm过滤器过滤后，贮于棕色瓶中，置于4℃冰箱可保存2周。3. 10%过硫酸铵，0.5 g过硫酸铵溶于4 ml水中，定容至5 ml，应新配新用。4. 10×TBE缓冲液（1 mol/L Tris， 0.83mol/L 硼酸，10 mmol/L EDTA）： 121.1 g Tris，51.35 g硼酸，3.72 g Na2EDTA ·2H2O，溶于双蒸水中定容至1升，置于4℃下可贮存2周，其pH约为8.3。5. TBE电极缓冲液：10×TBE 缓冲液稀释至1×TBE备用。6. TEMED7. 固定/停止溶液：10%冰醋酸（V/V）配制2升备用。8. 染色溶液：硝酸银2 g，甲醛3 ml，溶于2升超纯水中备用。9. 显影溶液：60 g碳酸钠（Na2CO3)溶于2升超纯水中，使用前加3 ml 37%甲醛和40 ml硫代硫酸钠溶液（10 mg/ml）。10. 95%乙醇。11. 0.5%冰乙酸。12. Sigmacote （Sigma CAT. #SL-2）。二、测序反应1. 对于每组测序反应，标记四个0.5 ml eppendorf管（G、A、T、C）。每管加入2 ml适当的d/ddNTP混合物（d/ddNTP Mix）。各加入1滴（约20 μl）矿物油，盖上盖子保存于冰上或4℃备用。2. 对于每组四个测序反应，在一个eppendorf管中混合以下试剂：（1） 样品反应：质粒模板DNA ：2.1 pmol5×测序缓冲液 ： 5 ml引物： 4.5 pmol无菌ddH2O 至终体积16 ml（2）对照反应pGEM-3Zf（+）对照DNA（4 mg） ：4.0 ml5×测序缓冲液： 5 mlpUC/M13正向引物（4.5 pmol） ：3.6 ml3. 在引物/模板混合物（以上第2步）中加入1.0 ml测序级Taq DNA聚合酶（5 μ/ml）。用吸液器吸动几次混匀。4. 从第3步的酶/引物/模板混合物中吸取4 ml加入每一个d/ddNTP混合物的管内。5. 在微量离心机中离心一下，使所有的溶液位于eppendorf管底部。6. 把反应管放入预热至95℃的热循环仪，以【注意】中循环模式为基准，开始循环程序。对于每个引物/模板组合都必须选择最佳退火温度。下列程序一般能读出从引物开始350碱基的长度。7. 热循环程序完成后，在每个小管内加入3 μlDNA测序终止溶液，在微量离心机中略一旋转，终止反应。【注意】（1）测序所用模板DNA的量一般按下面要求加入：模板种类/长度 模板量200 bp（PCR产物）：16 ng（120 fmol）3000～5 000 bp（超螺旋质粒DNA）： 4 mg（2 pmol）48 000 bp（λ,粘粒DNA）： 1 mg（31 fmol）由于超螺旋质粒产生的信号比松弛的线性双链DNA弱，因此使用超螺旋质粒作为模板时其用量要比其它模板大一些。（2）计算与4.5 pmol相当的引物纳克数可用以下一般公式：4.5 pmol=1.5 ng×n，其中n为引物碱基数计算与1p mol相当的引物微克数可用以下一般公式：dsDNA：1 pmol=（6.6×10mg）×n，其中n为模板碱基对数ssDNA：1pmol=（3.3×10mg）×n，其中n为模板碱基数（3）为阻止Taq DNA聚合酶延伸非特异性退火引物， 热循环仪必须预热至95℃。温度变换应越快越好。下面的循环时间不包括变温时间。如果你无法确定使用何种模式，建议从模式1开始。模式1：适用于引物<24碱基或GC含量<50%95℃ 2分钟，然后： 95℃ 30秒（变性），42℃ 30秒（退火），70℃ 1分钟（延伸）。模式2：适用于≥24碱基或略短的GC含量≥50%的引物。95℃ 2分钟，然后：95℃ 30秒（变性），70℃ 30秒（退火/延伸）。（4）在加入终止溶液之后样品可在4℃保存过夜。三、测序凝胶板的制备1. 玻璃板的处理银染测序的玻璃板一定要非常清洁，一般先用温水和去污剂洗涤，再用去离子水冲洗玻璃板，除去残留的去污剂，最后用乙醇清洗玻璃板。玻璃板上遗留的去污剂微膜可能导致凝胶染色时背景偏高（棕色）。短玻璃板经粘合溶液处理可将凝胶化学交联于玻璃板上。这一步对于在银染操作过程中防止凝胶撕裂至关重要。（1）短玻璃板的处理① 在1 ml95%乙醇，0.5%冰乙酸中加入5 ml粘合硅烷（Bind Silane），配成新鲜的粘合溶液。② 用经浸透新配的粘合溶液浸透的吸水棉纸擦拭仔细清洗过并已经自然干燥的玻璃板，整个板面都必须擦拭。③ 4～5分钟后，用95%乙醇单向擦玻璃板，然后略用力沿垂直方向擦拭。重复三次这一清洗过程，每次均须换用干净的纸，除去多余的粘合溶液。【注意】① 在95%乙醇单向擦玻璃板时过度用力会带走过多的粘合硅烷，使凝胶不能很好地粘附。② 准备长玻璃板之前要更换手套，防止粘染粘合硅烷。③ 防止粘合溶液沾染在长玻璃板上是很重要的，否则将导致凝胶撕裂。（2）长玻璃板的处理：① 用浸透Sigmacote溶液的棉纸擦拭清洗过的长玻璃板。② 5～10分钟后用吸水棉纸擦拭玻璃板以除去多余的Sigmacote溶液。【注意】① 用过的凝胶可在水中浸泡后用剃须刀片或塑料刮刀刮去。玻璃板须用去污剂完全清洗。或者凝胶用10%NaOH浸泡后除去。为防止交叉污染，用于清洗短玻璃板的工具必须与清洗长玻璃板的工具分开，如果出现交叉污染，以后制备的凝胶可能撕裂或变得松弛。2. 凝胶的制备（1）玻璃板经粘合硅胶和Sigmacote处理后，即可固定玻璃板。该方法是用0.2 mm或0.4 mm厚的边条置于玻璃板左右两侧，将另一块玻璃板压于其上。在长玻璃板的一侧插入鲨鱼齿梳平的一面边缘，用夹子固定住。（2）根据所需要的凝胶浓度，按下表制备测序凝胶，一般6%～8%的胶浓度可获得较好的结果。配制过程中，先用适量双蒸水溶解尿素，再加入Acr&Bis和10×TBE缓冲液，再用双蒸水调终体积至99.2 ml，并用0.45 mm的滤膜过滤，然后加过硫酸铵和TEMED。溶解尿素时不必加热。如果确需加热则应等溶液完全冷却后，方可加入TEMED和过硫酸铵。一般在胶灌制后4～6分钟，即开始聚合，如果聚合不好，则应使用高浓度的TEMED和过硫酸铵。（3）胶配制好后，即可灌制胶板。一般是将凝胶沿着压条边缘缓慢地倒入玻璃板的槽中，倒完后，静止放置使之聚合完全。【注意】① 使用夹子固定玻璃板时，最好夹子的力量稍大一些，防止因力量不足使灌胶的过程中出现漏胶液现象。② 灌制凝胶的过程中要严防产生气泡，否则影响测序的结果。四、电泳1. 预电泳（1）当凝胶聚合完全后，拨出鲨鱼齿梳，将该梳子反过来，把有齿的一头插入凝胶中，形成加样孔。（2）立即将胶板固定在测序凝胶槽中，一般测序凝胶槽的上下槽是分开的，因而只有在固定好凝胶板后，方能加入TBE缓冲液。（3）稀释10×TBE缓冲液至1×TBE，将该缓冲液加入上下二个电泳槽中，去除产生的气泡，接上电源准备预电泳。（4）有些电泳槽，如LKB的Macrophor等是使用水浴加热的，则应先将水浴加热至55℃后进行预电泳。有的不使用水浴加热，依靠电泳过程中自身产生的热进行保温，如上海求精有机玻璃仪器生产的测序电泳槽，这种槽需夹上二块散热铝板，使整个凝胶板的温度一致。（5）按30 V/cm的电压预电泳20～30分钟。预电泳的过程是去除凝胶的杂质离子，同时使凝胶板达到所需的温度。高温电泳可防止GC丰富区形成的发夹状结构，影响测序的结果。【注意】① 用鲨鱼齿梳制作加样孔时，应注意将齿尖插入胶中0.5mm左右，千万注意不能使加样孔渗漏，否则得不到正确的结果。② 应时刻注意上面电泳槽中的缓冲液是否渗漏，否则极易造成短路而损坏电泳仪。2. 样品的制备当在预电泳时，即可进行样品的制备，将反应完毕的样品在沸水浴中加热1～3分钟，立即置于冰上即可。如果样品长时间不用，则应重新处理。可使用4～6%聚丙烯酰胺凝胶，胶厚0.4 mm。厚度小于0.4 mm的胶可能导致信号太弱。加样时不必吸去上层覆盖的矿物油，但要小心地吸取矿物油下的蓝色样品。3. 上样及电泳关闭电泳仪，用移液枪吸缓冲液清洗样品孔，去除在预电泳时扩散出来的尿素，然后立即用毛细管进样器吸取样品，加入样品孔中。上样顺序一般为G、A、T、C。加样完毕后，立即电泳。开始可用30 V/cm进行电泳，5分钟后可提高至40～60 V/cm，并保持恒压状态。一般来说，一个55 cm长，0.2 mm厚的凝胶板，在2500 V恒压状态下电泳2小时即可走到底部，同时在电泳过程中，电流可稳定地从28 mA降至25 mA。为了能读到更长的序列，可采用两轮或多轮上样。【注意】① 上样电泳时，一定要注意凝胶板的温度是否达到55℃左右，如果还没有达到，则应等温度达到后才能上样电泳。② 一般来说电泳时，不宜使用太高的电压，因为太高的电压会使凝胶的分辨率降低，并且使带扩散。电泳中可进行恒功率电泳。五、测序凝胶的银染染色过程要求凝胶浸在塑料盘中。因而至少使用两个盘子，大小与玻璃板类似。在盘中加入新鲜溶液之前须用高质量的水洗涤盘子。1. 电泳完毕后用一个塑料片子小心地分开两板，凝胶应该牢固地附着在短玻璃板上。2. 固定凝胶：将凝胶（连玻璃板）放入塑料盘，用固定/停止溶液浸没，充分振荡20分钟或直至样品中染料完全消失，胶可在固定/停止溶液中保存过夜（不振荡）。保留固定/停止溶液，用于终止显影反应。3. 洗胶：用超纯水振荡洗胶3次，每次2分钟。从水中取出，当转移至下一溶液时拿着胶板边沿静止10～20秒，使水流尽。4. 凝胶染色：把凝胶移至染色溶液充分摇动30分钟。5. 凝胶显影（1）在显影溶液中加入甲醛（3 ml）和硫代硫酸钠溶液（400 μl）以完成显影液的配制。（2）从染色溶液中取出凝胶放入装有超纯水的盘中浸洗5～10秒。注意，把凝胶从超纯水转移到显影溶液的总时间不能长于5～10秒。浸泡时间过长则导致信号微弱或丧失信号。若浸泡时间过长，可重复第五步用染色液浸泡。（3）立刻将凝胶转移至1升（总量的一半）预冷的显影液充分振荡直至模板带开始显现或开始出现第一批条带，把凝胶移入剩下的1升显影液中继续显影2～3分钟或直至所有条带出现。6. 固定凝胶：在显影液中直接加入等体积的固定/停止溶液。停止显影反应，固定凝胶。7. 在超纯水中浸洗凝胶两次，每次2分钟，注意在本操作中戴手套拿着胶板边缘避免在胶上印上指纹。8. 将凝胶置于室温干燥或用抽气加热法干燥。在可见光灯箱或亮白，黄色背景（如纸）上观察凝胶，若需永久保存的记录, 则可用EDF胶片保留实验结果。【注意】测序产物的银染是显现序列信息的一种新方法，本系统的成败受几个因素的影响① 水的质量对于染色的成功极其重要。超纯水（NANOpureR或Milli-QR的水）或双蒸水可获得较好的效果，如果水中有杂质，则低分子量条带可能无法出现。② 碳酸钠也非常重要。使用新鲜的，美国化学学会级碳酸钠较好，如Fisher和Kodak ACS试剂级碳酸钠（Fisher Cat #S263-500或S262-3，或Kodak Cat #109-1990），一般可获得较好的结果。③ 色后的洗涤步骤是非常关键的。如果凝胶洗涤时间太长，银颗粒会脱离DNA，产生很少或没有序列信号。如果洗涤时间过长，染色步骤可以重新进行。④ 如果凝胶厚度超过0.4 mm或丙烯酰胺浓度高于4～6%，则有必要延长固定和染色的时间。如果凝胶比0.4 mm薄，染色反应后的洗涤必须缩短至不超过5秒。⑤ 在室温下进行所有步骤，显影反应除外。显影溶液必须预冷至10～12℃以减小背景杂色。注意：临用前在显影溶液中加入甲醛和硫代硫酸钠。用新配的染色及显影溶液。不要重复使用任何溶液。六、EDF胶片显影使用EDF胶片可增强测序条带的对比度，如果测序胶上条带很淡，我们建议把数据转移至EDF胶片，银染胶在其影像转移至EDF胶片之后可增强条带可读性。1. 在暗室内，将染色过的粘于玻璃板的凝胶（胶面向上）置于荧光灯箱上。如有合适的漫射板，亦可用白灯箱，为确保曝光时间，用一小条EDF胶片曝光不同时间，检查不同的曝光强度，一般曝光20～40秒可得较好结果。2. 在红灯下找到EDF胶片有缺刻的一角，然后把胶片置于凝胶上，使缺口位于左上角。由于EDF胶片是单面的，因此必须确保缺口在左上角。3. 在EDF胶片上放置一干净、干燥的玻璃板，开亮灯箱约20秒。4. 用冲显放射自显影胶片的步骤手工显影EDF胶片，可使用下列操作过程：（1） 在Kodak GBX显影液中显影1～5分钟；（2） 水洗1分钟；（3）在Kodak GBX定影液中定影3分钟；（4）水洗1分钟。【注意】① 进行EDF胶片显影之前凝胶必须完全干燥。戴手套进行操作，以免印上指纹。同时注意EDF胶片不能用自动胶片处理器。② 对于不同的光源最佳曝光时间可能不同，通过对一小条EDF胶片曝光不同时间以选择你所用光源的最佳曝光时间，参阅胶片说明书。③ 曝光时间短则EDF胶片影像较深，曝光时间长则有助于减弱背景。 “鸟枪法”是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段，继而将这些片段与适当的载体结合，将重组DNA转入受体菌扩增，获得无性繁殖的基因文库，再结合筛选方法，从众多的转化子菌株中选出含有某一基因的菌株，从中将重组的DNA分离、回收。这种方法也就是应用基因工程技术分离目的基因，其特点是绕过直接分离基因的难关，在基因组DNA文库中筛选出目的基因。可以说这是利用“溜散弹射击”原理去“命中”某个基因。由于目的基因在整个基因组中太少太小，在相当程度上还得靠“碰运气”，所以人们称这个方法为“鸟枪法”或“散弹枪”实验法。一、用限制酶切下目的片段的大片段InsertDNA，并用Agarose凝胶电泳进行回收。二、对回收的大片段DNA用物理方法（如超声波等）进行切断处理，然后用T4DNAPolymerase对小片段DNA进行末端平滑化。三、进行Agarose电泳，切胶回收1kbp～2kbp的小片段DNA。然后用BcaBestDNAPolymerase在DNA的3"端加上一个A碱基。四、把加上A-tail的DNA片段连入T-Vector中，然后转化，挑选克隆。五、对阳性克隆（含1kbp～2kbpInsert）进行DNA测序。六、对数据进行编辑，最后连成一条大片段的DNA序列。

高中粗鉴定:用吡罗红（DNA）和甲基绿（RNA）鉴定.DNA的鉴定(1)配制二苯胺试剂:取0.1 mL B液;滴入到10 mL A液中,混匀.(2)鉴定:取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝).用沸水浴(100℃)加热10 min.在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色).附1:研磨液的配制方法Tris:10.1 g(相对分子质量为121.4),先加50 mL蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 mol/L的盐酸调至pH=8.0,再加下述药品.NaCl:8.76 g(相对分子质量58.44)EDTA:37.2 g(相对分子质量372.24)SDS:20 g(相对分子质量288.3)待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定溶至1000 mL.若在室温低于20℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解.如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用.附2:研磨液中几种药品的作用SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离.EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA.物质的量浓度为0.15 mol/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA.Tris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态.(Tris为三羟甲基氨基甲烷)RNA的鉴定取RNA沉淀约O.2 g，加2 ml 10％H2SO4→沸水浴中加热2 min→加1.5 ml地衣酚试剂→沸水浴中加热→观察颜色变化。

DNA提取的完整步骤 ：1． 取新鲜或冷冻样品的肌肉组织100ul-200ul或95%ALC保存的样品组织0.05g。 2． 将组织尽量剪碎，分别装入1.5ml 的离心管中。 3． 每管中加入450ul的裂解缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.0; 100mM EDTA, pH8.0) 4． 每管加入10% SDS 50-100ul(70-80不定) (1-2%),再加入2.5-5ul（3ul）蛋白酶K (20mg/ml),是其终浓度达100ug/ml. 混匀，55℃ 3h至过夜（期间将管子颠倒几次）。 5． 样品中加入150ul NaCl（盐析作用），室温8000rpm离心20min，去沉淀，然后在上清液中加入等体积（500ul）预冷异丙醇（沉淀DNA），混匀，20℃处理30min，14000rpm离心10min，去上清液。沉淀加70%ALC洗涤离心去ALC，室温挥发ALC5-10min，加TE 500ul，加10ul RNAase (终浓度4mg/ul)，即2.5ul。37℃ 30min 或65℃ 15min。 6． 加等体积酸液（提取DNA中的蛋白质）缓慢来回颠倒离心管10min，13000-15000rpm离心10min。用移液管（大口Tip头）小心取出上层相至另外干净的离心管中，不要触到两相之间的白色蛋白层（可视情况重复操作 次）。 7． 加入等体积酚：氯仿(催取酚)（1：1），轻摇,缓慢颠倒混匀10min 13000-15000rpm 离心5-10分钟，取上层清液于干净离心管中。 8． 加入等体积氯仿（氯仿：异戊醇（阻止氯仿挥发）=24：1），轻摇，缓慢颠倒混匀10min,13000-15000rpm离心5-10min。取上清液加入1/10体积2M NaCl和等体积-20℃保存的无水乙醇（或等体积异丙醇）（沉淀DNA），沉淀DNA 10min,13000rpm离心5min，去上清，加入100-150ul70%ALC,离心，小心倒掉ALC（当心DNA沉淀丢失），用70%ALC再洗一次，然后去ALC。45℃烘箱烘干15-30min，用双蒸水沿管壁沿四周冲洗（TE量视DNA沉淀量而定，在80-250ul之间），溶解12-24h,-20℃保存备用。注意事项：1、 裂解液要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解。 2、 酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性，飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤，因此应注意防护。氯仿易燃、易爆、易挥发，具有神经毒作用，操作时应注意防护。 3、 各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解。 4、 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。 5、 异丙醇,乙醇.NaAc,KAc等要预冷,以减少DNA的降解,促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀。 6、 提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。 7、 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。

碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2、37℃振荡培养过夜。 3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液。 4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合。 5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。 6、加入0.15m1预冷溶液III(5 mol/L KAc，pH4.8)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 。 7、以10，000rpm离心20min，取上清液于另一新Ep管 8、加入等体积的异戊醇，混匀后于?0℃静置10min。 9、再以10，000rpm离心20min，弃上清。 10、用70％乙醇0．5ml洗涤一次，抽干所有液体。 11、待沉淀干燥后，溶于0．05mlTE缓冲液中 煮沸法 1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。 2、弃上清，将管倒置于卫生纸上几分钟，使液体流尽。 3、将菌体沉淀悬浮于120ml STET溶液中, 涡旋混匀。 4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 涡旋振荡3秒钟。 5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。 6、用微量离心机4℃下12000g离心10分钟。 7、用无菌牙签从eppendorf管中去除细菌碎片。 8、取20ml进行电泳检查。酚氯仿裂解法① 从琼脂平板上挑取转化菌阳性克隆，接种到标准LB培养液中（含有卡那霉素30 μg/mL）摇菌12 h；收集1.5 mL菌液，8000 g/min离心3 min，弃上清，沉淀加入200 μL TE，充分混匀；加入400 μL酚氯仿（1∶1体积）混合液，剧烈振动10 s，混匀；12 000 g/min离心5 min，1 mL胰岛素注射针收集上清，尽量避免吸入蛋白沉淀层；上清经国产0.22 μm针式滤器过滤1次；向过滤上清液内加入2倍体积无水乙醇，振荡10 s，12 000 g/min离心5 min；沉淀溶于20 μL的RTE溶液中，37℃水浴. ② 按PstI内切酶说明书进行酶切反应（37℃，1 h）. 酶切产物10 μL，10 g/L琼脂糖凝胶电泳. ③ PCR引物根据参考文献〔1〕设计，预计扩增产物片断大小为714 bp. ④ 常规制备感受态菌E.coli DH5a，提取质粒DNA常规转化感受态，涂于含有卡那霉素（30 μ/mL）LB培养平板中，37℃培养，15 h后观察筛选克隆情况. 碱解法操作步骤1、细菌繁殖LB培养基，2 ml/20ml，37℃，200rpm，摇一摇，过夜2、离心10 min，5000 rpm, 4℃；弃上淸液3、沉淀（菌体细胞）预冷的TES缓冲液洗涤，离心10 min，5000 rpm, 4℃加入预冷的1 ml Solution I，冰浴，10 min4、重新悬浮，加入150 ul溶菌酶母液，室温放置5 min5、加入1.2 ml Solution II, 冰浴，5 min6、加入0.9 ml预冷乙酸钾，混匀，离心10 min，12000 rpm, 4℃7、加入1.5 ml异丙醇，-20℃冰箱内放置15 min8、离心10 min，12000 rpm, 4℃9、取沉淀，悬于400 ul TE缓冲液中10、加入40 ul，3 M NaAc11、酚/氯仿，抽提，乙醇沉淀12、离心10 min，12000 rpm, 4℃13、取沉淀，冷冻干燥，再悬浮于50 ul TE缓冲液中。14、电泳检测提取DNA的质量还有碱变性法、SDS法、 羟基磷灰石层析法等

病情在发展加重了，乙肝病毒复制是阳性的，具有传染性。同时肝细胞有损伤，肝功异常，进入了肝炎期。必须要抓紧时间治疗了，治疗必须是选择专业的治疗肝病的中医院就诊，采用中草药为主来治疗。不用轻易用抗病毒西药治疗。用药后数值可以暂时降低，但是用药时间很长，停药后会反弹加重，很难再停药的。

还不明白吗？那个大叔做完那个动作之后，你没看他们两个什么表情吗？DNA touch简单的说就是检验龙儿是否和他母亲有一样的翘臀的啦，因为泰子的职业类似于“艺妓”（表达能力有限请勿吐槽），所以那个大叔肯定是去过那个泰子上班的酒吧啦鉴定过啦（touch），在知道龙儿是他儿子（DNA）之后就是开个玩笑的撒（touch）。但是你如果站在龙儿的角度去想，你肯定是想杀了那个大叔的~~~~DNA：这里代之遗传也就是母子。touch：就是摸（鉴定），也可以理解成2楼得咸猪手 3楼那个太搞了，不愧是学术人士···

DNA指纹技术原理：一般要通过以下几点来完成：1、将送检的各种生物学检样，如毛发、血痕、精斑、人体组织或白骨等，把其中所含的DNA 提取出来。2、选用与探针配对的限制性核酸内切酶，在长链DNA 位置上加以切割，使分子量很大的DNA 长链切短成许多长度不同的小片段。3、在胶板尺寸较长的凝胶电泳仪中，对酶解完全后的DNA 片段进行电泳，各酶切片段就会按其长度大小在电场中进行分离。4、先用碱性溶液使凝胶板中分离开的双链DNA 片段变性为单链片段，然后将凝胶板夹在尼龙膜中，使这些单链DNA片段印溃(blot-ting)，转移并永久性地固定在尼龙膜上。5、让放射性DNA探针与尼龙膜上的单链DNA片段进行分子杂交。6、用放射性胶片与尼龙薄膜叠放，尼龙膜上的放射性探针便会发出X 射线使胶片曝光，从而使杂交有探针的长度不同的DNA片段位置显影在胶片上。这样的特征DNA片段条状图谱，便是所谓的DNA指纹。1 DNA指纹图的建立及发展近百年来的研究认为，任何遗传分析都是以遗传标志为基础的，而任何一个遗传标志的价值又在于其变异 性(即多态性)的大小。有关遗传多态性的研究对促进人类学、遗传学、免疫学以及法医学的发展， 以及对阐明某些疾病的发病机理乃至协助诊断等方面都起了十分重要的作用。但以往的研究都是利用各种外部表现型、生理缺陷型、同工酶、多态蛋白等作为遗传标志，用间接分析来推论相应的遗传基因。70年代末，限制性内切酶和重组体DNA技术的出现以及分子生物学的飞速发展，使人们对遗传标志的研究转向DNA分子本身。由于各种遗传信息都蕴藏在DNA分子上，生物个体间的差异在本质上是DNA分子的差异，因此DNA被认为是最可靠的遗传标志。某些DNA序列的差异可通过限制性酶切片段长度的改变来反映，此即限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphisms,RFLP),其产生是由于点突变、DNA重排、插入或缺失引起的〔1〕。随着对RFLP研究的深入，人们发现了基因组中最有变异性的一类序列——高变异DNA序列，使DNA遗传标志的发展和应用得到了一次飞跃。1980年，Wyman和White描述了第一个多等位性的具有高度多态性的人类DNA标志。不久，在胰岛素基因(Insulingene)的5′端区域、致癌基因(C-Haras I Oncogene)的3′端分别发现了相同的高度可变的标志(hypervariable marker)。在α-球蛋白(α-globin)基因群周围还发现了其它三个标志〔2〕。1982年，Bell等〔3〕证实：这些高度多态性区域串联着重复的短序列单位，重复单位数目的差异导致了这种高度的可变性，由于这些结构特征，人们称这些区域为小卫星(minisatellite)或高度可变区域(hypervariable)或可变数目的串联重复(variable number of tandem repeats)。1985年，Jeffreys 等〔4〕用肌红蛋白基因第一内含子中的串联重复序列(重复单位含33bp)作探针，从人的基因文库中筛选出8个含有串联重复序列(小卫星)的重组克隆。序列分析表明，这8个小卫星重复单位的长度和序列不完全相同，但都有相同的核心序列(core sequence)即GGCCAGGA/GGG。他们先后用两个多核心小卫星(poly coreminisate-llite)33.6和33.15探针进行southern杂交，在低严谨条件下杂交得到了包含10多条带的杂交图谱，不同个体杂交图谱上带的位置就象人的指纹一样千差万别，Jeffrey称之为DNA指纹(DNA fingerprint)〔5〕，又名遗传指纹(genetic fingerprint)。RFLP DNA指纹分析技术由于方法繁杂、周期长、实验条件高等缺陷而无法大范围推广。1990年，Williams等〔6〕首次报道了AP-PCR技术，Welsh和McCelland〔7〕亦独立地进行了这方面的工作，从而使DNA指纹技术应用更加广泛。AP-PCR技术是采用随意设计的1个或2个引物，对模板DNA进行PCR扩增，一般先是在低严格条件，即在高Mg2+浓度(大于传统PCR Mg2+浓度1.5mmol/L)、较低退火温度(36℃～50℃)下进行1～6个循环的PCR扩增，随后在严格条件下进行PCR扩增，产物经2%琼脂糖凝胶电泳或6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，可得到DNA指纹图谱。其基本原理是：在低严格复性条件下，引物与模板DNA非完全互补序列形成错配，错配引物在DNA聚合酶作用下沿模板链延伸，合成新链，当在一定距离内模板DNA另一单链也发生引物错配时，即可对两错配引物间的DNA进行扩增。但是此种错配并非随机发生，引物和模板间，特别是在引物3′端必须存在一定的互补序列，即可产生不同的扩增片段或组合，通过DNA指纹图谱，可得到配对DNA样品中的差异片段，用于克隆、测序、染色体定位和基因片段的生物学功能研究。我国杨建厂等〔8〕利用PCR的原理成功地建立了一种全新的DNA指纹检测技术，称之为随机引物PCR人DNA指纹检测技术(arbitrarily primed PCR human DNA fingerprinting,APHDP)，此外还开发出处理DNA指纹数据应用软件，应用于个人识别、遗传素质与疾病的相关特征研究等。2 DNA指纹技术所用的探针自DNA指纹技术建立以来，这一技术迅速在动植物的进化关系、亲缘关系分析以及法医学方面得到广泛应用。也正是由于DNA指纹技术在核酸分析中显示出了强大的生命力，因而许多学者围绕此技术所用的探针作了大量的工作，除Jeffrey等〔5〕的探针外，用人工化学合成或从生物组织中提取后再扩增的办法生产出了一批高水平的探针。迄今，在DNA指纹技术中所用的探针大概有probe33.15、33.6〔5〕、bacteriophage MB〔9〕、pig repetitire clone p83、PGB 725、poly(GT) containing 18.1、(GTG)5/(CAC)5〔10，11〕、(CAC/TA)4及(GT)12等。同时，在探针的标志上也有了很大的发展，根据它们的结构可大致分为小卫星探针和简单重复序列探针，简单重复序列包括微卫星探针(microsatellite probe)和寡聚核苷酸探针。小卫星探针的核心序列为33bp，常定位在人常染色体前的末端(proterminal)区域，微卫星探针则在10～20bp之间，而寡聚核苷酸探针在10bp以下，普遍散布在人类整条染色体上，或者在基因间区域或者位于内含子内。1988年，我国伍新尧等〔12〕根据DNA指纹是人基因组中重复序列的RFLP的原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA同源序列性高于90%的事实，选用鼠MBP cDNA3′端的一段序列(非表达区高度重序列，与人基因组中该类重复序列几乎完全同源)，长度为0.81kb的片段作探针，检测用HaeⅢ酶解的人DNA限制性片段(RF)，在人群中可分出22条谱带，受检 的30例无血缘关系的个体之间没有两个人的谱带是完全相同的，显示这一方法的高度个体特异性，这是国内首次用自已的力量找到DNA指纹的探针。3 DNA指纹的应用3.1 法医学方面 同以往的血型测定法相比，DNA指纹技术在法医学领域上具有无可比拟的优越性。已成为鉴定犯罪、亲子鉴定和确定个体间亲缘关系的工具〔5，13〕。随后，国内学者李伯龄〔14〕、姜先华〔15〕、伍新尧等〔12〕也先后对此项技术进行了研究，并应用于实际案件的鉴定中，解决了过去无法解决的疑难案例，如微量血痕、部分腐败的碎尸块的个人认定等。3.2 在动植物科学中的应用3.2.1 生物种群学研究 利用DNA指纹图可以估算连锁不平衡，比较等位基因的频率，还能估计不同个体之间的重组率，在种群学研究上有助于建立某一个体在种群中的地位和关系，特别是对真菌的种群研究，有很多真菌可以通过有性和无性的方式繁殖，但是何时以何种方式繁殖，程度如何，并不清楚，而利用DNA指纹图就能区分以有性和无性方式产生的后代，并能确定某一区域真菌的自然分布〔1，16〕。3.2.2 测定物种之间的遗传距离、物种分类鉴定 Jeffreys等〔5〕认为在一个群体的不同成员间拷贝数的串联重复序列(VNTR)由于多态性程度高，在遗传分析中尤其适合作为多态性标志，简单重复的不稳定性可导致VNTR长度的迅速变化，根据家族中或育种群体中VNTR的分离重组频率，可以测定出遗传距离，可用统计学公式确定个体间的亲缘关系：D=2Nab/(Na+Nb),，D值越大，亲缘关系越近，遗传距离就越小；D值越小，亲缘关系越远，遗传距离就越大。为此，运用DNA指纹技术可检测不同物种、同种及同种不同个体的亲缘关系，用于物种分类鉴定，也可用于杂交后代亲本决定，杂交后代群体分开，检测近等基因系(或同类系)种的多态性，并对检测基因进行定位。Welsh等〔7〕对布氏疏螺旋体菌株的DNA指纹进行分析，发现这种lyme病的病原菌实际上是由三个不同的种群组成。罗超权等〔12〕运用AP-PCR鉴定弓形虫虫株，在国内开创了运用DNA指纹技术作生物分类的先例。3.3 在流行病学方面的运用 由于DNA指纹具有以下几个特点：①能反映基因组的变异性；②具有高度的变异性；③具有简单的稳定的遗传性；④DNA指纹谱具有体细胞稳定性。所以，它同一般的流行病学方法相比较而言，具有无比的优越性，使其成为流行病调查的一种有效工具。Jan DA等〔17〕，Denise Chevrel-Dellagi等〔18〕运用IS6110序列作探针对结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，调查国际间结核病的种型、分析流行情况，改进了控制结核病的方法。而ZhenHua Yang等〔19〕从67个病人中分离出结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，发现分离到PTBN12型时易查明流行环节，从而为快速进行疾病控制提供了一个有力证据。在我国，童笑梅等〔20〕采用随机扩增多态DNA指纹图技术对医院内感染的14例新生儿进行病原流行病学分析，发现患儿体内携带的与医务人员鼻中携带的华纳葡萄球菌菌株的DNA指纹图完全一致，从而证明此次感染的病原菌为华纳葡萄球菌，传染源是携带病菌的医务人员。郭永建等〔21〕在6个月内对121名产科新生儿中的30名检出的31株铜绿假单胞菌进行RAPD指纹图谱分析和血清学分型，结果表明，铜绿假单胞菌在产科新生儿中暴发流行，0∶6/R∶1型为暴发流行性菌株，对医院感染病原菌分型、精确确定传染源、阻断传播途径、控制和预防医院感染具有重要的指导意义。3.4 疾病诊断及治疗 鉴于DNA指纹所具有的上述特点，故DNA指纹广泛应用于一些疾病的诊断及治疗。Morral〔22〕等发现CF基因9号外显子侧翼含有一小卫星区，且此等位基因2.6带常与△F508连锁，相伴率为50.6%、41.6%，△F508是最主要的致病突变，可疑患者电泳图只要发现2.6等位基因，就可对此病进行初步诊断。现已在Wilson病、外周神经纤维瘤、成人多束肾、多巴性肌紧张、Frecbreich共济失调、Kallmunm综合征性连锁、视网膜病等基因内或旁侧发现有高度的小卫星区域，从而可进行基因诊断。Okamoto R〔23〕用DNA指纹法预测慢性粒cell性白血病骨髓移植术后复发，取得了成功。3.5 肿瘤的研究 肿瘤是多因素、多阶段的变化过程，病因复杂、变化多样，但归根到底还是在DNA的变化上。一般说来，癌组织、转移灶与正常组织或外周血细胞DNA指纹有差别，常见的是某条带或几条带的缺失，某一条或某几条带密度降低，或者癌组织中出现新的带。Thein等〔24〕用33.6和33.15为探针研究患者DNA指纹谱变化，发现胃肠肿瘤患者癌组织DNA指纹谱全有改变，并认为体细胞突 变还有种属特异性。刘霜等〔25〕应用RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术对6例肝癌患者的癌组织与非癌组织进行分析，发现所有肝癌组织基因组DNA的RAPD指纹图谱均存在差异，其中3例配对肝癌基因组中均存在一相同的0.9Kb的随机扩增片段。杨建厂等〔8〕用APHDFF技术对28例确诊为鼻咽癌病人血DNA指纹图的检测，发现有3条DNA片段出现的频率明显低于健康人群。王黛等〔26〕用LE11.8、MYO和Mb探针，经Southern杂交法检测12例儿童急性粒cell白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排，结果发现初始或复发与完全缓解时的DNA指纹图相比，谱带有增加或减少，从而认为急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排。

NgAgo 基因编辑技术有可能在将来取代 CRISPR这项成果本身很有价值，而且好事多磨，经过切磋琢磨做得质量很高。

ngago如何发挥dna表达抑制功能，为什么不能发挥dna 编辑功能DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。比如：甲基化会促使异染色质化，DNA构象改变（如Z型-B型之间的转变）。更深一层的机理应该是甲基的引入使得分子内或分子间的非共价键重新分配等，这样也会影响DNA与转录因子的结合等等

山东大汶口出土古人类化石，DNA与现代日本人吻合，揭开其起源之谜 相信大家都听过这个民间广泛流传的故事：秦始皇派徐福出海寻找长生不老之术，徐福带上三千童男童女东渡，但并未返回，而是在日本群岛定居下来繁衍生息，这就是日本各地居民为何将徐福奉为神话的原因。实际上，徐福不可能是祖先级，因为日本的历史远远不止两千年，而且根据山东大汶口遗址出土物证显示，徐福并不是第一批踏上日本半岛的中国人。 人类社会进程的一般顺序是：石器时代、青铜时代、铁器时代，每个时期都会度过成百上千年的岁月，然而日本的铁器时代却来得太过突然。大约在公元前3世纪，尚处于原始社会的日本"一夜暴富"，飞跃性进入农业社会！ 它被称为弥生时代，它为日本带来的变化意义重大：弥生人走出洞穴开始建造木屋，脱去树叶穿上了麻布衣服，男性地位开始凸显，女性开始注重装扮，此前没有的先进工具大量出现，墓葬规格和形制均有了很大改观。 弥生时代迅捷的动作违背了人类社会正常发展的速度，这样超自然的现象也引起了广泛关注，就连日本学者都无法自圆其说。因此，"移民说"逐渐被认可，即日本现代人类属于原生居民与外来人种的结合，而最有可能的来源是中国和朝鲜半岛。 学者通过现代科技手段研究母系线粒体DNA（mtDNA），证明了上述观点。人类的基因在不断变化，但女性的线粒体基因能够定向遗传给后代，因此研究一个地区人群mtDNA的结构类型和构成比例，可以很好体现其遗传特性。 大汶口文化发源于山东半岛，遗址中出土过公元前3000多年的人类遗骸，有学者便将其与日本、朝鲜居民进行mtDNA对比，结果显示二者存在大量相似，尤其是D型单倍群体出奇的吻合。此外，弥生时代之前的绳纹人被认为是日本原著居民，但经过mtDNA分析却发现，绳纹人体内也有部分外来基因。 史书记载："陈胜等起，天下叛秦，燕、齐、赵民避地朝鲜数万口。"很显然，这些避难之人并未停下脚步，而是通过朝鲜半岛继续前往日本，并在那里完成定居。而绳纹人距今约三千年左右，所以早在秦汉之前，早就有中国人远渡重洋，到达过日本。大汶口遗址位于泰安，正是春秋齐国的领地，这也符合古书上的记载。 另外，还有一位美国学者曾做过日本人、绳纹人、史前中国人的牙齿形态特征分析，研究表明现代日本人只有少量的绳纹人原生居民的基因，而大多数基因都来自大陆中国型人群。不过，这只能说明外来文明曾经到访，并无法证明日本最原始的起源。 事实上，日本列岛出土的古人类化石可追溯到3万年之前，也就是说他们拥有独立的人类起源系统，只不过在后续的发展中曾接受过其他系统的混合罢了。但不管怎么说，基因是不会说谎的，日本现代文明中有远古中国的影子，希望随着考古的发展，能够解决掉这一世纪难题。

首先，端粒学说仍然是一个假说，假说就有在未来被推翻的可能；其次，端粒学说认为生殖细胞端粒不缩短，所以减数分裂不适用这一讨论；然后，对于有丝分裂，如果端粒学说正确，那么子代DNA与亲代的确不完全一致。有丝分裂里的平均分配是指理论上两个子代细胞相同，但不等于子代与亲代一致；再然后，即便不考虑端粒学说，有丝分裂过程中本来就伴随着DNA复制和突变，就算没有端粒的缩短，实际情况中子代与亲代的DNA也很难保持一致，甚至两个子代细胞之间都会有差异。所以平均分配只是理想情况。最后，上述所说这些差异占整体DNA比例很低，放眼大局的话，有丝分裂中子代和亲代的DNA基本上是一致的。对于高中生物而言，要弄清楚出题人想问的是大体情况还是细节，是在考DNA复制的延续性，还是突变等因素带来的变异性。

错了，这好像是端粒学说自由基学说：通常指异常活泼的带电分子或基因团称为自由基自由基产生后，即攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子

A、端粒学说认为正常体细胞的端粒DNA序列随细胞分裂次数增加而变短，A错误； B、衰老的细胞呼吸速率减慢，大多数酶的活性降低，B错误； C、细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生了基因突变，C错误； D、蝌蚪尾的消失、细胞的自然更新和被病原体感染细胞的清除都通过细胞凋亡完成，D正确． 故选：D．

【答案】：AAmes试验、基因正向突变试验的检测终点是基因突变，微核试验和染色体畸变试验的检测终点是染色体畸变，检测DNA损伤的试验有：姐妹染色单体交换试验、程序外DNA合成（UDS）试验，因此正确答案选A

【答案】：A遗传病理学试验中，检测基因突变的试验有：Ames试验、哺乳动物细胞基因突变试验、果蝇伴性隐形致死试验；检测染色体畸变的试验有：染色体畸变试验、微核试验、显性致死试验：检测DNA损伤的试验有：姐妹染色单体交换试验、程序外DNA合成(UDS)试验，所以正确答案为A。

【答案】：E此题考查考生对遗传毒理学原理和遗传学终点的理解。遗传学终点可分为基因突变、染色体畸变、染色体组畸变（非整倍体）及DNA原发损伤。题干所列各试验的终点，微核试验为染色体畸变（非整倍体）；显性致死试验为生殖细胞染色体畸变；细菌回复突变试验为基因突变；骨髓染色体畸变试验为体细胞染色体畸变；程序外DNA合成试验为原发性DNA损伤。

RNA聚合酶可以解旋DNA。原核生物的RNA聚合酶σ因子的主要作用是识别DNA模板上的启动子，其单独存在时不能与DNA模板结合，与核心酶结合成全酶后，才可使全酶与模板DNA上的启动子结合。当它与启动基因的特定碱基序列结合后，DNA双链解开一部分，使转录开始，故σ因子又称起始因子。RNA聚合酶主要是在转录时用到 其作用1有解开DNA双链的作用2就是催化合成RNA。重新组合DENA, 这个我不清楚，可能要查查文献。但是上面说了按RNA聚合酶的作用，主要是以DNA为模板合成RNA。

A、DNA分子的复制时，以解开的两条链分别为模板链合成各自的子链，A正确； B、DNA分子复制所需要的原料是四种分别含有A、G、C、T碱基的脱氧核糖核苷酸，B错误； C、DNA分子的复制过程需要消耗能量，C正确； D、DNA分子的解旋需要解旋酶酶的催化，D正确． 故选：B．

个人觉得水光比较好，可以试试林志玲水光针

氨基酸是蛋白质的基本单位多肽是个多个氨基酸脱水缩合而成脱氧核糖核苷酸 构成DNA的单位 按照碱基互补原则合成DNA染色体的组成成分之一是DNA染色体是DNA-组蛋白复合体的一种特殊存在形式。DNA-组蛋白复合体高度螺旋化，这个状态就叫做染色体了。染色体也有一些特征，例如带纹，大小，着丝粒位置等，是区别物种和其他染色体的标志。遗传中，DNA的作用是表达基因 ，以出现形状，染色体则在细胞分裂的时候出现，起到自由组合和分离的作用。（因为DNA-组蛋白复合体松散状态非常长。。。不利于各自分离。染色体状态，他们就很短很容易配对分离了） 一种平行关系

双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T），又称有义链（sensestrand）。分子中的核苷酸序列是同DNA双链中一条脱氧核苷酸链的序列相互补，转录RNA分子的这条DNA链称为DNA的模板链，另一条链称为该基因的编码链。转录初级产物RNA的核苷酸序列同编码链的序列相同(除了以U替换T)，意指DNA通过RNA编码该基因的蛋白质产物。含有众多基因的双链DNA分子中，各个基因的模板链未必都在同一条链上，就双链DNA分子中的一条链来说，既是某些基因的模板链，又是另一些基因的编码链。（反编码链）：DNA双链中作为模板指导与之互补的RNA合成的链。生物学是一门研究生命和活有机体的自然科学，包括它们的构造，功能，生长，来源，演化，分布和分类。

双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T），又称有义链（sensestrand）。分子中的核苷酸序列是同DNA双链中一条脱氧核苷酸链的序列相互补，转录RNA分子的这条DNA链称为DNA的模板链，另一条链称为该基因的编码链。转录初级产物RNA的核苷酸序列同编码链的序列相同(除了以U替换T)，意指DNA通过RNA编码该基因的蛋白质产物。含有众多基因的双链DNA分子中，各个基因的模板链未必都在同一条链上，就双链DNA分子中的一条链来说，既是某些基因的模板链，又是另一些基因的编码链。（反编码链）：DNA双链中作为模板指导与之互补的RNA合成的链。生物学是一门研究生命和活有机体的自然科学，包括它们的构造，功能，生长，来源，演化，分布和分类。

穷途末路 追击 打死奥伯恩 就会随机获得骨架或者DNA 打生化魔方，获得一个针，这3个配套得个A博士的箱子

经常有患者咨询：“我是乙肝大三阳患者，经过一段时间的坚持治疗，已经没有什么不适症状了，在医院检查HBV-DNA已经转阴了，想问一下，?”肝病专家指出，乙肝大三阳DNA阴性还是会传染的，乙肝大三阳DNA阴性只能说明患者体内病毒含量较少，病毒依然是存在的，因此还需要继续进行治疗，一直到完全康复。肝病专家指出，乙肝是传染性疾病，乙肝病毒DNA是衡量乙肝传染性强弱的最佳指标，针对于乙肝大三阳DNA阴性的患者，只能说该患者目前病毒在体内相对来说比较稳定，没有复制或处于极低复制状态，传染性弱，但是仍然有一定的传染性。HBV-DNA是判断乙肝传染性强弱的重要依据。不管乙肝大三阳还是小三阳都需要根据HBV-DNA载量来衡量。判断乙肝大三阳传染性大小的依据是看HBV-NDA的数值，数值越大传染性越大，数值越小传染性也就越小。HBV-DNA数值小于1000或检测不到时，则说明HBV-NDA转为阴性。乙肝大三阳DNA阴性时，如果肝功能检查显示异常，则也是需要积极进行抗病毒治疗。但是在治疗乙肝大三阳之前，需要进行乙肝病毒变异耐药检测。推荐阅读：长沙治疗乙肝大三阳需要多少钱建议乙肝大三阳患者DNA阴性时应及时去正规专科医院进行全面检查，根据实际检查结果进行综合治疗，武警湖南总队医院拥有先进的医疗设备、完善的学科体系，设有肝病专家门诊及住院部，均有临床经验丰富、学术水平较高的主任医师坐诊，针对肝病各科专家形成统一整体，为患者进行会诊，出具最优化的治疗方案，欢迎广大肝病患者前来就诊!

意思是乙肝病毒dna复制定量，检测的是体内乙肝病毒的多少，如果指标越高说明病毒复制越多越快，传染性很高，处于急性传染期。

你的第一个问题我表示赞成我所了解到的Ct值是荧光定量PCR技术中的一个重要概念，它反映DNA从基量扩增到阈值所需要的循环次数，那么当基量很小的时候，扩增到阈值所需要的循环次数很显然就很大，所以Ct值越大，说明DNA含量越少。所以我还是比较赞成第三种观点。Ct值是小数并不是不可能，因为基量是未知的，所以扩增到阈值完全可能是小数。你在百度上搜索“乙肝病毒Ct值”，会有很多答案，你可以参考祝身体健康

HBV-DNA莹光（不是灵光）定量检测，正常值一般为小于1000拷贝（copies）/ml，有的医院为小于500拷贝（copies）/ml即5.00E+02/ml，如果超过这个数值代表患者体内乙肝病毒复制活跃，而且数值越大，复制（繁殖）越活跃。你的结果比较边缘，ct值是这个实验的循环数，你的ct值达到了36.94，说明实验经过36.94个循环才测出了病毒，加上HBV-DNA的拷贝数只有5.00E+02即500个，就在正常值和异常值的边缘，所以这个结果很可能是可疑的结果，需要复查，并且需要医生进行正确的判断。建议到医院复查，然后由有经验的医生进行确诊。

DNA的数值是10乘以几次方那个CT值就是为了定性的。。是阴性和阳性的意思

中文的名字是峰力。峰力听力集团总部位于瑞士苏黎世郊外的Stafa，是专门从事高科技助听器和FM无线调频助听产品研究、开发、生产与销售的跨国上市企业，是全球听力行业的学院派领导者。依托专业的听力科技以及同广大听力保健专家的通力合作，峰力公司致力于大力提高弱听人士的生活水平。如今，峰力拥有了多个产品品牌、广泛的销售通道和全系列助听器和FM无线调频高科技产品。全球员工3000多人，是全球听力保健行业的三大巨头之一

《工作DNA》（郝明义）电子书网盘下载免费在线阅读资源链接：链接：https://pan.baidu.com/s/1NZtiy_jgkx0Noo1J6nhlzg 提取码：81g9书名：工作DNA作者：郝明义豆瓣评分：7.8出版社：海南出版社出版年份：2007-1页数：264内容简介：★风靡台湾的工作圣经，职场生涯的良师益友。★鸟、骆驼与鲸鱼的故事，8年再版18次。★蔡志忠、几米、冯仓、李多钰、许知远、刘苏里鼎力推荐。工作的人，是三种动物鸟：当我们在基层的时候。从一个想当皇帝的年轻人谈起，三十岁之前不要计较的事情，怎样寻找一个心爱的工作，爱情与第一个工作。骆驼：进入中层干部的时候。贵人是怎么出现的。鲸鱼：成为决策者的时候。大亨的十二个信条，下台的品位。郝明义，轮椅上的大家从小，他患了小儿麻痹症，被指定只能做一些静态的工作；大学毕业时，他和朋友办了家公司，只是为了给他喜欢的女孩子一个工作；再后来，公司倒闭了；再再后来，他的脊椎严重扭曲变形，医生告知他：最好不要再上班，尽量做一些趴着工作的事情……1956年，他出生于韩国；1978年，他从台大商学系毕业，次年进入出版业，历任特约翻译、编辑、主编、总编辑等职；1988年，任台湾时报出版公司总经理；1996年，创立大块文化出版公司；1997年，任台湾商务印务馆总经理兼总编辑；2001年，创立“网络与书”；现任大块文化出版公司董事长，“网络与书”发行人。他是台湾最具个人魅力的出版人之一；他引进了昆德拉、村上春树、卡尔维诺；他打造出了《相约星期二》、《情商EQ》等超级畅销书；他掀起了蔡志忠、朱德庸、几米等漫画绘本的阅读热潮；他是出版业的标竿，更是工作人的典范。“与其为了多活几年而限制生命，还不如把生命浓缩于尽情地冲刺。”他一直都在抗拒“只能做一些静态职业”的宿命；他希望有一天自己的墓志铭可以写着：这个人一直在练习控制他自己的意志、语言与能力——虽然总是破绽百出。

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通常DNA检测大概3-7天能出结果，如果是着急的也是有加急服务的但是费用需要另算。

你是用蓝白斑筛选体系吗？一般白斑表示有目的基因插入lacZ，破坏其功能，而不能正常合成酶降解底物，从而不出现蓝斑。因此重组的载体一般LacZ的活性已被破坏，产生白斑，但是有时你插入的目的基因短，使得LacZ基因没有完全破坏的话，可能会出现淡蓝的斑。

你用的是蓝白斑筛选，白斑为插入目的基因片段的转化子，蓝斑则没有，挑取白色单菌落摇菌进行pcr检测验证。百度蓝白斑筛选。

供体菌相应位点的染色体没有交换到受体菌上，而且受体菌本身不能被该选择性培养基选择，可以再做一组供体菌的对照试验，看看能不能生长，这种转化本身发生频率就很低，样本一定要多。用的是蓝白斑筛选，白斑为插入目的基因片段的转化子，蓝斑则没有，挑取白色单菌落摇菌进行pcr检测验证。百度蓝白斑筛选。扩展资料：大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化，常用柱层析法和氯化铯梯度离心法。常使用的所有纯化方法都利用了质粒DNA 相对较小及共价闭合环状这样两个性质。例如，用氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心分离质粒和染色体DNA就取决于溴化乙锭与线状以及与闭环DNA分子的结合量有所不同。参考资料来源：百度百科-质粒DNA纯化

这个是蓝白斑筛选试验。蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法： 是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质。这样，lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补，称为α-互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。

--蓝白斑筛选过程中，T载体:DNA=1:4,DNA为PCR纯化产物，--如果是摩尔比没什么问题。其实只要目的片段摩尔数高于载体就会有很好的结果。但是如果产物量太大，则会有不良的效果。根据你的问题1：检测纯化产物。出了问题后纯化产物一定要走电泳查看，确认回收效率。2：连接的产物量不用太大。3000bp的T载体如果用25ng，你的643bp产物用10~30ng足够了，这个量在凝胶上只是明确的条带而已，不会很亮。3：检测感受态：感受态细胞如果是自己做的，也许会有杂菌。买来的也存在一定的几率。做一个空转对照，确认感受态不会有问题。4：休克温度：42度即可，没必要45度。45秒没问题，实际上30~90秒都可以，我一般用45秒。5：连接：4度过夜已经足够，除非你的片段很长。6：蓝白斑筛选：有可能淡蓝色的蓝斑是你需要的克隆，如果你的克隆浅蓝色的斑很多，更可能是这样。一般效率高的话只有少于10%的蓝斑，效率一般则可能超过半数蓝斑甚至更多。7：生长速度：关于生长速度你的概念是错误的，数百道数千bp的插入克隆生长速度不会差太多，不可以此作为依据。即使你转纯化的质粒克隆也会不一样大小。但是有插入的克隆会略略慢一点点。8：再确认一下载体吧。

DNA是生物遗传信息的分子载体，它并不直接包含高考知识点。高考知识点是指在高中阶段学习的各学科知识的范围和内容，主要包括语文、数学、英语、物理、化学、生物、地理、历史、政治等学科的相关知识。DNA是由四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）组成的序列，它负责传递和存储生物的遗传信息。DNA的序列编码了生物体的基因信息，而基因则包含了一系列的遗传指令，控制着生物体的生长、发育和功能。虽然DNA本身并不直接包含高考知识点，但遗传学和分子生物学等学科研究了DNA的结构和功能，进一步揭示了基因的作用和遗传机制。在高考中，生物学科中也会涉及到DNA的结构、复制、转录、翻译等方面的知识点。总而言之，DNA是生物遗传信息的载体，而高考知识点是指高中阶段学习的各学科知识的范围和内容，两者在概念上存在区别。然而，在生物学科中，DNA和遗传信息的相关知识点会涉及到高考的考查范围。

迄今，因医源性造成尖锐湿疣或HPV传染的报道极少见。从理论上来讲，尖锐湿疣或HPV的医源性传染途径还是可能的。医源性传染途径包括医务人员自身的被传染和医务人员对病人的传染，如医务人员在为尖锐湿疣患者或HPV感染者进行检查、激光、冷冻、手术或注射等诊疗时没有进行必要的安全防护则可引起医务人员自身被传染。同样，医务人员在为健康人或非尖锐湿疣患者进行检查或治疗时，由于医疗器械等消毒不严格则可将被HPV污染的器械用于健康人或非尖锐湿疣者而造成尖锐湿疣或HPV的传染。金文等报告3例男性患儿(2例5岁，1例8岁)在同一医院同一手术室接受包茎和包皮阴茎头粘连扩张分离术后3个月分别在其包皮、龟头及尿道口出现米粒大小赘生物，经病理学检查确诊为尖锐湿疣。马德强报告1例47岁男性肛肠科医生右眼内眦发生0.3—0.5em尖锐湿疣，可能是患者在1个月前为一肛周较大尖锐湿疣病人做手术时术中有过血滴溅人眼部感染发病。 一些研究发现在用激光治疗尖锐湿疣时产生的烟雾中有HPV存在，这提示含HPV的烟雾可能成为HPV并引起尖锐湿疣的传染途径。 Garden等研究报道，尖锐湿疣患者在用激光手术时，其烟雾中可以检测到完整的HPV DNA，进一步用HPV DNA探针进行杂交实验证实HPV DNA存在。这一结果说明在激光治疗尖锐湿疣时的气化过程中可能有病毒由组织释放到空气中。Bersbrant等对用C02激光术和电烧灼术治疗外生殖器疣的手术者进行了治疗前后HPV污染的监测，结果在治疗后手术者的鼻腔、鼻唇沟和眼脸粘膜有HPV污染。 近几年来，国内学者在这方面作了些研究，有不同结果的报道。吴原等用PGR方法检测20例激光治疗尖锐湿疣烟雾中的HPVDNA，结果只有1份标本HPV6、11型DNA呈阳性。 研究者分析C02激光治疗尖锐湿疣时烟雾中存在少量HPV的原因主要有： ①疣体突出部分较疏松，大功率C02激光时其光压易使疣体组织向四周飞溅； ②由于C02激光使疣组织气化时形成微型爆炸，当其发生在突出的疣体侧缘时，易使上端较疏松的疣组织向四周扩散。 顾恒等收集了21例尖锐湿疣患者在用C02激光治疗时的烟尘标本，用PCR方法进行HPV6型和HPVll型DNA检测，结果21例尖锐湿疣组织中19例HPV阳性；但从距激光烧灼部位5cm(21例)和50cm(12例)处收集的烟尘标本中无1例阳性。实验中来发现烟尘中及不同的吸附材料(无纺布、纱布、擦镜纸)存在对HPV检测有抑制作用的物质。这一结果提示在用大功率(30W)C02激光治疗尖锐湿疣时，其烟尘中无HPV，不会对周围人群造成危害，最近，任正忠等报道采用PGR技术对C02激光治疗尖锐湿疣烟雾中HP~DNA检测的情况：研究者对47例尖锐湿疣患者治疗时的组织、焦炭、烟雾标本采用PGR技术进行HPV6／11型和HPVl6型；DNA检测，结果在47例尖锐湿疣患者的141份标本中检出阳性标本69份。其中组织标本检出阳性结果30份(63.88％)，焦炭标本检出阳性结果24份(51.1％)，烟雾标本检出阳性结果15份(31.9％)o：组织标本检测结果为HPV6／11型阳性26份，HPVl6型阳性14份，其中HPV6／11型、HPVl6型均为阳性10份。焦炭标本检测结果为HPV6／11型阳性19份，HPVl6型阳性5份，其中HPV6／11型，HPVl6型均为阳性3份。烟雾标本检测结果为HPV6／11型阳性10份，HPVl6型阳性5份。 研究者分析在焦炭中检测出HPV司能是： ①C02激光气化不全及确有病毒存在； ②取焦炭材料时被污染。 在烟雾及烟尘中检测出HPV可能是： ①吸头被污染； ②C02激光治疗尖锐湿疣时产生的烟雾及烟尘中确实存在HPV DNA。 尽管在激光治疗尖锐湿疣时，对其烟雾中是否存在HPV DNA的研究结果尚不一致，但激光治疗尖锐湿疣时烟雾中HPV DNA存在的研究提示医务人员在使用激光治疗病毒感染或与病毒感染相关的疾病过程中操作者应极慎重，并做好安全防护工作。

　　中新药业（600329）：天津生物芯片技术有限责任公司（公司占26.4%），主要从事微生物检测芯片的研发、基因组学和功能基因组学三大研究，是唯一致力于病原微生物检测生物芯片研发的基地。其投建了基因组学、功能基因组学、生物信息学和生物芯片四大现代生物技术研究平台。自成立之初，公司就引进全球生物芯片先驱美国昂飞基因芯片作为公司的芯片分析平台，更作为其在中国健康长城计划的唯一合作伙伴和3家授权技术服务商之一。　　友好集团（600778）：公司携手国家人类基因组南方研究中心共同组建了上海申友生物技术有限公司，在人类疾病的基因诊断、药物基因组学开发及模式动物研究方面进行开发与生产，并致力于科技成果产业化。公司现有业务包括DNA亲子鉴定、DNA测序、病毒检测试剂盒等。　　达安基因（002030）：公司于1996年在国内率先开发出荧光定量PCR检测技术，开拓了基因疾病诊断新领域，在国内开展荧光定量PCR检测的医疗机构中，有70%与公司建立了合作关系，其产品在市场中占有绝对优势。荧光定量PCR检测技术是基因诊断发展的主导方向，公司所处的行业发展前景良好。

南斯拉夫的10第纳尔。

因为没有家族基因的关系，所以说曹操是汉朝丞相曹参的后代是错误的。但现有的夏侯基因与曹操家族的基因并不一致，所以曹操从夏侯氏领养的说法并不准确。11日，复旦大学历史与人类学联合课题组发布了曹操家族DNA研究的最新成果。专家表示，通过现代基因倒位和古代DNA检测的双重验证，曹操家族DNA的Y染色体SNP突变类型为O2*-M268。课题组由复旦大学历史系教授、中国魏晋南北朝史学会副会长、复旦大学现代人类学教育部重点实验室李辉教授领衔。相关论文发表在国际学术期刊人类遗传学报上。有遗传学家表示，之前引起强烈争议的河南安阳曹操墓的真实性，可以通过曹操后代的现代DNA来验证。2009年12月27日，河南省文物局宣布，曹操墓最终确认在河南省安阳市安丰乡西高穴村南。后来国家文物局认定曹操为河南安阳东汉大墓的墓主人，但民间质疑该墓造假的声音不断。中国科学院基因组研究所副所长于君说，虽然牙齿等古生物化石可能存在DNA损伤等问题。但是，仍然可以通过一个DNA片段进行测序。如果要验证曹操本人是否在河南安阳被发现，理论上可以和后人的DNA推断的结果进行比较。2009年，河南安阳宣布发现曹操墓，消息一出就引起了极大的轰动，也一直伴随着真伪之争。同年，复旦大学人类遗传学实验室启动了一个大型项目，试图通过曹操后代的DNA来推断曹操的身世。采集血样“滴血认亲”国内媒体称，课题组称，自2009年以来，上述课题组的专家一直在全国各地采集曹操后代的静脉血样本。参与者包括来自79个曹氏家族的280名男性志愿者和446名夏侯、曹氏男性志愿者，最终样本量超过1000例。同时，课题组专家对全国各地的258本曹氏宗谱进行了全面的考证，并通过查阅史书和方志，试图寻找到曹氏迁徙的可能线索。“比如曹氏中各支系的祖先和现居住地能否与史书记载的曹操后代流向吻合？”经过这一步的研究，课题组通过史料分析，筛选出了8个支持家谱、具有一定可信度的曹氏家族。在找到这八个曹氏家族后，专家们检测了他们的DNA。“人类DNA共有30亿个碱基对，组合成23对染色体和线粒体，男性特有的、碱基对相对稳定的Y染色体是最合适的检测对象。”李辉说，“经过复杂的Y染色体DNA全序列检测，最终发现6个家族属于O2*-M268基因型。这6个O2*-M268样本的祖先交集是在1800年到2000年前，也就是曹操生活的年代。”李辉认为，这些家庭共同检测到了一种非常罕见的染色体类型，这种染色体只占全国人口的5%左右。“假设都是假冒的，那么符合概率等于这个基因型的人口比例的乘积，也就是5%的五次方。所以他们造假的可能性只有千万分之三。所以在法医学上，可以认定他们是曹操真正的后代。”2011年12月28日，课题组宣布定位了曹操家族的DNA，发现了6个极有可能是曹操后裔的族群，随即引发强烈反响。当时，李辉估计这种类型属于曹操的概率为92.71%。复旦大学课题组根据现代曹姓后代的基因结合曹石宗墓考古发掘组长李灿和遗址发掘者的口述，以及“元宝坑一号墓”中央位置墓砖上的“河间明府”铭文，最终确定两颗牙齿均来自曹操的叔祖曹丁。课题组将一颗保存完好的牙齿带回复旦大学人类遗传学实验室进行古DNA检测。2012年底，根据现代基因和古代DNA的双重验证，课题组得出了最终结论——100%确认曹操家族的DNA。家谱记载曹操直系后代的现代独立八大家族中，有六个家族的Y染色体为罕见的O2*-M268，显著性达到P=9105，证明曹操的Y染色体属于该类型。安徽亳州曹操始祖墓元宝坑一号墓遗存也属于这一类型，与现代曹操后代关系密切。夏侯和曹参的后代不是这种类型。因此，曹操的父亲是从家族内部收养的，而不是曹参本地人。目前已发现曹操后代9人，分别来自绩溪、安徽舒城、安徽亳州、江苏海门、徐闻、江苏盐城、山东乳山、辽宁东港、辽宁铁岭。

这和物种有关，也和不同的染色体有关，一般有几百个到几千个不等。以上数据为人类各条染色体上的基因数，供参考：1号染色体 31862号染色体 20933号染色体 16384号染色体 13005号染色体 14486号染色体 18437号染色体 17228号染色体 11629号染色体 139410号染色体 125911号染色体 200012号染色体 150913号染色体 61114号染色体 142015号染色体 114316号染色体 127017号染色体 165018号染色体 48019号染色体 186120号染色体 82421号染色体 38622号染色体 812X染色体 1529Y染色体 344

无创dna低危不能说明染色休没有问题。无创DNA产前检测技术对于胎儿的三大染色体疾病（唐氏综合征（T21）、爱德华氏综合征（T18）、帕陶氏综合征（T13））的检出率均在90%以上。我们人体有46条染色体，它们是成对存在的，每对中的一条来自父亲、另一条来自母亲。我们按照长短将其编号为1-22号，以及剩下一对性染色体XX或XY。其中最常出现异常的三对染色体是13、18、21号染色体，它们一旦出现异常，后果往往是很严重的。目前的无创检测实际上只能检测第13、18、21号这三对染色体是否多一条。也就是说，如果胎儿的其他染色体数量异常，或是数量正常却有结构异常的，都是检测不出来的。扩展资料：13号染色体多一条：即13-三体综合征（Patau综合征），自然发病率为1/6000~1/5000，由于患儿伴有复杂的疾病，95%以上在胎儿期就会死于宫内，出生后大部分在几天至几周内死亡；18号染色体多一条：即18-三体综合征（Edwards综合征），自然发病率为1/7000~1/3500，多数患儿外表和各主要器官有严重的多发畸形，出生后存活时间往往很短；21号染色体多一条：即很多人熟知的21-三体综合征（也叫唐氏综合征、先天性愚型），自然发病率为1/800~1/600，是最常见的染色体数量异常。患儿表现为先天智力低下，生长发育迟缓，并伴有多发畸形。其实无论唐筛、无创，还是羊穿，说到底都是一种辅助预防出生缺陷的产检手段，每一种检查的结果都不是100%准确的。也就是说，并不是说结果低风险，胎儿就一定没问题；结果高风险，胎儿就一定有问题。产检过程中，孕妈和医生充分沟通，根据孕妈自身情况，选择合适的检查方式，才是明智和理性的，也是对胎儿和整个家庭更负责的做法。所有检查的最初目的都是为了保证宝宝健健康康出生，但即使结果不尽如人意，也请坦然面对，修养身体重新开始，总会拥有一个健康的宝宝伴你左右。参考资料来源：百度百科-无创DNA产前检测技术参考资料来源：百度百科-染色体

提起无创18为正数男孩，大家都知道，有人问无创dna18号-0.01是男孩还是女孩，另外，还有人想问无创dna正常值是-3~3,我是3.024有问题吗?，你知道这是怎么回事？其实hcgb校正值4.45偏高，导致21三体综合征高风险，其他都正常。医生建议做无创DNA，怎么办？下面就一起来看看无创dna18号-0.01是男孩还是女孩，希望能够帮助到大家！ 无创18为正数男孩 1、无创18为正数男孩:无创dna18号-0.01是男孩还是女孩 无创dna产前检测是检测21、18、13号非整倍体疾病的，所以报告是这三项的指数已生男孩t18数值。 hcgb校正值4.45偏高，导致21三体综合征高风险，其他都正常。医生建议做无创DNA，怎么办？ 也就是唐氏综合症（）、爱德华氏综合症（)、怕陶氏综合征（）的。 优孕亲仁已生男 无创dna。 2、无创18为正数男孩:无创dna正常值是-3~3,我是3.有问题吗? 检测值一个通过复杂的生物信息分析，计算出来的数值，没有实际的物理意义，也没有单位。检测值的高低某种意义上来说，与母亲体内的胎儿游离DNA含量有关。只要不超出临界值都是无异常的。也就是说：只要结果一栏上标明是“未见明显异常”，您的宝宝的此项检测就是无异常。 一般正常参考值为-3到3（但每个检测机构的参考值可以不一样的），这之间的数值都是正常的。无创18看男女已生验证。 所以，以检测报告和检测机构解读为准。 3、hcgb校正值4.45偏高，导致21三体综合征高风险，其他都正常。医生建议做无创DNA，怎么办？ 你好，这个21三体综合征是唐氏综合症，需要注意，建议你还是考虑做进一步检查，唐氏筛查只是一个筛查，不能作为最终诊断结果，所以建议还是做无创DNA或者是穿刺比较好 4、无创体-0.57 13体0.35 21体-1.53男孩还是女孩，有人会看吗？ 看男女不是看那个的，报告如果说有侦测出Y，那就是男孩，反之女孩，基因中心有的无创18为正数其余为负数。 5、无创18为正数男孩:无创DNA检测结果18高于13合21是还是女宝 你好，您的检查结果都是正常的，临床研究出无创的正常范围是-3到3之间，21号：0.11 18号：-2.51 13号：-2.91无创看男孩女孩诀窍。 均在正常范围内（具体可检测机构或者医生） 6、无创DNA检测，可以看孩子性别吗？据说 21,18,13 这三个值之间，18的值比21和13都低，就是反之女宝！ 你生小宝宝的时候384020有人告诉我这一看就是男孩，四个月后检查真的是男孩！现在儿子一岁半啦希望能帮助到你们 7、无创18为正数男孩:孕妇无创13号值为3.，正常么 无创DNA产前检测是采取孕妇静脉血，分离血浆中的DNA，利用新一代DNA测序技术进行深度测序，进行生物信息分析，从中得到胎儿的遗传信息。从而检测胎儿是否患21三体综合征(唐氏综合征)、18三体综合征(爱德华氏综合征)、13三体综合征(帕陶氏综合征)三大疾病。无创准确率基本高达97%，一般正常花费在-元左右。每个地区每家医院收费标准不同。 以上就是与无创dna18号-0.01是男孩还是女孩相关内容，是关于无创dna18号-0.01是男孩还是女孩的分享。看完无创18为正数男孩后，希望这对大家有所帮助！

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